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转录因子AP-2beta和p53蛋白相互作用的研究 被引量：1
1
作者 王琳 汤婷 +1 位作者 欧阳文英 粟敏 《激光生物学报》 CAS 2017年第2期189-193,共5页
转录因子p53与AP-2基因家族成员AP-2beta发生突变后,均会导致个体出现相应的疾病。本文首先利用两个重组质粒p CMV-HA-p53和p Myc-AP-2beta,转染永生化的胚胎肾细胞HEK293(野生型),在细胞中表达相应蛋白质。通过免疫共沉淀实验证明AP-2b... 转录因子p53与AP-2基因家族成员AP-2beta发生突变后,均会导致个体出现相应的疾病。本文首先利用两个重组质粒p CMV-HA-p53和p Myc-AP-2beta,转染永生化的胚胎肾细胞HEK293(野生型),在细胞中表达相应蛋白质。通过免疫共沉淀实验证明AP-2beta和p53蛋白在体内可以相互作用。并将梯度增加的p MycAP-2beta质粒及等量p CMV-HA-p53质粒转染到HEK293细胞,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验证明AP-2beta能正向调控p53蛋白的表达。为了进一步探讨AP-2beta与p53的作用机制,利用蛋白质合成抑制剂CHX(cycloheximide)处理转染了AP-2beta与p53表达质粒的细胞,实验结果说明,AP-2beta能增加p53蛋白的稳定性来调控p53的表达。 展开更多
关键词 ap-2beta P53 蛋白稳定性
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接头蛋白复合体AP2B1基因的克隆与分析 被引量：1
2
作者 柴佳 苗燕 蔡霞 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期3909-3918,共10页
泽漆（Euphorbia helioscopia L.）为大戟科（Euphorbiaceae）大戟属（Euphorbia）一年生或两年生草本植物,整棵植株含乳汁。作为一种古老的民间草药,泽漆的主要药用成分存在于乳汁中。因此,研究乳汁管的发育可为泽漆乳汁中药用成分的... 泽漆（Euphorbia helioscopia L.）为大戟科（Euphorbiaceae）大戟属（Euphorbia）一年生或两年生草本植物,整棵植株含乳汁。作为一种古老的民间草药,泽漆的主要药用成分存在于乳汁中。因此,研究乳汁管的发育可为泽漆乳汁中药用成分的合成、积累和转运提供理论依据。AP-2B1是接头蛋白复合体2（AP-2）的beta-型亚基。我们通过前期的研究发现,AP-2B1可能在泽漆乳汁管发育过程溶酶体酶的分拣和转运中有重要的作用。为此,我们采用RACE技术从泽漆中分离克隆出AP-2B1基因,序列全长3 176 bp,命名为Eh AP-2B1（登录号：KP995937）。再利用NCBI网站及生物信息学软件对其进行分析,Eh AP-2B1基因编码903个氨基酸,蛋白相对分子量为100.37 k D,等电点为5.10。Eh AP-2B1基因编码的蛋白属于亲水性蛋白,具有3个保守区域。通过氨基酸序列比对,Eh AP-2B1蛋白与麻风树（Jatropha carcas）的AP-2B1蛋白相似度达到100%,与可可树（Theobroma cacao）、甜橙（Citrus sinensis）的相似度达到99%。根据系统进化树的分析结果表明,泽漆AP-2B1蛋白与蓖麻（Ricinus communis）AP-2B1蛋白的亲缘关系最近,与麻风树的AP-2B1蛋白平行进化。通过对该蛋白二级结构预测分析显示,多肽链中α-螺旋（α-helix）最多,占45.63%,其次为无规则卷曲（random coil）,占31.56%,最后为延伸链（extended strand）和β-转角（β-turn）,分别占17.17%和5.65%。此研究结果为后期进行乳汁管发育与调控的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 泽漆 ap-2复合物亚基β-1 基因克隆 信息学分析
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动脉导管未闭患儿TFAP2B基因变异筛查
3
作者 孙瑾 韩波 +3 位作者 魏美丽 杨文巍 王介忠 刘永蛟 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期72-75,共4页
目的检测动脉导管未闭(PDA)患儿TFAP2B基因序列,探讨TFAP2B基因变异与PDA的关系。方法选取74例PDA患儿为病例组,100例健康儿童为对照组,分别收集外周血并提取基因组DNA。应用聚合酶链反应扩增TFAP2B基因的全部外显子及其两侧的部分内含... 目的检测动脉导管未闭(PDA)患儿TFAP2B基因序列,探讨TFAP2B基因变异与PDA的关系。方法选取74例PDA患儿为病例组,100例健康儿童为对照组,分别收集外周血并提取基因组DNA。应用聚合酶链反应扩增TFAP2B基因的全部外显子及其两侧的部分内含子,采用Sanger测序法对扩增片段进行测序。将所测得序列与Genbank及NCBI数据库中TFAP2B基因序列进行比对,以识别TFAP2B基因有无突变或多态性。应用χ2检验比较TFAP2B基因多态在病例组和对照组之间的频率分布差异。结果病例组和对照组TFAP2B基因均发现1个新的单核苷酸多态位点(SNP),TFAP2B基因第1外显子编码区上游第34位鸟嘌呤转变为腺嘌呤(c.1-34G→A)。该位点等位基因及基因型在病例组和对照组间的频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TFAP2B基因c.1-34G→A单核苷酸多态位点与动脉导管未闭之间无明显相关。 展开更多
关键词 动脉导管未闭 TFAP2B 基因突变 单核苷酸多态性 儿童
原文传递
转录因子激活蛋白-2α、雌激素受体-β和基质金属蛋白酶-9在扁平苔藓皮损中的表达 被引量：1
4
作者 张紫燕 白莉 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期339-342,共4页
目的探讨转录因子激活蛋白-2α（AP-2α）、雌激素受体-β（ER-β）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在扁平苔藓皮损中的表达及意义。方法选取30例扁平苔藓皮损和30例正常人皮肤组织，应用免疫组化SP法观察ER—β和MMP-9的表达，采用RT—PCR... 目的探讨转录因子激活蛋白-2α（AP-2α）、雌激素受体-β（ER-β）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在扁平苔藓皮损中的表达及意义。方法选取30例扁平苔藓皮损和30例正常人皮肤组织，应用免疫组化SP法观察ER—β和MMP-9的表达，采用RT—PCR和Western印迹法检测AP-2α、ER—β和MMP-9基因及其蛋白水平。结果扁平苔藓皮损中AP-2st、ER-β、MMP-9mRNA的相对表达水平为0．488±0．039、0．365±0．032和1．237±0．027，与正常组织相比，AP-2α、ER—β表达下降（P值均〈0．01），而MMP-9表达升高（P〈0．01）。Western印迹检测结果与RT—PCR相似，即AP-2st、ER-β蛋白表达下降（P值均〈0．01），而MMP-9表达升高。AP-2α的表达与ER—β的表达呈正相关（r=0．89，P〈0．01），与MMP-9的表达呈负相关（r=-0．91，P〈0．01）。结论ER-β表达的下调和MMP-9表达的上调可能是AP-2st表达下调引起调控下游靶基因异常所致，可能为扁平苔藓的发病环节之一。 展开更多
关键词 扁平苔藓 转录因子ap-2 雌激素受体Β 基质金属蛋白酶9
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