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秦皮乙素调控AKT/SKP2/MTH1通路诱导急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用研究
1
作者 宋卫华 褚福营 +5 位作者 谢玮 陈金亮 赵枰 仇宏 陶健 陈相 《中国药房》 北大核心 2026年第1期36-41,共6页
目的探讨秦皮乙素(Esc)通过调控蛋白激酶B(AKT)/S期激酶相关蛋白2(SKP2)/MutT同源酶1(MTH1)通路诱导急性髓系白血病(AML)HL-60细胞凋亡的作用。方法将HL-60细胞分为Control组(常规培养)、Esc低浓度组(L-Esc组,25μmol/L Esc)、Esc中浓度... 目的探讨秦皮乙素(Esc)通过调控蛋白激酶B(AKT)/S期激酶相关蛋白2(SKP2)/MutT同源酶1(MTH1)通路诱导急性髓系白血病(AML)HL-60细胞凋亡的作用。方法将HL-60细胞分为Control组(常规培养)、Esc低浓度组(L-Esc组,25μmol/L Esc)、Esc中浓度组(M-Esc组,50μmol/L Esc)、Esc高浓度组(H-Esc组,100μmol/L Esc)、Esc高浓度+SC79(AKT激动剂)组(100μmol/L Esc+5μmol/L SC79)。采用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;采用CM-H2DCFDA荧光探针法检测细胞中活性氧(ROS)水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)]和AKT/SKP2/MTH1通路相关蛋白[磷酸化AKT(p-AKT)、AKT、SKP2、MTH1]及AKT上下游效应蛋白磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和周期蛋白依赖性激酶抑制剂1(P21)、周期蛋白依赖性激酶抑制剂1B(P27)的表达。结果与Control组相比,L-Esc组、M-Esc组、H-Esc组细胞的存活率、集落数以及AKT、PI3K蛋白的磷酸化水平和SKP2、MTH1、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而ROS水平、细胞凋亡率和Bax、cleaved caspase-3、P21、P27蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),且Esc的作用具有浓度依赖性(P<0.05);与H-Esc组相比,Esc高浓度+SC79组细胞上述指标均被显著逆转(P<0.05)。结论Esc可能通过抑制AKT/SKP2/MTH1通路,促进HL-60细胞中ROS的大量产生及细胞凋亡程序的启动,最终有效抑制HL-60细胞增殖。 展开更多
关键词 秦皮乙素 急性髓系白血病 HL-60细胞 蛋白激酶B 细胞凋亡 akt/SKP2/MTH1通路
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电针背俞穴激活PI3K/AKT通路改善糖尿病肾病大鼠肾脏血流动力学与肾功能研究
2
作者 张慧杰 丁戊坤 +2 位作者 张竞飞 邵音 李杨 《黑龙江医药科学》 2026年第1期67-71,共5页
目的:探讨电针背俞穴(脾俞、三焦俞、肾俞、膀胱俞)对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾脏血流动力学、蛋白尿及肾功能的影响,分析其作用机制是否与PI3K/AKT信号通路激活相关。方法:选取健康SD大鼠120只,构建DKD大鼠模型,将造模成功的SD大鼠根据随... 目的:探讨电针背俞穴(脾俞、三焦俞、肾俞、膀胱俞)对糖尿病肾病(DKD)大鼠肾脏血流动力学、蛋白尿及肾功能的影响,分析其作用机制是否与PI3K/AKT信号通路激活相关。方法:选取健康SD大鼠120只,构建DKD大鼠模型,将造模成功的SD大鼠根据随机数表法分为模型组、电针组和电针+LY294002(PI3K抑制剂)组,另设空白组(n=30)。电针组每日接受背俞穴电针治疗(疏密波,4 Hz/60 Hz,1 m A,15 min),持续4周,电针+LY294002组在电针干预前尾静脉注射LY294002(0.3 mg·m L^(-1)·bw)。干预前后检测肾脏血流动力学参数(Vsmax、Vdmin)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及血糖水平。结果:干预后,电针组Vsmax、Vdmin显著升高(P<0.01),RI显著降低(P<0.01),UAER、Scr、BUN及血糖均明显下降(P<0.01),且改善效果显著优于电针+LY294002组(P<0.05或P<0.01),LY294002部分抑制了电针对血流动力学、蛋白尿及肾功能的改善作用。结论:电针背俞穴可通过激活PI3K/AKT通路,改善DKD大鼠肾脏血流灌注、减轻蛋白尿、保护肾功能并辅助调控血糖,为DKD的非药物治疗提供科学依据。 展开更多
关键词 电针 背俞穴 糖尿病肾病 PI3K/akt通路 肾脏血流动力学
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基于EMT和AKT通路研究雷公藤红素对肝癌HepG2细胞侵袭转移的作用
3
作者 陈惠云 江川 +2 位作者 熊也平 刘智勇 程心玲 《江西中医药》 2026年第1期75-81,共7页
目的:探究雷公藤红素对肝癌HepG2细胞侵袭转移的作用及其分子机制。方法:采用CCK-8法和克隆形成实验检测不同浓度雷公藤红素(0.5、1、1.5、2、4μmol/L)对HepG2细胞增殖的影响;利用划痕愈合和Transwell侵袭实验观察细胞迁移和侵袭能力变... 目的:探究雷公藤红素对肝癌HepG2细胞侵袭转移的作用及其分子机制。方法:采用CCK-8法和克隆形成实验检测不同浓度雷公藤红素(0.5、1、1.5、2、4μmol/L)对HepG2细胞增殖的影响;利用划痕愈合和Transwell侵袭实验观察细胞迁移和侵袭能力变化;运用Western Blot技术分析EMT标志物及AKT信号通路关键蛋白的表达水平。通过表皮生长因子(EGF)诱导建立EMT模型,验证药物干预效应。结果:雷公藤红素呈剂量依赖性显著抑制HepG2细胞增殖(P<0.05),上调E-cadherin、下调N-cadherin的表达,但对Vimentin无显著影响,同时显著抑制AKT蛋白表达。结论:雷公藤红素通过双重机制抑制肝癌细胞转移:一是调控E-cadherin/N-cadherin表达逆转EMT进程;二是特异性抑制AKT信号通路活化。 展开更多
关键词 雷公藤红素 肝癌 侵袭转移 细胞上皮间质转化 akt
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COL12A1通过PI3K/AKT通路调控肺腺癌H1650细胞恶性行为的机制研究
4
作者 张青 吴灵芝 +6 位作者 冯契靓 陈荣荣 秦二云 张诚实 赵云峰 雷撼 刘明 《临床肺科杂志》 2026年第1期71-76,共6页
目的探讨COL12A1在肺癌细胞系中的表达及其通过PI3K/AKT信号通路对H1650细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用Western Blot和qRT-PCR检测COL12A1在正常肺上皮细胞(BEAS-2B)及肺癌细胞(A549、PC9、H1650)中的表达水平。通过慢病... 目的探讨COL12A1在肺癌细胞系中的表达及其通过PI3K/AKT信号通路对H1650细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用Western Blot和qRT-PCR检测COL12A1在正常肺上皮细胞(BEAS-2B)及肺癌细胞(A549、PC9、H1650)中的表达水平。通过慢病毒转染构建COL12A1敲低的H1650细胞模型(sh COL12A1),并采用CCK-8、流式、划痕实验及Transwell实验检测COL12A1基因对H1650细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。用Western Blot检测敲低COL12A1后PI3K/AKT通路关键蛋白的表达水平变化。结果COL12A1在肺癌细胞中表达显著高于正常肺上皮细胞。敲低COL12A1后,H1650细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低,而凋亡率显著增加。Western Blot结果显示,敲低COL12A1可抑制PI3K/AKT通路的磷酸化激活(p-PI3K、p-AKT水平下降)。结论COL12A1在肺癌细胞系中高表达,并通过激活PI3K/AKT信号通路促进H1650细胞的恶性生物学行为,可能成为肺癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 COL12A1 非小细胞肺癌 PI3K/akt信号通路
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毛喉素调控ERK和Akt信号通路促进C2C12成肌细胞分化
5
作者 黄柳艳 张文烯 +3 位作者 陈淑雯 余诗美 戴忠 左长清 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第5期1114-1121,共8页
背景:毛喉素是一种从毛喉鞘蕊花中提取到的二萜类天然化合物,对骨骼肌的修复具有重要的调节作用。但毛喉素对C2C12骨骼肌细胞成肌分化的调控作用尚未得到充分探索。目的:研究毛喉素对C2C12成肌细胞系分化的影响,并探讨其潜在的分子机制... 背景:毛喉素是一种从毛喉鞘蕊花中提取到的二萜类天然化合物,对骨骼肌的修复具有重要的调节作用。但毛喉素对C2C12骨骼肌细胞成肌分化的调控作用尚未得到充分探索。目的:研究毛喉素对C2C12成肌细胞系分化的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法:在C2C12细胞生长过程中分别加入0,0.1,0.25,0.5,1,5,10,20μmol/L毛喉素进行处理,CCK-8和qRT-PCR检测细胞增殖情况。在诱导C2C12细胞成肌分化过程中分别加入0,0.25,0.5,1μmol/L毛喉素进行处理,免疫荧光染色及qRT-PCR检测C2C12细胞成肌分化状况;Western blot检测影响成肌分化的相关信号通路蛋白的表达水平。结果与结论:①高浓度(>1μmol/L)毛喉素处理后,C2C12细胞的活力下降,细胞增殖被抑制。②与0μmol/L组比较,成肌诱导4 d时,qRT-PCR结果显示毛喉素能够上调Myh2、Myh4、Myomaker的表达,但是下调Myh7的表达;免疫荧光染色结果表明,毛喉素处理后C2C12细胞的融合指数和肌管直径均增加,肌管的数量增多。③Western blot结果表明成肌分化诱导2 d时,毛喉素处理明显抑制细胞外信号调节激酶1/2磷酸化蛋白表达水平,促进蛋白激酶B磷酸化蛋白表达;毛喉素处理会显著上调成肌分化转录因子肌细胞生成素蛋白表达水平。④结果表明,毛喉素可能通过调控细胞外信号调节激酶1/2及蛋白激酶B信号传导促进C2C12骨骼肌细胞成肌分化。 展开更多
关键词 毛喉素 成肌分化 C2C12细胞 ERK1/2 akt 骨骼肌 肌细胞生成素 细胞增殖
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Gremlin 1通过PI3K/AKT通路调控肺腺癌细胞的凋亡、增殖和侵袭
6
作者 李俊杰 陆建雄 +2 位作者 吴沛静 韦金利 雷薇 《吉林医学》 2026年第1期5-11,共7页
目的:研究Gremlin 1通过磷脂酰激醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路调控肺癌NCI-H1793细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法:体外培养肺癌NCI-H1793细胞,分为正常组、对照siRNA(si-NC)组、si-Gremlin1组、si-Gremlin1+740Y-P组(740Y-P... 目的:研究Gremlin 1通过磷脂酰激醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路调控肺癌NCI-H1793细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法:体外培养肺癌NCI-H1793细胞,分为正常组、对照siRNA(si-NC)组、si-Gremlin1组、si-Gremlin1+740Y-P组(740Y-P为PI3K/AKT通路激活剂)。GEO在线数据库分析Gremlin1表达水平及生存率,细胞增殖通过CCK-8法检测;细胞凋亡使用流式细胞术检测;细胞迁移通过划痕实验检测;Transwell实验用于细胞侵袭检测;Western印迹实验检测Gremlin1、Bax、酶切-半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、E-钙黏连蛋白(cadherin)、波形蛋白(vimentin)及PI3K、磷酸化(P)-PI3K、AKT和P-AKT表达。结果:GEO在线数据库分析结果显示,肺癌组织中Gremlin1表达高于正常组,Gremlin1低表达组生存期优于Gremlin1高表达组;与正常组、si-NC组相比,si-Gremlin1组细胞增殖、迁移和侵袭活性下降,且E-cadherin、P-PI3K、P-AKT下调,si-Gremlin1组细胞凋亡率、酶切-Caspase-3、Bax、vimentin增加;与si-Gremlin1组相比,si-Gremlin1+740Y-P组细胞增殖、迁移、侵袭活性及E-cadherin、P-PI3K和P-AKT水平上升,而细胞凋亡率、酶切-Caspase-3、Bax、vimentin水平减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:调控Gremlin1表达可通过PI3K/AKT通路影响肺腺癌NCI-H1793细胞的生物学特性。 展开更多
关键词 肺腺癌 Gremlin1 PI3K/akt通路 增殖 凋亡
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Erastin介导PI3K/AKT信号通路调控三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞铁死亡机制的研究
7
作者 包鸿蓉 臧思佳 +2 位作者 孙泽涛 孙平 孙成 《现代肿瘤医学》 2026年第1期14-23,共10页
目的:探讨铁死亡诱导剂Erastin对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞铁死亡的影响及机制研究。方法:体外培养MDA-MB-231细胞,采用CCK-8法检测Erastin(0、5、10、20、30μmol/L)处理12、24、36、48 h后对细胞增殖的影响,确定最佳作用浓度和时间... 目的:探讨铁死亡诱导剂Erastin对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞铁死亡的影响及机制研究。方法:体外培养MDA-MB-231细胞,采用CCK-8法检测Erastin(0、5、10、20、30μmol/L)处理12、24、36、48 h后对细胞增殖的影响,确定最佳作用浓度和时间;通过光镜观察细胞形态的变化、试剂盒测定LDH水平以及克隆形成和划痕实验检测细胞的增殖、迁移能力,试剂盒测定Fe^(2+)、GSH和L-ROS水平以及Western blot检测GPX4蛋白表达进行铁死亡标志物检测,使用铁死亡抑制剂Fer-1(5μmol/L)抑制铁死亡检测Erastin对细胞死亡的影响;通过Western blot检测Erastin对p-PI3K、p-AKT通路蛋白的表达并使用Fer-1逆转实验;通过PI3K/AKT通路抑制剂LY294002(10μmol/L)与Erastin联用以验证通路在铁死亡中的作用。结果:Erastin以时间和浓度依赖的方式显著抑制了MDA-MB-231细胞的增殖。与对照组相比,光镜下可见Erastin组细胞形态由上皮样变为椭圆形,细胞死亡数量增加,LDH试剂盒检测发现细胞毒性明显升高,克隆形成和迁移能力显著降低;Erastin组细胞内Fe^(2+)和L-ROS水平显著升高,GSH水平和GPX4蛋白表达显著降低;细胞内p-PI3K、p-AKT蛋白水平明显下降。加入铁死亡抑制剂Fer-1后,发现上述效应被显著逆转。接下来实验加入PI3K/AKT通路抑制剂LY294002后发现,由Erastin诱导的细胞死亡和铁死亡显著增强。结论:Erastin可诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞发生铁死亡,这一过程通过调控PI3K/AKT信号通路来实现。 展开更多
关键词 Erastin PI3K/akt信号通路 铁死亡 三阴性乳腺癌
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双花母草素调节Akt/mTOR信号通路对非小细胞肺癌细胞恶性生物学行为的影响
8
作者 赵晓静 常丽薇 +2 位作者 崔永丽 李燕涛 薛艳超 《临床肺科杂志》 2026年第1期82-89,共8页
目的探讨双花母草素(PRO)调节蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549,用CCK8检测PRO对A549细胞活性的影响;将A549细胞分... 目的探讨双花母草素(PRO)调节蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞恶性生物学行为的影响。方法体外培养人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549,用CCK8检测PRO对A549细胞活性的影响;将A549细胞分为NC组、PRO低浓度处理组(PRO-L组,2.5μmol/L)、PRO中浓度处理组(PRO-M组,5μmol/L)、PRO高浓度处理组(PRO-H组,10μmol/L)、PRO-H+Akt/mTOR通路激活剂(740Y-P)组(10μmol/L PRO+30μmol/L 740Y-P);克隆形成实验检测各组A549细胞增殖情况,TUNEL染色法检测各组A549细胞凋亡情况,划痕实验和Matrigel侵袭实验分别检测各组A549细胞迁移和侵袭能力;qRT-PCR和Westren Blot实验检测上皮间质转化(EMT)和Akt/mTOR通路相关基因的表达情况。构建NSCLC裸鼠移植瘤模型,将造模成功的裸鼠分为:模型(Model)组、PRO组、PRO+740Y-P组,观察各组裸鼠肿瘤组织生长情况,并检测各组肿瘤组织中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR蛋白表达情况。结果与NC组相比,PRO-L组、PRO-M组和PRO-H组的A549细胞克隆形成数目、划痕愈合率和侵袭细胞数减少,Akt、mTOR、Vimentin mRNA及p-Akt、p-mTOR、Vimentin蛋白表达量明显下降,细胞凋亡率、E-cadherin mRNA和其蛋白表达量显著上升(P<0.05);与PRO-H组相比,PRO-H+740Y-P组A549细胞克隆形成数目、划痕愈合率和侵袭细胞数明显增多,Akt、mTOR、Vimentin mRNA和p-Akt、p-mTOR、Vimentin蛋白表达量明显上升,细胞凋亡率、E-cadherin mRNA和蛋白表达量明显下降(P<0.05)。与模型组相比,PRO组裸鼠肿瘤组织质量、体积及p-Akt、p-mTOR蛋白表达量显著降低(P<0.05);与PRO组相比,PRO+740Y-P组裸鼠肿瘤组织质量、体积及p-Akt、p-mTOR蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论PRO可通过抑制Akt/mTOR信号通路的激活从而实现对NSCLC细胞恶性生物学行为的抑制作用。 展开更多
关键词 双花母草素 akt/mTOR信号通路 非小细胞肺癌 恶性生物学行为
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生长激素对大鼠心肌缺血/再灌注后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Caspase-3 Cleaved caspase-3蛋白表达的影响 被引量：3
9
作者 黄瑞健 李萌 孙培吾 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期527-530,共4页
目的研究生长激素(Growth hormone,GH)对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia reperfusion,I/R)后心肌细胞凋亡及相关基因Caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白表达的影响。方法24只大鼠随机分为三组,假手术组(sham-operated group,n=8,仅手术24h... 目的研究生长激素(Growth hormone,GH)对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia reperfusion,I/R)后心肌细胞凋亡及相关基因Caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白表达的影响。方法24只大鼠随机分为三组,假手术组(sham-operated group,n=8,仅手术24h)、心肌缺血/再灌注(I/R)组(n=8)、GH组(n=8),后两组均缺血30min,再灌注24h,GH组于建立模型前7d每天给予人重组生长激素(reconbination human growth hormone,rhGH)针剂皮下注射(1U/kg体质量),其他二组等量生理盐水注射。以TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,DAB免疫组化法检测心肌细胞Caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白表达并进行心肌组织病理学检查。结果大鼠心肌I/R24h后心肌细胞凋亡指数明显上升(对照于假手术组,P<0.05),心肌细胞Caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白表达呈阳性染色指数明显升高(P<0.05),心肌病理检查见心肌缺血区呈大小不一的坏死灶,缺血心肌间有炎症细胞浸润,心肌排列不整齐(HE染色),而GH组心肌细胞凋亡率及心肌细胞Caspase-3、Cleaved caspase-3蛋白表达呈阳性染色指数明显好于I/R组(P<0.05),心肌细胞炎症细胞也明显减少,坏死灶也少于I/R组。结论GH可以减少心肌I/R后心肌细胞凋亡及细胞Caspase-3、Cleaved caspase-3染色阳性指数,说明GH对I/R后的心肌具有保护作用。 展开更多
关键词 缺血/再灌注 生长激素 凋亡 CASPASE-3 cleaved CASPASE-3
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早期针刺对颅脑损伤大鼠神经功能和Cleaved Caspases-3的影响 被引量：5
10
作者 杜若桑 张晓辉 +2 位作者 柳依江 郑淑美 崔海 《中国中医急症》 2021年第4期608-611,625,共5页
目的观察针刺对颅脑损伤(TBI)大鼠脑组织Cleaved Caspases-3表达、脑组织病理形态和运动、感觉等神经功能的影响。方法将40只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组,各10只。模型组和针刺组应用PCI3000打击器撞击硬脑膜制备TBI... 目的观察针刺对颅脑损伤(TBI)大鼠脑组织Cleaved Caspases-3表达、脑组织病理形态和运动、感觉等神经功能的影响。方法将40只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组,各10只。模型组和针刺组应用PCI3000打击器撞击硬脑膜制备TBI模型;假手术组仅开颅暴露硬脑膜,不进行打击;空白组不做处理。造模后即对针刺组进行针刺治疗,每日1次,干预7 d。在治疗第2、4、7天应用改良神经功能评分(mNSS)和Rotarod test检测大鼠运动、感觉等神经功能损伤程度。第7天治疗结束后利用HE染色法观察脑组织病理形态改变,Western blotting法检测脑组织Cleaved Caspases-3蛋白表达。结果治疗第2、4、7天时与假手术组相比,模型组mNSS评分明显升高(均P <0.01),Rotarod test评分显著下降(P <0.01,P <0.01,P <0.05)。治疗第4、7天时,与模型组相比,电针组大鼠mNSS评分降低(均P <0.05),Rotarod test评分升高(P <0.05或P <0.01)。HE染色显示针刺组可观察到正常神经元,组织疏松和紊乱轻于模型组,整体情况好于模型组。模型组大鼠Cleaved Caspases-3蛋白表达量显著高于假手术组(P <0.01),针刺组表达量低于模型组(P <0.01)。结论针刺可以通过抑制脑组织内Cleaved Caspases-3的表达,减轻细胞凋亡达到修复脑组织和保护神经功能的疗效。 展开更多
关键词 颅脑损伤 针刺 神经功能 cleaved Caspases-3 大鼠
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唾液miR-15b与口腔鳞状细胞癌cleaved caspase-3表达及临床意义 被引量：3
11
作者 谷爱玲 何巍 安志强 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2023年第2期127-133,共7页
目的 分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者唾液miR-15b和组织cleaved caspase-3表达及与预后的关系。方法 收集2016年5月至2020年6月期间我院收治的OSCC患者154例(OSCC组),另收集103例健康志愿者作为对照组。分别采用实时荧光定量PCR(qPCR)及... 目的 分析口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者唾液miR-15b和组织cleaved caspase-3表达及与预后的关系。方法 收集2016年5月至2020年6月期间我院收治的OSCC患者154例(OSCC组),另收集103例健康志愿者作为对照组。分别采用实时荧光定量PCR(qPCR)及免疫组化染色法检测唾液miR-15b水平及组织cleaved caspase-3表达。受试者工作特征(ROC)曲线分析唾液miR-15b表达诊断OSCC的效能。分析唾液miR-15b表达与口腔鳞癌临床病理特征的关系,采用多因素Cox回归分析影响OSCC预后的因素。结果 OSCC患者唾液miR-15b水平显著低于对照组(0.72±0.33 vs. 1.00±0.23,P<0.001)。ROC曲线分析唾液miR-15b水平诊断OSCC的曲线下面积为0.760(0.703~0.817)。与癌旁组织比较,OSCC组织中caspase-3、cleaved caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.001)。经Spearman相关性分析,OSCC患者的唾液miR-15b水平与OSCC组织cleaved caspase-3蛋白表达呈负相关(r=-0.321,P<0.001)。唾液miR-15b表达与肿瘤直径和预后有关(P<0.05)。miR-15b低表达组患者5年DFS率和5年OS率分别为28.57%和44.16%,高表达组患者5年DFS率和5年OS率分别为62.34%和81.82%,差异有统计学意义(P<0.001)。多因素Cox风险比例回归模型结果显示TNM分期、根治性手术、唾液miR-15b水平均是影响OSCC患者OS的独立预后因素(P<0.05)。结论 OSCC患者唾液miR-15b水平与组织cleaved caspase-3相关,可作为预测OSCC患者预后的生物标志物。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 miR-15b cleaved caspase-3 唾液 预后
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癫痫大鼠海马硫氧还蛋白还原酶活性及cleaved caspase-3表达检测 被引量：2
12
作者 魏学文 张晓伟 《检验医学与临床》 CAS 2011年第22期2695-2696,共2页
目的研究海人酸诱导癫痫大鼠海马组织硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性及cleaved caspase-3表达变化。方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为癫痫对照组(NS组)和癫痫组(KA组)。采用脑室注射海人酸制作大鼠癫痫模型。海人酸注射6h取海马组织匀浆,应... 目的研究海人酸诱导癫痫大鼠海马组织硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性及cleaved caspase-3表达变化。方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为癫痫对照组(NS组)和癫痫组(KA组)。采用脑室注射海人酸制作大鼠癫痫模型。海人酸注射6h取海马组织匀浆,应用5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)还原法对海马TrxR活性进行测定,采用western blotting法检测cleaved caspase-3表达。结果 NS组、KA组TrxR活性分别为:(71±19)、(116±40)U/mg;KA组cleaved caspase-3的表达较NS组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论癫痫大鼠海马组织TrxR活性明显增加,引起caspase-3裂解,导致神经元凋亡。 展开更多
关键词 癫痫 海人酸 硫氧还蛋白还原酶 cleaved CASPASE-3
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三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡与cleaved-caspase-3表达的关系 被引量：19
13
作者 张胜强 张洪艳 +4 位作者 齐宝林 高克峰 黄建伟 刘贵廷 崔虎军 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期1139-1143,1148,共6页
目的:观察三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡作用和对cleaved-caspase-3表达的影响,探讨其抗肺癌的可能作用机制。方法:体外培养SPC-A-1细胞,以不同剂量三叶青黄酮进行处理,未给予三叶青黄酮组作为对照组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2... 目的:观察三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡作用和对cleaved-caspase-3表达的影响,探讨其抗肺癌的可能作用机制。方法:体外培养SPC-A-1细胞,以不同剂量三叶青黄酮进行处理,未给予三叶青黄酮组作为对照组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色分析法,观察三叶青黄酮对SPC-A-1细胞增殖抑制作用,计算半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞仪和TUNEL染色检测三叶青黄酮对SPC-A-1细胞凋亡的影响;分别采用免疫细胞分析和蛋白印记分析(Western blot)检测三叶青黄酮对SPC-A-1细胞cleaved-caspase-3表达的影响。结果:三叶青黄酮对SPC-A-1细胞增殖具有明显抑制作用,呈剂量和时间依赖性,并诱导SPC-A-1细胞凋亡,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);三叶青黄酮显著增加SPC-A-1细胞cleaved-caspase-3表达水平,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:三叶青黄酮可显著抑制SPC-A-1细胞增殖,并诱导其凋亡,机制可能与增强cleaved-caspase-3表达有关。 展开更多
关键词 肺癌 三叶青黄酮 凋亡 cleaved-caspase-3
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Caspase-3及Cleaved-Caspase-3在氟中毒大鼠肝脏中表达 被引量：16
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作者 李永宁 肖晶晶 赵建勇 《贵州医药》 CAS 2016年第3期239-240,F0003,共3页
目的探讨氟中毒大鼠肝脏组织中Caspase-3及Cleaved-Caspase-3的表达情况。方法选用36只健康SD大鼠分为对照组、低氟组、高氟组(饮用含氟量分别为<1mg/L、5mg/L及50mg/L的自来水),每组12只(雌雄各半)。饲养6个月后,股动脉放血处死,氟... 目的探讨氟中毒大鼠肝脏组织中Caspase-3及Cleaved-Caspase-3的表达情况。方法选用36只健康SD大鼠分为对照组、低氟组、高氟组(饮用含氟量分别为<1mg/L、5mg/L及50mg/L的自来水),每组12只(雌雄各半)。饲养6个月后,股动脉放血处死,氟离子电极法检测大鼠尿氟含量;自动血生化分析仪检测大鼠肝功能;免疫组织化学法和蛋白印记(Western blot)法检测Caspase-3及Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平。结果低氟组、高氟组大鼠尿氟[(1.85±0.13)、(2.23±0.10)mg/L均高于对照组[(1.63±0.11)mg/L](P<0.05);低、高氟组大鼠血清谷丙转氨酶及谷草转氨酶活性[(48.66±5.55)、(68.17±8.39)U/L及(142.57±16.21)、(165.89±28.26)U/L]均高于对照组[(38.49±2.98)、(117.98±9.88)U/L](P<0.05);高过剂量氟组Caspase-3及Cleaved-Caspase-3蛋白表达[(98.08±13.08)、(106.33±9.14)]明显高于对照组[(53.92±6.36)、(59.78±7.54)](P<0.05)。结论氟可促进Caspase-3及Cleaved-Caspase-3蛋白的表达,其可能参与慢性氟中毒所致肝脏损伤发病过程。 展开更多
关键词 氟中毒 CASPASE-3 cleaved-Caspase-3 细胞凋
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针康法对脑缺血大鼠缺血半暗区细胞凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白和cleaved-caspase-9蛋白表达的影响 被引量：14
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作者 唐强 田源 +5 位作者 叶涛 朱路文 阮野 赵彬 陈慧杰 王雪 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第12期1365-1371,共7页
目的观察针康法对脑缺血大鼠缺血半暗区细胞凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和cleaved-caspase-9蛋白表达的影响。方法选取180只雄性Sprague-Dawley大鼠,通过随机数字表法随机分为假手术组、模型组、针刺组、康复组和针康组。每组再分为... 目的观察针康法对脑缺血大鼠缺血半暗区细胞凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和cleaved-caspase-9蛋白表达的影响。方法选取180只雄性Sprague-Dawley大鼠,通过随机数字表法随机分为假手术组、模型组、针刺组、康复组和针康组。每组再分为3 d、7 d和14 d三个亚组(n=12)。采用改良Longa线栓法进行造模,假手术组和模型组不予治疗,针刺组进行头穴丛刺治疗,康复组进行跑台康复训练,针康组进行针康法治疗。术后各时间点对大鼠进行改良神经功能缺损评分(mNSS)后取材,采用TUNEL染色观察大鼠脑缺血半暗区细胞凋亡率,Western blotting检测脑缺血半暗区XIAP和cleaved-caspase-9蛋白表达。结果术后各时间点,与模型组比较,各治疗组mNSS评分均降低(P<0.05),细胞凋亡率均降低(P<0.05),XIAP蛋白表达上调(P<0.05),cleaved-caspase-9蛋白表达下调(P<0.05);与针刺组、康复组比较,针康组细胞凋亡率进一步降低(P<0.05),XIAP蛋白表达进一步上调(P<0.05)。术后7 d、14 d,针康组mNSS评分进一步降低(P<0.05),针康组cleaved-caspase-9蛋白表达进一步下调(P<0.05)。结论针康法能降低脑缺血大鼠神经功能缺损,优于单独的头穴丛刺和康复训练,其机制可能与促进XIAP蛋白表达,抑制caspase-9蛋白活化,从而减少细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 脑缺血 神经功能 针康法 凋亡 X连锁凋亡抑制蛋白 cleaved-caspase-9 大鼠
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基于生物信息学和实验验证探讨温经汤通过PI3K/Akt/mTOR通路对子宫内膜异位症自噬的影响 被引量：6
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作者 张翼 吴璐璐 +3 位作者 贺冰 梁莹莹 唐俐 谭泉宁 《中国中医药信息杂志》 CAS 2025年第1期60-68,共9页
目的采用生物信息学方法及体外实验探讨温经汤治疗子宫内膜异位症的机制。方法通过TCMSP数据库收集温经汤有效成分及相关靶点,利用GEO数据库筛选子宫内膜异位症相关靶点并对靶点进行功能富集分析,预测温经汤治疗子宫内膜异位症的核心靶... 目的采用生物信息学方法及体外实验探讨温经汤治疗子宫内膜异位症的机制。方法通过TCMSP数据库收集温经汤有效成分及相关靶点,利用GEO数据库筛选子宫内膜异位症相关靶点并对靶点进行功能富集分析,预测温经汤治疗子宫内膜异位症的核心靶点并对核心靶点-药物配体进行分子对接,通过体外实验对结果进行验证。结果通过TCMSP数据库筛选获得温经汤有效成分117种,对应靶点248个;GEO数据库收集子宫内膜异位症相关差异基因5312个;温经汤治疗子宫内膜异位症的潜在作用靶点97个,核心靶点为IL6、TNF、EGFR。子宫内膜异位症差异基因主要富集于神经活性配体-受体相互作用、MAPK信号通路、内吞作用、钙信号通路、自噬、PI3K-Akt信号通路等。分子对接表明IL6、TNF、EGFR与相应药物配体结合稳定。体外实验表明,温经汤可抑制PI3K/Akt/mTOR通路表达,促进LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化,增加Beclin-1表达,抑制P62表达。温经汤还可抑制子宫内膜异位症特异性生物标志物CA125表达,减少异位内膜细胞表皮生长因子受体、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α表达,抑制异位内膜细胞增殖。结论温经汤可通过多途径、多靶点治疗子宫内膜异位症。其中,通过抑制PI3K/Akt/mTOR表达逆转自噬抑制是重要机制之一。 展开更多
关键词 温经汤 子宫内膜异位症 生物信息学 PI3K/akt/mTOR信号通路
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氨甲酰化促红细胞生成素对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及cleaved Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：1
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作者 黄兆琦 伍金雷 +4 位作者 许卫 陈永权 谢文杰 陈晞明 陈盛强 《中西医结合心脑血管病杂志》 2017年第16期1974-1978,共5页
目的观察氨甲酰化促红细胞生成素(CEPO)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白活化表达的影响。方法将30只雄性成年SD大鼠随机分为假手术(Sham)组(n=10)、CEPO组(n=10)和对照(Control)... 目的观察氨甲酰化促红细胞生成素(CEPO)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能、心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白活化表达的影响。方法将30只雄性成年SD大鼠随机分为假手术(Sham)组(n=10)、CEPO组(n=10)和对照(Control)组(n=10),采用腹主动脉缩窄术制作慢性心力衰竭模型,术后第8周CEPO组开始经腹腔注射50μg/kg CEPO,3次/周,连续4周;Sham组、Control组同期经腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。术后第8周、12周行心脏彩超检测大鼠心功能。术后第12周末取大鼠心肌组织切片采用HE染色法观察心肌组织细胞形态;采用原味缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡及计算凋亡指数(AI);采用Western blot印迹法检测心肌活化型Caspase-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达水平。结果与假手术组相比,建模大鼠术后第8周时出现心室肥厚及左室射血分数(LVEF)减退;CEPO组干预4周后左室射血分数较Control组明显升高(P<0.05),收缩末期室间隔厚度(IVSs)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)、舒张末期室间隔厚度(IVSd)、舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)明显降低(P<0.05)。与Control组比较,CEPO组AI值显著降低[(23.87±1.45)%vs(30.15±0.67)%,P<0.05],cleaved Caspase-3表达水平(0.489 1±0.029 1)明显减少(P<0.01)。结论 CEPO可通过抑制凋亡关键酶Caspase-3的活化,显著减少cleaved Caspase-3蛋白的表达水平,减少心肌细胞凋亡以改善心功能。 展开更多
关键词 心力衰竭 氨甲酰化促红细胞生成素 心肌凋亡 活化型Caspase-3蛋白
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左金丸通过抑制ERK、p38和AKT信号通路抑制肿瘤血管生成和结肠癌生长 被引量：1
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作者 袁杰 孟娇 +4 位作者 闫化茹 常彬 孙明瑜 梁婷玉 王子元 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第5期343-350,共8页
目的:研究左金丸通过抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路对肿瘤血管生成的影响。方法:使用不同浓度的左金丸处理含有或不含VEGF的HUVEC和Lovo细胞,利用CCK-8法评估左金丸对HUVEC和Lovo细胞增殖的影响;利用流式细胞术分析左金丸对HUVEC细... 目的:研究左金丸通过抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路对肿瘤血管生成的影响。方法:使用不同浓度的左金丸处理含有或不含VEGF的HUVEC和Lovo细胞,利用CCK-8法评估左金丸对HUVEC和Lovo细胞增殖的影响;利用流式细胞术分析左金丸对HUVEC细胞凋亡的影响;采用划痕实验、Transwell实验、管腔形成实验检测左金丸对HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成的影响;建立人结肠癌Lovo细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组:对照组(0.9%氯化钠溶液组),左金丸低、中、高剂量组(1 027.5 mg/kg,2 055 mg/kg,4 110 mg/kg)和化疗药5-Fu组(50 mg/kg),每隔1日给药1次。给药第21天处死裸鼠,比较各组肿瘤体积和重量。利用免疫组化法检测各组瘤体中CD34表达(微血管密度)。采用Western blot法检测左金丸对VEGFR2及其下游信号通路的调控作用。结果:左金丸能显著抑制HUVEC细胞和Lovo细胞的增殖,尤其对VEGF诱导的HUVEC细胞增殖的抑制效果更为明显(P<0.05)。左金丸能促进VEGF诱导的HUVEC细胞凋亡、抑制其迁移、侵袭和管腔形成能力(P<0.05)。在裸鼠移植瘤模型中,左金丸剂量依赖性地抑制了移植瘤的体积和重量(P<0.05),并使瘤体微血管密度显著减低(P<0.05)。此外,左金丸还通过抑制VEGF诱导的HUVEC细胞中ERK1/2、p38MAPK和AKT的磷酸化水平发挥作用,表现出剂量依赖性和时间依赖性,但未对VEGFR2磷酸化水平表达产生影响。结论:左金丸能有效抑制肿瘤血管生成,其机制可能与其抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 左金丸 肿瘤血管生成 结肠癌 ERK1/2 akt p38MAPK
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抵当汤含药血清通过PI3K/Akt/mTOR信号通路增强高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞自噬 被引量：2
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作者 董妍妍 张可敬 +1 位作者 储俊 储全根 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第3期461-469,共9页
目的观察抵当汤含药血清通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR信号通路对高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)自噬的影响,以期为糖尿病肾病(DN)的治疗提供新的思路。方法连续过筛法结合胶原酶法提取... 目的观察抵当汤含药血清通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR信号通路对高糖诱导的大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)自噬的影响,以期为糖尿病肾病(DN)的治疗提供新的思路。方法连续过筛法结合胶原酶法提取与培养原代RGECs,使用第Ⅷ因子免疫荧光法对其鉴定。通过高糖培养基诱导RGECs模拟糖尿病环境下的细胞状态。将细胞分为5组:空白组(正常培养的RGECs)、高糖模型组(使用高糖培养基诱导的RGECs)、抵当汤组(在高糖诱导基础上加入抵当汤含药血清进行干预的RGECs)、3-MA组(在高糖诱导基础上加入自噬抑制剂3-MA进行干预的RGECs)和抵当汤+3-MA干预组(在高糖诱导基础上同时加入抵当汤含药血清和自噬抑制剂3-MA进行干预的RGECs)。CCK-8法筛选最佳造模条件和含药血清干预浓度,利用单丹磺酰卡巴胺(MDC)法观察自噬囊泡荧光强度,RT-qPCR法检测Beclin-1、p62mRNA表达,Western blotting法检测p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin-1、p62、LC3B蛋白表达水平。结果与正常组比较,高糖模型组RGECs自噬荧光信号减少,荧光强度降低,Beclin-1 mRNA表达减少,p62 mRNA表达升高,Beclin-1蛋白表达和LC3Ⅱ/Ⅰ水平下降,P62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达上升(P<0.01);与高糖模型组比较,抵当汤组RGECs自噬荧光面积与强度明显升高,Beclin-1 mRNA表达上升,p62 mRNA表达下降,Beclin-1蛋白表达上升,p62、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达下降(P<0.01)。结论抵当汤含药血清可通过部分调节PI3K/Akt/mTOR信号通路,增强RGECs的自噬,为糖尿病肾病的治疗提供新策略。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 抵当汤 自噬 PI3K/akt/mTOR信号通路 肾小球内皮细胞
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Homer 1a过表达通过调控PI3K/AKT/mTOR通路介导的自噬减轻创伤性脑损伤小鼠神经损伤 被引量：2
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作者 王远 王孟阳 +1 位作者 张修民 罗明 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期31-37,共7页
目的探讨Homer蛋白同源物1a(Homer 1a)过表达对创伤性脑损伤(TBI)小鼠神经损伤的影响及分子机制。方法将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:假手术组、TBI组、空载慢病毒(Lv-NC)组、Homer 1a过表达慢病毒(Lv-Homer 1a)组和Lv-Homer 1a联... 目的探讨Homer蛋白同源物1a(Homer 1a)过表达对创伤性脑损伤(TBI)小鼠神经损伤的影响及分子机制。方法将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:假手术组、TBI组、空载慢病毒(Lv-NC)组、Homer 1a过表达慢病毒(Lv-Homer 1a)组和Lv-Homer 1a联合磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)激动剂740 Y-P(Lv-Homer 1a联合740 Y-P)组,每组12只。于造模前5 d原位注射相应慢病毒至小鼠大脑皮层内,而740 Y-P于造模前1 d经腹腔注射。采用自由落体打击法构建TBI模型,并于术后72 h对小鼠进行神经功能缺损评分(mNSS);测定小鼠脑组织含水量;HE染色和Nissl染色分别观察小鼠脑组织病理损伤、神经元丢失情况;透射电子显微镜观察小鼠脑组织细胞自噬小体形成水平;Western blot法检测小鼠脑组织中Homer 1a、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、Beclin 1、PI3K、磷酸化的PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化的mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平。结果与假手术组比较,TBI组小鼠mNSS和脑含水量显著升高,脑组织病理损伤严重,神经元大量丢失,自噬小体形成增加,脑组织中Homer 1a、Beclin 1蛋白表达和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ蛋白比值显著升高,而p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR蛋白比值显著降低。与TBI组比较,Lv-Homer 1a组小鼠mNSS和脑含水量降低,脑组织病理损伤和神经元丢失得到改善,自噬小体形成和自噬相关蛋白表达增加,p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR蛋白比值降低。与Lv-Homer 1a组比较,Lv-Homer 1a联合740 Y-P组小鼠神经损伤加重,自噬小体形成和自噬相关蛋白表达减少,而PI3K/AKT/mTOR信号通路被激活。结论过表达Homer 1a可有效减轻TBI小鼠神经损伤,其作用机制可能与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路介导的自噬有关。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤(TBI) Homer 1a 自噬 PI3K/akt/mTOR信号通路
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