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葛根素靶向抑制Notch1/PI3K/AKT/mTORC1通路抑制胃癌进展 被引量:2
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作者 李文哲 刘芳芳 《生命的化学》 2025年第2期332-339,共8页
本文探讨了葛根素对胃癌(gastric cancer,GC)进展的影响及相关分子机制。使用不同浓度葛根素处理GC细胞系AGS、N87,并将细胞分为空白组(0 mg/mL)、低浓度葛根素组(10 mg/mL)、中浓度葛根素组(50 mg/mL)和高浓度葛根素组(100 mg/mL)。通... 本文探讨了葛根素对胃癌(gastric cancer,GC)进展的影响及相关分子机制。使用不同浓度葛根素处理GC细胞系AGS、N87,并将细胞分为空白组(0 mg/mL)、低浓度葛根素组(10 mg/mL)、中浓度葛根素组(50 mg/mL)和高浓度葛根素组(100 mg/mL)。通过克隆形成实验检测各组细胞增殖活性,划痕实验检测各组细胞迁移能力,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,Western blot检测各组细胞Notch1受体、Notch1受体活化片段(Notch1 intracellular domain,Notch1 ICD)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、磷酸化PI3K(phosphorylated PI3K,p-PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、pmTORC1(Ser2448)、p-mTORC2(Ser2481)、凋亡相关蛋白(Bax、Bad)表达水平。构建裸鼠GC荷瘤模型,使用不同剂量葛根素饲喂,依据葛根素剂量将裸鼠分为对照组(0 mg/kg)、低剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(10 mg/kg)和高剂量组(20 mg/kg),观察各组裸鼠GC体内生长差异。向各葛根素处理组细胞培养体系中加入Notch1受体激动剂Jagged-1多肽(10μg/mL),再次检测上述指标。结果发现,与空白组细胞相比,葛根素以浓度依赖性方式抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭活性。与空白组细胞相比,葛根素处理组细胞Notch1受体水平更高,而Notch1 ICD水平较低;p-PI3K、p-AKT、p-mTORC1水平更低,而P3IK、AKT、mTOR、p-mTORC2水平无显著差异;Bax和Bad表达水平显著升高。与对照组裸鼠相比,葛根素饲喂组裸鼠形成的GC肿瘤生长均显著减缓。加入Jagged-1后,各葛根素处理组细胞增殖、迁移和侵袭活性均显著升高,p-PI3K、p-AKT、p-mTORC1(Ser2448)表达水平均显著升高。由此得出结论,葛根素通过靶向抑制Notch1/PI3K/AKT/mTORC1通路的激活进而抑制胃癌细胞的恶性生物学行为,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 葛根素 NOTCH1 PI3K akt mtorc1 胃癌
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丹红注射液对动脉粥样硬化小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化及PI3K/Akt/mTORC1信号通路的影响 被引量:13
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作者 周明学 李思耐 +2 位作者 刘卫红 尚菊菊 刘红旭 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2019年第8期46-50,共5页
目的观察丹红注射液对动脉粥样硬化(AS)小鼠自噬基因Atg13启动子区甲基化及自噬信号通路PI3K/Akt/mTORC1的影响,探讨其可能的作用机制。方法40只8周龄雄性ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、阳性对照组和丹红注射液低、高剂量... 目的观察丹红注射液对动脉粥样硬化(AS)小鼠自噬基因Atg13启动子区甲基化及自噬信号通路PI3K/Akt/mTORC1的影响,探讨其可能的作用机制。方法40只8周龄雄性ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养6周,随机分为模型组、阳性对照组和丹红注射液低、高剂量组,每组10只,各给药组给予相应药物干预。6周后RT-PCR检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13、Atg3和Atg4a的mRNA表达;Westernblot检测AS小鼠主动脉Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ、PI3K、Akt、p-Akt、mTORC1和p-mTORC1的蛋白表达;采用亚硫酸氢盐测序法检测AS小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平。结果与模型组比较,丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Beclin1蛋白表达明显升高,丹红注射液低剂量组小鼠主动脉LC3Ⅱ/Ⅰ表达明显升高(P<0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉Atg13、Atg3和Atg4a mRNA表达显著升高(P<0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉自噬基因Atg13启动子区甲基化水平明显降低(P<0.01),丹红注射液高、低剂量组小鼠主动脉p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.01),丹红注射液高剂量组小鼠主动脉p-mTORC1蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论丹红注射液防治AS的机制可能与降低模型小鼠主动脉Atg13启动子区甲基化水平、抑制PI3K/Akt/mTORC1信号通路和促进细胞自噬有关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 丹红注射液 自噬 DNA甲基化 Atg13 PI3K/akt/mtorc1信号通路 小鼠
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不同治法方药对抑郁模型大鼠海马组织PI3K/Akt/mTORC1信号通路的影响 被引量:16
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作者 倪慧 张铭珈 +2 位作者 敖海清 朱艳芳 徐志伟 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3273-3276,共4页
目的:基于PI3K/Akt/mTORC1信号通路,探讨不同治法方药抗抑郁效应的作用机制。方法:60只大鼠随机分为空白组、模型组、右归丸组、四逆散组、四君子组,建立慢性不可预知应激(CUS)抑郁模型,灌胃42d后检测行为学、海马神经元尼氏染色及通路... 目的:基于PI3K/Akt/mTORC1信号通路,探讨不同治法方药抗抑郁效应的作用机制。方法:60只大鼠随机分为空白组、模型组、右归丸组、四逆散组、四君子组,建立慢性不可预知应激(CUS)抑郁模型,灌胃42d后检测行为学、海马神经元尼氏染色及通路相关蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠糖水偏好率显著降低、旷场水平运动总路程显著减少(P<0.01)、海马神经元损伤、尼氏小体减少,右归丸组、四逆散组、四君子组对其均有改善作用;模型组PI3K、Akt、mTOR磷酸化蛋白与总蛋白比值以及Raptor蛋白表达较空白组显著下调(P<0.01,P<0.05),均可被四逆散显著上调(P<0.01),而右归丸组、四君子组仅有mTOR、PI3K蛋白表达水平上调(P<0.01)。结论:四逆散可能通过激活PI3K/Akt/m TORC1信号通路来保护海马神经元并发挥抗抑郁作用。 展开更多
关键词 抑郁 海马 神经元 PI3K/akt/mtorc1信号通路 右归丸 四逆散 四君子汤
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三七调节肾脏PI3K/Akt/mTORC1-线粒体能量代谢治疗血瘀证慢性肾衰竭大鼠的机制研究 被引量:15
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作者 刘晓羽 黄志敏 +7 位作者 邱少彬 邱菲 黄筱瑛 江旖旎 林爱桃 张知英 唐宇 吴金玉 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1888-1895,共8页
观察三七对血瘀证阿霉素肾纤维化大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1)信号通路及线粒体能量... 观察三七对血瘀证阿霉素肾纤维化大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1)信号通路及线粒体能量代谢的影响,探讨三七发挥肾保护的作用机制。将30只造模成功的阿霉素肾纤维化雄性大鼠随机分为模型组、三七低剂量组、三七中剂量组、三七高剂量组、阳性对照组(盐酸贝那普利组),每组6只;将6只清洁级SD雄性大鼠分为正常组。正常组和模型组给予生理盐水,治疗组分别给予相应的药物,给药8周后,检测各组大鼠肾功能,肾脏病理,肾组织腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)含量和Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性,肾组织中ATP5B、mTORC1、p70核糖体S6激酶(70 kDa ribosomal protein S6 kinase,P70S6K)及P85、Akt、p-Akt、SH2域肌醇磷酸酶(SH2-containing inositol phosphatase,SHIP2)蛋白表达。结果显示,与正常组相比,模型组大鼠尿素氮(urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)水平均显著升高(P<0.01);与模型组相比,三七各剂量组和阳性对照组大鼠BUN、SCr水平均呈下降趋势,其中,三七中、高剂量组与阳性对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,三七各剂量组与阳性对照组肾组织的空泡样、纤维样改变,肾小球萎缩,肾小管囊性扩张,大量炎性细胞的浸润等病理改变均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组肾组织线粒体ATP含量、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg2+-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组比较,三七中、高剂量组和阳性对照组肾组织线粒体ATP含量、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性显著升高(P<0.05)。与模型组相比,三七中、高剂量组以及阳性对照组ATP5B和SHIP2表达增加,mTORC1、P70S6K、P85、Akt和p-Akt表达降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。综上,三七可能通过抑制PI3K/Akt/mTORC1-线粒体能量代谢通路的活化,发挥抗纤维化机制,进而实现肾保护作用。 展开更多
关键词 三七 血瘀 线粒体能量代谢 PI3K/akt/mtorc1 肾纤维化
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基于PI3K/AKT/mTORC1信号通路探讨三七对阿霉素肾纤维化大鼠自噬水平的影响 被引量:2
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作者 黄诗棋 吴金玉 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期275-278,共4页
目的基于PI3K/AKT/mTORC1信号通路,通过实验观察三七对阿霉素肾纤维化大鼠自噬水平的影响。方法选用健康雄性清洁级SD(Sprasue-Dawley)大鼠60只,随机分成正常组、模型组、三七低剂量治疗组、三七中剂量治疗组、三七高剂量治疗组和贝那... 目的基于PI3K/AKT/mTORC1信号通路,通过实验观察三七对阿霉素肾纤维化大鼠自噬水平的影响。方法选用健康雄性清洁级SD(Sprasue-Dawley)大鼠60只,随机分成正常组、模型组、三七低剂量治疗组、三七中剂量治疗组、三七高剂量治疗组和贝那普利组共6组,每组10只。除正常组大鼠以外,各组大鼠均采用阿霉素诱导建立肾纤维化大鼠模型。造模成功后,对正常组、模型组均予以生理盐水[10mL/(kg·d)]灌胃;三七低、中、高剂量治疗组分别予以三七颗粒0.45g/(kg·d)、0.9g/(kg·d)、1.8g/(kg·d)水溶液灌胃,贝那普利组予以盐酸贝那普利5mg/(kg·d)药液灌胃,每天一次,共干预8周。分别采用HE、Masson染色方法观察肾脏组织病理情况;采用蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)法检测肾组织中PI3K、AKT、mTORC1、P62、Beclin1、LC3的蛋白表达水平。结果(1)与正常组相比,模型组肾组织可见空泡样、纤维样改变,肾小球萎缩,肾小管囊性扩张,大量炎性细胞的浸润,而三七各个剂量组与贝那普利组肾组织的上述病理改变均有不同程度的改善,且三七中、高剂量组和贝那普利组肾组织病变改善最为明显。(2)与正常组相比,模型组的PI3K、AKT、mTORC1、P62蛋白表达量明显增加(P<0.05);与模型组相比较,三七各个剂量组与贝那普利组PI3K、AKT、mTORC1、P62的表达量均有不同程度减少,其中,三七中、高剂量组与贝那普利组PI3K、AKT、mTORC1、P62的表达量明显减少(P<0.05)。(3)与正常组相比,模型组的Beclin1、LC3蛋白表达量明显减少(P<0.05);与模型组相比较,三七各个剂量组Beclin1、LC3的表达量随着三七剂量的增加均有不同程度增加,其中,三七中、高剂量组Beclin1、LC3的表达量和贝那普利组LC3的表达量明显增加(P<0.05)。结论三七可能通过抑制PI3K/AKT/mTORC1信号通路的活化,进而上调肾组织自噬水平,从而发挥抗肾纤维化的作用。 展开更多
关键词 肾纤维化 三七 PI3K/akt/mtorc1信号通路 自噬
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MiR-146a-5p targeting SMAD4 and TRAF6 inhibits adipogenensis through TGF-β and AKT/mTORC1 signal pathways in porcine intramuscular preadipocytes 被引量:14
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作者 Que Zhang Rui Cai +2 位作者 Guorong Tang Wanrong Zhang Weijun Pang 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2021年第1期220-235,共16页
Background: Intramuscular fat(IMF) content is a vital parameter for assessing pork quality. Increasing evidence has shown that microRNAs(miRNAs) play an important role in regulating porcine IMF deposition. Here, a nov... Background: Intramuscular fat(IMF) content is a vital parameter for assessing pork quality. Increasing evidence has shown that microRNAs(miRNAs) play an important role in regulating porcine IMF deposition. Here, a novel miRNA implicated in porcine IMF adipogenesis was found, and its effect and regulatory mechanism were further explored with respect to intramuscular preadipocyte proliferation and differentiation.Results: By porcine adipose tissue miRNA sequencing analysis, we found that miR-146a-5p is a potential regulator of porcine IMF adipogenesis. Further studies showed that miR-146a-5p mimics inhibited porcine intramuscular preadipocyte proliferation and differentiation, while the miR-146a-5p inhibitor promoted cell proliferation and adipogenic differentiation. Mechanistically, miR-146a-5p suppressed cell proliferation by directly targeting SMAD family member 4(SMAD4) to attenuate TGF-β signaling. Moreover, miR-146a-5p inhibited the differentiation of intramuscular preadipocytes by targeting TNF receptor-associated factor 6(TRAF6) to weaken the AKT/mTORC1 signaling downstream of the TRAF6 pathway.Conclusions: MiR-146a-5p targets SMAD4 and TRAF6 to inhibit porcine intramuscular adipogenesis by attenuating TGF-β and AKT/mTORC1 signaling, respectively. These findings provide a novel miRNA biomarker for regulating intramuscular adipogenesis to promote pork quality. 展开更多
关键词 Adipogenesis akt/mtorc1 signal pathway MiR-146a-5p Porcine intramuscular fat SMAD4 TGF-βsignal pathway TRAF6
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消瘰丸基于PI3K/Akt/mTORC1通路对实验性甲状腺肿大鼠的干预机制 被引量:15
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作者 梁伟 孙禹 +2 位作者 陈丽新 程伟 李文兰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期30-36,共7页
目的:通过观察消瘰丸对实验性甲状腺肿大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(m TORC1)通路的影响,探究其对实验性甲状腺肿大鼠的治疗效果。方法:购买60只5月龄SPF级SD大鼠,雌雄各半,其中10只作为... 目的:通过观察消瘰丸对实验性甲状腺肿大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(m TORC1)通路的影响,探究其对实验性甲状腺肿大鼠的治疗效果。方法:购买60只5月龄SPF级SD大鼠,雌雄各半,其中10只作为正常组,其余大鼠灌服丙基硫氧嘧啶(PTU)溶液构建结节性甲状腺肿大鼠模型,建模成功后随机分为模型组、左甲状腺素钠片组、消瘰丸低、中、高剂量组各10只。左甲状腺素钠片组采用15μg·kg^(-1)的左甲状腺素钠片灌胃,消瘰丸低、中、高剂量组分别采用低剂量10 g·kg^(-1)、中剂量20 g·kg^(-1)、高剂量30 g·kg^(-1)消瘰丸灌胃,正常组、模型组采用等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。干预4周后采用5%苯巴比妥做常规腹腔注射麻醉后处死,显微镜观察大鼠病理组织学、采用罗氏电化学发光免疫分析仪检测血清甲状腺激素水平、酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清细胞生长因子、采用高效液相色谱仪检测神经递质、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PI3K/Akt/m TORC1信号通路蛋白表达量。结果:与正常组比较,模型组碱性成纤维生长因子(b FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、5-羟色胺(5-HT)、促甲状腺激素(TSH)水平、PI3K、Akt、m TORC1蛋白表达量升高,去甲肾上腺素(NE)、三碘甲腺原氨酸(T_(3))、四碘甲腺原氨酸(T_(4))、游离三碘甲状腺原氨酸(FT_(3))、游离甲状腺激素(FT_(4))水平降低(P<0.05);与模型组比较,左甲状腺素钠片组、消瘰丸低、中、高剂量组b FGF、VEGF、IGF-1、5-HT、TSH水平,PI3K、Akt、m TORC1蛋白表达量降低,NE、T_(3)、T_(4)、FT_(3)、FT_(4)水平升高(P<0.05);左甲状腺素钠片组比较,消瘰丸低、中、高剂量组b FGF、VEGF、IGF-1、5-HT、TSH水平,PI3K、Akt、m TORC1蛋白表达量降低,NE、T_(3)、T_(4)、FT_(3)、FT_(4)水平升高(P<0.05)。结论:消瘰丸可能作用于PI3K/Akt/m TORC1信号通路,发挥其治疗结节性甲状腺肿的作用,且表现为剂量依赖。 展开更多
关键词 消瘰丸 结节性甲状腺肿 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K) 蛋白激酶B(akt) 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mtorc1)
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塞来昔布通过c-Myc及Akt/mTORC1信号通路延缓c-Myc诱导小鼠肝细胞癌的发展 被引量:2
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作者 莫雅斯 饶辉 +2 位作者 盛磊 胡俊杰 郑国华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期342-347,共6页
目的探讨塞来昔布对c-Myc诱导小鼠肝细胞癌发展的作用及其机制。方法选取FVB/N小鼠,尾静脉高压注射c-Myc建立肝细胞癌模型,将小鼠分为4组(每组7只):正常组、模型组、塞来昔布低、高剂量组(150、300 mg·kg^-1)。给药干预6周后采集样... 目的探讨塞来昔布对c-Myc诱导小鼠肝细胞癌发展的作用及其机制。方法选取FVB/N小鼠,尾静脉高压注射c-Myc建立肝细胞癌模型,将小鼠分为4组(每组7只):正常组、模型组、塞来昔布低、高剂量组(150、300 mg·kg^-1)。给药干预6周后采集样本,测定小鼠体重和肝重,比较各组小鼠肝脏和肝脏指数差异;HE检测小鼠肝脏组织病变情况;IHC检测小鼠肝脏组织中Ki67蛋白表达情况;West-ern blot检测小鼠肝组织中c-Myc、p-Akt T308、p-Akt S473、p-4EBP1蛋白的表达水平。结果与正常组相比,模型组肝脏重量和肝重指数明显增大;肝脏组织多核、固缩现象明显;细胞核大量Ki67阳性染色;c-Myc和p-Akt T308、p-Akt S473、p-4EBP1蛋白表达明显增加。不同剂量塞来昔布干预后能明显抑制和改善上述指标的变化。结论塞来昔布可以通过调控c-Myc及Akt/mTORC1信号通路延缓c-Myc诱导小鼠肝细胞癌的发展。 展开更多
关键词 肝细胞癌 塞来昔布 增殖 C-MYC akt/mtorc1信号通路 FVB/N小鼠
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Notch/Hes1-PI3K/AKT/mTORC1信号轴调控银屑病样皮炎小鼠白细胞介素17A表达的研究 被引量:8
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作者 李新新 王燕芹 +1 位作者 邢潇匀 马蕾(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期1671-1676,共6页
目的:探讨Notch/Hes1-PI3K/AKT/mTORC1信号轴对银屑病样皮炎小鼠IL-17A表达的影响。方法:将24只雄性BALB/c小鼠按随机数字法分为对照组、银屑病样皮炎小鼠模型组和γ分泌酶抑制剂DAPT干预组,每组8只。观察各组实验小鼠皮损改变及组织病... 目的:探讨Notch/Hes1-PI3K/AKT/mTORC1信号轴对银屑病样皮炎小鼠IL-17A表达的影响。方法:将24只雄性BALB/c小鼠按随机数字法分为对照组、银屑病样皮炎小鼠模型组和γ分泌酶抑制剂DAPT干预组,每组8只。观察各组实验小鼠皮损改变及组织病理学变化,RT-PCR检测小鼠皮肤组织中Hes1、PTEN、AKT、mTORC1及IL-17A mRNA表达,Western blot检测小鼠皮肤组织中Hes1、PTEN、p-AKT、p-mTOR及IL-17A蛋白表达。结果:肉眼观察干预组小鼠银屑病样皮炎严重程度明显轻于模型组,组织病理显示其表皮增厚及真皮炎症细胞浸润程度均明显轻于模型组,且表皮厚度测量明显薄于模型组[(40.57±6.23)μm vs(105.72±7.46)μm,P<0.01]。3组小鼠皮肤组织中Hes1、PTEN、AKT、mTORC1、IL-17A mRNA表达(F/χ2值分别为18.74、28.96、16.74、6.36和17.56)和Hes1、PTEN、p-AKT、p-mTOR、IL-17A蛋白表达(F/χ2值分别为11.77、9.92、16.98、7.69和34.26)差异均有统计学意义(均P<0.01)。模型组PTEN mRNA(0.25±0.14)和蛋白(0.39±0.21)表达均显著低于对照组(P<0.05),干预组PTEN mRNA和蛋白表达(1.02±0.21、0.66±0.20)显著高于模型组(均P<0.01)。模型组Hes1、AKT、mTORC1、IL-17A mRNA和蛋白表达均显著高于对照组(均P<0.01),而干预组上述指标mRNA和蛋白表达均显著低于模型组(均P<0.05)。结论:Notch/Hes1信号通路可能通过负向调控PTEN活化PI3K/AKT/mTORC1信号通路,促进IL-17A的表达和分泌,在银屑病疾病过程中发挥致炎作用。 展开更多
关键词 银屑病 NOTCH 发状分裂相关增强子1 PI3K/akt/mTOR通路 IL-17A
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8-氮鸟嘌呤通过Akt/mTORC1/ULK1诱导细胞自噬增强其在肝癌细胞中的耐药性 被引量:2
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作者 徐俊亭 李殿龙 +5 位作者 王旭 蔺洁茹 郝燕飞 张鑫朋 刁爱坡 刘振兴 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期799-807,共9页
细胞自噬是真核生物中进化保守的对细胞内容物进行降解的生理过程,其利用溶酶体将细胞内物质降解再利用,在应激条件下可以促进癌细胞的存活。8-氮鸟嘌呤(8-azaguanine,8-AG)是一种嘌呤核苷酸生物合成的抑制剂,对多种肿瘤细胞具有抗肿瘤... 细胞自噬是真核生物中进化保守的对细胞内容物进行降解的生理过程,其利用溶酶体将细胞内物质降解再利用,在应激条件下可以促进癌细胞的存活。8-氮鸟嘌呤(8-azaguanine,8-AG)是一种嘌呤核苷酸生物合成的抑制剂,对多种肿瘤细胞具有抗肿瘤活性。然而,耐药性限制了8-AG作为抗癌药物的应用,其耐药性机制尚不清楚。本研究发现8-AG通过诱导细胞自噬减弱其细胞毒性而产生耐药性。利用HepG2和SMMC-7721肝癌细胞系进行药物处理,结果显示8-AG抑制肿瘤细胞活力,并且通过上调促凋亡蛋白BCL-2样蛋白11(BCL-2-like protein 11,Bim)中的BimS亚型水平来诱导内源性凋亡。此外,Western blot实验检测结果表明8-AG通过抑制Akt(protein kinase B)/mTORC1(mammalian target of rapamycin complex 1)信号通路激活ULK1(Unc-51-like autophagy activating kinase 1)蛋白,从而诱导自噬发生。敲低自噬相关基因7(autophagy-related gene 7,ATG7)显著增加BimS的蛋白水平,促进8-AG引起的细胞死亡;联合使用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)或巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf A1)促进8-AG诱导的肝癌细胞凋亡。以上结果表明,8-AG诱导自噬导致肿瘤细胞产生耐药性,抑制自噬可增加癌细胞对其的敏感性。 展开更多
关键词 8-氮鸟嘌呤 耐药性 细胞自噬 蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1 细胞凋亡
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胃饥饿素通过调控PI3K-AKT-mTORC1通路改善废用性肌肉萎缩研究
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作者 张笑笑 王萍 +3 位作者 李奕冰 冯海龙 何伟涵 张英剑 《胃肠病学和肝病学杂志》 2026年第2期219-223,共5页
目的 探讨胃饥饿素通过调控PI3K-AKT-mTORC1信号通路在小鼠废用性肌萎缩中的作用,为胃饥饿素改善小鼠盆底骨骼肌功能障碍导致的运动型便秘的治疗提供新的视角与思路。方法 构建体外废用性肌萎缩细胞模型,进行药物干预,利用Western blott... 目的 探讨胃饥饿素通过调控PI3K-AKT-mTORC1信号通路在小鼠废用性肌萎缩中的作用,为胃饥饿素改善小鼠盆底骨骼肌功能障碍导致的运动型便秘的治疗提供新的视角与思路。方法 构建体外废用性肌萎缩细胞模型,进行药物干预,利用Western blotting法检测PI3K-AKT-mTORC1信号通路相关蛋白AKT、p-AKT的表达及肌萎缩相关蛋白FoxO3a、p-FoxO3a的表达;另外,建立废用性肌萎缩小鼠动物模型,药物干预28 d后处死,分离后肢肌肉测量湿重,HE染色观察后肢肌肉病理变化,Western blotting法检测肌萎缩相关蛋白MAFbx和MuRF1表达情况。结果 (1)体外废用性肌萎缩细胞实验结果提示:胃饥饿素干预后AKT蛋白表达有上升趋势,p-AKT蛋白表达上调(P<0.01),FoxO3a蛋白表达有下降趋势,p-FoxO3a蛋白表达下调(P<0.01);(2)废用性肌萎缩小鼠动物实验结果提示:胃饥饿素分泌增加可以使模型组小鼠体质量改善,使后肢肌肉湿重增加,HE染色显示小鼠后肢肌肉萎缩的改善,肌萎缩相关蛋白MAFbx和MuRF1蛋白表达上调。结论 胃饥饿素触发PI3K-AKT-mTORC1信号通路,下调肌萎缩相关蛋p-FoxO3a,进而改善小鼠废用性肌萎缩,为盆底骨骼肌运动功能障碍型便秘的治疗提供新的理论基础。 展开更多
关键词 废用性肌萎缩 胃饥饿素 ATROGIN-1 MuRF1 PI3K-akt-mtorc1信号通路
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益气解毒方通过调控AKT1/GLUT1信号通路抑制鼻咽癌的恶性进展
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作者 许红淼 何兰 +6 位作者 熊雨 邹芳 蔺婷 江志超 唐乐 何迎春 周芳亮 《南方医科大学学报》 北大核心 2026年第2期259-270,共12页
目的研究AKT1/GLUT1信号通路在益气解毒方抗鼻咽癌中的作用。方法采用分子对接技术分析益气解毒方活性成分与AKT1的结合能力,MTT及RTCA法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Matrigel侵袭小室法检测细胞侵袭能力,Western bl... 目的研究AKT1/GLUT1信号通路在益气解毒方抗鼻咽癌中的作用。方法采用分子对接技术分析益气解毒方活性成分与AKT1的结合能力,MTT及RTCA法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Matrigel侵袭小室法检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测蛋白的表达变化。鼻咽癌裸鼠移植瘤模型分为对照组(等体积生理盐水灌胃)、益气组(以15.357 g·kg^(-1)·d^(-1)的益气解毒方灌胃)、5-Fu组(腹腔注射8 g·kg^(-1)·d^(-1)的5-氟尿嘧啶),10只/组,5-Fu组每2 d腹腔注射1次,其余2组灌胃1次/d,共给药18 d。结果与溶剂组比较,益气解毒方组细胞增殖速度、迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05),p-AKT、GLUT1、XIAP、N-cadherin及Vimentin表达下调(P<0.05);与单用益气解毒方组相比,GLUT1或AKT1激活剂与益气解毒方联用组细胞增殖速率提高,迁移和侵袭能力增强(P<0.05),XIAP、N-cadherin及Vimentin表达上调(P<0.05);在鼻咽癌裸鼠移植瘤模型中,益气解毒方显著抑制肿瘤的生长并下调了肿瘤组织中AKT、p-AKT和GLUT1的表达(P<0.05)。结论益气解毒方抑制鼻咽癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制与AKT1/GLUT1信号通路有关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 益气解毒方 akt1/GLUT1 侵袭与迁移
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根皮苷通过调节IRS-1/PI3K/Akt信号通路改善T2DM大鼠的糖脂代谢紊乱
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作者 努尔·艾力 曹清雨 +3 位作者 刘欢 何军伟 钟卫红 曹岚 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第3期139-148,共10页
目的:观察根皮苷改善2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏糖脂代谢紊乱的药效学作用,并基于胰岛素受体底物-1(IRS-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路探讨其作用机制。方法:采用高脂饲料和链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,分为空白组,... 目的:观察根皮苷改善2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏糖脂代谢紊乱的药效学作用,并基于胰岛素受体底物-1(IRS-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路探讨其作用机制。方法:采用高脂饲料和链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,分为空白组,模型组,二甲双胍组(300 mg·kg^(-1)),根皮苷高、低剂量组(100、25 mg·kg^(-1)),灌胃给药6周,观察大鼠体质量和空腹血糖(FBG)的变化,开展口服葡萄糖耐量实验(OGTT);全自动生化分析仪检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、糖化血清蛋白(GSP)水平、天冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测空腹胰岛素(FINS)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α;生化法测定肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;计算胰腺指数、肝脏指数、胰岛素抵抗指数;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝脏和胰腺病理变化,免疫荧光法(IF)检测胰腺组织中胰岛素和胰高血糖素的变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织IRS-1/PI3K/Akt通路相关蛋白及其下游糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)和叉头盒转录因子O1(FoxO1)蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量持续下降、FBG水平明显升高,OGTT血糖曲线下面积(AUC)、GSP、TC、TG、LDL-C、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及胰腺指数、肝脏指数、胰岛素抵抗指数明显升高,HDL-C、SOD、FINS水平明显降低(P<0.05,P<0.01);组织学结果显示,模型组大鼠胰岛萎缩,呈现显著结构紊乱,胰岛素阳性β细胞显著减少(P<0.01),胰高血糖素阳性α细胞显著增加(P<0.01);模型组大鼠肝有炎性细胞浸润,部分细胞坏死,而且肝脏磷酸化(p)-IRS-1/IRS-1、p-GSK-3β/GSK-3β、p-FoxO1/FoxO1蛋白表达显著升高(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠糖尿病症状有所改善,体质量和FBG变化趋势接近空白组,OGTT-AUC、GSP、TC、TG、LDL-C、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及胰腺指数、肝脏指数、胰岛素抵抗指数明显减少(P<0.05,P<0.01),HDL-C、SOD、FINS水平明显升高(P<0.05,P<0.01);各给药组大鼠胰腺和肝脏病理改变得到有效改善,胰腺中胰岛素阳性β细胞显著增加(P<0.01),胰高血糖素阳性α细胞显著减少(P<0.01),肝脏中p-IRS-1/IRS-1、p-GSK-3β/GSK-3β、p-FoxO1/FoxO1蛋白表达显著减少(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:根皮苷逆转T2DM大鼠出现的体质量减轻和FBG异常升高,改善血脂、氧化应激、炎症水平,缓解胰岛素抵抗,且对肝脏和胰腺有一定的保护作用,其降糖作用机制可能是通过调节IRS-1/PI3K/Akt信号通络,降低GSK-3β和FoxO1活性,促进肝脏糖原合成,抑制肝脏糖异生功能,进而发挥改善糖脂代谢紊乱。 展开更多
关键词 根皮苷 胰岛素受体底物-1(IRS-1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(akt) 2型糖尿病(T2DM) 胰岛素抵抗 糖脂代谢
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沉默PAK1通过阻断PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导胶质母细胞瘤细胞自噬发挥抗肿瘤效应
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作者 秦立鹏 康婧 +2 位作者 贾培雷 王凯 薛松林 《中国医科大学学报》 北大核心 2026年第1期41-47,共7页
目的探讨沉默p21活化激酶1(PAK1)表达对人胶质母细胞瘤(GBM)细胞生长活性的抑制效应及可能机制。方法通过GEPIA在线数据库分析GBM患者癌组织中PAK1 mRNA表达及其与患者预后的关系。采用实时定量PCR检测人正常胶质细胞系NHA及不同人GBM... 目的探讨沉默p21活化激酶1(PAK1)表达对人胶质母细胞瘤(GBM)细胞生长活性的抑制效应及可能机制。方法通过GEPIA在线数据库分析GBM患者癌组织中PAK1 mRNA表达及其与患者预后的关系。采用实时定量PCR检测人正常胶质细胞系NHA及不同人GBM细胞系中PAK1 mRNA表达。将U251细胞分为沉默阴性对照(si-NC)组、si-PAK1组、si-PAK1+通路激活剂(740Y-P)组和si-PAK1+自噬抑制剂氯喹(CHQ)组。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,平板克隆法检测细胞克隆形成能力,Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测细胞中PAK1 m RNA表达,Western blotting检测细胞中通路及自噬相关蛋白表达。结果GBM组织中PAK1 mRNA表达水平明显高于正常脑组织(P<0.05),且PAK1 mRNA高表达的患者预后较差。沉默PAK1表达可明显降低细胞增殖活性(P<0.05),减少细胞克隆团数量,降低细胞迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡(P<0.05),下调细胞中p-PI3K、p-AKT、p-m TOR和p62蛋白表达水平,上调Beclin-1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值(P<0.05)。740Y-P或CHQ干预处理后,沉默PAK1表达引发的上述变化均被逆转。结论沉默PAK1表达可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导细胞自噬,从而阻止GBM恶性进展。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 p21活化激酶1 PI3K/akt/mTOR信号通路 自噬
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秦皮乙素调控AKT/SKP2/MTH1通路诱导急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用研究
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作者 宋卫华 褚福营 +5 位作者 谢玮 陈金亮 赵枰 仇宏 陶健 陈相 《中国药房》 北大核心 2026年第1期36-41,共6页
目的探讨秦皮乙素(Esc)通过调控蛋白激酶B(AKT)/S期激酶相关蛋白2(SKP2)/MutT同源酶1(MTH1)通路诱导急性髓系白血病(AML)HL-60细胞凋亡的作用。方法将HL-60细胞分为Control组(常规培养)、Esc低浓度组(L-Esc组,25μmol/L Esc)、Esc中浓度... 目的探讨秦皮乙素(Esc)通过调控蛋白激酶B(AKT)/S期激酶相关蛋白2(SKP2)/MutT同源酶1(MTH1)通路诱导急性髓系白血病(AML)HL-60细胞凋亡的作用。方法将HL-60细胞分为Control组(常规培养)、Esc低浓度组(L-Esc组,25μmol/L Esc)、Esc中浓度组(M-Esc组,50μmol/L Esc)、Esc高浓度组(H-Esc组,100μmol/L Esc)、Esc高浓度+SC79(AKT激动剂)组(100μmol/L Esc+5μmol/L SC79)。采用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;采用CM-H2DCFDA荧光探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)]和AKT/SKP2/MTH1通路相关蛋白[磷酸化AKT(p-AKT)、AKT、SKP2、MTH1]及AKT上下游效应蛋白磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和周期蛋白依赖性激酶抑制剂1(P21)、周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B(P27)的表达。结果与Control组相比,L-Esc组、M-Esc组、H-Esc组细胞的存活率、集落数以及AKT、PI3K蛋白的磷酸化水平和SKP2、MTH1、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而ROS水平、细胞凋亡率和Bax、cleaved caspase-3、P21、P27蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),且Esc的作用具有浓度依赖性(P<0.05);与H-Esc组相比,Esc高浓度+SC79组细胞上述指标均被显著逆转(P<0.05)。结论Esc可能通过抑制AKT/SKP2/MTH1通路,促进HL-60细胞中ROS的大量产生及细胞凋亡程序的启动,最终有效抑制HL-60细胞增殖。 展开更多
关键词 秦皮乙素 急性髓系白血病 HL-60细胞 蛋白激酶B 细胞凋亡 akt/SKP2/MTH1通路
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美洲大蠊提取物调控JAK1/PI3K/AKT信号通路干预磨玻璃结节型患者源性早期肺腺癌类器官的机制研究
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作者 何佳玮 黄春霞 +11 位作者 钟杨 马琼 李佳 赖恒周 肖平 任益锋 耿福能 吴桃清 蒋义芳 李雪珂 由凤鸣 付西 《中国中药杂志》 北大核心 2026年第2期482-492,共11页
该研究旨在利用患者源性类器官(PDO)模型,阐明传统中药美洲大蠊提取物(PAE)对磨玻璃结节(GGN)型早期肺腺癌的干预作用及分子机制,成功构建了GGN型患者源性早期肺腺癌类器官(GGN-PDO)模型。药品质控及成分鉴定层面,利用高效液相色谱(HPLC... 该研究旨在利用患者源性类器官(PDO)模型,阐明传统中药美洲大蠊提取物(PAE)对磨玻璃结节(GGN)型早期肺腺癌的干预作用及分子机制,成功构建了GGN型患者源性早期肺腺癌类器官(GGN-PDO)模型。药品质控及成分鉴定层面,利用高效液相色谱(HPLC)对PAE游离氨基酸与肽类含量进行测定,进一步采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)对PAE主要成分进行解析,并应用方差分析评估同一批次药品间的相似性(皮尔逊相关系数范围0.87~0.99)并实现质量控制。组织病理学层面,苏木素-伊红(HE)染色及关键分子标志物细胞角蛋白7(CK7)、甲状腺转录因子-1(TTF-1)、增殖细胞核抗原(Ki-67)的免疫组化(IHC)染色均表征了类器官的肿瘤组织特征。药效学评价显示,PAE能以剂量依赖方式显著抑制GGN-PDO的增殖及细胞活力,同时免疫荧光(IF)染色表明PAE处理可显著降低细胞增殖核心指标Ki-67的表达水平。流式细胞术定量分析证实PAE可显著诱导GGN-PDO细胞凋亡,且Western blot分析进一步确证了PAE处理可下调抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)的表达,上调促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,从而激活凋亡通路。尤为关键的是,首次发现PAE促进细胞凋亡的作用机制与抑制Janus激酶1(JAK1)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路有关,表现为PAE干预后显著降低JAK1、PI3K、p-PI3K、AKT及p-AKT蛋白水平。综上,该研究首次利用与临床高度相关的GGN-PDO模型揭示PAE通过抑制JAK1/PI3K/AKT信号通路诱导早期肺腺癌细胞凋亡,为开发针对GGN的创新药物及非手术干预策略奠定了重要的理论与实验基础。 展开更多
关键词 美洲大蠊提取物 JAK1/PI3K/akt信号通路 磨玻璃结节 早期肺腺癌 患者源性类器官 细胞凋亡
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健脾疏肝方对非酒精性脂肪性肝病模型大鼠PI3K/AKT/HIF-1α信号通路表达的影响
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作者 王晓雨 李冀 +3 位作者 付强 付殷 韩东卫 胡晓阳 《中国中医药信息杂志》 2026年第1期84-90,共7页
目的研究健脾疏肝方对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝组织PI3K、AKT、mTOR、缺氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子A(VEGFA)表达的影响,探讨其调节NAFLD脂质代谢紊乱的作用机制。方法60只SD大鼠随机分为对照组12只和高脂饮食... 目的研究健脾疏肝方对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝组织PI3K、AKT、mTOR、缺氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子A(VEGFA)表达的影响,探讨其调节NAFLD脂质代谢紊乱的作用机制。方法60只SD大鼠随机分为对照组12只和高脂饮食组48只,分别予普通饲料和高脂饲料喂养8周构建NAFLD模型。模型复制成功后,将高脂饮食组大鼠随机分为模型组、辛伐他汀组和健脾疏肝方高、低剂量组,分别以相应药物灌胃6周。检测大鼠血脂及肝功能相关指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)],HE染色观察肝组织形态,油红O染色观察肝组织脂质蓄积情况,ELISA检测肝组织脂质代谢酶甾醇调节元件结合蛋白(SREBP)-1c、脂肪酸合酶(FASN)、3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受体(LDLR)含量,RT-PCR检测肝组织PI3K、AKT、mTOR、HIF-1α、VEGFA mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠肝湿重、肝指数明显升高(P<0.01),血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST及肝组织SREBP-1c、FASN、HMGCR含量明显升高(P<0.01),血清HDL-C和肝组织LDLR含量明显降低(P<0.01);肝组织出现明显脂肪变性,脂质蓄积增多,肝组织PI3K、AKT、mTOR、HIF-1α、VEGFA mRNA表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,健脾疏肝方高剂量组、辛伐他汀组大鼠肝湿重、肝指数明显降低(P<0.05,P<0.01),血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST及肝组织SREBP-1c、FASN、HMGCR含量明显降低,血清HDL-C和肝组织LDLR含量明显升高(P<0.05,P<0.01);肝组织脂肪变性减轻,脂质蓄积减少,肝组织PI3K、AKT、mTOR、HIF-1α、VEGFA mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论健脾疏肝方可能通过抑制NAFLD模型大鼠PI3K/AKT/HIF-1α信号通路相关分子表达调控脂质代谢关键酶SREBP-1c、FASN、HMGCR、LDLR水平,改善脂质代谢紊乱,减轻肝脏脂质蓄积,发挥治疗NAFLD作用。 展开更多
关键词 健脾疏肝方 非酒精性脂肪性肝病 脂肪酸合成 PI3K/akt/HIF-1α信号通路 大鼠
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桂枝-重楼有效组分调控PI3K/AKT/HIF-1α通路抑制子宫腺肌病进展的分子机制
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作者 曹涵 王欣 +2 位作者 王子璐 刘洋 师伟 《时珍国医国药》 北大核心 2026年第2期234-242,共9页
目的探讨桂枝-重楼有效成分联用抑制子宫腺肌病(AM)进展的相关分子机制。方法利用梯度浓度的重楼皂苷(PP)Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ(PPⅠ、PPⅡ、PPⅦ)及桂枝有效成分反式肉桂醛(TCA)分别处理子宫腺肌病原代细胞(AMDC),通过CCK-8法检测药物对AMDC活力... 目的探讨桂枝-重楼有效成分联用抑制子宫腺肌病(AM)进展的相关分子机制。方法利用梯度浓度的重楼皂苷(PP)Ⅰ、Ⅱ、Ⅶ(PPⅠ、PPⅡ、PPⅦ)及桂枝有效成分反式肉桂醛(TCA)分别处理子宫腺肌病原代细胞(AMDC),通过CCK-8法检测药物对AMDC活力的影响;正交实验筛选PPⅡ与TCA最佳配比(简称PT),Transwell检测细胞侵袭、迁移能力;网络药理学筛选出PT治疗AM的关键通路;利用梯度浓度的PT腹腔注射ICR小鼠30 d,评价药物的安全性;他莫昔芬滴喂新生ICR雌鼠建立AM模型小鼠,设置空白组、西药对照组、模型组、1/2PT剂量组和PT剂量组,按分组干预30 d后,HE染色法观察小鼠子宫形态学改变;免疫组化法检测子宫组织中p-PI3K、p-AKT、HIF-1α和CD31的表达水平改变。结果PPs中PPⅡ抑制AMDC细胞活力效果最佳;与PPⅡ和TCA单独使用相比,PT联合应用抑制AMDC细胞的侵袭和迁移效果更明显;网络药理学分析提示PI3K/AKT/HIF-1α通路是PT联用治疗AM的关键通路;梯度浓度的PT处理小鼠未见明显损伤;HE染色结果发现,PT可减少AM模型小鼠子宫内膜腺体向肌层侵袭的数量;免疫组化结果表明,PT能够降低子宫腺肌病小鼠子宫组织中p-PI3K、p-AKT、HIF-1α和CD31的表达水平(P<0.05)。结论PT联用通过抑制PI3K/AKT/HIF-1α通路降低腺体向肌层的侵袭,延缓AM进展。 展开更多
关键词 子宫腺肌病 重楼皂苷Ⅱ 反式肉桂醛 PI3K/akt/HIF-1α通路
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mTORC1通过β-TrCP调控TPP1蛋白的稳定性
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作者 孟志伟 张瑞怀 +2 位作者 闫先航 陈耀 周小明 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2026年第1期82-90,共9页
目的 探讨雷帕霉素机制性靶蛋白复合物1(mechanistic target of rapamycin complex 1,mTORC1)通过β-转导素重复序列蛋白(β-TrCP)对三肽基肽酶1(tripeptidyl peptidase 1,TPP1)蛋白稳定性的调控作用。方法 利用免疫共沉淀、谷胱甘肽巯... 目的 探讨雷帕霉素机制性靶蛋白复合物1(mechanistic target of rapamycin complex 1,mTORC1)通过β-转导素重复序列蛋白(β-TrCP)对三肽基肽酶1(tripeptidyl peptidase 1,TPP1)蛋白稳定性的调控作用。方法 利用免疫共沉淀、谷胱甘肽巯基转移酶沉降技术(GST Pull-down)以及蛋白质免疫印迹技术(Western blot)探究TPP1与mTORC1和(或)β-TrCP之间的相互作用;利用不同营养应激或雷帕霉素调节体外培养细胞的mTORC1活性,通过Western blot观察TPP1蛋白表达水平,或通过定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qPCR)观察TPP1转录水平;利用蛋白酶体或Cullin neddylation抑制剂探究TPP1蛋白降解是否由蛋白酶体和Cullin依赖性的E3泛素连接酶介导;利用DNA点突变(site-directed DNA mutagenesis)技术将TPP1上潜在的β-TrCP识别的磷酸化降解决定子(phosphodegron)序列中的丝氨酸(S)突变为丙氨酸(A);利用慢病毒介导的shRNA技术静默β-TrCP或Cullin1基因的表达;利用Western blot检测TPP1磷酸化以及泛素化水平,并验证Phosphodegron中的两个丝氨酸位点对其泛素化的重要性;利用体外TPP1活性实验探究Phosphodegron突变是否会影响TPP1活性。结果 TPP1与mTORC1或β-TrCP均存在相互作用;TPP1蛋白水平与mTORC1活性成反比,且蛋白水平的变化并非由转录水平改变引起;蛋白酶体被抑制或β-TrCP被敲低后,TPP1蛋白水平升高。体外激酶实验表明TPP1可以被mTORC1磷酸化,体内泛素化实验表明TPP1可以被β-TrCP泛素化;TPP1的Phosphodegron突变不会影响TPP1活性。结论 mTORC1通过磷酸化TPP1促进其与β-TrCP的特异性结合,进而导致TPP1的泛素化以及蛋白酶体降解。 展开更多
关键词 mtorc1 β-TrCP TPP1 泛素-蛋白酶体系统
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COL12A1通过PI3K/AKT通路调控肺腺癌H1650细胞恶性行为的机制研究
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作者 张青 吴灵芝 +6 位作者 冯契靓 陈荣荣 秦二云 张诚实 赵云峰 雷撼 刘明 《临床肺科杂志》 2026年第1期71-76,共6页
目的探讨COL12A1在肺癌细胞系中的表达及其通过PI3K/AKT信号通路对H1650细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用Western Blot和qRT-PCR检测COL12A1在正常肺上皮细胞(BEAS-2B)及肺癌细胞(A549、PC9、H1650)中的表达水平。通过慢病... 目的探讨COL12A1在肺癌细胞系中的表达及其通过PI3K/AKT信号通路对H1650细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用Western Blot和qRT-PCR检测COL12A1在正常肺上皮细胞(BEAS-2B)及肺癌细胞(A549、PC9、H1650)中的表达水平。通过慢病毒转染构建COL12A1敲低的H1650细胞模型(sh COL12A1),并采用CCK-8、流式、划痕实验及Transwell实验检测COL12A1基因对H1650细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。用Western Blot检测敲低COL12A1后PI3K/AKT通路关键蛋白的表达水平变化。结果COL12A1在肺癌细胞中表达显著高于正常肺上皮细胞。敲低COL12A1后,H1650细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,而凋亡率显著增加。Western Blot结果显示,敲低COL12A1可抑制PI3K/AKT通路的磷酸化激活(p-PI3K、p-AKT水平下降)。结论COL12A1在肺癌细胞系中高表达,并通过激活PI3K/AKT信号通路促进H1650细胞的恶性生物学行为,可能成为肺癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 COL12A1 非小细胞肺癌 PI3K/akt信号通路
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