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意大利蜜蜂Akt1的空间结构、同源性、互作蛋白和KEGG通路分析
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作者 李桂林 王姝威 冯颖 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 2026年第1期105-110,共6页
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt属于蛋白激酶家族,包含3个亚型:Akt1、Akt2和Akt3.研究表明,Akt1与生物的生长发育和癌症等有关.但是,关于Akt1在昆虫中的功能及其涉及的信号通路却很少被报道.该文利用生物信息学软件分析发现意大利蜜蜂Akt1的... 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt属于蛋白激酶家族,包含3个亚型:Akt1、Akt2和Akt3.研究表明,Akt1与生物的生长发育和癌症等有关.但是,关于Akt1在昆虫中的功能及其涉及的信号通路却很少被报道.该文利用生物信息学软件分析发现意大利蜜蜂Akt1的二级结构由多个无规则卷曲、18个α螺旋和21个β折叠组成;Akt1的三维结构以单体的形式存在.在膜翅目Akt1的遗传进化上,意大利蜜蜂Akt1与小蜜蜂亲缘关系较近.另外,意大利蜜蜂Akt1与PI3K/Akt/mTOR信号通路的多个蛋白质存在互作关系.该研究可为意大利蜜蜂Akt1结构与功能的进一步研究构建理论基础. 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 生物信息学 结构特征 akt1 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方改善ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉内皮细胞间质转化的作用机制
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作者 吕美君 贾连群 +3 位作者 闵冬雨 宋囡 王杰 张琦 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第1期159-164,I0003,共7页
目的基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方对ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉EndMT的作用机制。方法24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只;C57BL/6J小鼠8只作为空白常对照组。ApoE~(-/-)小鼠... 目的基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方对ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉EndMT的作用机制。方法24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只;C57BL/6J小鼠8只作为空白常对照组。ApoE~(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养制备AS模型,C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养。12周后,开始灌胃,空白对照组和模型组灌胃等容积生理盐水,化瘀祛痰方组灌胃化瘀祛痰方20 g/(kg·d),辛伐他汀组灌胃辛伐他汀混悬液2.275 mg/(kg·d),每日1次,给药4周。采用全自动生化分析仪检测血清血脂水平;苏木精-伊红染色法(HE)观察主动脉病理组织形态表现;免疫荧光法检测主动脉EndMT程度;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测主动脉转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)、TWIST mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管内皮钙粘蛋白(VE-Cadherin)、ZEB1、TWIST、Akt1、p-Akt1、β-catenin、p-β-catenin、TGF-β1、Smad2及p-Smad2蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,模型组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著下降(P<0.05);主动脉内壁不平整光滑,可见多量的泡沫细胞聚集,形成粥样斑块,斑块附着处血管内膜明显增厚且结构紊乱,管腔中可见脱落的斑块碎;主动脉α-SMA、VE-Cadherin双染色阳性细胞明显增多,α-SMA蛋白表达水平明显升高,VE-Cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);主动脉转录因子ZEB1、TWIST mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05);主动脉TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉p-Akt1及p-β-catenin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);化瘀祛痰方干预后,小鼠血清TC、TG、LDL-C水平显著下降,HDL-C水平显著升高(P<0.05);主动脉内壁欠光滑,可见少量内皮细胞脱落,管壁厚度明显减轻;主动脉α-SMA、VE-Cadherin双染色阳性细胞明显减少,α-SMA蛋白表达水平明显降低,VE-Cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);主动脉转录因子ZEB1、TWIST mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);主动脉TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉p-Akt1及p-β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论化瘀祛痰方能够显著改善ApoE~(-/-)AS小鼠EndMT,其作用机制可能与调控ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路,调节EndMT相关转录因子,进而调节EndMT基因表达有关。 展开更多
关键词 化瘀祛痰方 动脉粥样硬化 内皮细胞间质转化 ApoA-Ⅰ/akt1/β-catenin/TGF-β通路
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IGFBP2通过AKT1/NF-κB通路调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的机制
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作者 张虹 叶丽君 +1 位作者 廖南生 陈文晓 《健康研究》 2025年第1期74-78,F0003,共6页
目的研究IGFBP2通过AKT1/NF-κB通路调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的机制,为胰腺癌的诊断、靶向治疗和机制研究提供实验基础。方法收集64例胰腺癌患者和同期健康体检者100例,采用ELISA方法检测并比较2组血清中IGFBP2的表达水平;采用免疫组... 目的研究IGFBP2通过AKT1/NF-κB通路调控胰腺癌细胞增殖和凋亡的机制,为胰腺癌的诊断、靶向治疗和机制研究提供实验基础。方法收集64例胰腺癌患者和同期健康体检者100例,采用ELISA方法检测并比较2组血清中IGFBP2的表达水平;采用免疫组织化学方法检测胰腺癌患者癌组织和癌旁组织中IGFBP2的表达,RT-qPCR检测胰腺癌细胞系中IGFBP2的表达。CCK8法和流式细胞术评估细胞增殖、凋亡情况,Western blot法检测IGFBP2对AKT1/NF-κB信号通路的影响。结果胰腺癌患者的血清IGFBP2表达水平高于健康体检者,差异有统计学意义(P<0.05);IGFBP2诊断胰腺癌的曲线下面积为0.772(95%CI:0.696~0.849)。免疫组织化学染色方法显示,IGFBP2在胰腺癌患者癌组织明显高表达;RT-qPCR结果显示,IGFBP2在胰腺癌细胞中的表达水平高于人正常胰腺导管细胞系HPNE中的表达水平,且在AsPC-1细胞株中表达最高;差异均有统计学意义(P<0.01)。CCK8法和流式细胞术结果显示,抑制IGFBP2表达可以抑制细胞活力并促进细胞凋亡;Western blot检测结果显示,IGFBP2基因沉默后p-AKT、p-IkBa、p-P65蛋白表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论IGFBP2靶向调控AKT1/NF-κB通路,促进胰腺癌细胞增殖并抑制凋亡。 展开更多
关键词 胰腺癌 胰岛素样生长因子结合蛋白2 akt1/NF-κB 增殖 凋亡
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miR-15b-5p通过USP9X影响PIK3CA/AKT1通路缓解哮喘气道炎症 被引量:1
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作者 周宇洋 王知广 +4 位作者 朴艺花 韩雪 宋艺兰 延光海 朴红梅 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期193-203,共11页
目的 研究miR-15b-5p是否能通过负调控泛素特异性肽酶9X(USP9X)下调磷脂酰肌醇4, 5-二磷酸3-激酶催化亚基α/AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(PIK3CA/AKT1)通路的表达,从而缓解哮喘气道炎症。方法 通过在线数据库(miRWalk)预测USP9X可能是miR-15b... 目的 研究miR-15b-5p是否能通过负调控泛素特异性肽酶9X(USP9X)下调磷脂酰肌醇4, 5-二磷酸3-激酶催化亚基α/AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(PIK3CA/AKT1)通路的表达,从而缓解哮喘气道炎症。方法 通过在线数据库(miRWalk)预测USP9X可能是miR-15b-5p的直接靶点,并进行了荧光素酶报告基因检测验证。通过免疫共沉淀(CO-IP)验证了USP9X与PIK3CA之间能否直接结合以及USP9X和其小分子抑制剂WP1130在PIK3CA的去泛素化中作用。取C57小鼠,随机分为Control组、 OVA组、 OVA联合NC组以及miR-15b-5p agomir治疗组,每组10只。BEAS-2B细胞用白细胞介素13(IL-13)诱导,并用miR-15b-5p mimic治疗。进行了HE、 Masson、 PAS、免疫组织化学、免疫荧光染色及流式细胞术、 Western blot法、实时定量PCR检测。结果 发现给予miR-15b-5p agomir和mimic后能够减少支气管周围炎性细胞,改善气道炎症,并且miR-15b-5p能靶向负调控USP9X。USP9X能够与PIK3CA直接结合,以蛋白酶体依赖性方式调节PIK3CA水平,并且USP9X对K29连接的PIK3CA蛋白起去泛素化作用,下调USP9X会使PIK3CA的泛素化水平增加。USP9X的小分子抑制剂WP1130与敲低USP9X作用一致,均能够增加PIK3CA的泛素化水平,使PIK3CA的蛋白水平降低。结论 miR-15b-5p/USP9X/PIK3CA/AKT1信号通路可能为哮喘提供潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 miR-15b-5p USP9X PIK3CA akt1 泛素化 哮喘
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扶正消岩颗粒通过调控AKT1/BAD/BCL-2通路改善乳腺癌化疗期癌因性疲乏
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作者 孙心悦 王宽宇 +4 位作者 王钢 代清泉 陈静 孔祥定 栾佳 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第12期2646-2657,共12页
目的基于扶正祛邪理论探究扶正消岩颗粒对乳腺癌化疗期癌因性疲乏(CRF)的治疗效果及作用机制。方法将90例正虚毒瘀型乳腺癌CRF患者随机分为对照组(化疗及对症治疗)、研究组(加服扶正消岩颗粒),45例/组。比较两组Piper疲乏量表(PFS)、Kar... 目的基于扶正祛邪理论探究扶正消岩颗粒对乳腺癌化疗期癌因性疲乏(CRF)的治疗效果及作用机制。方法将90例正虚毒瘀型乳腺癌CRF患者随机分为对照组(化疗及对症治疗)、研究组(加服扶正消岩颗粒),45例/组。比较两组Piper疲乏量表(PFS)、Karnofsky功能状态(KPS)量表及中医证候评分。利用多数据库分析药物活性成分、靶点及疾病相关靶点,构建PPI网络并富集分析,通过分子对接和动力学模拟研究主要成分槲皮素与AKT1等核心靶点作用情况。构建乳腺癌CRF小鼠模型,设正常对照组、模型组和扶正消岩颗粒灌胃治疗组,检测不同组小鼠运动功能改变、腓肠肌组织凋亡相关蛋白AKT1、p-AKT1、BCL-2、BAD表达及血清IL-6、IL-1β水平。结果研究组治疗后PFS、KPS及中医证候评分结果均优于治疗前和对照组(P<0.05);筛选出57个药物与疾病交集靶标,确定5个关键靶点,发现主要成分槲皮素与AKT1等核心靶点强结合,并可能通过凋亡通路发挥作用;扶正消岩颗粒可改善小鼠运动能力,逆转腓肠肌凋亡蛋白表达异常,降低血清IL-6、IL-1β水平(P<0.05)。结论扶正消岩颗粒可缓解乳腺癌患者化疗期癌因性疲乏,改善中医证候和生活质量,改善疲乏模型小鼠体能,可能通过调控AKT1/BAD/BCL-2通路抑制骨骼肌凋亡,下调IL-6、IL-1β水平发挥作用。 展开更多
关键词 扶正消岩颗粒 乳腺癌 癌因性疲乏 网络药理学 akt1/BAD/BCL-2信号通路
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Akt1上调FBXO6表达对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响
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作者 高彩月 曹丹丹 +4 位作者 倪思琦 张婧 王迎伟 邱文 赵晨卉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第6期777-785,共9页
目的:检测胶质瘤组织和细胞中F盒蛋白(F-box protein,FBXO)6的表达及其对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响,并探究FBXO6表达的上游调控机制。方法:使用CGGA数据库分析胶质瘤患者肿瘤组织中FBXO6的表达及其与患者预后的相关性。行RT-PCR和West... 目的:检测胶质瘤组织和细胞中F盒蛋白(F-box protein,FBXO)6的表达及其对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响,并探究FBXO6表达的上游调控机制。方法:使用CGGA数据库分析胶质瘤患者肿瘤组织中FBXO6的表达及其与患者预后的相关性。行RT-PCR和Western blot检查胶质瘤细胞系(U251、U373和U87)中FBXO6的表达水平,筛选出FBXO6蛋白表达量最高的U87细胞。CCK-8和Transwell实验检测过表达和沉默FBXO6对U87细胞增殖和侵袭的影响。使用U0126(ERK1/2抑制剂)、SP600125(JNK抑制剂)和Perifosine(Akt1抑制剂)处理U87细胞,Western blot检查ERK1/2、JNK、Akt1的表达和磷酸化水平,之后行RT-PCR和Western blot检测FBXO6的表达变化,CCK-8和Transwell实验检测U87细胞增殖和侵袭能力。使U87细胞过表达FBXO6并给予Perifosine处理,进行RT-PCR、Western blot、CCK-8和Transwell实验,检测FBXO6表达、细胞增殖和侵袭能力。结果:胶质瘤患者癌组织中FBXO6高表达,且表达量与恶性程度相关,并与患者不良预后密切相关。3种胶质瘤细胞系U251、U373和U87均表达FBXO6,以U87细胞表达最为显著。过表达FBXO6基因后U87细胞的增殖和侵袭明显增强,而沉默FBXO6基因后U87细胞的增殖和侵袭明显减弱。Akt1抑制剂可显著下调U87细胞的FBXO6表达,而ERK1/2和JNK抑制剂对FBXO6的表达无明显影响。Akt1抑制剂可显著减弱U87细胞的增殖和侵袭,而过表达FBXO6可拮抗上述效应。结论:胶质瘤细胞中Akt1活化上调FBXO6基因的表达,促进细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 胶质瘤 FBXO6 akt1 增殖 侵袭
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AKT1介导的肝癌细胞自噬增强^(125)I粒籽辐照敏感性 被引量:1
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作者 王琛禹 吴治州 +2 位作者 刘丽 肖云华 黄学全 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第6期539-550,共12页
目的探究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(serine/threonine-protein kinase 1,AKT1)介导的肝癌细胞自噬对^(125)I粒籽辐照敏感性的影响。方法①利用iProX数据库和STRING12.0网站对^(125)I粒籽辐照前后肝癌蛋白组数据进行分析,探究差异表达蛋白... 目的探究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(serine/threonine-protein kinase 1,AKT1)介导的肝癌细胞自噬对^(125)I粒籽辐照敏感性的影响。方法①利用iProX数据库和STRING12.0网站对^(125)I粒籽辐照前后肝癌蛋白组数据进行分析,探究差异表达蛋白及相关功能联系,同时借助癌症基因组图谱(the cancer genome attas,TCGA)数据库分析AKT1表达水平与肝癌患者生存期关系。②利用人肝癌细胞系HUH7和Hep3B构建体外辐照模型,^(125)I组细胞接受起始表观活度0.8 mCi/粒籽的^(125)I放射性粒籽持续辐照约120 h累计辐射剂量8 Gy,对照组(NC组)正常培养120 h。③使用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)、诱导剂分别处理肝癌细胞系,构建CQ组和RAPA组。运用慢病毒转染技术构建过表达AKT1肝癌细胞系,即AKT1组。将同样处理的肝癌细胞系持续^(125)I粒籽辐照120 h,获得CQ+^(125)I组、RAPA+^(125)I组、AKT1+^(125)I组。④Western blot检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)、p62、AKT1、p-AKT1的变化,利用细胞免疫荧光观察LC3表达;平板克隆实验和流式细胞术实验检测细胞克隆能力以及凋亡率。结果①^(125)I粒籽辐照后,相较于NC组,^(125)I组的中p62表达降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增高(P<0.05),免疫荧光显示LC3绿色荧光点增多。与^(125)I组比较,CQ+^(125)I组p62表达增高(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低(P<0.01)。在细胞凋亡和克隆能力方面,CQ+^(125)I组凋亡率较^(125)I组降低(P<0.01),CQ+^(125)I组克隆形成数较^(125)I组增多(P<0.01),而RAPA+^(125)I组结果与之相反。②iProX数据库分析显示,AKT1在辐照组降低,TCGA数据库分析表明,AKT1高表达预示肝癌患者较差预后(P<0.01)。③^(125)I粒籽辐照后,^(125)I组AKT1在RNA和蛋白水平表达均降低(P<0.01)。过表达AKT1后,自噬水平降低(P<0.05),^(125)I粒籽辐照过表达AKT1的肝癌细胞可部分恢复自噬水平。相较于AKT1组,AKT1+^(125)I组的AKT1、p-AKT1、p62表达均降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值增高(P<0.05)。④关于细胞凋亡和克隆能力,AKT1+^(125)I组较^(125)I组凋亡率降低(P<0.05),AKT1+^(125)I组较AKT1组凋亡率升高(P<0.05)。HUH7细胞中AKT1+^(125)I组较^(125)I组克隆能力提高(P<0.05),在Hep3B细胞中AKT1+^(125)I组较^(125)I组克隆能力提高(P<0.05),AKT1组较NC组克隆能力增高(P<0.05)。结论^(125)I粒籽辐照后的肝癌细胞通过降低AKT1的表达诱导致命性自噬,为^(125)I放射性粒籽植入治疗肝癌提供了新的理论依据。 展开更多
关键词 肝癌细胞 ^(125)I放射性粒籽 akt1 自噬 辐射敏感性
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基于PIK3CA/AKT1/PPARG/CYP7A1信号通路探讨四妙丸改善游离脂肪酸诱导的高脂血症HepG2细胞模型脂质沉积 被引量:1
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作者 王可馨 徐文杰 +3 位作者 张锋林 丁梦泽 谭晓梅 夏婷 《药物评价研究》 北大核心 2025年第6期1425-1437,共13页
目的通过数据库预测结合体外细胞实验探讨四妙丸调血脂的作用及机制。方法通过中药系统药理学(TCMSP)数据库与分析平台、GeneCards、Disgenet、OMIM等数据库筛选四妙丸关键成分及高脂血症相关靶点;蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析四妙... 目的通过数据库预测结合体外细胞实验探讨四妙丸调血脂的作用及机制。方法通过中药系统药理学(TCMSP)数据库与分析平台、GeneCards、Disgenet、OMIM等数据库筛选四妙丸关键成分及高脂血症相关靶点;蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析四妙丸治疗高脂血症的关键靶点;基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析此过程涉及的生物学过程及通路;进一步采用分子对接探讨四妙丸成分与关键靶点间的相互作用。体外培养HepG2细胞,采用CCK-8实验筛选游离脂肪酸造模和四妙丸、辛伐他汀给药的最佳浓度,构建游离脂肪酸诱导的HepG2细胞高脂血症模型,给予四妙丸(25、50、100 mg·L^(−1))、辛伐他汀(25μmol·L^(−1))处理24 h,对照组不造模不加药,模型组不加药,通过细胞油红O染色和细胞内总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量测定研究细胞内脂质积累情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测磷脂酰肌醇4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)和细胞色素7A1(CYP7A1)mRNA和蛋白表达。结果共筛选出56个四妙丸核心成分,对应蛋白靶点735个;高脂血症疾病靶点共1860个;有效成分靶点与疾病靶点的交集靶点为244个。PPI结果显示核心靶点包括AKT1、IL6、EGFR、TNF、PIK3CA、PPARG等。GO和KEGG富集分析揭示四妙丸主要通过PI3K-AKT1信号通路、胰岛素抵抗、炎症反应信号等改善高脂血症。细胞实验结果表明,与模型组比较,四妙丸显著降低游离脂肪酸诱导的HepG2高脂血症细胞模型内脂质沉积(P<0.05、0.01),显著降低细胞内TC、TG的含量(P<0.05、0.01);显著降低细胞内PIK3CA、AKT1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05、0.01),显著升高PPARG、CYP7A1 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论四妙丸改善游离脂肪酸诱导的HepG2细胞高脂血症,作用机制与调节PIK3CA/AKT1/PPARG/CYP7A1信号通路有关。 展开更多
关键词 四妙丸 高脂血症 网络药理学 HepG2细胞 PIK3CA/akt1/PPARG/CYP7A1通路 作用机制
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Magnesium isoglycyrrhizinate ameliorates isoproterenol-induced myocardial remodeling in mice by regulating oxidative stress and apoptosis via the PI3K/AKT1 signaling pathway 被引量:2
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作者 Xingyu Zhou Dan Fu +8 位作者 Saige Sun Qiuyan Liu Longxing Liu Jia Shi Zijie Ge Yu Ma Yilin He Li Xu Kai Qian 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 2025年第4期321-333,共13页
The aim of this study is to investigate the mechanism of magnesium isoglycyrrhizinate(MgIG)in the treatment of myocardial remodeling induced by isoproterenol(ISO)in mice.We assessed the impact of MgIG on ISO-induced m... The aim of this study is to investigate the mechanism of magnesium isoglycyrrhizinate(MgIG)in the treatment of myocardial remodeling induced by isoproterenol(ISO)in mice.We assessed the impact of MgIG on ISO-induced myocardial remodeling by activating the PI3K/AKT1 pathway.The cardiac function of mice was evaluated by echocardiography,revealing that MgIG could improve left ventricular function.Pathological staining analysis showed that MgIG could reduce the degree of myocardial injury caused by ISO.Serum data detected by ELISA demonstrated that MgIG could decrease the levels of CK-MB,MDA,and LDH while increasing the activity of GSH-Px.Western blotting analysis revealed that protein expression levels of Collagen I,BNP,Bax,cleaved caspase-3,p-PI3K,and p-AKT1 were decreased,whereas the protein expressions of Bcl-2,COX2,and SOD1 were increased upon MgIG treatment.However,the activation of the PI3K pathway reversed the cardioprotective effects of MgIG,as evidenced by the addition of PI3K activators.Taken together,our comprehensive results suggested that MgIG could improve ISO-induced myocardial remodeling,potentially through its mechanism of inhibiting the PI3K/AKT1 pathway to regulate apoptosis and oxidative stress. 展开更多
关键词 Magnesium isoglycyrrhizinate ISOPROTERENOL Myocardial remodeling PI3K/akt1 APOPTOSIS Oxidative stress
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金樱子通过调控Src-AKT1轴抑制肺动脉高压平滑肌增殖
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作者 杨子为 吕畅 +4 位作者 董柱 计书磊 毕生辉 张雪花 王晓武 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第9期1889-1902,共14页
目的探讨传统中药金樱子(RLM)治疗肺动脉高压(PAH)的协同机制,通过网络药理学预测其活性成分与作用靶点,并通过体内外实验验证其抗增殖效应降低细胞内钙离子浓度作用。方法网络药理学分析:筛选金樱子活性成分及PAH疾病靶点,构建“成分-... 目的探讨传统中药金樱子(RLM)治疗肺动脉高压(PAH)的协同机制,通过网络药理学预测其活性成分与作用靶点,并通过体内外实验验证其抗增殖效应降低细胞内钙离子浓度作用。方法网络药理学分析:筛选金樱子活性成分及PAH疾病靶点,构建“成分-靶点-疾病”互作网络,进行基因富集分析与分子对接验证。体外实验:设置对照组、缺氧组+溶剂对照、缺氧+金樱子(100 mg/mL)、缺氧+金樱子(200 mg/mL)、缺氧+金樱子(300 mg/mL),通过Western blotting和免疫荧光检测细胞增殖。动物实验:将大鼠随机分为5组:阴性对照组、野百合碱(MCT)+溶剂对照、野百合碱+金樱子(100 mg/mL),MCT+金樱子(200 mg/mL)、MCT+金樱子(300 mg/mL)。HE染色、免疫荧光染色观察肺血管形态学变化。结果网络分析筛选出7种核心活性成分(如β-谷甾醇、山奈酚)及39个关键靶点,分子对接显示Src为高亲和力靶点。KEGG富集分析显示,差异基因显著富集于钙信号通路和PI3K-AKT通路。体外实验表明,与对照组相比,Hypo组PCNA上调(P<0.001)。金樱子显著抑制PASMCs增殖(PCNA表达下调)。Western blotting实验证实金樱子可以抑制Src和AKT1的磷酸化。动物实验证实,金樱子治疗组肺动脉平均压(P<0.001)和右心室肥厚指数降低,右心室射血功能改善,肺血管壁增厚和纤维化减轻。结论金樱子通过调控Src-AKT1轴,发挥抗平滑肌增殖的作用,为肺动脉高压的治疗提供了新型天然药物候选策略。 展开更多
关键词 肺动脉高压 平滑肌细胞增殖 akt1 SRC 网络药理学
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Neu-P11通过AKT1/FOXO1信号通路改善2型糖尿病胰岛素抵抗
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作者 李秀平 杨通平 +5 位作者 綦思珂 毛丽娜 何佳瑶 唐振华 欧阳远东 蔡世昌 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第10期1999-2000,共2页
褪黑素(melatonin,Mel)是松果体分泌的内源性吲哚胺类激素,既往研究证实其可以增强胰岛素敏感性[1],然而,Mel在体内的代谢速率较快且半衰期较短,直接做药物使用时效果不显著,且其合成和提取不易,高剂量使用时可能会引起副作用。Neu-P11... 褪黑素(melatonin,Mel)是松果体分泌的内源性吲哚胺类激素,既往研究证实其可以增强胰岛素敏感性[1],然而,Mel在体内的代谢速率较快且半衰期较短,直接做药物使用时效果不显著,且其合成和提取不易,高剂量使用时可能会引起副作用。Neu-P11作为新型MT1/MT2双受体激动剂,其特点是容易在实验室中合成,化学稳定性高、半衰期长,直接做药物使用时副作用较少,并可替代Mel,与Mel受体结合而发挥生物学效用[2],在改善代谢紊乱方面展现出潜在优势。 展开更多
关键词 Neu-P11 T2DM akt1 FOXO1 胰岛素抵抗
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意大利蜜蜂Akt1的蛋白序列特征和结构域分析
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作者 李桂林 冯颖 +4 位作者 张新怡 张呈豪 夏文丽 王姝威 赵航 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 2025年第2期93-98,共6页
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶已被证明是反转录病毒癌基因v-akt的编码产物,所以又被称为Akt.Akt有3个亚型,分别是Akt1、Akt2和Akt3.研究表明,Akt1与精神分裂症、生物的生长发育等有关.该文利用生物信息学软件分析意大利蜜蜂Akt1蛋白的序列和... 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶已被证明是反转录病毒癌基因v-akt的编码产物,所以又被称为Akt.Akt有3个亚型,分别是Akt1、Akt2和Akt3.研究表明,Akt1与精神分裂症、生物的生长发育等有关.该文利用生物信息学软件分析意大利蜜蜂Akt1蛋白的序列和结构特征.结果表明,意大利蜜蜂Akt1是一种存在于细胞质中并由544个氨基酸残基组成的带负电的稳定的亲水蛋白.Akt1有4个结构域,不具有跨膜结构域.另外,Akt1一共具有60个可能的磷酸化修饰位点,33个潜在的O-连接的糖基化修饰位点和1个N-连接的糖基化修饰位点.该研究可为进一步研究意大利蜜蜂Akt1的功能提供理论依据. 展开更多
关键词 生物信息学 意大利蜜蜂 结构特征 akt1
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miR‑34a‑5p/AKT1轴在子宫内膜异位症患者内膜组织中的表达及其机制
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作者 孙志敏 张红娣 魏伟 《解剖学研究》 2025年第2期152-159,F0003,共9页
目的探究miR‑34a‑5p/AKT1轴在子宫内膜异位症患者内膜组织中的表达及机制。方法收集2023年1月-2023年12月于我院妇科住院行腹腔镜手术治疗的子宫内膜异位症患者的异位内膜组织和正常的子宫内膜组织各60例,分别设为EMs组和为Con组。免疫... 目的探究miR‑34a‑5p/AKT1轴在子宫内膜异位症患者内膜组织中的表达及机制。方法收集2023年1月-2023年12月于我院妇科住院行腹腔镜手术治疗的子宫内膜异位症患者的异位内膜组织和正常的子宫内膜组织各60例,分别设为EMs组和为Con组。免疫组化检测子宫内膜组织中AKT1表达,分离人原代子宫内膜基质细胞(hESCs)并鉴定;将hESCs随机分为miR‑NC组、miR‑34a‑5p组、miR‑34a‑5p+pcDNA‑AKT1组和Control组,采用qRT‑PCR检测子宫内膜组织中miR‑34a‑5p表达,CCK‑8和EdU检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞侵袭能力,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白质印迹法检测细胞中AKT1、CDK6、CyclinD1蛋白表达,双荧光素酶报告基因检测miR‑34a‑5p和AKT1的靶向关系。结果与Control组比较,EMs组子宫内膜异位组织中miR‑34a‑5p相对表达量(0.21±0.05)明显降低,且AKT1阳性表达率(75%)明显增加(P<0.01)。与Control组比较,miR‑34a‑5p组细胞中miR‑34a‑5p相对表达量(1.92±0.23)、细胞G0/G1期(65.84±7.02)、G2/M期(35.68±4.02)细胞比例明显增加,细胞活力、细胞中EdU阳性率(12.48±1.40)、细胞侵袭数目(30.62±3.45)、细胞S期(18.34±1.95)和细胞中cyclin D1(0.34±0.05)、CDK6(0.24±0.04)、AKT1蛋白(0.38±0.05)表达明显降低(P<0.01);miR‑34a‑5p+pcDNA‑AKT1组细胞中miR‑34a‑5p相对表达量(1.15±0.14)、细胞G0/G1期(45.91±4.83)、G2/M期(22.87±2.21)细胞比例均低于miR‑34a‑5p组,细胞活力、细胞中EdU阳性率(31.74±4.02)、细胞侵袭数(76.54±7.93)、细胞S期(28.78±3.84)和细胞中cyclin D1(0.69±0.08)、CDK6(0.50±0.06)、AKT1(0.29±0.07)蛋白表达均高于miR‑34a‑5p组(P<0.01)。生物信息学结果显示,转染野生型AKT1时miR‑34a‑5p组(0.34±0.06)荧光素酶活性低于miR‑NC组(P<0.01)。结论miR‑34a‑5p在子宫内膜异位症患者内膜组织中表达降低,AKT1表达升高,过表达miR‑34a‑5p可抑制子宫内膜异位症患者子宫内膜基质细胞增殖和侵袭,阻滞细胞周期。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 miR‑34a‑5p/akt1 内膜基质细胞 细胞周期
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槲皮素激活Akt1/AMPK/FoxO3a通路抑制成骨细胞凋亡的研究
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作者 牛晓莹 张祥生 +1 位作者 叶茂林 马江涛 《中医研究》 2025年第5期71-75,共5页
目的:探讨槲皮素对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、成骨分化和凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养MC3T3-E1细胞进行成骨诱导,分别采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)法及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)法检测槲皮素... 目的:探讨槲皮素对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、成骨分化和凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养MC3T3-E1细胞进行成骨诱导,分别采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)法及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)法检测槲皮素对MC3T3-E1细胞增殖活力和成骨能力的影响。采用ALP法和原位末端转移酶标记法(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)分别检测MC3T3-E1细胞成骨能力和凋亡水平,蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B蛋白1(phospho-protein kinase B,p-Akt1)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phospho-adenosine monophosphate-actived protein kinase,p-AMPK)、磷酸化叉头框蛋白O3a(phosporylated forkhead box O3a protein,p-FoxO3a)表达水平。结果:①在一定范围内槲皮素呈浓度依赖性促进MC3T3-E1增殖,5μmol/L槲皮素能促进MC3T3-E1细胞增殖,促进细胞成骨。②10μmol/L LY294002抑制MC3T3-E1细胞ALP活性,促进细胞凋亡,抑制p-Akt1、p-AMPK和p-FoxO3a蛋白表达;与单独使用10μmol/L LY294002相比,5μmol/L槲皮素联合10μmol/L LY294002促进MC3T3-E1细胞ALP活性增加,抑制细胞凋亡,促进p-Akt1、p-AMPK和p-FoxO3a蛋白表达。结论:槲皮素通过上调Akt1/AMPK/FoxO3a信号通路的磷酸化促进MC3T3-E1细胞增殖和分化,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 槲皮素 MC3T3-E1细胞 akt1/AMPK/FoxO3a通路 成骨分化 凋亡
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Akt1在高血压心肌纤维化中的作用及其机制 被引量:48
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作者 苗艳菊 杨敏 +2 位作者 郑娇 王绿娅 杜杰 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期265-271,共7页
目的观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响。方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检... 目的观察Akt1在高血压心肌纤维化中的作用,并探讨其对心脏成纤维细胞转分化的影响。方法 34只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和高血压组,采用植入式胶囊渗透压泵分别灌注生理盐水和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),于第7天时采用鼠尾套法检测小鼠尾动脉血压、超声检测心脏结构及功能;处死并取其心脏进行组织切片,行Masson染色观察胶原沉积;流式细胞学方法检测心脏中巨噬细胞浸润;免疫组织化学染色检测炎症细胞因子[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]和促纤维化因子[转化生长因子β(TGF-β)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]表达;实时定量PCR检测Akt1及α-SMAmRNA水平;Westernblot检测α-SMA蛋白表达以及Akt1蛋白表达和激活。体外分离原代骨髓巨噬细胞进行Akt1siRNA及ControlsiRNA干扰后与乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)共培养,观察促纤维化因子mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,高血压组在AngⅡ灌注7d时血压升高[(147.1±1.0)比(104.6±2.1)mmHg,P<0.01],射血分数和短轴缩短率均升高(P<0.05);胶原沉积明显增加[(2.06±0.18)%比(0.35±0.04)%,P<0.01];心脏组织中巨噬细胞浸润增加[(1.75±0.15)%比(0.44±0.07)%,P<0.01],促炎因子(iNOS、IL-1β、TNF-α)及促纤维化因子(TGF-β、α-SMA)表达升高(均P<0.01)。高血压组Akt1及α-SMAmRNA表达上调(P<0.01),Akt1磷酸化水平上调(P<0.01),同时α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.05)。体外实验,与单独CFs组相比,CFs与转染ControlsiRNA巨噬细胞共培养组促纤维化因子(α-SMA、TGF-β、Ⅰ型胶原)mRNA表达升高(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达明显上调(P<0.01),而CFs与转染Akt1siRNA巨噬细胞共培养组上述促纤维化因子mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01),α-SMA蛋白表达下降(P<0.05)。结论在高血压心脏纤维化疾病早期,心脏组织Akt1活性增加,可能通过促进炎症反应,介导巨噬细胞作用下的成纤维细胞转分化,进而促进高血压导致的心肌纤维化。 展开更多
关键词 高血压 心肌纤维化 炎症反应 akt1 血管紧张素Ⅱ
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银屑病皮损及正常人皮肤中Akt1,Akt2和Akt3的表达 被引量:9
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作者 蔓小红 张晓艳 +4 位作者 李红艳 徐波 唐娟 陈扬鑫 潘琳 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第5期338-340,共3页
目的探讨Akt三种亚型Akt1,Akt2和Akt3的表达在寻常性银屑病发病中的意义。方法采用免疫组化法检测30例寻常性银屑病皮损及15例正常皮肤中Akt1,Akt2和Akt3的表达,并利用计算机图像采集与分析系统对免疫组化结果进行平均光密度测定。结果... 目的探讨Akt三种亚型Akt1,Akt2和Akt3的表达在寻常性银屑病发病中的意义。方法采用免疫组化法检测30例寻常性银屑病皮损及15例正常皮肤中Akt1,Akt2和Akt3的表达,并利用计算机图像采集与分析系统对免疫组化结果进行平均光密度测定。结果免疫组化结果显示,与正常人表皮相比,寻常性银屑病皮损中Akt1(0.2170±0.0144)和Akt2(0.2157±0.0150)的表达差异无统计学意义(P>0.05),而Akt3(0.2990±0.0165)的表达却明显高于正常皮肤,差异有统计学意义(P<0.01)。结论寻常性银屑病皮损内Akt活性的升高可能与Akt3的表达增强有关。 展开更多
关键词 akt1 AKT2 Akt3 银屑病
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RNAi调下AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖 被引量:5
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作者 梅玫 任玉 +6 位作者 周旋 赵津辉 王凡 高伟 祁艳斌 姚智 蒋伶活 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期51-56,共6页
目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染... 目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染至乳腺癌MCF-7细胞。应用real-timePCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclinD1和P53的表达情况。应用MTT法、流式细胞术、2-D和3-DMatrigel实验检测MCF-7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力。结果:重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K介导的靶向AKT1,PI3KP85shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclinD1的表达亦下调,P53表达则上调。MTT法结果显示rAd5-siAKT1-siPI3K组细胞生长抑制率>50%,与未转染组和rAd5-siCtrl转染组比较,出现明显的G1/G0细胞周期阻滞;2-D和3-DMatrigel实验显示,未转染组和rAd5-siCtrl转染组细胞呈正常形态,而rAd5-siAKT1-siPI3K转染组细胞贴壁生长能力明显减低,细胞团块明显缩小。结论:靶向AKT1、PI3KP85亚基的shRNA技术可以抑制MCF-7细胞中AKT1、PI3KP85亚基的表达,抑制MCF-7细胞的体外增殖。 展开更多
关键词 RNA干扰 乳腺肿瘤 akt1 PI3KP85 增殖
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慢病毒介导Akt1 shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖的影响 被引量:11
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作者 马体栋 赵凡 李碧香 《肿瘤药学》 CAS 2019年第4期572-577,共6页
目的探究慢病毒介导Akt1 shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖水平的影响。方法以人肝母细胞瘤细胞株HepG2为研究对象,将其分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-Akt1慢病毒组(C组)。A组细胞未作任何处理,B... 目的探究慢病毒介导Akt1 shRNA载体转染对人肝母细胞瘤细胞株HepG2凋亡和增殖水平的影响。方法以人肝母细胞瘤细胞株HepG2为研究对象,将其分为空白对照组(A组)、空白载体病毒组(B组)和ShRNA-Akt1慢病毒组(C组)。A组细胞未作任何处理,B组细胞转染空白载体慢病毒,C组细胞转染shRNA-Akt1载体构建的慢病毒。利用短发夹RNA(shRNA)干扰技术构建Akt1的基因下调载体,通过慢病毒转染HepG2细胞,qPCR和Western blotting检测凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-9的表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭能力;Annexin-V/PI法检测细胞凋亡水平。结果shRNA-Akt1载体慢病毒转染滴度为8×10^7 TU·mL^-1。三组细胞的Akt1 mRNA相对表达量比较,差异均具有统计学意义(F=9.904,P=0.025),且C组显著低于A组和B组(q=3.092,2.009;P=0.019);三组细胞的Caspase-3和Caspase-9 mRNA相对表达量比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),且C组显著高于A组和B组(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,三组细胞的Akt1蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(F=11.002,P=0.011),且C组显著低于A组和B组(q=2.887,2.457;P=0.014);三组细胞的Caspase-3和Caspase-9蛋白水平比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),且C组显著高于A组和B组(P<0.05)。CCK-8结果显示,C组细胞增殖率显著低于B组和A组(q=2.009,3.901;P<0.05)。Transwell结果显示,C组细胞的侵袭能力显著低于B组和A组(q=2.127,2.157;P<0.05)。Annexin-V/PI结果显示,C组细胞凋亡率显著高于B组和A组(q=2.445,2.659;P<0.05)。结论慢病毒介导Akt1 shRNA载体可抑制HepG2细胞增殖和侵袭,并促进其凋亡,可作为肝癌的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 akt1 HEPG2细胞 侵袭 增殖 凋亡
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丹芪合剂下调糖尿病肾病大鼠肾组织Akt1的表达 被引量:18
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作者 余红 石明隽 +5 位作者 肖瑛 刘瑞霞 王园园 桂华珍 郭兵 张国忠 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期259-262,共4页
目的:观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶B(PKB/Akt1)表达的影响,探讨其保护肾脏的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病丹芪合剂组(2 g.kg-1)和依那普利组(10 mg.kg-1)。单次尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿... 目的:观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶B(PKB/Akt1)表达的影响,探讨其保护肾脏的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病丹芪合剂组(2 g.kg-1)和依那普利组(10 mg.kg-1)。单次尾静脉注射链脲佐菌素复制糖尿病模型。生化方法检测血糖、尿蛋白和血肌酐。免疫组化检测肾组织Akt1、E-钙黏素(E-cadherin)、纤维连接蛋白(FN)蛋白表达;Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平;RT-PCR检测Akt1 mRNA水平。结果:丹芪合剂明显降低DM大鼠肾组织Akt1蛋白和mRNA表达(P<0.01);同时上调E-cadherin蛋白表达并下调α-SMA表达,使FN沉积减少(P<0.01);降低DM大鼠血肌酐和尿蛋白水平(P<0.05)。丹芪合剂组与依那普利组之间无统计学差异。结论:丹芪合剂可能通过抑制Akt信号分子,进而抑制上皮细胞-间充质细胞转化,减少FN沉积,对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 akt1 上皮细胞-间充质细胞转化 丹芪合剂 依那普利
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植物K^+通道AKT1的研究进展 被引量:12
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作者 伍国强 水清照 冯瑞军 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期225-234,共10页
钾(K)是植物生长发育必需的大量营养元素之一,主要通过根细胞的K^+通道及转运蛋白介导吸收。AKT1是Shaker型K^+通道家族的重要成员,在植物根吸收K^+和体内跨膜转运中发挥重要作用。该文综述了植物AKT1的分子结构、组织特异性表达、调控... 钾(K)是植物生长发育必需的大量营养元素之一,主要通过根细胞的K^+通道及转运蛋白介导吸收。AKT1是Shaker型K^+通道家族的重要成员,在植物根吸收K^+和体内跨膜转运中发挥重要作用。该文综述了植物AKT1的分子结构、组织特异性表达、调控机制及生物学功能等方面的研究进展,并对该通道今后的研究方向进行了展望。 展开更多
关键词 akt1 K+吸收 K+饥饿 耐盐性
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