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绣球‘杜丽’AP 3基因克隆与基因编辑载体构建
1
作者 李童 王月莹 赵惠恩 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期257-266,共10页
绣球(Hydrangea macrophylla)是以花序为主要观赏部位的园林植物,多用作切花装饰和景观营造,在亚洲、美洲、欧洲广泛栽培。为探究AP 3基因在绣球花萼形成过程中的功能,加快重瓣绣球新品种培育进程,该研究以绣球‘杜丽’为材料,克隆其MAD... 绣球(Hydrangea macrophylla)是以花序为主要观赏部位的园林植物,多用作切花装饰和景观营造,在亚洲、美洲、欧洲广泛栽培。为探究AP 3基因在绣球花萼形成过程中的功能,加快重瓣绣球新品种培育进程,该研究以绣球‘杜丽’为材料,克隆其MADS-box B类基因HmAP 3,并结合生物信息学方法预测基因功能;根据HmAP 3序列信息,筛选出高特异性编辑靶点并构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,通过农杆菌转化法将载体整合到绣球基因组中。结果表明:(1)克隆到1段HmAP 3基因的cDNA序列,其序列全长546 bp,共编码181个氨基酸,测序结果表明其氨基酸序列与参考序列一致性为100%,与拟南芥AtAP3相似度为58.8%。(2)不同属植物AP3氨基酸序列差异较大,在同属不同物种中,AP3蛋白主要结构较为保守,仅在少数基序上存在差异。(3)在HmAP 3中共鉴定到2个高特异性靶点,并成功构建2个单靶点CRISPR/Cas9基因编辑载体。(4)该研究共获得5株基因组内含有Cas 9序列的抗性芽,但其靶点均未突变,在抗性芽中没有检测到Cas9表达。该研究探讨了AP 3基因在重瓣绣球育种中的价值,对绣球的CRISPR/Cas9基因编辑技术进行了初探,为绣球优良品种繁育工作奠定了基础。 展开更多
关键词 绣球 MADS-box家族 ap3 CRISPR/Cas9 载体构建
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假基因GTF3AP2参与调控造血干祖细胞向红系分化
2
作者 夏澜 荣誉 +2 位作者 夏洪恺 马艳妮 余佳 《基础医学与临床》 2025年第6期735-740,共6页
目的 探究假基因GTF3AP2对红系分化的影响。方法 通过高通量转录组测序鉴定可能在红系分化中发挥作用的功能性假基因GTF3AP2,在CD34+造血干祖细胞中通过shRNA抑制GTF3AP2内源表达,利用集落形成实验检测造血干细胞的集落形成能力以及流... 目的 探究假基因GTF3AP2对红系分化的影响。方法 通过高通量转录组测序鉴定可能在红系分化中发挥作用的功能性假基因GTF3AP2,在CD34+造血干祖细胞中通过shRNA抑制GTF3AP2内源表达,利用集落形成实验检测造血干细胞的集落形成能力以及流式分析检测红系/巨核系祖细胞的比例变化,并通过转录组测序确定其在红系分化中的作用,揭示体外敲降GTF3PAP2后细胞分子水平的变化。结果 抑制GTF3AP2的内源表达后,细胞的扩增能力显著增强,其中红系集落数目明显增多(P<0.001),CD71+CD235a+红细胞前体细胞比例显著增加(P<0.01),而CD71-CD235a+成熟红细胞比例减少(P<0.05),同时红系分化相关基因如KLF1、HBB、GYPA、EPOR、TFRC等表达显著下降。结论 敲降GTF3AP2促进红系前体细胞扩增,抑制红细胞成熟,提示GTF3AP2可能在红系分化过程中发挥调控作用。 展开更多
关键词 假基因 红系分化 转录组测序 GTF3ap2
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贝莱斯芽孢杆菌AP3抑制铜绿微囊藻效应与机理研究
3
作者 黄义棚 孙瑞彬 +6 位作者 袁春营 崔青曼 李伯菲 孙搏远 林展望 阳涛 田烘周 《水生态学杂志》 北大核心 2025年第4期247-255,共9页
研究贝莱斯芽孢杆菌AP3对铜绿微囊藻的抑制效应与机理,拓宽芽孢杆菌的应用范围,对水产养殖的健康绿色发展具有实践意义。通过对比不同浓度贝莱斯芽孢杆菌AP3悬液、无菌滤液下铜绿微囊藻密度、叶绿素a含量、光合基因表达量及细胞抗氧化... 研究贝莱斯芽孢杆菌AP3对铜绿微囊藻的抑制效应与机理,拓宽芽孢杆菌的应用范围,对水产养殖的健康绿色发展具有实践意义。通过对比不同浓度贝莱斯芽孢杆菌AP3悬液、无菌滤液下铜绿微囊藻密度、叶绿素a含量、光合基因表达量及细胞抗氧化指标等的差异,分析贝莱斯芽孢杆菌AP3对铜绿微囊藻的抑制作用,并探究其机理。结果显示:贝莱斯芽孢杆菌AP3显著抑制铜绿微囊藻的生长(P<0.05),第6天,AP3菌株浓度为0.5×10^(7)、1×10^(7)和2×10^(7) CFU/mL时,平均抑藻率分别为54.13%、68.14%和76.50%;0.5%、1%和2%AP3无菌滤液对铜绿微囊藻均有显著的抑制作用(P<0.05),第6天,0.5%、1%和2%AP3无菌滤液的平均抑藻率分别为27.84%、47.63%和80.02%;第3天,2%AP3无菌滤液显著降低铜绿微囊藻叶绿素a含量(P<0.05),第6天,1%和2%AP3无菌滤液组铜绿微囊藻叶绿素a含量显著低于对照组(P<0.05);第3天和第6天,1%和2%AP3无菌滤液组铜绿微囊藻的最大量子产量F_(v)/F_(m)和最大电子传递速率RET_(max)均显著低于对照组和0.5%无菌滤液组(P<0.05),第6天,0.5%AP3无菌滤液组铜绿微囊藻的F_(v)/F_(m)和RET_(max)均显著低于对照组(P<0.05);第3天和第6天,1%和2%AP3无菌滤液组铜绿微囊藻的psbA和rbcL基因表达均显著低于对照组(P<0.05),1%和2%无菌滤液组铜绿微囊藻的psbA基因表达水平显著低于0.5%无菌滤液组(P<0.05);1%和2%AP3无菌滤液显著降低了铜绿微囊藻细胞中SOD和CAT活性(P<0.05),显著升高了藻细胞中MDA含量(P<0.05)。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌ap3 铜绿微囊藻 抑制效应 荧光参数 基因表达
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基于Fe^(3+)-DA-APS自催化体系的Fe_(3)O_(4)/PAA水凝胶的制备及性能研究
4
作者 温暖 何新宇 +2 位作者 黄欣薏 何帅 左芳 《广东化工》 CAS 2024年第4期5-8,共4页
以Fe_(3)O_(4)纳米粒子为磁性组分,基于AA(丙烯酸)与部分Fe3O4反应产生的Fe3+、多巴胺(DA)构建双重自催化过硫酸铵(APS)的自由基聚合体系,在低温下制备了Fe_(3)O_(4)/聚丙烯酸(PAA)水凝胶,并对其进行表征。研究结果表明:Fe_(3)O_(4)/PA... 以Fe_(3)O_(4)纳米粒子为磁性组分,基于AA(丙烯酸)与部分Fe3O4反应产生的Fe3+、多巴胺(DA)构建双重自催化过硫酸铵(APS)的自由基聚合体系,在低温下制备了Fe_(3)O_(4)/聚丙烯酸(PAA)水凝胶,并对其进行表征。研究结果表明:Fe_(3)O_(4)/PAA水凝胶具有良好的力学性能,断裂伸长率、拉伸强度分别为900%、251.1 kPa;同时,其可较好粘附不同基材,在钢材上粘附-剥离循环20次后粘附强度仍稳定在30.7 kPa左右;此外,其还可感应极小形变,并在166 ms内快速响应。该Fe_(3)O_(4)/PAA水凝胶综合性能良好,具备应用于柔性传感器等领域的潜力。 展开更多
关键词 Fe^(3+)-DA-apS 自催化 自由基聚合 水凝胶 柔性传感器
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毛白杨AP3同源基因(PtAP3)的克隆及其在烟草中的正反义转化初报 被引量：4
5
作者 王冬梅 张志毅 +2 位作者 安新民 李善文 何承忠 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期35-42,共8页
根据毛果杨AP3同源基因(PTD)设计一对PCR引物,以毛白杨基因组DNA为模板,通过PCR技术分离克隆了毛白杨AP3同源基因PtAP3.分析表明该基因全长1 813 bp(包括引入的酶切位点),包括7个外显子和6个内含子,编码238个氨基酸.在GenBank中进行blas... 根据毛果杨AP3同源基因(PTD)设计一对PCR引物,以毛白杨基因组DNA为模板,通过PCR技术分离克隆了毛白杨AP3同源基因PtAP3.分析表明该基因全长1 813 bp(包括引入的酶切位点),包括7个外显子和6个内含子,编码238个氨基酸.在GenBank中进行blast检索,发现其氨基酸序列与大丁草、矮牵牛、百合、玫瑰、苹果、毛果杨AP3同源基因的氨基酸序列具有52%～82%的同源性.PtAP3蛋白具有非常保守的MADS-box序列,推测其为转录因子.Southern杂交分析发现,该基因在毛白杨雄株中为双拷贝,而在雌株中则为单拷贝.为进行功能分析,构建了正反义表达载体,通过农杆菌介导转化获得了一些转基因烟草植株. 展开更多
关键词 毛白杨 ap3同源基因 克隆 转化
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簸箕柳AP3同源基因SsMADS的克隆与特性分析 被引量：4
6
作者 陈英 关亚丽 +2 位作者 程强 曹友志 黄敏仁 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2007年第3期469-475,共7页
用cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)方法从簸箕柳雄花序中克隆了一个AP3同源基因的cDNA,长826 bp,包括完整的编码区、5′-UTR和3′-UTR,并将其相应的基因命名为SsMADS。该基因由7个外显子和6个内含子组成,编码... 用cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)方法从簸箕柳雄花序中克隆了一个AP3同源基因的cDNA,长826 bp,包括完整的编码区、5′-UTR和3′-UTR,并将其相应的基因命名为SsMADS。该基因由7个外显子和6个内含子组成,编码区长723 bp,编码241个氨基酸,其N-端具有典型的MADS保守结构域。序列分析表明,SsMADS编码的氨基酸序列与毛果杨(Populus trichocarp)AP3同源蛋白有95.7%相似性,与其他几种柳属植物的AP3同源蛋白相似性达96.1%～99.6%。实时定量RT-PCR表明,SsMADS在叶、茎和根中表达量极低,在花序中表达量较高,并且其表达量在花器官的早中期发育阶段逐步提高,说明该基因在簸箕柳花器官的发育中起作用。 展开更多
关键词 簸箕柳 SsMADS ap3 实时定量RT-PCR 系统进化树分析
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拟南芥AP3基因植物表达载体的构建及在烟草中的遗传转化 被引量：3
7
作者 刘彩霞 代丽娟 +2 位作者 刘轶 葛晓兰 曲冠证 《山东农业科学》 2016年第2期7-11,共5页
拟南芥花器官B类特征基因属于MADS-box基因家族,其中APETALA3(AP3)基因在花瓣和雄蕊中特异性地表达。为探讨AP3基因在花瓣和雄蕊发育中的功能,本研究从拟南芥(Arabidopsis thaliana)花序中克隆At AP3基因构建植物表达载体,并转化烟草(Ni... 拟南芥花器官B类特征基因属于MADS-box基因家族,其中APETALA3(AP3)基因在花瓣和雄蕊中特异性地表达。为探讨AP3基因在花瓣和雄蕊发育中的功能,本研究从拟南芥(Arabidopsis thaliana)花序中克隆At AP3基因构建植物表达载体,并转化烟草(Nicotiana tobacum)。通过PCR及q RT-PCR分析,表明At AP3基因成功转入烟草基因组并表达转录。表型观测显示转基因烟草雄蕊与野生型相比明显变短,说明AP3基因特异性地参与雄蕊的发育并起着至关重要的作用。 展开更多
关键词 拟南芥 apETALA3(ap3) 转基因 烟草 雄蕊发育
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油菜沪油15中AP2/ERF-B3亚族转录因子的克隆和生物信息学分析 被引量：9
8
作者 庄静 周熙荣 +6 位作者 孙超才 管帮超 彭日荷 乔玉山 章镇 熊爱生 姚泉洪 《分子细胞生物学报》 CSCD 北大核心 2008年第3期192-206,共15页
AP2/ERF转录因子家族广泛存在于植物中,参与植物细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因表达调控。本文利用油菜UniGene数据库,以拟南芥AP2/ERF-B3亚族转录因子保守序列为信息探针,分离得到2个油菜AP2/ERF-B3亚族的转录因子Bna... AP2/ERF转录因子家族广泛存在于植物中,参与植物细胞周期、生长发育以及生物和非生物胁迫相关基因表达调控。本文利用油菜UniGene数据库,以拟南芥AP2/ERF-B3亚族转录因子保守序列为信息探针,分离得到2个油菜AP2/ERF-B3亚族的转录因子BnaERFB3-1和BnaERFB3-2。通过PCR和RT-PCR方法分别从双低甘蓝型油菜沪油15的DNA和cDNA中克隆了上述基因。序列分析显示,克隆的BnaERFB3-1-Hy15和BnaERFB3-2-Hy15转录因子与电子克隆的基因序列差异很小,均只有1个氨基酸位点不同,且都没有内含子。从氨基酸序列的相似性、组成成分、理化性质、疏水性/亲水性、序列比对、进化树、功能域、二级结构、三级结构、无序化特性等方面进行了预测和较为全面的分析。结果显示BnaERFB3-1-Hy15和BnaERFB3-2-Hy15是亲水性蛋白,在蛋白质的三级结构上与AtERF5相似,BnaERFB3-1-Hy15和BnaERFB3-2-Hy15蛋白无序化程度大于拟南芥AtERF5。通过分析EST丰度显示,BnaERFB3-1的表达集中在种子中,而BnaERFB3-2的表达则集中在根中。另外,将上述基因分别构建入酵母表达载体和植物双元表达载体,为深入研究该基因在油菜抗逆调控中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 转录因子ap2/ERF—B3亚族 生物信息学 进化树 油菜沪油15
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桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2、AP-1蛋白表达水平的影响 被引量：10
9
作者 张宇 张小卿 +1 位作者 吴景东 马贤德 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期2229-2232,共4页
目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2、AP-1蛋白含量的影响。方法:将30只小鼠随机分为6组,分别为中药低、中、高剂量组、空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)。对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中... 目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2、AP-1蛋白含量的影响。方法:将30只小鼠随机分为6组,分别为中药低、中、高剂量组、空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)。对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组小鼠进行皮肤光老化模型制备,空白对照组小鼠正常饲养。在造模前30 min,给空白对照组和模型对照组小鼠灌胃生理盐水,高、中、低剂量组小鼠灌胃相应剂量药液,阳性对照组(VE组)灌胃维生素E滴剂。造模完成后,采用Western-blot方法检测皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白含量的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),AP-1蛋白表达水平显著上升(P<0.05);与模型对照组相比,中药低、中、高剂量组小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白的表达水平显著上升(P<0.05),AP-1蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论:桃红四物汤对皮肤光老化具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 桃红四物汤 光老化 Smad-3 TIMP-1 TIMP-2 ap-1
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3AP1-FG型断路器自动分闸原因分析及防范措施 被引量：9
10
作者 杨雪飞 童钰 《广西电力》 2014年第5期84-85,共2页
针对某变电站35 kV 3AP1-FG型断路器合闸后自动分闸事件,通过对异常断路器进行停电解体检查,分析断路器合闸后自动分闸的主要原因为断路器脱扣线圈顶杆歪斜,引起顶杆卡涩,从而导致分闸棘爪处于触发状态。针对存在的问题,给出了相应的处... 针对某变电站35 kV 3AP1-FG型断路器合闸后自动分闸事件,通过对异常断路器进行停电解体检查,分析断路器合闸后自动分闸的主要原因为断路器脱扣线圈顶杆歪斜,引起顶杆卡涩,从而导致分闸棘爪处于触发状态。针对存在的问题,给出了相应的处理方法及防范措施。 展开更多
关键词 3ap1-FG型断路器 自动分闸 脱扣线圈
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肺癌细胞中PIK3AP1基因表达变化及其过表达对细胞增殖、侵袭、迁移的影响 被引量：1
11
作者 杜玮 黄秋敏 严飞 《山东医药》 CAS 2020年第26期10-14,共5页
目的观察肺癌细胞中PIK3AP1基因的表达情况,分析其表达与患者预后的关系,以及PIK3AP1基因过表达对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法体外培养正常支气管上皮细胞系HBEC,非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358,小细胞肺癌细胞系... 目的观察肺癌细胞中PIK3AP1基因的表达情况,分析其表达与患者预后的关系,以及PIK3AP1基因过表达对肺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法体外培养正常支气管上皮细胞系HBEC,非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358,小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82。采用RT-PCR法检测上述细胞中PIK3AP1 mRNA的表达。利用Kaplan-Meier plotter在线生存分析数据库,对肺癌组织中PIK3AP1 mRNA表达与患者预后的相关性进行分析。取不表达PIK3AP1的肺癌细胞,将其分为观察组和对照组,以慢病毒转染技术分别转染PIK3AP1过表达载体和空载体,采用BrdU法观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,细胞划痕实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测AKT、p-AKT蛋白表达。结果PIK3AP1基因在小细胞肺癌细胞系H69、H526、H82中高表达,在非小细胞肺癌细胞系A549、HCC827、H358中低表达或不表达,在正常支气管上皮细胞中不表达。PIK3AP1基因高表达和低表达肺癌患者的中位生存期分别为60.73、92.63个月,PIK3AP1基因高表达者预后较差(P<0.05)。取不表达PIK3AP1的A549细胞进行转染,与对照组比较,观察组细胞增殖能力增高,侵袭能力增强(P均<0.01),迁移能力无明显变化(P>0.05);p-AKT蛋白表达增高(P<0.01),AKT蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论PIK3AP1在具有高转移能力的小细胞肺癌细胞中高表达,其高表达提示预后不良;PIK3AP1可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进肺癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 肺癌 PIK3ap1 P-AKT 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移
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转录因子AP-2α对HeLa细胞内14-3-3σ表达的影响
12
作者 甘露 黄明元 +2 位作者 蒙子君 张哲 罗炳德 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第17期1680-1683,共4页
目的探讨转录因子AP-2α对HeLa细胞内14-3-3σ表达的影响。方法在HeLa细胞内过表达AP-2α或干扰AP-2α的表达,用荧光定量RT-PCR和Western blot检测Hela细胞AP-2α和14-3-3σ的表达量;采用计算机软件预测14-3-3σ的启动子区域的转录因子... 目的探讨转录因子AP-2α对HeLa细胞内14-3-3σ表达的影响。方法在HeLa细胞内过表达AP-2α或干扰AP-2α的表达,用荧光定量RT-PCR和Western blot检测Hela细胞AP-2α和14-3-3σ的表达量;采用计算机软件预测14-3-3σ的启动子区域的转录因子结合位点;采用双荧光素酶报告基因分析试验验证AP-2α对14-3-3σ启动子转录活性的影响。结果在HeLa细胞内过表达AP-2α后,14-3-3σ的mRNA和蛋白表达水平增高,而用siRNA干扰AP-2α后,14-3-3σ的mRNA和蛋白表达水平降低;软件分析结果显示在14-3-3σ启动子区域存在多个潜在的AP-2α结合位点;双荧光素酶报告基因分析试验证明在HeLa细胞内,AP-2α增强14-3-3σ启动子的转录活性。结论 AP-2α正调控HeLa细胞内14-3-3σ的表达,这种调控作用可能是通过AP-2α增强14-3-3σ启动子的转录活性来完成的。 展开更多
关键词 ap-2 14-3-3σ HELA细胞 转录因子
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110kV 3AP1FG断路器电机储能回路的改进 被引量：1
13
作者 林向宇 黄丽娇 +1 位作者 连和 雷军军 《电工技术》 2014年第10期37-37,44,共2页
针对110kV 3AP1FG型SF6断路器因储能辅助开关故障导致其储能电机长时间运转而烧毁提出防范措施,并对其电机储能回路进行改进。
关键词 3ap1FG断路器 储能电机 烧毁 储能回路
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AP3M2在胃癌中的作用及临床意义分析
14
作者 吴晓滨 罗辉兴 翁诺卿 《消化肿瘤杂志（电子版）》 2020年第4期238-241,247,共5页
目的探讨接头相关复合体蛋白3亚基2(adaptor related protein complex 3 subunit mu 2,AP3M2)在胃癌中的表达情况及其临床意义。方法通过TCGA数据库、实时荧光定量PCR及免疫印迹实验检测AP3M2基因的mRNA及蛋白在胃癌组织中的表达情况。... 目的探讨接头相关复合体蛋白3亚基2(adaptor related protein complex 3 subunit mu 2,AP3M2)在胃癌中的表达情况及其临床意义。方法通过TCGA数据库、实时荧光定量PCR及免疫印迹实验检测AP3M2基因的mRNA及蛋白在胃癌组织中的表达情况。通过检测KM Plotter网站探索AP3M2的表达与胃癌患者预后的关系。通过平板克隆形成实验检测AP3M2对胃癌细胞的作用。结果TCGA数据库数据及本研究收集的胃癌患者组织显示AP3M2相比于癌旁组织,其在胃癌组织中的mRNA表达水平升高,同时AP3M2的蛋白在胃癌组织中的表达也有上调的现象。同时本研究通过KM Plotter网站分析得到AP3M2的mRNA表达水平与胃癌患者的预后有关,高表达AP3M2的胃癌患者其预后较低表达AP3M2的胃癌患者差。通过在AGS细胞(人胃腺癌细胞)中过表达AP3M2并检测其平板克隆形成能力的变化,发现过表达AP3M2可以增强胃癌细胞的克隆形成能力。结论AP3M2在胃癌中高表达,高表达AP3M2与胃癌患者的不良预后有关,且能增强胃癌细胞的克隆形成能力。 展开更多
关键词 ap3M2 胃癌 生存预后 促癌作用
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不结球白菜雄蕊瓣化相关AP3基因的克隆和表达分析 被引量：3
15
作者 黄和喜 王岩 +4 位作者 许玉超 徐玮玮 刘世拓 侯喜林 胡春梅 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期748-756,共9页
[目的]APETALA3(AP3)转录因子是特异性作用于花瓣和雄蕊的MIKCc-型植物MADS转录因子。通过分离和检测不结球白菜雄蕊变异系的Bc AP3基因,探究不结球白菜稳定雄性不育系的机制。[方法]利用同源克隆基因的方法,以不结球白菜突变系和保持... [目的]APETALA3(AP3)转录因子是特异性作用于花瓣和雄蕊的MIKCc-型植物MADS转录因子。通过分离和检测不结球白菜雄蕊变异系的Bc AP3基因,探究不结球白菜稳定雄性不育系的机制。[方法]利用同源克隆基因的方法,以不结球白菜突变系和保持系的早期花蕾总RNA为研究对象,克隆出2个AP3同源基因Bc AP3-1和Bc AP3-2,然后利用生物信息学方法对这2个基因的核苷酸和蛋白氨基酸序列结构和组成进行信息学分析。采用半定量PCR技术,对不结球白菜中2个AP3家族基因在不同发育时期及不同组织部位的表达进行了研究。[结果]Bc AP3-1基因的c DNA全长为698 bp,编码231个氨基酸,且在突变系和保持系中序列一致。Bc AP3-2基因在突变系中克隆到的c DNA全长为698 bp,编码231个氨基酸;而在保持系中克隆到的c DNA全长为674 bp,编码223个氨基酸。生物信息学分析结果表明:Bc AP3基因属于典型的MADS-box基因家族的Ⅱ类MIKCc-型基因,属于eu AP3家系。不同花器官RT-PCR结果表明:Bc AP3-1基因在2种材料的花瓣和雄蕊中均有表达,而Bc AP3-2只在突变系的雄蕊中表达,在保持系雄蕊中无表达。花发育不同时期RT-PCR结果表明:在突变系中,Bc AP3-2基因的表达量变化与雄蕊退化现象相一致。[结论]Bc AP3-2基因可能与不结球白菜雄蕊瓣化性状密切相关。 展开更多
关键词 不结球白菜 雄蕊瓣化 ap3基因 基因表达
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河南汉族人群CYP3A4*1G和CYP3AP1*3多态性及连锁不平衡分析 被引量：6
16
作者 任欣伟 杨卫红 +3 位作者 李彦鹏 蔡要欣 贾敏 张莉蓉 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期602-605,共4页
目的探讨中国河南省汉族人群中CYP3A4*1G和CYP3AP1*3多态性分布及连锁不平衡关系。方法采用聚合酶链式反应与限制性内切酶片段长度多态性技术,对324例河南汉族人群CYP3A4*1G和CYP3AP1*3多态性进行分析。结果 CYP3A4*1G(20230G>A)频率... 目的探讨中国河南省汉族人群中CYP3A4*1G和CYP3AP1*3多态性分布及连锁不平衡关系。方法采用聚合酶链式反应与限制性内切酶片段长度多态性技术,对324例河南汉族人群CYP3A4*1G和CYP3AP1*3多态性进行分析。结果 CYP3A4*1G(20230G>A)频率为27.8%,GG、GA和AA基因型频率分别为50.3%、43.8%和5.9%;CYP3AP1*3(-44G>A)频率为75.2%,GG、GA和AA基因型分别为54.9%、40.5%和4.6%。CYP3A4*1G和CYP3AP1*3的等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。LDA连锁不平衡分析发现CYP3A4*1G和CYP3AP1*3具有连锁不平衡关系(r2=0.36,D'=0.647 4,P<0.01)。结论 CYP3A4*1G和CYP3AP1*3等位基因在河南汉族人群中具有较高的频率,CYP3A4*1G和CYP3AP1*3之间具有连锁不平衡关系。 展开更多
关键词 细胞色素P-450 CYP3A 细胞色素P-450 CYP3A4＊1G 细胞色素P-450 CYP3ap1＊3 多态性 单核苷酸 连锁不平衡
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白蛋白结合型紫杉醇联合AP方案在浸润性小叶癌中的应用及其对FCN3、sRAGE和nectin-4的影响
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作者 李静 王志芬 +2 位作者 杨庚武 李颖 刘峥 《广东医学》 CAS 2023年第11期1390-1394,共5页
目的 探讨白蛋白结合型紫杉醇联合AP方案在浸润性小叶癌中的应用及其对纤维胶凝蛋白3(FCN3)、可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)、结合素-4(nectin-4)的影响。方法 前瞻性收集2017—2020年在邯郸市中心医院、河北医科大学第四医院就... 目的 探讨白蛋白结合型紫杉醇联合AP方案在浸润性小叶癌中的应用及其对纤维胶凝蛋白3(FCN3)、可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)、结合素-4(nectin-4)的影响。方法 前瞻性收集2017—2020年在邯郸市中心医院、河北医科大学第四医院就诊的200例晚期乳腺浸润性小叶癌患者临床资料,以数字表法将其分成对照组和观察组各100例,对照组采用AP方案治疗,观察组采用白蛋白结合型紫杉醇联合AP方案治疗,对比两组患者的疗效、生存质量、不良反应、FCN3、sRAGE和nectin-4水平,同时分析患者血清FCN3、sRAGE和nectin-4水平和临床不同病理特征之间的联系。结果 观察组的临床疗效显著高于对照组(P<0.05);观察组的生活质量评分显著高于对照组(P<0.05);观察组不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05);治疗前两组的FCN3、sRAGE和nectin-4水平均差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组的FCN3、sRAGE和nectin-4水平显著优于对照组(P<0.05);不同年龄、病理类型、肿瘤直径、孕激素受体表达、增殖细胞核抗原表达及雌激素受体表达等与患者血清FCN3、sRAGE和nectin-4的表达相比,差异无统计学意义(P>0.05),而不同TNM分期和淋巴结是否转移与血清FCN3、sRAGE和nectin-4的表达相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 白蛋白结合型紫杉醇联合AP方案治疗浸润性小叶癌,疗效确切,能提高患者生存质量,不良反应少,改善血清因子及预后,值得在临床上推广应用。 展开更多
关键词 白蛋白结合型紫杉醇 ap方案 浸润性 小叶癌 纤维胶凝蛋白3 可溶性晚期糖基化终末产物受体 结合素-4
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AP1S3基因突变与泛发性脓疱型银屑病的相关性研究 被引量：1
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作者 李璐璐 尤家宝 +3 位作者 付希安 于功奇 刘红 张福仁 《中国麻风皮肤病杂志》 2018年第3期131-134,共4页
目的:检测107例中国汉族泛发性脓疱型银屑病(GPP)患者衔接蛋白复合体1-σ1亚单位异构体基因(AP1S3)的突变。方法:提取全部107例GPP患者外周血DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增AP1S3基因全部外显子,并进行测序。结果:107例GPP患者均未... 目的:检测107例中国汉族泛发性脓疱型银屑病(GPP)患者衔接蛋白复合体1-σ1亚单位异构体基因(AP1S3)的突变。方法:提取全部107例GPP患者外周血DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增AP1S3基因全部外显子,并进行测序。结果:107例GPP患者均未发现AP1S3基因突变以及单核苷酸多态性(SNP)位点。结论:本组GPP患者发病与AP1S3基因无关。 展开更多
关键词 泛发性脓疱型银屑病 ap1S3 基因突变
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齿瓣石斛AP3基因的克隆及序列分析
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作者 陈凯 应奇才 +2 位作者 徐祥彬 沈波 王慧中 《杭州师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第4期257-262,共6页
采用RACE技术从石斛花序中克隆了MADS-box家族AP3基因,该基因全长947 bp,包括完整的编码区、5′-UTR和3′-UTR,编码227个氨基酸.生物信息学分析表明,该基因编码相对分子量为26.5 KD的碱性疏水蛋白,具有保守MADS区和半保守K区结构域,与... 采用RACE技术从石斛花序中克隆了MADS-box家族AP3基因,该基因全长947 bp,包括完整的编码区、5′-UTR和3′-UTR,编码227个氨基酸.生物信息学分析表明,该基因编码相对分子量为26.5 KD的碱性疏水蛋白,具有保守MADS区和半保守K区结构域,与蝴蝶兰和拟南芥AP3同源蛋白相似性高达92%和90%. 展开更多
关键词 石斛 ap3基因 生物信息学
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花器官发育B类基因AP3同源基因在几种葫芦科植物单性花发育过程中的作用研究 被引量：5
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作者 蔡广华 路洪凤 +1 位作者 黄三文 孙进京 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1604-1615,共12页
前期研究发现黄瓜花器官发育B类基因CsAP3可以通过调控乙烯受体基因CsETR1表达量参与雌花中雄蕊滞育而形成雌花的过程。本试验中进一步对丝瓜、苦瓜、甜瓜、西瓜、美洲南瓜和印度南瓜中的AP3同源基因进行了分析。利用简并PCR方法得到了... 前期研究发现黄瓜花器官发育B类基因CsAP3可以通过调控乙烯受体基因CsETR1表达量参与雌花中雄蕊滞育而形成雌花的过程。本试验中进一步对丝瓜、苦瓜、甜瓜、西瓜、美洲南瓜和印度南瓜中的AP3同源基因进行了分析。利用简并PCR方法得到了丝瓜和苦瓜中AP3同源基因序列,并根据已发表的基因组序列信息得到了甜瓜、西瓜、美洲南瓜和印度南瓜中AP3同源基因序列。分析发现这几个物种中AP3蛋白C端短GV重复序列编码区存在同义突变,表明该基因可能在形成雌性花的演化过程中具有保守功能。凝胶阻滞和烟草瞬时表达体系双荧光试验表明,甜瓜、西瓜和印度南瓜的AP3同源蛋白均具有结合ETR1同源基因启动子并调控其表达的潜力。这些结果为研究葫芦科雌性花发育调控机制提供了新的入手点,为揭示葫芦科植物雌性花起源提供了重要信息。 展开更多
关键词 葫芦科 单性花 ap3同源基因 乙烯受体
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