目的探究骨痹通消颗粒干预PI3K-AKT-mTOR信号通路调节细胞自噬水平治疗早期激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of the femoral head,SANFH)的机制。方法将30只清洁级新西兰兔随机分为对照组、模型组和实验组,除对照...目的探究骨痹通消颗粒干预PI3K-AKT-mTOR信号通路调节细胞自噬水平治疗早期激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of the femoral head,SANFH)的机制。方法将30只清洁级新西兰兔随机分为对照组、模型组和实验组,除对照组外,其余均采用脂多糖联合糖皮质激素建立模拟激素性股骨头坏死动物模型。造模成功后,模型组与对照组给予等量生理盐水,实验组灌喂骨痹通消颗粒浓缩液,1 d 1次,持续8 w,所有兔经腹腔麻醉后体外心脏采血,处死实验动物,取出各组兔双侧股骨头,对股骨头组织切片标本进行苏木精-伊红染色;免疫酶联吸附法检测血清ALP、TGF-β1水平;免疫组织化学染色法观察股骨头区细胞自噬情况;RT-qPCR检测组织中凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达水平;Western blot检测通路蛋白Akt、LC3-Ⅱ、mTOR及ULK1等表达水平。结果与对照组相比,模型组兔骨组织染色切片中骨小梁稀疏变细,空骨陷窝数明显增多(P<0.05),自噬蛋白LC3-Ⅱ、ULK1以及凋亡基因Bax表达水平显著上升(P<0.05),通路蛋白Akt和mTOR、抗凋亡基因Bcl-2、成骨相关因子ALP和TGF-β1表达下降(P<0.05),经骨痹通消颗粒干预治疗后,实验组兔骨组织空骨陷窝情况和细胞凋亡情况均显著改善(P<0.05),实验组LC3-Ⅱ、ULK1和Bax表达下降(P<0.05),Akt、mTOR、Bcl-2、ALP和TGF-β1表达显著提高(P<0.05)。结论经过骨痹通消颗粒干预后,SANFH兔模型自噬水平较前降低,细胞凋亡减少,骨修复增加,在动物实验层面有效延缓骨坏死进程,表明骨痹通消颗粒在SANFH早期具有积极的治疗作用。展开更多
文摘目的探究骨痹通消颗粒干预PI3K-AKT-mTOR信号通路调节细胞自噬水平治疗早期激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of the femoral head,SANFH)的机制。方法将30只清洁级新西兰兔随机分为对照组、模型组和实验组,除对照组外,其余均采用脂多糖联合糖皮质激素建立模拟激素性股骨头坏死动物模型。造模成功后,模型组与对照组给予等量生理盐水,实验组灌喂骨痹通消颗粒浓缩液,1 d 1次,持续8 w,所有兔经腹腔麻醉后体外心脏采血,处死实验动物,取出各组兔双侧股骨头,对股骨头组织切片标本进行苏木精-伊红染色;免疫酶联吸附法检测血清ALP、TGF-β1水平;免疫组织化学染色法观察股骨头区细胞自噬情况;RT-qPCR检测组织中凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达水平;Western blot检测通路蛋白Akt、LC3-Ⅱ、mTOR及ULK1等表达水平。结果与对照组相比,模型组兔骨组织染色切片中骨小梁稀疏变细,空骨陷窝数明显增多(P<0.05),自噬蛋白LC3-Ⅱ、ULK1以及凋亡基因Bax表达水平显著上升(P<0.05),通路蛋白Akt和mTOR、抗凋亡基因Bcl-2、成骨相关因子ALP和TGF-β1表达下降(P<0.05),经骨痹通消颗粒干预治疗后,实验组兔骨组织空骨陷窝情况和细胞凋亡情况均显著改善(P<0.05),实验组LC3-Ⅱ、ULK1和Bax表达下降(P<0.05),Akt、mTOR、Bcl-2、ALP和TGF-β1表达显著提高(P<0.05)。结论经过骨痹通消颗粒干预后,SANFH兔模型自噬水平较前降低,细胞凋亡减少,骨修复增加,在动物实验层面有效延缓骨坏死进程,表明骨痹通消颗粒在SANFH早期具有积极的治疗作用。
