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结直肠癌组织中PIK3CA基因突变与AKT1/2蛋白的表达及其意义 被引量:10
1
作者 蒋健坤 莫维光 《广西医学》 CAS 2010年第1期24-27,共4页
目的探讨结直肠癌患者PIK3CA基因第9、20外显子点突变率及其与AKT1/2蛋白表达的关系。方法用免疫组织化学EnVision法和SSCP-PCR(单链构象多态性聚合酶链反应)分别检测42例结直肠癌组织AKT1/2蛋白表达情况和PIK3CA基因第9、20外显子突变... 目的探讨结直肠癌患者PIK3CA基因第9、20外显子点突变率及其与AKT1/2蛋白表达的关系。方法用免疫组织化学EnVision法和SSCP-PCR(单链构象多态性聚合酶链反应)分别检测42例结直肠癌组织AKT1/2蛋白表达情况和PIK3CA基因第9、20外显子突变情况,并与20例健康体检者正常大肠黏膜作对照。结果AKT1/2蛋白在PIK3CA基因突变组中比无突变对照组有更高表达(P<0.05);AKT1/2蛋白在结直肠癌组织中表达显著高于正常结直肠黏膜(P<0.05);AKT1/2蛋白表达与有无淋巴结转移、癌组织浸润程度、临床分期有关(P<0.05);14.3%(6/42)的结直肠癌存在PIK3CA基因突变;PIK3CA基因在结直肠癌组织中突变率明显高于癌旁正常黏膜(P<0.05)。PIK3CA基因突变与AKT1/2蛋白阳性表达低度相关。结论PIK3CA基因在结直肠癌中存在高频率突变,该基因的突变导致AKT1/2蛋白表达上调,可能在结直肠癌进展过程中起重要作用。 展开更多
关键词 结肠癌 直肠癌 PIK3CA基因 akt1/2 SSCP-PCR 免疫组织化学
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IGFBP2通过AKT1/NF-κB通路调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的机制
2
作者 张虹 叶丽君 +1 位作者 廖南生 陈文晓 《健康研究》 2025年第1期74-78,F0003,共6页
目的研究IGFBP2通过AKT1/NF-κB通路调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的机制,为胰腺癌的诊断、靶向治疗和机制研究提供实验基础。方法收集64例胰腺癌患者和同期健康体检者100例,采用ELISA方法检测并比较2组血清中IGFBP2的表达水平;采用免疫组... 目的研究IGFBP2通过AKT1/NF-κB通路调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的机制,为胰腺癌的诊断、靶向治疗和机制研究提供实验基础。方法收集64例胰腺癌患者和同期健康体检者100例,采用ELISA方法检测并比较2组血清中IGFBP2的表达水平;采用免疫组织化学方法检测胰腺癌患者癌组织和癌旁组织中IGFBP2的表达,RT-qPCR检测胰腺癌细胞系中IGFBP2的表达。CCK8法和流式细胞术评估细胞增殖、凋亡情况,Western blot法检测IGFBP2对AKT1/NF-κB信号通路的影响。结果胰腺癌患者的血清IGFBP2表达水平高于健康体检者,差异有统计学意义(P<0.05);IGFBP2诊断胰腺癌的曲线下面积为0.772(95%CI:0.696~0.849)。免疫组织化学染色方法显示,IGFBP2在胰腺癌患者癌组织明显高表达;RT-qPCR结果显示,IGFBP2在胰腺癌细胞中的表达水平高于人正常胰腺导管细胞系HPNE中的表达水平,且在AsPC-1细胞株中表达最高;差异均有统计学意义(P<0.01)。CCK8法和流式细胞术结果显示,抑制IGFBP2表达可以抑制细胞活力并促进细胞凋亡;Western blot检测结果显示,IGFBP2基因沉默后p-AKT、p-IkBa、p-P65蛋白表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论IGFBP2靶向调控AKT1/NF-κB通路,促进胰腺癌细胞增殖并抑制凋亡。 展开更多
关键词 胰腺癌 胰岛素样生长因子结合蛋白2 akt1/NF-κB 增殖 凋亡
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扶正消岩颗粒通过调控AKT1/BAD/BCL-2通路改善乳腺癌化疗期癌因性疲乏
3
作者 孙心悦 王宽宇 +4 位作者 王钢 代清泉 陈静 孔祥定 栾佳 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第12期2646-2657,共12页
目的基于扶正祛邪理论探究扶正消岩颗粒对乳腺癌化疗期癌因性疲乏(CRF)的治疗效果及作用机制。方法将90例正虚毒瘀型乳腺癌CRF患者随机分为对照组(化疗及对症治疗)、研究组(加服扶正消岩颗粒),45例/组。比较两组Piper疲乏量表(PFS)、Kar... 目的基于扶正祛邪理论探究扶正消岩颗粒对乳腺癌化疗期癌因性疲乏(CRF)的治疗效果及作用机制。方法将90例正虚毒瘀型乳腺癌CRF患者随机分为对照组(化疗及对症治疗)、研究组(加服扶正消岩颗粒),45例/组。比较两组Piper疲乏量表(PFS)、Karnofsky功能状态(KPS)量表及中医证候评分。利用多数据库分析药物活性成分、靶点及疾病相关靶点,构建PPI网络并富集分析,通过分子对接和动力学模拟研究主要成分槲皮素与AKT1等核心靶点作用情况。构建乳腺癌CRF小鼠模型,设正常对照组、模型组和扶正消岩颗粒灌胃治疗组,检测不同组小鼠运动功能改变、腓肠肌组织凋亡相关蛋白AKT1、p-AKT1、BCL-2、BAD表达及血清IL-6、IL-1β水平。结果研究组治疗后PFS、KPS及中医证候评分结果均优于治疗前和对照组(P<0.05);筛选出57个药物与疾病交集靶标,确定5个关键靶点,发现主要成分槲皮素与AKT1等核心靶点强结合,并可能通过凋亡通路发挥作用;扶正消岩颗粒可改善小鼠运动能力,逆转腓肠肌凋亡蛋白表达异常,降低血清IL-6、IL-1β水平(P<0.05)。结论扶正消岩颗粒可缓解乳腺癌患者化疗期癌因性疲乏,改善中医证候和生活质量,改善疲乏模型小鼠体能,可能通过调控AKT1/BAD/BCL-2通路抑制骨骼肌凋亡,下调IL-6、IL-1β水平发挥作用。 展开更多
关键词 扶正消岩颗粒 乳腺癌 癌因性疲乏 网络药理学 akt1/BAD/BCL-2信号通路
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基于GEO数据库探讨翼状胬肉线粒体代谢基因AKT1与ATP5F1及BAG3表达与作用
4
作者 王诗逸 王婧 +1 位作者 王华 陈玉萍 《国际眼科杂志》 2026年第3期398-404,共7页
目的:探讨丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、ATP合酶F1亚基(ATP5F1)及Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)三者在翼状胬肉发生发展中的表达差异及作用机制。方法:通过GEO数据库获取翼状胬肉相关基因表达数据,筛选差异表达基因;利用String数据库构建蛋... 目的:探讨丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、ATP合酶F1亚基(ATP5F1)及Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)三者在翼状胬肉发生发展中的表达差异及作用机制。方法:通过GEO数据库获取翼状胬肉相关基因表达数据,筛选差异表达基因;利用String数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,结合Cytoscape软件筛选核心靶点;采用GO和KEGG通路富集分析线粒体代谢相关通路特征。收集翼状胬肉手术患者的胬肉头部、体部组织标本,HE染色观察两组组织病理形态差异,免疫组化法检测AKT1、ATP5F1、BAG3的蛋白表达水平。结果:GEO数据库分析共筛选出差异表达基因1264个,其中上调585个、下调679个。GO富集分析显示,生物学过程、细胞组分及分子功能层面均存在线粒体相关通路的显著富集;KEGG富集分析以氧化磷酸化、化学致癌-活性氧簇通路差异最为显著。收集翼状胬肉手术患者28例28眼的胬肉头部、体部组织标本,其中男7例7眼,女21例21眼,平均年龄69.32±8.98岁。HE染色结果显示,胬肉头部较体部上皮细胞异型增生更明显、基质纤维排列更紊乱,且炎症细胞浸润更显著。免疫组化结果证实,AKT1、ATP5F1、BAG3在胬肉头部的蛋白表达水平显著低于体部(均P<0.05)。结论:线粒体代谢相关基因AKT1、ATP5F1、BAG3在翼状胬肉中存在明显表达差异,且与病变组织的病理进展密切相关,其可能通过调控线粒体能量代谢参与翼状胬肉的发生发展,为该病的机制研究及靶向治疗提供新的实验依据与思路。 展开更多
关键词 翼状胬肉 GEO数据库 线粒体代谢 丝氨酸/苏氨酸激酶1(akt1) ATP合酶F1亚基(ATP5F1) Bcl-2相关抗凋亡基因3(BAG3)
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信号通路蛋白Akt1、ERK1/2与HIF-1α在肺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:17
5
作者 万军 车云 康宁宁 《实用癌症杂志》 2014年第12期1515-1517,1521,共4页
目的探讨信号通路蛋白Akt1、ERK1/2与HIF-1α在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法(Envision二步法),检测100例肺癌Akt1、ERK1/2和HIF-1α蛋白表达情况。结果 Akt1、ERK1/2及HIF-1α蛋白在肺癌组织中均呈不同程度表达... 目的探讨信号通路蛋白Akt1、ERK1/2与HIF-1α在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法(Envision二步法),检测100例肺癌Akt1、ERK1/2和HIF-1α蛋白表达情况。结果 Akt1、ERK1/2及HIF-1α蛋白在肺癌组织中均呈不同程度表达,其阳性表达率分别为63.00%、68.00%和52.00%;Akt1与HIF-1α表达具有明显相关性(γ=0.673,P=0.000),ERK1/2与HIF-1α表达亦具有明显相关性(γ=0.568,P=0.000);Akt1、ERK1/2和HIF-1α表达均与肺癌分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.01)。结论 Akt1、ERK1/2和HIF-1α在肺癌中均呈高水平表达,Akt1、ERK1/2与HIF-1α表达具有明显相关性,三者均与肺癌分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关,三者联合检测对肺癌诊断、治疗及预后具有重要意义。 展开更多
关键词 akt1 ERK1/2 HIF-1Α 肺癌
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老年大鼠阴茎海绵体中P-Erk1/2和P-Akt1激酶的表达 被引量:6
6
作者 毛俊彪 许陈祥 姜睿 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期693-697,共5页
目的:一氧化氮(NO)是阴茎勃起的关键因子,其生成主要由一氧化氮合酶(NOS)调节,而磷酸化Erk1/2(P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)均能调节一氧化氮合酶(NOS)的表达及活性从而影响阴茎勃起。本实验研究P-Erk1/2和P-Akt1激酶在老年大鼠阴茎... 目的:一氧化氮(NO)是阴茎勃起的关键因子,其生成主要由一氧化氮合酶(NOS)调节,而磷酸化Erk1/2(P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)均能调节一氧化氮合酶(NOS)的表达及活性从而影响阴茎勃起。本实验研究P-Erk1/2和P-Akt1激酶在老年大鼠阴茎海绵体中的表达,探讨其在老年大鼠勃起功能障碍(ED)发生中的可能作用。方法:A组(2月龄)和B组(18月龄)雄性SD大鼠各10只,测其血清睾酮(T),免疫组化和RT-PCR方法检测大鼠阴茎海绵体中P-Erk1/2和P-Akt1的表达水平。结果:血清T值在B组[(4.73±0.94)nmol/L]较A组[(9.57±1.57)nmol/L]显著下降(P<0.05)。P-Erk1、P-Erk2的mRNA和P-Erk1/2蛋白的相对表达量(积分光密度值IA)在B组(0.95±0.06、0.92±0.05、32.09±8.45)较A组(0.47±0.09、0.61±0.11、7.50±1.81)显著升高(P<0.05);P-Akt1的mRNA和P-Akt1蛋白的相对表达量在B组(0.94±0.05、10.93±3.06)与A组(0.97±0.04、11.67±5.61)无显著差异(P>0.05)。结论:P-Erk1/2的过表达可能是老年性ED发生的机制之一。 展开更多
关键词 ERK1/2 akt1 阴茎海绵体 勃起功能障碍
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氯化两面针碱调节AKT/ERK1/2磷酸化影响肺癌细胞生长、运动、微管形成以及免疫应答 被引量:3
7
作者 张建新 刘雨露 +2 位作者 朱子贵 赵红 姚平波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1177-1182,共6页
目的:研究氯化两面针碱(NC)对肺癌细胞生长、运动及炎症因子的影响,并阐明其可能机制。方法:以肺癌细胞系A549和NCI-H661为体外研究模型,CCK-8测定不同浓度NC对细胞活力的影响。选择0、3、6、12 nmol/L 4个浓度处理细胞,EdU染色测定细... 目的:研究氯化两面针碱(NC)对肺癌细胞生长、运动及炎症因子的影响,并阐明其可能机制。方法:以肺癌细胞系A549和NCI-H661为体外研究模型,CCK-8测定不同浓度NC对细胞活力的影响。选择0、3、6、12 nmol/L 4个浓度处理细胞,EdU染色测定细胞增殖,Transwell测定细胞侵袭,微管形成实验测定细胞微管形成能力,RT-PCR检测炎症因子iNOS、TNF-α、IL-4和IL-10 mRNA表达,ELISA检测iNOS、TNF-α、IL-4和IL-10含量,Western blot检测VEGF、N-cadherin和E-cadherin蛋白水平及AKT/ERK1/2通路磷酸化。加入AKT激活剂SC79(4μg/ml)进行验证实验。12周龄雄性BALB/c小鼠作为体外研究对象,检测NC对肿瘤的影响。结果:与对照组比较,当NC浓度>6 nmol/L时,可显著降低细胞活力,减少EdU阳性细胞数量、促进凋亡,抑制细胞侵袭,降低微管形成能力并提高细胞抗炎能力。与NC 0μg组相比,NC可抑制肿瘤生长。结论:NC可抑制肺癌细胞生长、运动,提高其抗炎能力,其机制可能与AKT/ERK1/2通路激活有关。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 肺癌细胞 EdU染色 抗炎 akt/ERK1/2通路
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AKT1基因沉默抑制Hep-2细胞体外侵袭能力的研究 被引量:2
8
作者 阎英 王宁 +1 位作者 张海波 徐莹 《中国实验诊断学》 2013年第11期1959-1963,共5页
目的研究AKT1基因沉默对人喉癌细胞系Hep-2体外侵袭能力的影响。方法利用阳离子脂质体将AKT1siRNA转染Hep-2细胞,RT-PCR和Western blot分析各组细胞AKT1,MMP-2mRNA和蛋白表达,划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell小室细胞测定细胞侵袭... 目的研究AKT1基因沉默对人喉癌细胞系Hep-2体外侵袭能力的影响。方法利用阳离子脂质体将AKT1siRNA转染Hep-2细胞,RT-PCR和Western blot分析各组细胞AKT1,MMP-2mRNA和蛋白表达,划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell小室细胞测定细胞侵袭能力。结果 AKT1siRNA可抑制AKT1mRNA转录和蛋白表达水平;AKT1基因沉默后细胞迁移运动能力明显减弱,穿模细胞数明显减少(P<0.01);MMP-2mRNA和蛋白表达下调。结论 AKT1siRNA可通过下调MMP-2表达抑制Hep-2细胞体外侵袭能力。 展开更多
关键词 akt1 喉癌 侵袭 基质金属蛋白酶-2
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Akt1在环氧合酶-2抑制剂抑制宫颈癌Hela细胞增殖中的作用 被引量:5
9
作者 刘小叶 周建斌 +1 位作者 李婷 黄余良 《中南医学科学杂志》 CAS 2014年第4期359-362,共4页
目的研究Akt1在环氧合酶2抑制剂NS398抑制宫颈癌Hela细胞增殖过程中的作用。方法以不同浓度的NS398或Akt1选择性激动剂IGF-1与NS398共同处理Hela细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制率,Western blotting免疫印迹技术分别检测Akt... 目的研究Akt1在环氧合酶2抑制剂NS398抑制宫颈癌Hela细胞增殖过程中的作用。方法以不同浓度的NS398或Akt1选择性激动剂IGF-1与NS398共同处理Hela细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长抑制率,Western blotting免疫印迹技术分别检测Akt1蛋白表达的变化。结果与对照组比较,不同浓度的NS398处理Hela细胞后,细胞生长抑制率(IR)增加(P<0.05);NS398呈浓度和时间依赖性下调Hela细胞Akt1蛋白质的表达(P<0.05);与单独用NS398组比较,Akt1激动剂与NS398共同处理细胞后,细胞IR值逐渐下降,并且其作用呈浓度依赖和时间依赖性(P<0.05)。结论 NS398呈剂量和时间依赖性抑制Hela细胞的增殖,其作用机制可能与下调Akt1蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 环氧合酶2抑制剂 宫颈癌 蛋白激酶B 细胞增殖
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术前新辅助化疗及肠内营养对胃癌患者Akt1、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响
10
作者 魏伦收 张娟娟 +2 位作者 康玉华 丁春生 索智敏 《当代医学》 2016年第26期1-2,共2页
目的探讨术前新辅助化疗(NAD)及肠内营养(EA)对胃癌患者胃癌组织内Akt1、Bcl-2、Bax蛋白影响。方法选取胃癌患者75例,随机分为对照组25例、NAD组25例和NAD+EA组25例,分别检测干预治疗前后胃癌组织中Akt1、Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结... 目的探讨术前新辅助化疗(NAD)及肠内营养(EA)对胃癌患者胃癌组织内Akt1、Bcl-2、Bax蛋白影响。方法选取胃癌患者75例,随机分为对照组25例、NAD组25例和NAD+EA组25例,分别检测干预治疗前后胃癌组织中Akt1、Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果 NAD组及NAD+EA组治疗后Akt1蛋白含量均较治疗前均显著降低(P<0.05),NAD组及NAD+EA组治疗后Akt1蛋白含量均较对照组显著降低(P<0.05)。NAD组及NAD+EA组治疗后Bcl-2蛋白含量均较治疗前均显著降低(P<0.05),Bax蛋白含量均较治疗前均显著升高(P<0.05),NAD组治疗后Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低(P<0.05),NAD+EA组治疗后Bcl-2蛋白含量较对照组显著降低(P<0.01),NAD组及NAD+EA组治疗后Bax蛋白含量均较对照组显著升高(P<0.05)。结论术前NAD结合EA能降低胃癌组织内Akt1、Bcl-2蛋白,提高Bax蛋白水平,可能通过改变蛋白含量抑制肿瘤进程。 展开更多
关键词 胃癌 新辅助化疗 akt1 BCL-2 BAX
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P-Erk1/2和P-Akt1在高血压大鼠阴茎海绵体中的表达
11
作者 毛俊彪 许陈祥 姜睿 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期24-28,共5页
目的:了解磷酸化Erk1/2(P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)在自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠阴茎海绵体中的表达及与勃起功能的关系。方法:健康成年雄性SPF级SHR与对照组WKY大鼠各8只,14周龄,体重250~300g。麻醉后颈动脉和海绵体内... 目的:了解磷酸化Erk1/2(P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)在自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠阴茎海绵体中的表达及与勃起功能的关系。方法:健康成年雄性SPF级SHR与对照组WKY大鼠各8只,14周龄,体重250~300g。麻醉后颈动脉和海绵体内插管连续监测平均动脉压(MAP)和海绵体内压(ICP),利用电刺激海绵体神经,记录ICP/MAP比值变化;免疫组织化学及RT-PCR技术检测P-Erk1/2和P-Akt1在大鼠阴茎海绵体的表达。结果:3V和5V电刺激海绵体神经后SHR组ICP/MAP比值(0.26±0.06、0.28±0.04)均较WKY组(0.46±0.12、0.76±0.13)显著降低(P均<0.05),P-Erk1、P-Erk2mRNA和P-Erk1/2蛋白的相对表达量在SHR组(0.81±0.05、0.91±0.06、54.22±10.05)较WKY组(0.42±0.04、0.68±0.14、7.05±1.45)显著升高(P均<0.05);P-Akt1mRNA和P-Akt1蛋白的相对表达量在SHR组(0.90±0.05、11.17±2.21)与WKY组(0.92±0.06、10.91±1.86)无显著差异(P均>0.05)。结论:高血压性勃起功能障碍的发生与阴茎海绵体P-Erk1/2的过度表达有关,而与P-Akt1的表达水平无明显相关。 展开更多
关键词 磷酸化P-Erk1/2 磷酸化P-akt1 阴茎海绵体 高血压 自发性 勃起功能 大鼠
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EGCG经AKT1-Mdm-2-p53途径抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖
12
作者 李维 罗瞳 罗招阳 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第15期2840-2843,共4页
目的:初步探讨EGCG对卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:通过绘制细胞生长曲线、平皿克隆和软琼脂集落形成实验观察EGCG对HO-8910细胞增殖的抑制作用;Western-blotting检测AKT1、Mdm-2与p53蛋白的表达。结果:(1)细胞生长... 目的:初步探讨EGCG对卵巢癌HO-8910细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:通过绘制细胞生长曲线、平皿克隆和软琼脂集落形成实验观察EGCG对HO-8910细胞增殖的抑制作用;Western-blotting检测AKT1、Mdm-2与p53蛋白的表达。结果:(1)细胞生长曲线、平皿克隆和软琼脂集落形成实验结果显示,EGCG可有效抑制HO-8910细胞的增殖(n=3,P<0.05)。(2)Westernblotting检测结果显示,EGCG处理后AKT1与Mdm-2蛋白表达均降低,而p53蛋白表达升高(P<0.05)。结论:EGCG通过抑制HO-8910细胞中AKT1与Mdm-2蛋白表达,促使p53蛋白表达而发挥其对细胞增殖的抑制作用。 展开更多
关键词 EGCG 卵巢癌 HO-8910细胞 akt1蛋白 Mdm-2蛋白 P53蛋白
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C5a激活Akt1-ERK1/2通路促进NSCLC细胞的增殖和迁移 被引量:2
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作者 何庆玲 赵晨卉 +5 位作者 王伟民 葛文 李雅 张婧 王迎伟 邱文 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1721-1727,共7页
目的:探讨C5a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及其潜在的分子机制。方法:RT-PCR和Western blot检测人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B和3种NSCLC细胞系(H1703、PC9、H1299)中C5a受体(C5aR)的表达;CC... 目的:探讨C5a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及其潜在的分子机制。方法:RT-PCR和Western blot检测人正常支气管上皮细胞系BEAS-2B和3种NSCLC细胞系(H1703、PC9、H1299)中C5a受体(C5aR)的表达;CCK-8和划痕实验检测C5a对PC9细胞增殖和迁移的影响;Western blot检查C5a刺激PC9细胞后蛋白激酶Akt1、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)和蛋白激酶C-α(protein kinase C-α,PKC-α)表达及磷酸化水平;用Akt1抑制剂Perifosine和ERK1/2抑制剂U0126分别处理PC9细胞后再给予C5a刺激,Western blot检测Akt1和ERK1/2的表达和磷酸化及其上下游调控关系,CCK-8和划痕实验检测Perifosine和U0126对细胞增殖和迁移的影响。结果:PC9细胞C5aR的表达水平显著高于其他细胞;C5a可明显促进PC9细胞的增殖和迁移能力;C5a刺激PC9细胞后,可显著增强Akt1和ERK1/2的磷酸化;Akt1和ERK1/2抑制剂均能明显降低C5a刺激PC9细胞后引起的细胞增殖和迁移,且Akt1抑制剂不仅能减弱Akt1的磷酸化,还能减弱ERK1/2的磷酸化,而ERK1/2抑制剂则仅能阻断其自身的磷酸化。结论:C5a刺激NSCLC细胞后可能通过激活Akt1-ERK1/2通路促进细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 C5A akt1 ERK1/2 增殖 迁移
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黄蜀葵花总黄酮介导AKT1信号通路拮抗HepG-2细胞脂质沉积研究 被引量:1
14
作者 杨渊 鲍家成 戴宗英 《中医药导报》 2024年第6期29-33,共5页
目的:探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对棕榈酸(PA)诱导HepG-2细胞脂质沉积模型的干预效应及机制。方法:体外培养人肝源HepG-2细胞,应用PA处理以构建细胞脂质沉积模型,然后从黄蜀葵花中提取TFA,以TFA或蛋白激酶B(AKT)抑制剂作为干预剂,对PA诱... 目的:探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对棕榈酸(PA)诱导HepG-2细胞脂质沉积模型的干预效应及机制。方法:体外培养人肝源HepG-2细胞,应用PA处理以构建细胞脂质沉积模型,然后从黄蜀葵花中提取TFA,以TFA或蛋白激酶B(AKT)抑制剂作为干预剂,对PA诱导的细胞脂质沉积模型进行预处理,应用油红O染色、酶联免疫吸附实验和免疫印迹实验(Western blotting)检测细胞脂质代谢、AKT1和脂联素(APN)信号通路蛋白表达水平。结果:与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预后,细胞脂质沉积程度(%)、游离脂肪酸(FFAs)和甘油三酯(TG)水平降低,而APN水平升高(P<0.05)。Western blotting实验显示PA模型组AKT1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)表达水平上调而APN和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)水平下调(P<0.05)。与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预显示AKT1下调而APN水平上调,其下游信号GSK3β表达上调而SREBP-1表达下调(P<0.05)。结论:TFA拮抗PA诱导的HepG-2细胞脂质沉积可能与其介导AKT1抑制及APN信号通路激活有关。 展开更多
关键词 黄蜀葵花总黄酮 akt1 APN 脂质沉积 拮抗效应 HEPG-2细胞
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Neuroprotective effects of ginsenoside Rb1 on hippocampal neuronal injury and neurite outgrowth 被引量:15
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作者 Juan Liu Jing He +3 位作者 Liang Huang Ling Dou Shuang Wu Qionglan Yuan 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第9期943-950,共8页
Ginsenoside Rb1 has been reported to exert anti-aging and anti-neurodegenerative effects. In the present study, we investigate whether ginsenoside Rb1 is involved in neurite outgrowth and neuroprotection against damag... Ginsenoside Rb1 has been reported to exert anti-aging and anti-neurodegenerative effects. In the present study, we investigate whether ginsenoside Rb1 is involved in neurite outgrowth and neuroprotection against damage induced by amyloid beta(25–35) in cultured hippocampal neurons, and explore the underlying mechanisms. Ginsenoside Rb1 significantly increased neurite outgrowth in hippocampal neurons, and increased the expression of phosphorylated-Akt and phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2. These effects were abrogated by API-2 and PD98059, inhibitors of the signaling proteins Akt and MEK. Additionally, cultured hippocampal neurons were exposed to amyloid beta(25–35) for 30 minutes; ginsenoside Rb1 prevented apoptosis induced by amyloid beta(25–35), and this effect was blocked by API-2 and PD98059. Furthermore, ginsenoside Rb1 significantly reversed the reduction in phosphorylated-Akt and phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2 levels induced by amyloid beta(25–35), and API-2 neutralized the effect of ginsenoside Rb1. The present results indicate that ginsenoside Rb1 enhances neurite outgrowth and protects against neurotoxicity induced by amyloid beta(25–35) via a mechanism involving Akt and extracellular signal-regulated kinase 1/2 signaling. 展开更多
关键词 nerve regeneration ginsenoside Rb1 hippocampal neurons neurite outgrowth apoptosis amyloid beta protein(25–35) growth-associated protein-43 Hoechst-33258 staining PD98059 API-2 akt and ERK1/2 signaling NSFC grant neural regeneration
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基于网络药理学的桑叶-红花治疗2型糖尿病作用机制探讨 被引量:3
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作者 周熠 那立欣 《上海中医药大学学报》 CAS 2022年第5期77-85,96,共10页
目的:基于网络药理学探讨桑叶-红花治疗2型糖尿病的作用机制。方法:基于中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)、治疗靶标数据库(TTD)等进行药物与疾病靶点收集,利用Cytoscape软件构建“有效成分-关键靶点-通路”网络图;基于DAVID 6.8数... 目的:基于网络药理学探讨桑叶-红花治疗2型糖尿病的作用机制。方法:基于中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)、治疗靶标数据库(TTD)等进行药物与疾病靶点收集,利用Cytoscape软件构建“有效成分-关键靶点-通路”网络图;基于DAVID 6.8数据库进行GO富集分析与KEGG分析,找出关键靶点及关键成分,并利用AutoDock Vina软件进行分子对接验证;进行细胞实验,验证关键化学成分干预HepG2胰岛素抵抗模型细胞的效果。结果:(1)网络拓扑分析结果表明,关键药物成分可能为黄芩苷、红厚壳内酯等,关键靶点可能为肿瘤坏死因子(TNF)、AKT丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)等。(2)KEGG分析发现桑叶-红花抗2型糖尿病主要与胰岛素信号传导通路、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路等信号通路有关。(3)分子对接发现AKT1与黄芩苷、TNF与红厚壳内酯对接效果最好。(4)细胞实验证明,20μg/ml黄芩苷及10μg/ml红厚壳内酯对HepG2细胞无毒性,且干预HepG2模型细胞后,可改善细胞的胰岛素敏感性。结论:桑叶-红花可能通过胰岛素信号传导通路、胰岛素抵抗相关通路等通路的协同作用发挥治疗2型糖尿病的作用,其关键药效成分可能为黄芩苷和红厚壳内酯。 展开更多
关键词 桑叶-红花 2型糖尿病 黄芩苷 akt1 网络药理学
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PKBα/Akt1基因多态性与2型糖尿病的相关性研究 被引量:7
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作者 许丽红 骆天红 +9 位作者 赵萸 钱镭 张芹 李文毅 张宏利 徐佳 简蔚霞 郑升 张贤玲 李果 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期62-65,共4页
目的研究蛋白激酶Bα亚型(PKBα,也称Akt1)基因单核苷酸多态性(SNP)与上海地区汉族人群2型糖尿病易感性的关系。方法利用等位基因特异PCR技术对460例2型糖尿病患者及444名正常对照者(NC组)Akt1基因3个标签SNP位点rs2494743、rs24... 目的研究蛋白激酶Bα亚型(PKBα,也称Akt1)基因单核苷酸多态性(SNP)与上海地区汉族人群2型糖尿病易感性的关系。方法利用等位基因特异PCR技术对460例2型糖尿病患者及444名正常对照者(NC组)Akt1基因3个标签SNP位点rs2494743、rs2494738和rs3001371进行基因分型。结果位点rs2494738和rs3001371的基因型分布在糖尿病组和NC组之间呈现显著性差异(均P〈0.01);rs2494738和rs3001371等位基因频率在2型糖尿病组和NC组的分布也呈现显著性差异(均P〈0.01);rs2494738的多态性与2型糖尿病发生风险呈等位基因计量效应关系。但rs2494743基因型和等位基因分布在NC组与2型糖尿病组中差异无统计学意义。单倍型分析结果显示3个单倍型频率在2型糖尿病组和NC组之间也存在显著差异(均P〈0.01)。结论在上海地区的汉族人群中,Akt1基因可能是2型糖尿病的易感基因之一;其SNP位点rs2494738和rs3001371变异可能与2型糖尿病发病相关。 展开更多
关键词 糖尿病 2 akt1 易感性 基因 多态性 单核苷酸
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RNA干扰技术联合抑制AKT1和COX-2表达对U251胶质瘤细胞增殖的影响
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作者 韩磊 张安玲 +5 位作者 岳晓 杨旸 王广秀 贾志凡 浦佩玉 康春生 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2010年第12期1137-1140,共4页
目的 探讨应用RNA干扰(RNAi)技术抑制U251恶性胶质瘤细胞株AKT1和COX-2表达后,在体外对U251细胞增殖的抑制作用.方法 构建靶向AKT1和COX-2的RNAi重组腺病毒表达载体(rAd-A+C)转染至U251细胞.应用Realtime PCR检测AKT1和COX-2 mRNA... 目的 探讨应用RNA干扰(RNAi)技术抑制U251恶性胶质瘤细胞株AKT1和COX-2表达后,在体外对U251细胞增殖的抑制作用.方法 构建靶向AKT1和COX-2的RNAi重组腺病毒表达载体(rAd-A+C)转染至U251细胞.应用Realtime PCR检测AKT1和COX-2 mRNA水平的变化;应用Western blot检测AKT1和COX-2蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析;应用MTr法和流式细胞术评价肿瘤细胞的增殖活性.结果 rAd-A+C可显著抑制U251细胞AKT1和COX-2的表达;与对照组和无义序列处理组(rAd-HK)比较,Western blot分析结果显示下游相关因子PCNA、Cyclin D1表达下降,而p53表达上调;细胞周期分析结果表明rAd-A+C处理组进入S期的细胞数较对照组减少了7.0%~7.8%,出现G0/G1期阻滞;MTT法分析显示rAd-A+C处理组细胞生长抑制率>58%.结论 靶向AKT1和COX-2的RNAi技术可显著抑制U251细胞AKT1和COX-2表达,在体外对U251细胞增殖活性产生明显抑制作用.因此,RNAi重组腺病毒表达载体介导的基因治疗可成为胶质瘤靶向治疗的新策略. 展开更多
关键词 神经胶质瘤 akt1 COX-2 RNA干扰 增殖活性
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siRNA沉默C-erbB-2基因对人喉癌Hep-2细胞PI3K/Akt信号通路的影响 被引量:2
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作者 余文发 赵玉林 +4 位作者 王萍 马慧敏 张国正 鲁保才 董明敏 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期894-897,共4页
目的:探讨siRNA沉默人喉癌Hep-2细胞C-erbB-2基因对细胞增殖的影响,及其与PI3K/Akt信号通路的关系。方法:利用siRNA技术转染Hep-2细胞C-erbB-2基因,RT-PCR3检测siRNA转染后C-erbB-2mRNA的水平变化,MTT检测细胞增殖情况改变,Western blo... 目的:探讨siRNA沉默人喉癌Hep-2细胞C-erbB-2基因对细胞增殖的影响,及其与PI3K/Akt信号通路的关系。方法:利用siRNA技术转染Hep-2细胞C-erbB-2基因,RT-PCR3检测siRNA转染后C-erbB-2mRNA的水平变化,MTT检测细胞增殖情况改变,Western blot检测ERK1/2和AKT1蛋白磷酸化变化情况。结果:转染C-erbB-2siRNA 24h后的Hep-2细胞C-erbB-2mRNA水平出现下调,细胞增殖抑制率增加,ERK1/2和AKT1蛋白磷酸化水平也相应降低,C-erbB-2基因表达与ERK1/2和AKT1蛋白磷酸化水平之间有显著相关性。结论:siRNA沉默Hep-2细胞C-erbB-2抑制Hep-2细胞增殖,这种增殖抑制可能通过降低ERK1/2和AKT1蛋白磷酸化水平实现。 展开更多
关键词 喉肿瘤 C—erbB-2基因 ERK1 2 akt1
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β-榄香烯对肺炎克雷伯菌致急性肺炎大鼠的保护作用 被引量:2
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作者 夏耀宗 施绍瑞 +2 位作者 胡伟 刘翔 付杰 《广东药科大学学报》 CAS 2021年第6期19-25,共7页
目的探讨β-榄香烯对肺炎克雷伯菌致急性肺炎大鼠的影响。方法将54只SD大鼠随机分成6组:健康对照组、肺炎模型组、β-榄香烯低剂量组、β-榄香烯中剂量组、β-榄香烯高剂量组和阿奇霉素组。构建肺炎克雷伯菌致急性肺炎大鼠模型,HE染色和... 目的探讨β-榄香烯对肺炎克雷伯菌致急性肺炎大鼠的影响。方法将54只SD大鼠随机分成6组:健康对照组、肺炎模型组、β-榄香烯低剂量组、β-榄香烯中剂量组、β-榄香烯高剂量组和阿奇霉素组。构建肺炎克雷伯菌致急性肺炎大鼠模型,HE染色和Masson染色观察肺组织病理形态并行肺损伤评分,检测肺组织湿/干质量(W/D);RT-PCR检测Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax和Survivin的表达;ELISA法检测血清和肺组织中TNF-α和IL-10水平;Western blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9、Survivin、TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ、FN、ERK1/2、p-ERK1/2、AKT和p-AKT蛋白表达量。结果与模型组比较,β-榄香烯中、高剂量显著减轻肺组织病理形态学改变,病理损伤评分、W/D值降低,Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白表达降低,Bax/Bcl-2、Survivin mRNA和蛋白表达升高,血清和肺组织TNF-α水平表达降低,IL-10表达升高,TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ、FN蛋白表达水平降低,ERK1/2、AKT的磷酸化水平降低。结论β-榄香烯可能通过抑制ERK1/2和AKT的磷酸化对肺炎克雷伯菌急性肺炎具有保护作用。 展开更多
关键词 Β-榄香烯 ERK1/2akt 肺炎克雷伯菌 急性肺炎 炎症因子 肺纤维化
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