基于AMPK/ACC/CPT1A信号通路探讨羟基茜草素对AML-12细胞脂质沉积的影响

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作者 侯渌茗 李莹 +3 位作者 许嘉鸿 李正鑫 马函琳 陈逸云 《中成药》 北大核心 2025年第9期3096-3101,共6页

目的探讨羟基茜草素(Pur)对AML-12细胞脂质沉积的影响。方法通过棕榈酸+油酸(PO,0.5+0.25 mmol/L)或棕榈酸(PA,0.5 mmol/L)诱导AML-12细胞,建立体外细胞脂质沉积模型。将细胞分为对照组、模型组和Pur 20、40、80μmol/L组。CCK8法测定... 目的探讨羟基茜草素(Pur)对AML-12细胞脂质沉积的影响。方法通过棕榈酸+油酸(PO,0.5+0.25 mmol/L)或棕榈酸(PA,0.5 mmol/L)诱导AML-12细胞,建立体外细胞脂质沉积模型。将细胞分为对照组、模型组和Pur 20、40、80μmol/L组。CCK8法测定细胞活力;生化试剂盒检测细胞甘油三酯(TG)水平;尼罗红染色检测细胞脂滴沉积情况;RT-qPCR法检测细胞内相关脂质代谢基因SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD 1,炎症基因IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL 10及AMPK/ACC/CPT1A通路相关基因AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1A mRNA表达;Western blot法检测细胞p-AMPKα、AMPKα、p-ACC、ACC、CPT1A蛋白表达。结果0~100μmol/L Pur对AML-12细胞活力无明显抑制作用(P>0.05)。与对照组比较,模型组AML-12细胞尼罗红染色半定量和TG水平升高(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL 10 mRNA表达升高(P<0.01),AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1A mRNA表达降低(P<0.01);p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC比值及CPT1A蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,Pur 40、80μmol/L组细胞尼罗红染色半定量和TG水平降低(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL 10 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1A mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01);p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC比值及CPT1A蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论Pur对AML-12细胞脂质沉积有较好的抑制作用,其作用可能与调控AMPK/ACC/CPT1A信号通路相关。 展开更多

关键词 羟基茜草素 aml-12细胞 棕榈酸 油酸 脂质沉积 脂代谢 炎症 AMPK/ACC/CPT1A信号通路

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罗汉果皂苷V对高糖诱导AML-12细胞氧化损伤的保护作用

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作者 侯新月 王娟 +1 位作者 何叶 陈旭 《右江民族医学院学报》 2025年第3期375-380,386,共7页

目的探讨罗汉果皂苷V(MV)是否通过激活PI3K/Akt信号通路抑制高糖诱导的AML-12肝细胞凋亡及氧化应激,从而发挥肝细胞保护作用。方法采用高浓度葡萄糖(144 mmol/L)构建AML-12肝细胞损伤模型;通过CCK-8法筛选MV的最佳干预浓度(70μmol/L);... 目的探讨罗汉果皂苷V(MV)是否通过激活PI3K/Akt信号通路抑制高糖诱导的AML-12肝细胞凋亡及氧化应激,从而发挥肝细胞保护作用。方法采用高浓度葡萄糖(144 mmol/L)构建AML-12肝细胞损伤模型;通过CCK-8法筛选MV的最佳干预浓度(70μmol/L);流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧(ROS)水平;Western Blot分析凋亡相关蛋白(BAX、Caspase-3)及PI3K/Akt通路关键分子(Akt、P-Akt)的表达。结果高糖处理显著降低AML-12细胞活力并诱导凋亡,同时上调BAX和Caspase-3蛋白表达,促进ROS释放,抑制PI3K/Akt通路活性(P-Akt/Akt比值下降)。MV干预后,细胞活力提高,凋亡率降低,凋亡蛋白表达下调,ROS生成减少,且PI3K/Akt通路活性显著增强。结论MV可通过激活PI3K/Akt信号通路,抑制高糖诱导的AML-12肝细胞凋亡及氧化应激,对高糖环境下的肝细胞损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 罗汉果皂苷V aml-12细胞 丝氨酸/苏氨酸激酶B 高糖诱导的肝损伤模型 氧化损伤

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非酒精性脂肪性肝炎AML-12体外模型建立

3

作者 梁晨晨 高建鹏 +4 位作者 赵振林 姜华 张雄 徐艳雯 李其龙 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2024年第9期1172-1178,共7页

目的分析并评价不同比例浓度梯度OA/PA诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)炎症体外模型。方法通过采用不同比例浓度梯度OA/PA(2∶3或2∶1)诱导AML-12细胞建立NASH炎症体外模型;收集细胞OA/PA(500μmol/L∶25... 目的分析并评价不同比例浓度梯度OA/PA诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)炎症体外模型。方法通过采用不同比例浓度梯度OA/PA(2∶3或2∶1)诱导AML-12细胞建立NASH炎症体外模型;收集细胞OA/PA(500μmol/L∶250μmol/L)诱导AML-12株CCK-8检测细胞毒性或存活率;油红O染色观察其胞内脂肪变性;qRT-PCR或Western blotting检测细胞内TNF-α、IL-6和TGF-β1 mRNA含量。结果得出不同比例浓度的OA/PA混合药物刺激24 h或48 h后,OA/PA以2∶1比例(500μmol/L+250μmol/L)等摩尔比混合后,细胞毒性明显低于2∶3的OA/PA(200μmol/L+300μmol/L)浓度(P<0.05);刺激48 h后,模型组细胞内脂滴及IL-6和TNF-αmRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论以2∶1比例的OA(500μmol/L)/PA(250μmol/L)混合药物诱导下成功建立NASH炎症AML-12体外模型。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝炎 aml-12 体外模型 OA PA

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PHP14通过与Vimentin相互作用影响TGF-β诱导的肝细胞AML-12上皮-间质转化 被引量：3

4

作者 徐安健 李艳萌 +2 位作者 乌姗娜 张蓓 姚静怡 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期1-6,共6页

目的:探讨PHP14在上皮-间质转化中的作用及其可能作用机制。方法:建立了研究上皮-间质转化的细胞模型小鼠肝细胞AML-12。在AML-12中过表达PHP14,通过光学显微镜进行形态学观察,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测AML-12上皮-间质转化... 目的:探讨PHP14在上皮-间质转化中的作用及其可能作用机制。方法:建立了研究上皮-间质转化的细胞模型小鼠肝细胞AML-12。在AML-12中过表达PHP14,通过光学显微镜进行形态学观察,应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测AML-12上皮-间质转化中相关标志物的表达情况。通过免疫共沉淀检测PHP14与Vimentin的相互作用情况。结果:小鼠肝细胞AML-12可作为研究上皮-间质转化的较好细胞模型。在AML-12中过表达PHP14可促进AML-12细胞的上皮-间质转化,并增强其运动能力。过表达PHP14可上调Vimentin的蛋白质水平,而对其他上皮-间质转化相关标志物表达没有影响。进一步的研究发现,PHP14可与Vimentin相互作用。结论:PHP14通过与Vimentin相互作用,稳定Vimentin的蛋白质水平,从而参与并调节上皮-间质转化。 展开更多

关键词 PHP14 上皮-间质转化 aml-12 Vimentin 细胞运动

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β2-spectrin的siRNA对AML-12肝细胞增殖特性的影响 被引量：1

5

作者 汪志军 涂炜 刘芳 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期8-11,共4页

目的应用特异性siRNA干扰小鼠肝细胞株AML-12中β2-spectrin表达,检测AML-12细胞增殖凋亡以及细胞周期的改变。方法化学合成β2-spectrin特异性siRNA,分别转染AML-12细胞,荧光定量PCR和Western blot确定其抑制效果。AML-12细胞经TGF-β... 目的应用特异性siRNA干扰小鼠肝细胞株AML-12中β2-spectrin表达,检测AML-12细胞增殖凋亡以及细胞周期的改变。方法化学合成β2-spectrin特异性siRNA,分别转染AML-12细胞,荧光定量PCR和Western blot确定其抑制效果。AML-12细胞经TGF-β细胞因子处理4h后,转染β2-spectrin特异性siRNA,48h后,BrdU标记法以及流式细胞术检测β2-spectrin沉默前后AML-12细胞增殖、凋亡以及周期变化;共聚焦技术检测干扰β2-spectrin表达对TGF-β/Smad信号通路中Smad3、Smad4核定位的影响。结果 siRNA可以高效特异沉默β2-spectrin的表达。流式细胞术检测显示,β2-spectrin沉默促进AML-12细胞增殖,抑制凋亡,S期细胞比例显著升高。免疫荧光结果显示,TGF-β处理后,Smad3、Smad4表达定位于细胞核,沉默β2-spectrin干扰Smad3、Smad4细胞核内定位。结论沉默β2-spectrin的表达促进AML-12增殖,抑制凋亡,促进细胞向S期转化。其机制可能是通过干扰Smad3、Smad4核定位而抑制TGF-β/Smad信号通路,进而发挥诱导凋亡效应。 展开更多

关键词 β2-spectrin aml-12细胞株 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡

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胚胎干细胞分泌因子增强AML-12细胞抗凋亡能力 被引量：1

6

作者 林武 黄昭帅 +1 位作者 鲍苗 陈肖鸣 《温州医科大学学报》 CAS 2018年第6期408-412,共5页

目的:研究胚胎干细胞分泌因子是否能增强AML-12细胞在恶劣条件培养下的抗凋亡能力。方法:分别用胚胎干细胞完全培养基(CON-M)和胚胎干细胞上清液(ESC-M)培养AML-12细胞,并置于恶劣细胞培养环境中培养,MTT法比较各组AML-12细胞活力;Seaho... 目的:研究胚胎干细胞分泌因子是否能增强AML-12细胞在恶劣条件培养下的抗凋亡能力。方法:分别用胚胎干细胞完全培养基(CON-M)和胚胎干细胞上清液(ESC-M)培养AML-12细胞,并置于恶劣细胞培养环境中培养,MTT法比较各组AML-12细胞活力;Seahorse细胞代谢分析仪比较各组AML-12细胞氧消耗率以及细胞外酸化率等呼吸功能代谢情况。结果:MTT结果显示在恶劣细胞培养环境中,于ESC-M中培养的AML-12细胞拥有更强的抗凋亡能力。Seahorse细胞代谢分析显示ESC-M培养能加强AML-12细胞糖酵解潜力、最大氧化呼吸能力以及氧化呼吸潜力。结论:胚胎干细胞分泌因子能够增强AML-12细胞在恶劣培养条件下的抗凋亡能力。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 细胞生存 肝细胞 代谢 aml-12细胞

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荷叶碱对小鼠肝AML-12细胞内脂质代谢的影响 被引量：8

7

作者 徐豪 王雪竹 +5 位作者 俞卓利 高靖汝 郭瑞 李娇妹 李松涛 韩强 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第11期18-24,共7页

该研究通过高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定荷叶中荷叶碱含量,对比分析25种荷叶中荷叶碱含量差异,并利用油酸诱导建立AML-12细胞脂质蓄积模型,研究荷叶碱对脂质代谢的影响。通过测定甘油三酯(Triglyce... 该研究通过高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)测定荷叶中荷叶碱含量,对比分析25种荷叶中荷叶碱含量差异,并利用油酸诱导建立AML-12细胞脂质蓄积模型,研究荷叶碱对脂质代谢的影响。通过测定甘油三酯(Triglyceride,TG)含量和油红O染色情况,评估细胞脂滴蓄积情况;检测细胞内AMP依赖的蛋白激酶(Adenosine 5‘-Monophosphate-Activated Protein Kinase,AMPK)通路相关蛋白表达水平,探究荷叶碱影响脂质代谢的作用机制。经HPLC检测,发现荷叶品种间荷叶碱含量差异显著,其中佛座莲的荷叶碱质量分数最高,达0.68 mg/g,而金凤的荷叶碱质量分数最低,仅为0.22 mg/g。在脂质代谢研究中,与对照组相比,模型组在建模后脂滴数量显著增加,TG含量提升(P<0.01),P-AMPK和脂肪甘油三酯脂肪酶(Adipose Triglyceride Lipase,ATGL)在蛋白水平上表达显著降低(P<0.05);在荷叶碱的干预下,AML-12细胞的脂滴蓄积程度明显降低,TG含量显著减少(P<0.05),P-AMPK和ATGL的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。由此表明:不同荷叶品种间荷叶碱含量存在明显差异,荷叶碱可能是通过调控AMPK/ATGL途径调节AML-12细胞内脂质代谢。该结果可为荷叶的开发利用提供理论支持。 展开更多

关键词 荷叶碱 aml-12细胞 脂代谢 高脂血症

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IL-12、IL-15对急性髓系白血病患者骨髓来源CD34+白血病细胞转化为NK细胞作用研究 被引量：12

8

作者 李焱 叶敬伟 郭晓玲 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期32-37,共6页

目的应用细胞因子组合体外诱导CD34+白血病细胞转化为自然杀伤(NK)细胞,探讨白介素(IL)-12、IL-15对NK细胞分化增殖、细胞活性、细胞毒作用以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达的作用。方法提取26例2016年8月至2017年11月初治高白... 目的应用细胞因子组合体外诱导CD34+白血病细胞转化为自然杀伤(NK)细胞,探讨白介素(IL)-12、IL-15对NK细胞分化增殖、细胞活性、细胞毒作用以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达的作用。方法提取26例2016年8月至2017年11月初治高白细胞血症急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞(BM-MNC),应用A组(SCF、IL-7、IL-12、IL-15)、B组(SCF、IL-7、IL-2、IL-15)两组细胞因子组合分别体外诱导分化5周,流式细胞术检测NK细胞比例及活化标志,实时定量PCR(QPCR)检测两组NK细胞Granzyme B、TNF-α、IFN-γ等基因的表达水平; CCK-8法分别检测两组NK细胞对患者来源白血病细胞和K562细胞的杀伤率。结果 A组NK细胞比例为(71. 22±2. 25)%,显著高于B组的(56. 32±3. 97)%(P <0. 05)。A组细胞增殖倍数与B组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。A组NK细胞活化标志CD69+、NKp46+、NKG2D+NK细胞比例分别为(70. 72±3. 62)%、(70. 30±3. 45)%、(72. 75±3. 89)%,均显著高于B组的(59. 98±2. 86)%、(60. 38±2. 84)%和(62. 30±4. 25)%(P <0. 05)。Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因的表达水平较诱导前患者BM-MNC显著升高,A组上述基因表达水平分别为13. 36±1. 54、9. 38±0. 51和6. 26±0. 25,均显著高于B组的9. 82±1. 21、7. 06±0. 52和4. 28±0. 23(P <0. 05)。在效靶比为10∶1时,A组NK细胞对K562细胞和患者来源白血病细胞的杀伤率分别为(62. 20±2. 36)%和(70. 78±2. 54)%,均显著高于B组的(56. 77±3. 81)%和(62. 95±1. 94)%(P <0. 05);且相同效靶比时A、B两组NK细胞对患者来源白血病细胞的杀伤率显著高于K562细胞(P <0. 05)。结论 CD34+白血病细胞可在体外诱导分化为NK细胞,且具有杀伤活性。联合应用IL-12、1L-15细胞因子组合能够诱导分化的NK细胞活性,提高对白血病细胞的杀伤率以及Granzyme B、TNF-α和IFN-γ基因表达水平,且诱导分化的NK细胞对白血病细胞的杀伤具有同体特异性。 展开更多

关键词 急性髓细胞白血病(AML) 白介素-12(IL-12) 白介素-15(IL-15) CD34^+细胞 自然杀伤(NK)细胞

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急性髓细胞性白血病患者治疗前后LDH和IL-2及IL-12的水平变化 被引量：1

9

作者 庞伟君 张宇明 《中国热带医学》 CAS 2006年第2期287-288,共2页

目的观察急性髓细胞性白血病(AML)患者化疗前后血中LDH、IL-2与IL-12的水平变化,探讨各指标的临床意义。方法初次治疗的白血病患者共36例,经DA方案化疗两个疗程后有不同程度缓解26例,测定治疗前后血中LDH、IL-2与IL-12水平,并与对照组... 目的观察急性髓细胞性白血病(AML)患者化疗前后血中LDH、IL-2与IL-12的水平变化,探讨各指标的临床意义。方法初次治疗的白血病患者共36例,经DA方案化疗两个疗程后有不同程度缓解26例,测定治疗前后血中LDH、IL-2与IL-12水平,并与对照组相比较。未缓解10例只比较治疗前后的LDH结果。结果缓解组26例,其中LDH治疗前为454.3±113.6,显著高于对照组96.7±28.6,治疗后LDH为211.5±57.6显著降低;IL-2治疗前为13.8±11.4,显著低于对照组33.6±8.4,治疗后IL-2为35.4±15.3显著升高;IL-12治疗前为19.3±6.5,显著低于对照组31.3±13.8,治疗后为40.2±17.3显著升高。未缓解10例治疗前LDH为653.2±326.4,治疗后为512.3±286.7,差异无显著性。结论白血病患者化疗后骨髓示缓解者其LDH较化疗前显著降低,IL-2与IL-12均较化疗前显著升高。 展开更多

关键词 AML 乳酸脱氢酶 白细胞介素-2 白细胞介素-12

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银杏叶提取物对二甲苯诱导肝损伤的影响

10

作者 米红梅 张娜 王明慧 《中国药业》 2025年第6期40-45,共6页

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对二甲苯(XY)诱导肝损伤的影响及其作用机制。方法动物实验取雄性KM小鼠,随机分为对照组[等体积生理盐水(NS)]、模型组(等体积NS)、GBE组(50μg/mL),采用吸入法复制二甲苯中毒急性肝损伤小鼠模型,建模成功后... 目的探讨银杏叶提取物(GBE)对二甲苯(XY)诱导肝损伤的影响及其作用机制。方法动物实验取雄性KM小鼠,随机分为对照组[等体积生理盐水(NS)]、模型组(等体积NS)、GBE组(50μg/mL),采用吸入法复制二甲苯中毒急性肝损伤小鼠模型,建模成功后腹腔注射给药或NS,每天1次,连续8周。细胞试验取AML 12细胞,设sh-NC+NS组(等体积NS)、sh-NC+GBE组(50μg/mL)、sh-KLF2+NS组(等体积NS)、sh-KLF2+GBE组(50μg/mL)。苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肝脏组织病理形态。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及白细胞介素6(IL-6)水平;流式细胞术检测活性氧(ROS)水平;Western blot法检测内皮型一氧化氮合酶/可溶性鸟苷酸环化酶(eNOS/sGC)通路相关蛋白;荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测Kruppel样转录因子2(KLF2)的表达水平。结果与模型组比较,GBE组小鼠肝组织中炎性细胞浸润以及细胞损伤情况减少;GBE组小鼠肝组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS水平均显著降低(P<0.05),丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙二醛(MDA)水平显著降低,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)及KLF2 mRNA水平显著升高(P<0.05)。与sh-NC+NS组比较,sh-NC+GBE组细胞中KLF2 mRNA水平显著升高,ROS水平显著降低;sh-KLF2+NS组细胞中KLF2 mRNA水平显著降低,IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与sh-KLF2+NS组比较,sh-KLF2+GBE组细胞中KLF2 mRNA水平显著升高,IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平显著降低(P<0.05)。结论GBE可用于改善二甲苯诱导的急性肝损伤,其机制可能为通过调节KLF2/eNOS/sGC信号轴抑制肝组织中氧化应激因子及炎性因子的表达。 展开更多

关键词 银杏叶提取物 急性肝损伤 二甲苯 KLF2/eNOS/sGC信号通路 作用机制 小鼠 AML 12细胞

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AML患者治疗前后LDH、IL-2、IL-12水平的变化及临床意义

11

作者 庞伟君 张宇明 《实用医技杂志》 2005年第11A期3044-3045,共2页

目的:观察急性髓细胞性白血病(AML)患者化疗前后血中LDHI、L-2与IL-12的水平变化,探讨各指标的临床意义。方法:初次治疗的白血病患者共36例,经DA方案化疗两个疗程后有不同程度缓解26例,测定治疗前后血中LDHI、L-2与IL-12水平,并与对照... 目的:观察急性髓细胞性白血病(AML)患者化疗前后血中LDHI、L-2与IL-12的水平变化,探讨各指标的临床意义。方法:初次治疗的白血病患者共36例,经DA方案化疗两个疗程后有不同程度缓解26例,测定治疗前后血中LDHI、L-2与IL-12水平,并与对照组相比较。未缓解10例只比较治疗前后的LDH结果。结果:缓解组26例,其中LDH治疗前为(454.3±113.6)U/L,显著高于对照组(96.7±28.6)U/L,治疗后LDH为(211.5±57.6)U/L显著降低;IL-2治疗前为(13.8±11.4)U/L,显著低于对照组(33.6±8.4)pg/ml,治疗后IL-2为(35.4±15.3)U/L显著升高;IL-12治疗前为(19.3±6.5)ng/ml,显著低于对照组(31.3±13.8)U/L,治疗后为(40.2±17.3)ng/ml显著升高。未缓解10例治疗前LDH为(653.2±326.4)U/L,治疗后为(512.3±286.7)U/L,差异无显著性。结论:白血病患者化疗后骨髓示缓解者其LDH较化疗前显著降低,IL-2与IL-1均较化疗前显著升高。 展开更多

关键词 AML 乳酸脱氢酶 白细胞介素-2 白细胞介素-12

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苦丁冬青苷D抑制肝细胞脂质沉积作用及机制

12

作者 薛彩彩 厉彦翔 +2 位作者 乔秀梅 彭金咏 王金红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1688-1694,共7页

目的探讨苦丁冬青苷D(kudinoside D,KD-D)对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导肝细胞脂质沉积的影响。方法体外培养AML-12细胞,随机分为Control组、PA组、PA+KD-D 20μmol·L^(-1)组、PA+KD-D 40μmol·L^(-1)组和PA+KD-D 80μmol&#... 目的探讨苦丁冬青苷D(kudinoside D,KD-D)对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导肝细胞脂质沉积的影响。方法体外培养AML-12细胞,随机分为Control组、PA组、PA+KD-D 20μmol·L^(-1)组、PA+KD-D 40μmol·L^(-1)组和PA+KD-D 80μmol·L^(-1)组。除Control组外,其他各组细胞加入PA(0.4 mmol·L^(-1))孵育24 h,KD-D在PA加入前1 h给予。MTT法检测细胞存活率;油红O染色和透射电子显微镜检测肝细胞脂质沉积;DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧族;MitoSOX线粒体超氧化物红色荧光探针检测细胞线粒体超氧化物。结果不同浓度KD-D明显改善PA诱导的肝细胞形态学改变。与Control组比较,PA组细胞内红色脂滴明显增加;与PA组比较,KD-D不同浓度干预的细胞内红色脂滴减少。透射电子显微镜结果提示,KD-D减少PA诱导的肝细胞脂肪变性并改善超微结构。此外,KD-D明显降低PA诱导的细胞活性氧水平(P<0.01),降低细胞线粒体超氧化物含量(P<0.01)。结论KD-D可抑制PA诱导的肝细胞脂质沉积,其机制可能与调控氧化应激反应有关。 展开更多

关键词 苦丁冬青苷D aml-12细胞 棕榈酸 脂质沉积 氧化应激 非酒精性脂肪性肝病

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5种食用菌水提物生物活性的比较 被引量：6

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作者 韩明月 李俐 +7 位作者 郝利民 王小龙 江庆伍 李雪 刘可可 刘永奇 伊娟娟 鲁吉珂 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第3期146-154,共9页

目的:探究并对比草菇、灰树花、红菇、鸡腿菇、树舌5种食用菌水提物的抗氧化、免疫及辐射防护作用,为食用菌的开发利用提供理论依据。方法:采用苯酚硫酸法、考马斯亮蓝法、福林-酚法及氯化铝法分别检测5种食用菌水提物中总糖和粗多糖、... 目的:探究并对比草菇、灰树花、红菇、鸡腿菇、树舌5种食用菌水提物的抗氧化、免疫及辐射防护作用,为食用菌的开发利用提供理论依据。方法:采用苯酚硫酸法、考马斯亮蓝法、福林-酚法及氯化铝法分别检测5种食用菌水提物中总糖和粗多糖、总蛋白、总酚、总黄酮的质量分数;以2,2’-联氨-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)二胺盐(2,2’-azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)阳离子自由基清除能力、2,2-联苯基-1-苦基肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、羟自由基清除能力、总还原力4种抗氧化活性指标研究食用菌水提物的体外抗氧化能力;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测食用菌水提物对巨噬细胞RAW264.7的促增殖活性;并以60Coγ辐射氧化损伤小鼠肝细胞AML-12为模型,探究5种食用菌水提物的体外辐射防护作用。结果:草菇、灰树花、红菇、鸡腿菇、树舌5种食用菌水提物的主要成分中总糖含量占比最高,相应的总糖质量分数分别为(80.90±1.20)%、(67.00±2.48)%、(55.31±0.55)%、(84.87±7.31)%和(58.19±1.50)%。粗多糖质量分数结果显示,灰树花提取物粗多糖含量最高,其粗多糖质量分数为(61.28±2.95)%。5种食用菌水提物均具有良好的抗氧化能力,其中树舌水提物的抗氧化活性最佳。此外,不同质量浓度(10~200μg/mL)的5种食用菌水提物均能一定程度促进巨噬细胞RAW264.7的增殖,相比之下,低质量浓度树舌水提物对巨噬细胞的增殖促进作用更显著。体外辐射防护作用结果表明,在实验质量浓度范围内(10~200μg/mL),草菇水提物对60Coγ辐射所致的AML-12细胞存活率下降具有明显的改善作用,而树舌水提物在低质量浓度时也同样具有显著的辐射防护作用。结论:5种食用菌水提物具有不同的生物活性,综合比较树舌水提物的抗氧化活性、免疫调节作用和抗辐射功能均较好,值得进一步深入研究。 展开更多

关键词 食用菌水提物 抗氧化活性 巨噬细胞RAW264.7 免疫调节 肝细胞aml-12 抗辐射活性

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