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新型钙激活氯离子通道ANO1抑制剂抗前列腺癌作用研究
1
作者 杨小花 陈攀 +1 位作者 罗桂芳 李专 《中南药学》 2025年第8期2217-2224,共8页
目的研究新型ANO1抑制剂YXH系列化合物(YXH-2215~YXH-2226)对前列腺癌的潜在治疗作用。方法通过细胞增殖抑制实验检测YXH系列化合物对ANO1不同表达水平前列腺癌细胞增殖活性的影响;进一步通过细胞迁移实验和Western blot技术,检测YXH-2... 目的研究新型ANO1抑制剂YXH系列化合物(YXH-2215~YXH-2226)对前列腺癌的潜在治疗作用。方法通过细胞增殖抑制实验检测YXH系列化合物对ANO1不同表达水平前列腺癌细胞增殖活性的影响;进一步通过细胞迁移实验和Western blot技术,检测YXH-2219对PC-3细胞迁移能力及ANO1表达的相关性;采用PC-3细胞移植瘤模型,探讨YXH-2219对异种移植瘤肿瘤生长的影响。结果YXH系列化合物能以剂量依赖性方式抑制高表达ANO1前列腺癌细胞PC-3的增殖;YXH-2219显著降低PC-3细胞迁移能力,并下调了PC-3细胞中ANO1的表达,对PC-3移植瘤模型肿瘤生长具有显著抑制作用。结论YXH系列化合物,尤其是YXH-2219具有良好的抗前列腺癌活性,其作用机制可能与抑制ANO1表达作用有关。 展开更多
关键词 YXH系列化合物 前列腺癌 钙激活氯离子通道 ano1 ano1抑制剂
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舌鳞状细胞癌中ANO1蛋白的表达及其临床意义
2
作者 闫红娟 马晓平 +5 位作者 唐小雪 李曼 李东慧 徐江 周政 陈敏 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第7期942-947,共6页
目的 探讨ANO1蛋白在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma, TSCC)中的表达及其与临床病理特征、预后的关系。方法 采用免疫组化法检测TSCC及配对癌旁正常组织中ANO1蛋白的表达情况。分析其与TSCC临床病理特征和预后的关系,并与... 目的 探讨ANO1蛋白在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma, TSCC)中的表达及其与临床病理特征、预后的关系。方法 采用免疫组化法检测TSCC及配对癌旁正常组织中ANO1蛋白的表达情况。分析其与TSCC临床病理特征和预后的关系,并与TCGA数据库样本分析结果进行比较。结果 TCGA数据库分析ANO1 mRNA在TSCC组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.000 1)。ANO1蛋白在TSCC组织中的高表达率为59.62%(31/52),显著高于配对的癌旁正常组织(15.38%,8/52)(P<0.000 1)。ANO1对TSCC诊断预测的曲线下面积(AUC)为0.726,灵敏度为67.3%,特异性为69.2%,有一定准确性,与TCGA数据库分析结果一致。ANO1蛋白高表达与TSCC临床分期(P=0.003)及T分期(P=0.020)相关。ANO1蛋白高表达TSCC患者的总生存期短于ANO1蛋白低表达患者(P=0.024 1),且ANO1蛋白表达是TSCC患者预后不良的独立风险因素(P=0.021)。结论 ANO1蛋白在TSCC组织中显著高表达,且与患者不良预后相关,可作为TSCC预后评估的潜在标志物。 展开更多
关键词 舌肿瘤 ano1 预后 免疫组织化学
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基于ANO1/PI3K/AKT通路探讨针刺对脓毒症胃肠功能障碍的影响
3
作者 褚玉茹 王栩 +3 位作者 李亚莉 张彬 李冰 阚建英 《河南中医》 2025年第9期1379-1384,共6页
目的:探究调理脾胃针法对脓毒症大鼠胃肠功能障碍的改善作用及其机制。方法:选取46只雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为空白组(8只)、假手术组(8只)及造模组(30只)。造模组大鼠以盲肠结扎穿刺法(cecum ligation and puncture, CLP)建立... 目的:探究调理脾胃针法对脓毒症大鼠胃肠功能障碍的改善作用及其机制。方法:选取46只雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为空白组(8只)、假手术组(8只)及造模组(30只)。造模组大鼠以盲肠结扎穿刺法(cecum ligation and puncture, CLP)建立脓毒症模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、针刺组、阻滞剂组,每组8只。针刺组取穴足三里、丰隆、阴陵泉、地机及中脘进行针刺,每次留针30 min,每日2次,连续3 d。阻滞剂组大鼠按照体质量腹腔注射50 mg·kg^(-1)LY294002后进行针刺治疗。采用全自动动物血液细胞分析仪检测白细胞(white blood cell, WBC)数量;ELISA法检测血清C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)和降钙素原(procalcitonin, PCT)的水平;大鼠灌胃黑色营养半固体糊检测胃排空率及小肠推进率;HE染色检测小肠病理变化;Western blot检测ANO1、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase, PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)、p-AKT蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组血液白细胞数量以及血清PCT、CRP水平显著升高(P<0.05);胃排空率和小肠推进率显著降低(P<0.05);ANO1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,针刺组血液白细胞数量以及血清PCT、CRP水平显著降低(P<0.05);胃排空率和小肠推进率显著升高(P<0.05);ANO1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与针刺组比较,阻滞剂组血液白细胞数量以及血清PCT、CRP水平显著升高(P<0.05);胃排空率和小肠推进率显著降低(P<0.05);ANO1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。HE染色显示:针刺可显著改善脓毒症大鼠小肠病理变化。结论:调理脾胃针法可能通过激活ANO1/PI3K/AKT信号通路缓解脓毒症胃肠功能障碍。 展开更多
关键词 脓毒症 胃肠功能障碍 调理脾胃针法 ano1/PI3K/AKT信号通路 大鼠
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基于KANO-AHP的儿童智力支持APP的交互设计 被引量：2
4
作者 陆毅华 刘昇航 《设计》 2025年第7期129-133,共5页
针对目前市面上的儿童智力支持App具有更好的交互体验以及适配使用需求,对用户需求进行研究分析得出交互设计模型。通过用户调研与访谈并结合KANO-AHP模型分析需求内容得出需求权重,根据要素权重构建最终的设计模型。研究得出了儿童智... 针对目前市面上的儿童智力支持App具有更好的交互体验以及适配使用需求,对用户需求进行研究分析得出交互设计模型。通过用户调研与访谈并结合KANO-AHP模型分析需求内容得出需求权重,根据要素权重构建最终的设计模型。研究得出了儿童智力支持App必备、期待、魅力共计25条核心的交互需求与对应儿童认知特征的设计策略。采用KANO和AHP模型相结合的研究方法,探讨了如何契合儿童发育阶段的交互设计策略并进行了实践,为后续儿童智力支持App的交互设计提供了一定的设计参考。 展开更多
关键词 智力训练 Kano AHP App交互设计 儿童设计
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Ano5基因缺陷通过调控PDE4D/cAMP轴导致小鼠成骨能力异常增强的机制研究
5
作者 王胜男 刘秀 +2 位作者 张帅 李鸿宇 胡颖 《口腔颌面修复学杂志》 2025年第3期164-169,共6页
目的:探讨Ano5基因缺陷导致小鼠成骨能力异常增强的潜在机制。方法:取出生2~3天的小鼠颅骨前成骨细胞(mCOB)进行原代培养,利用ELISA检测mCOB在成骨分化过程中PDE4D活性及cAMP浓度;qRT-PCR检测mCOB中Col1α1、Ocn、Ap-1基因的表达水平;We... 目的:探讨Ano5基因缺陷导致小鼠成骨能力异常增强的潜在机制。方法:取出生2~3天的小鼠颅骨前成骨细胞(mCOB)进行原代培养,利用ELISA检测mCOB在成骨分化过程中PDE4D活性及cAMP浓度;qRT-PCR检测mCOB中Col1α1、Ocn、Ap-1基因的表达水平;Western blot检测mCOB中PDE4D、OCN、COL1α1蛋白表达。利用免疫组织化学染色方法检测16周龄小鼠股骨中PDE4D的表达量。结果:Ano5^(-/-)mCOB中PDE4D蛋白表达减少、活性显著降低,股骨组织中PDE4D表达降低;mCOB中cAMP浓度升高,cAMP通路下游成骨相关基因Ocn、Col1α1、Ap-1表达水平增高。结论:Ano5基因缺陷通过影响PDE4D/cAMP信号通路,导致小鼠成骨能力异常增强。 展开更多
关键词 ano5 PDE4D CAMP 成骨分化 小鼠模型
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Anoctamin家族中钙激活氯离子通道调节剂筛选及应用研究进展 被引量：1
6
作者 吴明达 洪啟元 +6 位作者 兰月娇 姚岚 习诗婷 刘雪莹 高俊涛 郑锴 郝峰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期445-454,共10页
钙激活氯离子通道(CaCC)是一类能通过胞内钙离子激活转运氯离子的通道蛋白,其主要在神经元和肌细胞中参与调节膜电位、细胞内钙平衡和细胞兴奋性等重要的生理作用。Anoctamin(Ano)家族中Ano1是最经典的CaCC,Ano1的靶向调节剂对癌症、囊... 钙激活氯离子通道(CaCC)是一类能通过胞内钙离子激活转运氯离子的通道蛋白,其主要在神经元和肌细胞中参与调节膜电位、细胞内钙平衡和细胞兴奋性等重要的生理作用。Anoctamin(Ano)家族中Ano1是最经典的CaCC,Ano1的靶向调节剂对癌症、囊性纤维化、高血压、腹泻和哮喘等疾病具有潜在治疗作用。自2008年Ano1首次被发现后,先后出现了多种CaCC特异性调节剂的筛选方法,主要包括基于荧光蛋白的高通量初级筛选、电生理膜片钳技术和虚拟筛选,进而发现了多种药理学作用不同的小分子调节剂。本文综述了目前较为主流的筛选方法的原理和优缺点,并对迄今发现的Ano1特异性调节剂的化学结构和潜在的应用进展进行综述。 展开更多
关键词 钙激活氯离子通道 anoctamin ano1 ano2 高通量筛选 特异性调节剂
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邻苯二甲酸二异丁酯——新型的ANO2通道开放剂
7
作者 郑晓恬 白立川 +1 位作者 王惠杰 吴琼 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期695-700,共6页
目的筛选ANO2的特异性配体药物,为医药行业开发靶向ANO2新药提供先导化合物的结构信息。方法构建ANO2过表达的HEK293细胞株,应用共聚焦显微镜-膜片钳全细胞记录模式技术筛选ANO2的特异性配体。结果在胞内外钳制电压100 mV及含1μmol... 目的筛选ANO2的特异性配体药物,为医药行业开发靶向ANO2新药提供先导化合物的结构信息。方法构建ANO2过表达的HEK293细胞株,应用共聚焦显微镜-膜片钳全细胞记录模式技术筛选ANO2的特异性配体。结果在胞内外钳制电压100 mV及含1μmol·L^(-1)钙离子电极内液的记录条件下,邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate,DIBP)给药前ANO2介导的氯电流密度为(14.67±2.87)pA/pF,给药后ANO2介导的氯电流电导为(28.75±4.05)pA/pF,差异具有统计学意义(P<0.01);钙荧光成像实验结果表明DIBP无调节胞内游离钙信号的作用;在0μmol·L^(-1)钙离子条件下,DIBP对静息状态的ANO2通道不具有直接的激活作用。结论DIBP通过直接作用增强已活化ANO2通道的电导,其作为一种新型的促ANO2通道开放剂为开发靶向ANO2的药物提供结构信息,同时也为研究其他邻苯二甲酸酯类物质的毒理作用提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二异丁酯 ano2 配体 过表达 先导化合物 电流密度 白介素-8
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KANO模型在产品设计领域中的应用现状研究综述 被引量：11
8
作者 江玉洁 吕杰锋 孙荦 《设计》 2024年第5期73-75,共3页
对现阶段KANO模型在产品设计中的发展及应用现状进行梳理与分析,探讨KANO模型在未来产品设计中的发展方向。本文采用文献研究法,从KANO模型的理论基础、KANO模型的定量化改进研究、KANO模型在产品设计中的应用现状3个方面对KANO模型的... 对现阶段KANO模型在产品设计中的发展及应用现状进行梳理与分析,探讨KANO模型在未来产品设计中的发展方向。本文采用文献研究法,从KANO模型的理论基础、KANO模型的定量化改进研究、KANO模型在产品设计中的应用现状3个方面对KANO模型的文献进行了综述。目前,国内外文献主要集中在KANO模型的定量化研究和KANO模型的应用研究上;尽管KANO模型在实践中存在问卷设计难度及数据处理限制等问题,但该模型仍成功应用于多种行业,助力企业提升了产品性能和用户体验。KANO模型在产品设计中的应用将不断深化,实现对用户需求更精准的识别与满足,并通过精细化、个性化和动态化的改进策略提升模型效能,以适应复杂多变的市场环境。 展开更多
关键词 Kano模型 产品设计 定量分析 用户满意度 文献研究
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口腔鳞状细胞癌中ANO1的表达及临床意义 被引量：1
9
作者 闫红娟 马晓平 +4 位作者 李曼 仵楠 唐小雪 陈敏 徐江 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期508-512,共5页
目的:探讨ANO1在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及预后价值。方法:分别采用免疫组织化学法(n=163)和实时荧光定量PCR(n=42)检测ANO1蛋白和mRNA在OSCC及癌旁正常组织中的表达水平,分析ANO1的表达与OSCC患者临床病理特征(n=163)和预后(n=93... 目的:探讨ANO1在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及预后价值。方法:分别采用免疫组织化学法(n=163)和实时荧光定量PCR(n=42)检测ANO1蛋白和mRNA在OSCC及癌旁正常组织中的表达水平,分析ANO1的表达与OSCC患者临床病理特征(n=163)和预后(n=93)的关系,并与TCGA数据库样本分析结果进行比较。结果:免疫组化和实时荧光定量PCR结果证实ANO1在OSCC中高表达(P<0.05),与TCGA数据库分析结果一致。ANO1蛋白表达与T分期、淋巴结转移、TNM分期、预后不良密切相关(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,ANO1蛋白表达(P=0.002)和分化程度(P=0.034)是影响OSCC患者预后的独立危险因素。结论:ANO1在OSCC组织中高表达,且与患者不良预后相关,可作为肿瘤患者不良预后的新型生物标志物。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 ano1 免疫组织化学 实时荧光定量PCR 预后
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ANO1介导肿瘤恶性生物学行为的机制探讨 被引量：1
10
作者 郑晓恬 高凤彤 +3 位作者 石权 叶红莲 白立川 潘晓丽 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第3期561-565,共5页
ANO1又称为TMEM16A,其作为钙激活的电压依赖性氯通道的分子基础之一,广泛分布于体内多种组织器官,介导了支气管腺体分泌、痛觉、肠道慢波形成等多种生理功能;同时ANO1参与了多种病理过程的发生、发展,如恶性肿瘤、炎症等。多项报导证实... ANO1又称为TMEM16A,其作为钙激活的电压依赖性氯通道的分子基础之一,广泛分布于体内多种组织器官,介导了支气管腺体分泌、痛觉、肠道慢波形成等多种生理功能;同时ANO1参与了多种病理过程的发生、发展,如恶性肿瘤、炎症等。多项报导证实了恶性肿瘤发病过程中通过多种信号通路引起ANO1的高表达,继而高表达的ANO1激活不同的下游信号通路提高了肿瘤细胞的恶性生物学行为。本文主要探讨恶性肿瘤中高表达的ANO1提高肿瘤细胞恶性生物学行为的可能机制。 展开更多
关键词 ano1 增殖 迁移 浸润 信号通路
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沉默长链非编码RNA ANO1-AS1对食管鳞癌细胞迁移、侵袭的影响 被引量：2
11
作者 张健 邵生辉 +5 位作者 彭雅琼 向辉 骆苗苗 石梦珍 郑勇 陈卫刚 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期75-81,共7页
目的研究长链非编码(Lnc)RNA ANO1-AS1对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法食管癌细胞株(EC109、TE)转染ANO1-AS1敲减慢病毒,沉默ANO1-AS1表达为LV-sh-ANO1-AS1组,阴性肿瘤对照为LV-Con组,未进行转染为空白对照(Bla... 目的研究长链非编码(Lnc)RNA ANO1-AS1对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的影响及其可能的分子机制。方法食管癌细胞株(EC109、TE)转染ANO1-AS1敲减慢病毒,沉默ANO1-AS1表达为LV-sh-ANO1-AS1组,阴性肿瘤对照为LV-Con组,未进行转染为空白对照(Blank)组。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组食管癌细胞中ANO1-AS1和ANO1的相对表达量。通过划痕实验和Transwell迁移实验检测各组细胞的迁移能力。通过Transwell侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力。通过Western印迹测定每组细胞中ANO1、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、上皮间质转化(EMT)相关蛋白及细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达。结果qRT-PCR结果显示,转染ANO1-AS1敲减慢病毒后,食管癌细胞EC109、TE中LV-sh-ANO1-AS1组LncRNA ANO1-AS1和ANO1 mRNA表达水平均显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05)。划痕实验结果表明,LV-sh-ANO1-AS1组细胞划痕愈合率显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05)。Transwell结果表明,LV-sh-ANO1-AS1组细胞迁移和侵袭能力显著低于LV-Con组和Blank组(P<0.05)。Western印迹结果显示,与LV-Con组和Blank组比较,LV-sh-ANO1-AS1组MMP2、MMP9、Vimentin、p-ERK及ANO1蛋白表达水平显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论LncRNA ANO1-AS1在食管鳞癌细胞EC109、TE中高表达,并可能通过影响ERK/MAPK信号通路促进食管癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 食管癌 长链非编码(Lnc)RNA ano1-AS1 迁移 侵袭
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绵羊ANO5基因的生物信息学分析 被引量：1
12
作者 代淇佳 马博 +1 位作者 谢凡 张小雪 《寒旱农业科学》 2024年第1期37-42,共6页
作为Anoctamin蛋白家族的第五个成员,ANO5基因主要在绵羊肌肉再生、肌母细胞融合和肌细胞膜修复中发挥作用。为探究ANO5基因在绵羊体内的功能,本研究利用生物信息学软件分析了绵羊ANO5基因及其编码产物的结构与功能。结果显示:绵羊ANO5... 作为Anoctamin蛋白家族的第五个成员,ANO5基因主要在绵羊肌肉再生、肌母细胞融合和肌细胞膜修复中发挥作用。为探究ANO5基因在绵羊体内的功能,本研究利用生物信息学软件分析了绵羊ANO5基因及其编码产物的结构与功能。结果显示:绵羊ANO5基因含有一个最大长度为3351 bp的开放阅读框,推测其编码1116个氨基酸残基。该基因编码蛋白的分子式为C5897H9014N1546O1668S42,分子质量为129602.32 Da,理论等电点为7.24,估计半衰期为30 h,不稳定指数为49.71,脂肪族氨基酸指数为79.43。绵羊ANO5蛋白位于质膜的可能性最大(56.5%),不含信号肽,具有8段跨膜区,属于不稳定亲水性跨膜蛋白。二级结构以无规卷曲(68.43%)为主,三级结构主要由无规卷曲缠绕折叠形成。 展开更多
关键词 绵羊 ano5基因 生物信息学分析
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弱精子症患者精子锌稳态蛋白、GPR39和ANO1 mRNA的表达变化及其临床意义 被引量：1
13
作者 贺春 戴芳芳 +5 位作者 刘俊生 耿亚松 周均霞 胡一珍 郑波 王树松 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期18-25,共8页
目的:探究锌稳态相关蛋白、G蛋白偶联受体39(GPR39)及ANO1 mRNA在弱精子症精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性。方法:选取2022年6月至2023年4月我中心收集的弱精子症患者精液标本(PR+NP<40%,PR<32%,精子浓度>15&... 目的:探究锌稳态相关蛋白、G蛋白偶联受体39(GPR39)及ANO1 mRNA在弱精子症精子中的表达变化,并分析其与精子运动能力的相关性。方法:选取2022年6月至2023年4月我中心收集的弱精子症患者精液标本(PR+NP<40%,PR<32%,精子浓度>15×10^(6)/ml)40例,正常精液标本(PR+NP≥40%,PR≥32%,精子浓度>15×10^(6)/ml)42例。通过CASA检测精液常规参数及精子活力,测量两组精浆锌的含量,运用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对两组精子锌转运蛋白(ZIP13、ZIP8、ZNT10)、金属硫蛋白(MT1G、MT1、MTF)、GPR39和钙依赖性氯离子通道蛋白(ANO1)表达进行定量检测;运用激光共聚焦检测精子中的游离锌分布;运用免疫荧光染色观察精子中GPR39、MT1蛋白的表达;进一步采用Spearman秩相关分析其与精液参数的相关性。结果:与正常组相比,弱精子症组精浆锌的浓度无明显差异(P>0.05),弱精子症组精子游离锌水平明显降低(P<0.05);RT-qPCR检测结果显示,弱精子症组精子MT1G、MTF、ZIP13、GPR39、ANO1 mRNA相对表达量低于正常组(P<0.05);两组间ZIP8、ZNT10、MT1 mRNA相对表达量无显著性差异(P>0.05);免疫荧光结果显示弱精子组GPR39蛋白表达较低(P<0.05);相关性分析结果显示MT1G、MTF、GPR39、ANO1 mRNA相对表达量与前向运动精子百分率和精子活动率呈正相关(P<0.05)。结论:弱精子症患者精子锌稳态蛋白(MT1G、MTF、ZIP13)、GPR39和ANO1 mRNA表达下调且其表达与精子运动能力呈正相关。 展开更多
关键词 弱精子症 锌敏感受体GPR39 ano1 精子活力
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ANO5突变导致颌骨长骨发育不良
14
作者 郑超群 崔歌平 +1 位作者 任秀智 赵秀丽 《基础医学与临床》 CAS 2024年第11期1504-1509,共6页
目的在两个颌骨长骨发育不良(GDD)家系中进行临床特征和致病基因变异鉴定。方法对先证者及其家系成员进行面部和四肢外观畸形骨骼形态的观察,采集先证者及其父母的周静脉外周血3~4 mL;采用常规酚-氯仿法提取外周血基因组DNA;通过全外显... 目的在两个颌骨长骨发育不良(GDD)家系中进行临床特征和致病基因变异鉴定。方法对先证者及其家系成员进行面部和四肢外观畸形骨骼形态的观察,采集先证者及其父母的周静脉外周血3~4 mL;采用常规酚-氯仿法提取外周血基因组DNA;通过全外显子组测序(WES)对先证者进行候选致病基因变异的筛查,再经PCR-Sanger测序在先证者及其家系成员中针对候选致病变异进行变异验证;通过致病变异的家系共分离、变异位点进化保守性、候选致病变异的群体等位基因频率和生物信息学分析进行候选致病变异的致病性鉴定,最终确定上述家系GDD患者的致病变异。结果在两个GDD先证者中均鉴定到ANO5的杂合错义变异。家系1致病变异为位于ANO5第11外显子的c.1066T>G,家系2致病变异为位于ANO5第15外显子的c.1553G>A。上述两个变异分别导致ANO5编码蛋白第356位氨基酸由半胱氨酸变为甘氨酸(p.Cys356Gly),及第518氨基酸由甘氨酸变为谷氨酸(p.Gly518Glu)。结论本研究首次在中国人群中发现了c.1066T>G(p.Cys356Gly)致病变异,为患者疾病进展预后和未来产前基因诊断提供了重要依据。 展开更多
关键词 颌骨长骨发育不良 全外显子组测序 ano5 变异
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ANO5非移码插入突变型GDD家系临床分析及其诱导多能干细胞的构建
15
作者 王周阳 凌霄 +2 位作者 施燕妮 王磊 秦兴军 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2024年第1期36-41,共6页
目的:建立和鉴定临床发现的一个由ANO5基因新的致病性突变引起的颌骨骨干发育不良(gnathodiaphyseal dysplasia,GDD)家系中患病者和非患病者来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)。方法 :纳入以颌骨畸形为主要... 目的:建立和鉴定临床发现的一个由ANO5基因新的致病性突变引起的颌骨骨干发育不良(gnathodiaphyseal dysplasia,GDD)家系中患病者和非患病者来源的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,i PSCs)。方法 :纳入以颌骨畸形为主要表现的1个GDD家系5例患者,评估患者临床表现、骨影像学、骨密度、骨量等相关生化指标。收集家系中1例患病者与非患病者外周血样本,将表达Oct4、Sox2和Klf4转录因子的仙台病毒转染患病者和非患病者外周血单核细胞,将其重编程为i PSCs,并通过碱性磷酸酶染色、细胞免疫荧光、qPCR、核型分析等检测其干细胞多能性。结果:GDD主要表现为双侧上下颌骨弥漫性多发肿胀,并伴有全身骨密度下降。通过检测,证明患病者及非患病者外周血来源的i PSCs具有多能性。结论:GDD患者外周血单核细胞在体外可被成功诱导为无外源性基因整合的具有多能分化特性的i PSCs,为GDD的发病机制研究提供了高效直接的细胞模型。 展开更多
关键词 颌骨骨干发育不良 ano5基因 表型 诱导多能干细胞
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增强型绿色荧光蛋白融合对Ano1钙激活Cl-通道生理特性的影响 被引量：5
16
作者 郑锴 许会静 +6 位作者 藏雨轩 侯毅鞠 张丽 杨海鸥 朱洁 方芳 郝峰 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期623-628,共6页
本研究旨在探讨融合在Ano1钙激活Cl^-通道(anoctamin1)C末端的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Ano1生理特性的影响。分别构建融合和未融合EGFP的Ano1真核表达载体,通过脂质体介导分别将这两类真核表达载体转染至Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(F... 本研究旨在探讨融合在Ano1钙激活Cl^-通道(anoctamin1)C末端的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Ano1生理特性的影响。分别构建融合和未融合EGFP的Ano1真核表达载体,通过脂质体介导分别将这两类真核表达载体转染至Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞,倒置荧光显微镜下观察融合和未融合EGFP的Ano1在FRT细胞中的表达与定位;荧光淬灭动力学检测Ano1转运I^-的能力。结果显示,融合和未融合EGFP的Ano1均表达于FRT细胞膜上,且均能被Ca^(2+)激活,融合和未融合EGFP的Ano1转运I^-的能力无明显差异。以上结果提示,Ano1和EGFP-Ano1具有相似的生理特性。 展开更多
关键词 融合蛋白 增强型绿色荧光蛋白 ano1 生理特性 钙激活Cl^-通道
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ANO1在口腔鳞癌中的表达及临床分析 被引量：2
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作者 李雅冬 张劲松 +3 位作者 杨凯 张福军 陈睿 洪苏玲 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第10期1175-1178,共4页
目的探讨ANO1基因及蛋白在口腔鳞癌中的表达及其临床意义。方法用免疫组化SP法及Northern blot检测81例口腔鳞癌组织及相应正常组织的ANO1基因及蛋白的表达,并结合临床病理资料作相关分析。结果 ANO1在口腔鳞癌组织中的阳性表达明显高... 目的探讨ANO1基因及蛋白在口腔鳞癌中的表达及其临床意义。方法用免疫组化SP法及Northern blot检测81例口腔鳞癌组织及相应正常组织的ANO1基因及蛋白的表达,并结合临床病理资料作相关分析。结果 ANO1在口腔鳞癌组织中的阳性表达明显高于正常组织(P<0.05);有淋巴结转移的口腔鳞癌组织ANO1阳性表达高于无转移的口腔鳞癌组织(P<0.05);随着口腔鳞癌临床分期的升高,ANO1的阳性表达率升高(P<0.05)。SCC-25细胞系的内源性ANO1表达31.57±5.31高于Hep-2的0.26±0.03(P<0.05)。SCC-25的侵袭能力明显强于Hep-2(P<0.05)。结论 ANO1可能在口腔鳞癌的发生和发展过程中起到重要作用。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 ano1基因 NORTHERN BLOT
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ANO1对非小细胞肺癌病理分期和复发的影响 被引量：2
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作者 叶书高 王永功 +3 位作者 陈静瑜 郑明峰 吴小波 纪勇 《江苏医药》 CAS 2015年第22期2713-2715,F0003,共4页
目的探讨anoctamin 1(ANO1)表达对非小细胞肺癌(NSCLC)病理分期和复发的影响。方法Ⅰ-Ⅲ期NSCLC患者64例。采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化检测肺癌组织和癌旁组织ANO1和表皮生长因子受体(EGFR)的表达;行肿瘤病理分级评定,随访术... 目的探讨anoctamin 1(ANO1)表达对非小细胞肺癌(NSCLC)病理分期和复发的影响。方法Ⅰ-Ⅲ期NSCLC患者64例。采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化检测肺癌组织和癌旁组织ANO1和表皮生长因子受体(EGFR)的表达;行肿瘤病理分级评定,随访术后的复发。结果 NSCLC存在ANO1的过表达。ANO1阳性组28例中,26例(93%)的EGFR表达阳性;ANO1阳性组的病理Ⅲ期病例的比例高于ANO1阴性组(50%vs.17%)(P<0.01)。随访1年,ANO1阳性组的复发率高于ANO1阴性组(39%vs.17%)(P<0.01)。结论 ANO1在NSCLC组织存在过表达。ANO1的过表达促进EGFR的过表达,提高NSCLC的病理分级评分和复发率。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 ano1 表皮生长因子受体
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ANO1稳定高表达对Hep-2细胞株生物学特性的影响
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作者 李雅冬 张劲松 +3 位作者 杨凯 张福军 陈睿 陈丹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期251-255,共5页
目的检测ANO1高表达对Hep-2细胞株生物学特性的影响。方法利用ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株先后进行流式细胞仪,软琼脂细胞生长实验,体外划痕愈合实验,SiRNA实验,SiRNA沉默ANO1的体外划痕愈合实验,DIDS阻断氯离子通道实验,以明确ANO1高... 目的检测ANO1高表达对Hep-2细胞株生物学特性的影响。方法利用ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株先后进行流式细胞仪,软琼脂细胞生长实验,体外划痕愈合实验,SiRNA实验,SiRNA沉默ANO1的体外划痕愈合实验,DIDS阻断氯离子通道实验,以明确ANO1高表达对Hep-2细胞株生长、迁移及侵袭的影响。结果流式细胞仪检测细胞周期,结果显示实验组和空白组的G0/G1期比率差异无显著性(P>0.05);软琼脂细胞生长实验结果显示实验组和对照组差异无显著性(P>0.05);体外划痕愈合实验结果显示两者差异有显著性(P<0.05),表明ANO1高表达加快了Hep-2细胞的迁移速度;SiRNA沉默ANO1的体外划痕愈合实验结果显示两者差异有显著性(P<0.05),表明沉默ANO1可减缓Hep-2细胞的迁移速度。DIDS阻断氯离子通道实验结果显示两者差异有显著性(P<0.05),表明DIDS能有效的阻断ANO1的氯离子通道活性,并且减缓Hep-2细胞的迁移速度,再一次证明ANO1参与了Hep-2细胞的迁移活动。结论 ANO1高表达并未改变癌细胞的增殖速度,但却大大增加了头颈鳞癌细胞的移动能力,有望成为治疗头颈鳞癌的新靶点。 展开更多
关键词 头颈鳞癌 ano1 高表达 氯离子通道 生物学特性 HEP-2细胞 ano1
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稳定高表达ANO1对Hep-2细胞生物学性状的影响
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作者 李雅冬 张劲松 +3 位作者 杨凯 张福军 陈睿 洪苏玲 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期952-956,F0003,共6页
目的:建立外源性ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,并观察其对Hep-2细胞生物学性状的影响。方法:设计引物,提取头颈鳞癌患者的临床标本DNA,并以其为模板行PCR,得到ANO1基因序列片段,将ANO1片段插入到PSG-5质粒,转染入Hep-2细胞株,将稳定高表... 目的:建立外源性ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,并观察其对Hep-2细胞生物学性状的影响。方法:设计引物,提取头颈鳞癌患者的临床标本DNA,并以其为模板行PCR,得到ANO1基因序列片段,将ANO1片段插入到PSG-5质粒,转染入Hep-2细胞株,将稳定高表达ANO1的Hep-2细胞株设为实验组,空白质粒转染的Hep-2细胞株设为对照组。并利用Western blotting法和免疫荧光实验检测已转染细胞,观察ANO1的表达情况。利用Boyden小室侵袭实验和黏附实验检测Hep-2细胞生物学性状的变化。结果:成功构建含ANO1片段的pSG-5质粒,Western blotting法检测结果显示,各组均出现目的条带,实验组的相对分子质量为100 000处条带明显较浓。间接免疫荧光实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞内显现出亮绿色荧光,而空白质粒转染的Hep-2细胞内仅有较暗、较浅的绿色荧光。Boyden小室侵袭实验和黏附实验结果显示,稳定高表达ANO1的Hep-2细胞穿膜细胞百分比和黏附细胞百分比均明显高于对照组,两组结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功建立了ANO1稳定高表达的Hep-2细胞株,稳定高表达ANO1提高了Hep-2细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 头颈部肿瘤 ano1 HEP-2细胞
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