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人ALEX2部分cDNA序列的克隆与表达 被引量:3
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作者 张勇 师建国 +2 位作者 闫庆国 王丽 郭爱林 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第3期197-200,共4页
目的 :克隆人ALEX2基因部分片段的cDNA ,构建重组表达载体并诱导其表达 .方法 :通过RT PCR技术从人胚胎脑组织中特异扩增出ALEX2基因部分编码序列片断 (6 30~1 0 5 8位核苷酸 ) ,克隆入pGEM Teasy载体中 ,测序后亚克隆于表达载体pGEX 4... 目的 :克隆人ALEX2基因部分片段的cDNA ,构建重组表达载体并诱导其表达 .方法 :通过RT PCR技术从人胚胎脑组织中特异扩增出ALEX2基因部分编码序列片断 (6 30~1 0 5 8位核苷酸 ) ,克隆入pGEM Teasy载体中 ,测序后亚克隆于表达载体pGEX 4T 3中 ,酶切鉴定正确 ,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导 4h后 ,可表达Mr 4 1 70 0 0的目的蛋白 .结果 :特异扩增出大小约 4 4 0bp的片断 ,经测序与已知序列完全一致 ,构建了融合蛋白的重组表达质粒PGEX ALEX2 ,表达的融合蛋白产物经凝胶薄层扫描检测 ,占菌体总蛋白量的 1 5 .5 % .结论 :获得了人ALEX2部分基因编码片断及其原核表达产物 ,为下一步ALEX2mAb的制备和研究其生物学功能奠定了基础 . 展开更多
关键词 alex2 克隆 原核表达
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