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人源Alg1蛋白的原核表达及其跨膜结构域性质分析 被引量:1
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作者 魏东芝 陈征辉 +2 位作者 王春迪 高晓冬 王宁 《生物工程学报》 北大核心 2025年第4期1535-1546,共12页
作为最普遍的蛋白质糖基化修饰方式,N-糖基化起始于内质网中多萜醇寡糖(dolichol-linked oligosaccharide,DLO)前体的合成。甘露糖基转移酶Alg1催化添加DLO结构中的第1个甘露糖,是该生化途径中的关键酶。人体中ALG1基因的缺陷会导致先... 作为最普遍的蛋白质糖基化修饰方式,N-糖基化起始于内质网中多萜醇寡糖(dolichol-linked oligosaccharide,DLO)前体的合成。甘露糖基转移酶Alg1催化添加DLO结构中的第1个甘露糖,是该生化途径中的关键酶。人体中ALG1基因的缺陷会导致先天性糖基化疾病(congenital disorders of glycosylation,CDG)。为了建立人源Alg1(Homo sapiens Alg1,Hs Alg1)的体外表达和活性检测体系,本研究构建了全长的pET28a-His6-Hs Alg1和截除跨膜结构域(transmembrane domain,TMD)的pET28a-His6-Hs Alg123-464这2种质粒并在大肠杆菌中表达,以多萜醇磷酸壳二糖(dolichyl-pyrophosphateGlcNAc2,DPGn2)为反应底物,采用液质联用的方法检测Hs Alg1和Hs Alg123-464重组蛋白的活性。结果显示,Hs Alg1具有转糖基活性,蛋白纯化后活性降低,重新加入膜组分后得到部分回补,而Hs Alg123-464不能催化转糖基反应。上述结果表明Hs Alg1蛋白的N端TMD在催化反应中起到了重要的作用。本研究为后续表达并检测ALG1-CDG相关突变蛋白的活性奠定了基础。 展开更多
关键词 N-糖基化 甘露糖基转移酶alg1 膜蛋白 多萜醇寡糖
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ALG1基因相关先天性糖基化障碍伴婴儿痉挛症2例报告及文献复习
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作者 王秋红 邹丽萍 +2 位作者 王杨阳 沈雁文 石秀玉 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期525-530,共6页
目的探讨ALG 1基因相关先天性糖基化障碍(ALG1-CDG)的临床及遗传特征。方法回顾分析2例ALG1-CDG患儿的临床资料,并复习相关文献。结果来自同一家系的兄妹,均于出生后即有精神运动发育落后,且均在早期出现痉挛性发作,伴小头畸形、肌张力... 目的探讨ALG 1基因相关先天性糖基化障碍(ALG1-CDG)的临床及遗传特征。方法回顾分析2例ALG1-CDG患儿的临床资料,并复习相关文献。结果来自同一家系的兄妹,均于出生后即有精神运动发育落后,且均在早期出现痉挛性发作,伴小头畸形、肌张力低下、乳头内陷、眼部异常、血小板减少等;脑电图呈高峰失律。基因检测提示2例患儿均存在ALG1基因复合杂合变异,c.1129 A>C(p.Met 377 Leu)、c.1263+3A>T,两个位点分别遗传自父母。检索到国内外文献报道的ALG1-CDG患儿68例,其中国内报道2例。ALG1-CDG患儿主要表现为癫痫、精神运动发育落后、肌张力低下及小头畸形等神经系统异常,同时可存在其他多系统疾病。结论ALG1-CDG可表现为婴儿痉挛症,基因检测有助于诊断及遗传咨询。本研究拓展了ALG1表型谱及基因谱。 展开更多
关键词 alg1基因 先天性糖基化障碍 婴儿痉挛症 发育落后
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Nascent Proteome and Glycoproteome Reveal the Inhibition Role of ALG1 in Hepatocellular Carcinoma Cell Migration 被引量:4
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作者 Xinyi Cao Yuyin Shao +8 位作者 Peiyi Meng Zhao Cao Guoquan Yan Jun Yao Xinwen Zhou Chao Liu Lei Zhang Hong Shu Haojie Lu 《Phenomics》 2022年第4期230-241,共12页
Asparagine-linked glycosylation protein 1 homolog(ALG1)participates in the initial stage of protein N-glycosylation and N-glycosylation has been implicated in the process of hepatocellular carcinoma(HCC)progression.Ho... Asparagine-linked glycosylation protein 1 homolog(ALG1)participates in the initial stage of protein N-glycosylation and N-glycosylation has been implicated in the process of hepatocellular carcinoma(HCC)progression.However,whether ALG1 plays a role in human HCC remains unknown.In this study,the expression profile of ALG1 in tumorous and corresponding adjacent non-tumor tissues was analyzed.The relationship of ALG1 expression with clinical features and prognosis of HCC patients was also evaluated using immuno-histochemical method.Here we found ALG1 decreased in HCC tissues compared with adjacent normal liver tissues,which predicted an unfavorable prognosis.Combined with RNA interference,nascent proteome and glycoproteome were determined systematically in Huh7 cell line.Bioinformatics analysis indicated that the differentially expressed proteins participating in the response of ALG1 knockdown were most significantly associated with cell-cell adhesion.Functional studies confirmed that knockdown of ALG1 reduced cell adhesion capacity,and promoted cell migration.Furthermore,down-regulation of H8N2(on N-glycosite N651)and H5N4S2F1(on N-glycosite N692)from N-cadherin was identified as a feature of ALG1 knockdown.Our findings revealed that ALG1 controlled the expression of glycosylated N-cadherin and played a role in HCC migration,with implications for prognosis. 展开更多
关键词 Nascent proteome alg1 GLYCOSYLATION N-CADHERIN Hepatocellular carcinoma
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酵母LAG1同源的人类长寿保障新基因LASS2的克隆和功能研究 被引量:9
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作者 潘辉 覃文新 +5 位作者 霍克克 万大方 周筱梅 张萍萍 李育阳 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期90-95,共6页
目的 分离和克隆肝癌相关基因。方法 我们用高通量功能筛选和RACE(rapidamplificationofcDNAends)方法从人肝cDNA文库中克隆到一个与酵母长寿保障基因LAG1高度同源的人类新基因LASS2 (homosapienslongevityassurancehomologue 2ofyeas... 目的 分离和克隆肝癌相关基因。方法 我们用高通量功能筛选和RACE(rapidamplificationofcDNAends)方法从人肝cDNA文库中克隆到一个与酵母长寿保障基因LAG1高度同源的人类新基因LASS2 (homosapienslongevityassurancehomologue 2ofyeastLAG1)。结果 LASS2在正常人肝组织和肾组织中高表达 ,其表达谱不同于早先在人中克隆到的另一个与酵母LAG1高度同源的人类长寿保障基因LAG1Hs- 1。放射杂交基因定位显示LASS2位于人类染色体 1q11,酵母双杂交和GST结合实验发现LASS2蛋白能与细胞中的几个膜相关受体或转运体相互作用 ;另外 ,LASS2在体外对人肝癌细胞的克隆形成具有抑制作用 ,提示该基因可能参与细胞的生长调控。结论 LASS2是一个新的肝癌相关基因。 展开更多
关键词 alg1同源基因 染色体定位 酵母双杂交 肝细胞肝癌 克隆形成实验 GST结合实验 肝癌
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先天性糖基化障碍Ⅰk型一例 被引量:2
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作者 郭金 张娟 常艳美 《中华新生儿科杂志(中英文)》 CAS 2019年第2期140-141,共2页
先天性糖基化障碍是一种糖蛋白生物合成缺陷引起的多系统疾病。本文报告一例以新生儿水肿起病、经基因检测确诊的先天性糖基化障碍Ⅰk型患儿。该患儿生后即发现四肢水肿,伴惊厥,同时有喂养困难、凝血功能障碍、电解质紊乱、多脏器损害... 先天性糖基化障碍是一种糖蛋白生物合成缺陷引起的多系统疾病。本文报告一例以新生儿水肿起病、经基因检测确诊的先天性糖基化障碍Ⅰk型患儿。该患儿生后即发现四肢水肿,伴惊厥,同时有喂养困难、凝血功能障碍、电解质紊乱、多脏器损害及特殊面容等表现,基因检测发现患儿ALG1基因外显子区域c.1076C>T纯合突变,其父母该位点均为杂合突变。当新生儿水肿用常见病因不能解释时,需注意完善遗传代谢病相关基因检测,早期明确诊断。 展开更多
关键词 先天性糖基化障碍 水肿 alg1基因
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先天性糖基化异常Ik型的诊断学特征并文献复习 被引量:1
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作者 王亚萍 李荣培 +1 位作者 葛昂 满宜刚 《中华诊断学电子杂志》 2019年第4期249-253,共5页
目的探讨先天性糖基化异常(CDG)-Ik型的诊断学特征。方法回顾性分析济宁市第一人民医院儿科于2018年6月7日收治的1例诊断为CDG-Ik型患儿的临床资料,分析其临床表现及基因检测结果并复习相关文献。结果男性患儿1岁,间断抽搐,双眼内斜,追... 目的探讨先天性糖基化异常(CDG)-Ik型的诊断学特征。方法回顾性分析济宁市第一人民医院儿科于2018年6月7日收治的1例诊断为CDG-Ik型患儿的临床资料,分析其临床表现及基因检测结果并复习相关文献。结果男性患儿1岁,间断抽搐,双眼内斜,追视追听反应差,耳位偏低,双手无抓物意识,竖头不稳,运动发育落后,肌张力逐渐降低,膝腱反射减弱。检查发现肝功能异常,心肌损害,发育商低下。头颅磁共振成像(MRI)检查提示脑液腔隙较宽。基因测序全外显子检测,ALG1基因存在1处纯合突变:c.1312C>T(p.R438W),为错义突变,确诊为CDG-Ik型。经家系验证分析,受检人的父母该位点均为杂合变异,该位点为疑似致病性变异。结论CDG-Ik型为常染色体隐性遗传病,对于不明原因的多脏器损害,特别是合并智能运动发育落后、斜视、小脑萎缩的患儿应考虑本病的可能,ALG1基因检测有助诊断。 展开更多
关键词 先天性糖基化障碍 alg1基因 突变 遗传代谢病
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Fe掺杂对磁性拓扑材料MnAlGe中反常霍尔效应的调控 被引量:1
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作者 申建雷 梁婷婷 +3 位作者 王婧 张伸 刘恩克 许小红 《中国科学:物理学、力学、天文学》 CSCD 北大核心 2022年第6期109-116,共8页
本文采用缓慢冷却方法制备了磁性拓扑材料Mn_(1-x)Fe_(x)Al Ge系列单晶样品,并系统研究了Fe掺杂对体系的结构、磁性以及反常霍尔效应的影响.随着Fe含量的增加,体系的晶胞收缩,磁性逐渐降低.在Mn Al Ge中观测到高达~800Ω^(-1)cm^(-1)的... 本文采用缓慢冷却方法制备了磁性拓扑材料Mn_(1-x)Fe_(x)Al Ge系列单晶样品,并系统研究了Fe掺杂对体系的结构、磁性以及反常霍尔效应的影响.随着Fe含量的增加,体系的晶胞收缩,磁性逐渐降低.在Mn Al Ge中观测到高达~800Ω^(-1)cm^(-1)的反常霍尔电导率(AHC),并且随着Fe含量增加,体系的AHC逐渐降低.采用对数和TYJ模型对体系AHC的内外禀贡献进行定性和定量分离,其结果显示所有样品中内外禀机制对总的AHC贡献相当,并且两者均随着Fe含量的增加而降低. 展开更多
关键词 Mn_(1-x)Fe_(x)AlGe 反常霍尔效应 内禀机制 外禀机制
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