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ALOX15B-JNK在热应激诱导支持细胞氧化应激和凋亡中的作用 被引量：4
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作者 薛鸿雁 杨孟雨 +4 位作者 杨欢 董丽君 蔡霞清 赵泽民 王鲜忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5056-5065,共10页
旨在研究花生四烯酸脂氧合酶15B(arachidonate lipoxygenase type B,ALOX15B)是否参与了热应激条件下丙二醛(malondialdehyde,MDA)与活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成,进而调控睾丸支持细胞凋亡,以及JNK信号通路(jun amino te... 旨在研究花生四烯酸脂氧合酶15B(arachidonate lipoxygenase type B,ALOX15B)是否参与了热应激条件下丙二醛(malondialdehyde,MDA)与活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成,进而调控睾丸支持细胞凋亡,以及JNK信号通路(jun amino terminal kinase,JNK)是否在这一过程中发挥了作用。本研究从20只3周龄的三元杂交仔猪的睾丸组织中分离出支持细胞,随机分为3组,每组3个重复,将体外培养的仔猪睾丸支持细胞在44℃条件下处理30 min作为热应激模型,分别转染ALOX15B的siRNA、添加ALOX15B抑制剂(黄芩素)或JNK抑制剂后,运用流式细胞术检测细胞的凋亡率,使用Western blotting检测磷酸化JNK、ALOX15B和p53的蛋白表达,利用ELISA检测8-HETE与15-HETE的含量,采用试剂盒检测MDA和ROS的水平。结果显示,与单独的热应激组相比,黄芩素和热应激联合处理减少了8-HETE和15-HETE的含量(P<0.01),降低了MDA和ROS的水平(P<0.01),抑制了热应激诱导的细胞凋亡率(P<0.01);在热应激条件下,黄芩素和ALOX15B的siRNA均抑制了热应激诱导的JNK的磷酸化(P<0.01);JNK抑制剂SP600125可抑制热应激条件下p53的表达水平(P<0.01),降低细胞凋亡率(P<0.01)。与单独的热应激组相比,SP600125和热应激联合处理反馈抑制了ALOX15B的表达(P<0.01),减少了脂质过氧化物8-HETE(P<0.01)与15-HETE的含量(P<0.05),降低了MDA和ROS的水平(P<0.01)。这表明,在热应激条件下,ALOX15B使MDA和ROS的水平升高,诱导了支持细胞凋亡,JNK通过激活p53参与了ALOX15B调节的支持细胞凋亡;JNK可反馈调节ALOX15B、8-HETE、15-HETE、MDA和ROS的水平。 展开更多
关键词 热应激 睾丸支持细胞 JNK 细胞凋亡 alox15b
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