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促红细胞生成素对缺氧缺血性脑损伤模型新生大鼠认知功能的影响及对相关PARP-1/AIF信号通路的调控机制研究 被引量：11
1
作者 段淼 黄婷 +3 位作者 张苹琳 李清香 刘雅 曹云涛 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第18期2492-2497,共6页
目的:研究促红细胞生成素(EPO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBI)模型新生大鼠认知功能的影响以及对相关聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)/凋亡诱导因子(AIF)信号通路的调控机制。方法:将SD新生大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(HIBI组)和... 目的:研究促红细胞生成素(EPO)对缺氧缺血性脑损伤(HIBI)模型新生大鼠认知功能的影响以及对相关聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)/凋亡诱导因子(AIF)信号通路的调控机制。方法:将SD新生大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(HIBI组)和EPO干预组(EPO组),每组22只。HIBI组和EPO组大鼠采用Rice法建立HIBI模型,Sham组大鼠切口后即缝合而不作缺氧缺血处理。造模完毕后,EPO组大鼠每天腹腔注射重组人促红素注射液5 000 IU/kg,连续给药14 d;Sham组和HIBI组大鼠则腹腔注射等容生理盐水。取大鼠脑组织,采用TTC染色法检测梗死情况;采用TUNEL法检测海马组织CA1区神经细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹法检测海马组织CA1区中PARP-1、AIF、Bax蛋白表达水平;采用Morris水迷宫实验考察大鼠空间学习记忆能力。结果:与Sham组比较,HIBI组大鼠脑组织梗死面积比显著升高,海马组织CA1区中TUNEL阳性凋亡细胞数显著增多,PARP-1、AIF、Bax蛋白表达水平均显著升高;Morris水迷宫实验中大鼠的逃避潜伏期显著延长,穿台指数显著减少;上述差异均有统计学意义(P<0.05)。与HIBI组比较,EPO组大鼠脑组织梗死面积比显著降低,海马组织CA1区中TUNEL阳性凋亡细胞数显著减少,PARP-1、AIF、Bax蛋白表达水平均显著降低;Morris水迷宫实验中大鼠的逃避潜伏期显著缩短,穿台指数显著增加;上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:EPO能够明显抑制HIBI引起的大鼠神经细胞凋亡而发挥脑组织保护作用,并能促进大鼠认知功能的恢复,这一作用很可能是通过抑制细胞凋亡PARP-1/AIF信号通路来实现的。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 促红细胞生成素 神经细胞 凋亡 认知功能 大鼠 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1 凋亡诱导因子
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大黄素对人肝癌HepG2细胞AIF和EndoG蛋白表达的影响 被引量：7
2
作者 李杰玉 陈泽奇 +3 位作者 林源 李密 黄娟 熊丽丽 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第5期829-831,共3页
目的:观察大黄素干预后,体外培养的人肝癌HepG2细胞株胞浆和胞核内AIF和EndoG的表达情况,探讨大黄素对非Cas-pase依赖细胞凋亡的影响。方法:将体外培养的HepG2细胞分为四组:空白对照组、Caspase抑制剂组、大黄素干预组、大黄素+Caspase... 目的:观察大黄素干预后,体外培养的人肝癌HepG2细胞株胞浆和胞核内AIF和EndoG的表达情况,探讨大黄素对非Cas-pase依赖细胞凋亡的影响。方法:将体外培养的HepG2细胞分为四组:空白对照组、Caspase抑制剂组、大黄素干预组、大黄素+Caspase抑制剂组;取对数生长期的细胞进行实验,药物作用48小时后提取各组细胞胞浆及胞核蛋白;采用Western Blotting法分别检测各组细胞胞浆和胞核内AIF与EndoG的表达,并进行统计学分析。结果:AIF和EndoG在大黄素干预组、大黄素+Cas-pase抑制剂组细胞胞浆和胞核的表达均高于空白对照组及Caspase抑制剂组(p<0.01),其中以大黄素+Caspase抑制剂组的表达最高(p<0.01)。结论:大黄素能促进体外培养的人肝癌HepG2细胞AIF和EndoG的表达和核转位,可以通过非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 大黄素 肝细胞癌 凋亡诱导因子 核酸内切酶G 细胞凋亡
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枸杞多糖对离体缺血性脑损伤后PARP-1和AIF的影响 被引量：4
3
作者 周茹 郝银菊 +5 位作者 姚婉霞 杨文莉 李南 乔海琦 杜娟 余建强 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期120-123,共4页
目的:探讨枸杞多糖(LBP)对原代培养的大鼠海马神经元氧糖剥夺损伤后调亡通路PARP-1/AIF的影响。方法:以原代培养的新生大鼠海马神经元为研究对象,用无糖培养液结合物理性缺氧建立氧糖剥夺损伤模型。Hoechst 33342染色法、Annexin V-FITC... 目的:探讨枸杞多糖(LBP)对原代培养的大鼠海马神经元氧糖剥夺损伤后调亡通路PARP-1/AIF的影响。方法:以原代培养的新生大鼠海马神经元为研究对象,用无糖培养液结合物理性缺氧建立氧糖剥夺损伤模型。Hoechst 33342染色法、Annexin V-FITC/PI法检测原代培养的新生大鼠海马神经细胞的凋亡;化学比色法测定神经细胞NAD含量的变化;琼脂糖凝胶电泳法检测DNA Ladder;免疫蛋白印迹技术和实时荧光定量PCR技术检测凋亡相关因子PARP-1、AIF和Endo G的蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组可显著降低神经细胞NAD的含量;神经元出现明显的DNA梯度;Hoechst 33342和Annexin V-FITC/PI法检测显示神经细胞凋亡率明显升高;出现大量的DNA断裂片段;PARP-1和AIF的蛋白水平明显上调,Endo G蛋白水平明显下调;PARP-1、AIF和Endo G的mRNA水平明显上调。与模型组比较,枸杞多糖治疗组(10、20、40 mg/L)和尼莫地平组可显著提高海马神经细胞NAD的含量;DNA梯度有不同程度的缓解;显著降低神经细胞的凋亡率;对DNA梯度有不同程度的缓解;明显抑制PARP-1和AIF蛋白表达,增强Endo G蛋白的表达;明显抑制PARP-1,AIF和Endo G mRNA表达。结论:枸杞多糖通过抑制PARP-1/AIF凋亡通路对氧糖剥夺再灌注损伤的新生大鼠海马神经元发挥保护作用。 展开更多
关键词 枸杞多糖 脑缺血性损伤 PARP-1 aif
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凋亡诱导因子(AIF)对细胞凋亡的调控 被引量：10
4
作者 王昌正 曹诚 马清钧 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期454-456,共3页
凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)是一种具有凋亡诱导活性的蛋白质,定位于线粒体的膜间隙。细胞受到凋亡刺激时,AIF分子从线粒体释放到胞质,然后再易位到核,与染色体DNA结合,使染色体核周边凝集和DNA断裂成约50 kb的大片段... 凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)是一种具有凋亡诱导活性的蛋白质,定位于线粒体的膜间隙。细胞受到凋亡刺激时,AIF分子从线粒体释放到胞质,然后再易位到核,与染色体DNA结合,使染色体核周边凝集和DNA断裂成约50 kb的大片段。AIF具有凋亡诱导活性和氧化还原酶活性,但二者的作用是脱偶联的。AIF是第一个被鉴定出可以不依赖于胱天蛋白酶(caspase)信号通路而直接介导细胞发生凋亡的分子,但后来也有的报道认为AIF的凋亡活性需依赖于胱天蛋白酶。 展开更多
关键词 凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor aif) 细胞凋亡 线粒体 胱天蛋白酶(caspase)
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DIDS对SIN-1诱导大鼠海马神经元凋亡及PARP-1/AIF表达的影响 被引量：3
5
作者 李曦 尹金宝 +5 位作者 钟志超 范洪领 许黎娟 郑原印 蔡仕宁 常全忠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1549-1552,共4页
目的观察氯通道阻断剂4,4'-二异硫氰基芪-2,2'-二磺酸(DIDS)对NO诱导的大鼠离体海马神经元凋亡的保护作用。方法离体培养12 d的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、3-吗啡斯德酮亚胺(3-morpholinosyndnomine,SIN-1)处理组、S... 目的观察氯通道阻断剂4,4'-二异硫氰基芪-2,2'-二磺酸(DIDS)对NO诱导的大鼠离体海马神经元凋亡的保护作用。方法离体培养12 d的SD大鼠海马神经元,随机分为正常对照组、3-吗啡斯德酮亚胺(3-morpholinosyndnomine,SIN-1)处理组、SIN-1+DIDS组。对各组神经元分别在相应的时间点用MTT法测定细胞生存率、Hoechst 33258测定凋亡百分数、免疫化学荧光分析检测凋亡信号蛋白PARP-1/AIF的变化、Western blot分析凋亡蛋白Caspase-3的变化。结果 DIDS呈剂量依赖性地抑制SIN-1诱导的神经元损伤,减少凋亡发生数目,并能抑制损伤所引起的Caspase-3的激活、削弱PARP-1/AIF的表达。结论氯通道可能参与了NO诱导的海马神经元损伤,氯通道阻断剂DIDS的保护作用可能与削弱PARP-1/AIF的表达有关。 展开更多
关键词 4 4'-二异硫氰基芪-2 2'-二磺酸(DIDS) 一氧化氮多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1) 凋亡诱导因子(aif) 凋亡 氯通道
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齐口裂腹鱼同种移植炎症因子AIF-1的克隆及蛋白质结构预测 被引量：5
6
作者 王利 魏勇 +2 位作者 龙钟明 刘港彪 苟小兰 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第2期723-727,共5页
同种移植炎症因子AIF-1是一种细胞质的钙离子结合蛋白。本研究采用RT-PCR方法从齐口裂腹鱼脾脏中克隆到AIF-1,并运用生物信息学方法预测其蛋白质结构。结果表明:齐口裂腹鱼AIF-1基因包含一个444 bp的完整阅读框,编码一个由147个氨基酸... 同种移植炎症因子AIF-1是一种细胞质的钙离子结合蛋白。本研究采用RT-PCR方法从齐口裂腹鱼脾脏中克隆到AIF-1,并运用生物信息学方法预测其蛋白质结构。结果表明:齐口裂腹鱼AIF-1基因包含一个444 bp的完整阅读框,编码一个由147个氨基酸组成的蛋白。AIF-1蛋白预测分子量为16.5 KDa,理论pI为4.43,无信号肽,有一个跨膜区,二级结构以α-螺旋为主,未见β-折叠区。同源建模显示齐口裂腹鱼AIF-1蛋白与已测定的小神经胶质细胞特定蛋白具有非常相似的三级结构。这为深入研究AIF-1分子结构和功能积累了参考资料。 展开更多
关键词 同种移植炎症因子aif-1 克隆 蛋白质结构 齐口裂腹鱼
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槲皮素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠远期学习记忆及PARP-1/AIF信号通路的影响 被引量：12
7
作者 杨青丽 陈彦锋 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期936-941,共6页
目的观察槲皮素对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠远期学习记忆及多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)/凋亡诱导因子(AIF)信号通路的影响。方法 56只7日龄新生SD大鼠随机分为假手术组、HIBD组、槲皮素低剂量(20 mg/kg)组和槲皮素高剂量(... 目的观察槲皮素对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠远期学习记忆及多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(PARP-1)/凋亡诱导因子(AIF)信号通路的影响。方法 56只7日龄新生SD大鼠随机分为假手术组、HIBD组、槲皮素低剂量(20 mg/kg)组和槲皮素高剂量(40 mg/kg)组,每组14只。除假手术组外,其余各组经右颈总动脉结扎并缺氧制作HIBD模型。槲皮素组在造模后立即腹腔注射相应剂量的槲皮素,每日1次,连续7 d;假手术组和HIBD组分别在同一时间点给予等量生理盐水腹腔注射。21日龄时,各组大鼠行悬挂实验和滑棒实验检测神经功能,28日龄时各组大鼠行Morris水迷宫检测空间学习记忆能力。水迷宫实验结束后,大鼠断头取脑,苏木精-伊红(HE)染色观察海马病理学改变,Western blot法检测海马PARP-1和AIF表达情况,ELISA法检测海马Bcl-2和Bax表达情况。结果与假手术组比较,HIBD组的神经功能和学习记忆能力显著下降;而与HIBD组比较,槲皮素低、高剂量组的神经功能和空间学习记忆能力显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示,假手术组大鼠海马的神经元结构完整,排列整齐紧密;HIBD组海马的神经元数量明显减少,且排列疏松;槲皮素低、高剂量组则较HIBD组神经元数量明显增多。HIBD组大鼠海马PARP-1、AIF和Bax表达高于槲皮素低、高剂量组,而槲皮素低、高剂量组高于假手术组,Bcl-2的变化则与此相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。槲皮素低、高剂量组相比,神经功能、学习记忆能力以及PARP-1、AIF、Bcl-2和Bax的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论槲皮素可以改善HIBD新生大鼠的远期学习记忆能力,其机制可能通过下调PARP-1/AIF细胞凋亡信号通路,抑制神经细胞凋亡,发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 槲皮素 PARP-1/aif信号通路 学习记忆 大鼠
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甲状腺激素对大鼠脑缺血再灌注损伤后CytC和AIF表达的影响 被引量：5
8
作者 张琼哲 刘恒方 +3 位作者 张敏 崔明 郭亚培 吴世陶 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期67-71,共5页
目的:探讨甲状腺激素(T3)对大鼠脑缺血再灌注损伤后Cyt C和AIF表达的影响及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham1)、假手术组+T3(sham2)、缺血再灌注组(IR)、缺血再灌注组+T3(T3)4组。线栓法建立MCAO模型,缺血后1 h及再灌注6 ... 目的:探讨甲状腺激素(T3)对大鼠脑缺血再灌注损伤后Cyt C和AIF表达的影响及其机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham1)、假手术组+T3(sham2)、缺血再灌注组(IR)、缺血再灌注组+T3(T3)4组。线栓法建立MCAO模型,缺血后1 h及再灌注6 h腹腔注射甲状腺激素10μg/100 g,生理盐水为安慰剂。缺血2 h,再灌注24 h后进行神经功能缺损评分;TTC染色测定脑梗死体积百分比;HE染色观察形态学变化;免疫组化技术和实时荧光定量PCR方法检测Cyt C及AIF阳性表达和m RNA水平。结果:与sham1、sham2相比,IR组Cyt C及AIF阳性表达及m RNA水平显著升高(P<0.01),而T3组较IR组显著下降(P<0.01),神经功能、梗死体积明显改善。结论:甲状腺激素对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其机制可能与抑制促凋亡因子CytC及AIF表达有关。 展开更多
关键词 甲状腺激素 脑缺血再灌注损伤 细胞色素C 凋亡诱导因子
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PARP-1激活和AIF易位在肠缺血再灌注损伤中的作用 被引量：2
9
作者 邢莉 潘旭东 +3 位作者 方纬 赵莉 刘光茂 李虎臣 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1489-1492,1549,共5页
目的:研究大鼠肠缺血再灌注后肠损伤中是否存在聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)激活和凋亡诱导因子(AIF)易位,并探索二者在肠缺血再灌注损伤中的作用。方法:通过阻断腹腔干和肠系膜上动脉30min后,恢复血运,制作鼠肠缺血再灌注模型,分... 目的:研究大鼠肠缺血再灌注后肠损伤中是否存在聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)激活和凋亡诱导因子(AIF)易位,并探索二者在肠缺血再灌注损伤中的作用。方法:通过阻断腹腔干和肠系膜上动脉30min后,恢复血运,制作鼠肠缺血再灌注模型,分为肠缺血再灌注组(I/R),缺血再灌注前15min经静脉给PARP-1抑制剂3-AB组(Drug)和假手术组(Sham)。取肠组织分别作HE染色、聚腺苷二磷酸核糖(PAR)的免疫组化染色,TUNEL方法检测组织细胞凋亡情况,WesternBlot检测凋亡早期信号PARP-1片段p85和凋亡诱导因子(AIF)的表达情况。结果:I/R组肠损伤程度、PAR阳性表达率、细胞凋亡率和凋亡早期信号PARP-1p85片段、AIF表达程度均较Sham组显著增高(P<0.05);应用PARP-1抑制剂后,Drug组上述指标均较I/R组显著降低(P<0.05),但仍高于Sham组。结论:在大鼠肠缺血再灌注损伤中存在PARP-1激活和AIF易位两分子事件,并在肠缺血再灌注损伤中发挥重要作用;肠缺血再灌注前应用PARP-1抑制剂有肠保护效果。 展开更多
关键词 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶一1(PARP一1) 缺血再灌注 肠损伤 凋亡诱导因子(aif)
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慢性酒精中毒大鼠海马神经元凋亡及caspase-8、AIF的表达升高 被引量：9
10
作者 段玉香 石秋艳 姜进克 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第12期1309-1312,共4页
目的观察慢性酒精中毒大鼠海马神经元凋亡及caspase-8、AIF蛋白表达情况,探讨慢性酒精中毒脑损伤可能的发病机制。方法清洁级8周龄雄性SD大鼠45只,随机分为对照组和酒精组,采用逐步增加浓度自由饮方法建立慢性酒精中毒大鼠动物模型。应... 目的观察慢性酒精中毒大鼠海马神经元凋亡及caspase-8、AIF蛋白表达情况,探讨慢性酒精中毒脑损伤可能的发病机制。方法清洁级8周龄雄性SD大鼠45只,随机分为对照组和酒精组,采用逐步增加浓度自由饮方法建立慢性酒精中毒大鼠动物模型。应用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能,采用HE染色法观察海马神经元病理形态学改变,TUNEL法、免疫组化法检测凋亡神经元数量及caspase-8、AIF蛋白的表达。结果酒精组可见海马神经元数目缺失及细胞变性和损伤,其凋亡神经元数和caspase-8、AIF蛋白表达阳性细胞数均高于对照组(P<0.01)。结论慢性酒精中毒大鼠海马存在明显神经元凋亡,伴有caspase-8、AIF蛋白表达增加,通过caspase依赖性和非依赖性两种通路发生细胞凋亡可能是其病理基础之一。 展开更多
关键词 慢性酒精中毒 细胞凋亡 CASPASE-8 凋亡诱导因子
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AIF基因的能量代谢功能分析 被引量：2
11
作者 杨驹 关静 +6 位作者 纵亮 王洪阳 张超 张悦 郭维维 翟所强 王秋菊 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第2期250-254,共5页
目的量化AIF基因在细胞能量代谢中的功能特性,探讨该基因相关听神经病的分子致病机制。方法选择第三代基因编辑工具CRISPR-Cas9技术结合阳离子脂质体转染技术,快速实现对HELA细胞的AIF基因进行敲除,并通过Western blot进行蛋白表达分析,... 目的量化AIF基因在细胞能量代谢中的功能特性,探讨该基因相关听神经病的分子致病机制。方法选择第三代基因编辑工具CRISPR-Cas9技术结合阳离子脂质体转染技术,快速实现对HELA细胞的AIF基因进行敲除,并通过Western blot进行蛋白表达分析,Sanger测序进行基因型的分析,然后利用Oxygraph-2K对多个AIF基因敲除细胞系以及野生型细胞系进行氧化供能的检测,最后采用Graph Pad prism5.00进行数据分析。结果通过该方法获得了多株AIF基因敲除细胞系,并发现野生型细胞系耗氧功能明显强于AIF基因敲除细胞系。结论通过CRISPR-Cas9技术的应用,本研究快速实现了AIF蛋白表达缺失细胞系和野生型细胞系在氧化呼吸方面的差异比较,间接量化了该基因缺失所导致的能量损失,能量供应障碍可能是听神经病的致病机制之一。 展开更多
关键词 aif基因 听神经病 CRISPR-Cas9 基因敲除 氧化耗能
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AIF与Calpain-I在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量：2
12
作者 赵悦 彭杰 +2 位作者 李兴德 朱中成 张明云 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第3期601-604,共4页
目的:检测胃癌组织中抑癌基因AIF与Calpain-I mRNA水平的表达情况,探讨其在胃癌发生发展中的作用及其临床意义。方法:实时荧光定量PCR法检测64例胃癌组织及其对应的癌旁组织中AIF与Cal-pain-I mRNA表达情况。结果:胃癌组织中AIF与Calpai... 目的:检测胃癌组织中抑癌基因AIF与Calpain-I mRNA水平的表达情况,探讨其在胃癌发生发展中的作用及其临床意义。方法:实时荧光定量PCR法检测64例胃癌组织及其对应的癌旁组织中AIF与Cal-pain-I mRNA表达情况。结果:胃癌组织中AIF与Calpain-I mRNA表达水平较癌旁组织上调,其阳性率分别为84%和75%,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。早期胃癌中AIF与Calpain-I mRNA表达水平增高,随着肿瘤恶性程度的增高、临床分期的变晚,逐渐表现出下调趋势。结论:在胃癌组织中,AIF与Calpain-I mR-NA表达水平较癌旁正常组织上调,且与胃癌的临床分期显著相关。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR aif Calpain-I 胃癌
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凋亡诱导因子(AIF)在胃癌细胞和组织中的表达及意义 被引量：5
13
作者 王昌正 李英男 +2 位作者 吴本俨 朱鸣 王卫华 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第7期1184-1186,共3页
目的:探讨凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:用免疫印迹法检测AIF在细胞中的表达量;用免疫组化法检测AIF在29例胃癌组织和10例癌旁正常胃组织中的表达。结果:胃癌细胞株中(低... 目的:探讨凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:用免疫印迹法检测AIF在细胞中的表达量;用免疫组化法检测AIF在29例胃癌组织和10例癌旁正常胃组织中的表达。结果:胃癌细胞株中(低分化胃癌细胞株MGC-803、中分化胃癌细胞株SGC-7901)AIF的表达量高于胃上皮细胞株(胎儿胃上皮细胞株HFE-145、胃上皮永生细胞株GES-1);AIF在胃癌组织、癌旁正常胃组织中表达阳性率分别为41.38%、10%,胃癌组织中AIF的表达与肿瘤的浸润深度、TNM分期、有无淋巴结转移均无关(P>0.05)。结论:AIF的表达量上调可能对胃癌的发生、发展起一定作用。 展开更多
关键词 凋亡诱导因子 胃癌细胞 胃癌组织 免疫印迹 免疫组化
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真核表达载体PcDNA3.0-AIF△1-480构建及其促凋亡活性的研究 被引量：1
14
作者 赵悦 肖华卫 +5 位作者 王乐 王丽娟 李萌 金桂花 周侠 朱青 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期806-810,共5页
目的:构建AIF截短后只保留羧基端促凋亡结构域的真核表达载体,了解其是否有促凋亡活性作用及其机制。方法:通过PCR方法构建出AIF截短体AIF△1-480的真核表达载体。采用脂质体将该载体瞬时转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,采用流式细胞技术... 目的:构建AIF截短后只保留羧基端促凋亡结构域的真核表达载体,了解其是否有促凋亡活性作用及其机制。方法:通过PCR方法构建出AIF截短体AIF△1-480的真核表达载体。采用脂质体将该载体瞬时转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,采用流式细胞技术检测其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用,同时采用JC-1流式细胞技术检测其对线粒体膜电位的影响。选取5～7周龄BALB/c雌性裸鼠35只,构建荷瘤裸鼠模型,并在体内实验中检测该载体的促凋亡活性作用。结果:成功构建真核表达载体PcDNA3.0-AIF△1-480,并经酶切鉴定和DNA测序证明。在体外实验中,与对照组相比该载体能够诱导MCF7细胞发生凋亡,对照组、PcDMA3.0组和PcDNA3.0-AIF△1-480组凋亡率分别为0.01%、16.01%和28.55%。同时MCF7细胞转染该载体后能够使线粒体膜电位发生去极化,导致凋亡的发生,对照组、PcD-MA3.0组和PcDNA3.0-AIF△1-480组凋亡率分别为2.26%、60.37%和95.78%。在荷瘤裸鼠模型中,转染该载体后能够抑制肿瘤的生长,至观察终点中位肿瘤体积分别为1 187.2、1 000.0和609.4mm3。结论:截短后只保留羧基端的AIF仍然有促凋亡活性作用,其机制是通过改变线粒体膜电位来发挥促凋亡作用。 展开更多
关键词 真核表达载体 aif 凋亡 小鼠 裸
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Daintain/AIF-1促进肝癌细胞的增殖与迁移 被引量：2
15
作者 贾绍辉 姜华 +1 位作者 杜仲夏 陈正望 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第2期257-259,共3页
目的:探讨炎症因子Daintain/AIF-1在肝癌发生发展进程中的作用。方法:利用结晶紫染色方法测定HepG2细胞的增殖,流式细胞术测定细胞周期分布,western blot方法检测相关周期表达蛋白,Transwell方法检测HepG2细胞的迁移。结果:在此研究中... 目的:探讨炎症因子Daintain/AIF-1在肝癌发生发展进程中的作用。方法:利用结晶紫染色方法测定HepG2细胞的增殖,流式细胞术测定细胞周期分布,western blot方法检测相关周期表达蛋白,Transwell方法检测HepG2细胞的迁移。结果:在此研究中我们发现Daintain/AIF-1通过上调周期相关蛋白cyclinD1和cdk4的表达以及增加Rb的磷酸化,加快了HepG2细胞周期的进程,从而促进了HepG2细胞的增殖,另外我们发现Daintain/AIF-1也促进了HepG2细胞的迁移。结论:此研究表明Daintain/AIF-1参与了肝癌的发生发展进程,更进一步证明了炎症因子与癌症的发生发展密不可分。 展开更多
关键词 Daintain aif-1 HEPG2细胞 增殖 迁移
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锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型的保护作用及其对AIF凋亡通路的影响 被引量：2
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作者 贾国强 巴晓红 潘凤英 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期228-232,共5页
目的研究不同浓度的锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型的保护效果,确定有效的浓度,并探讨其对AIF凋亡通路的作用,分析其神经保护作用的机制。方法以不同浓度的锂剂对制备氧糖剥夺模型的SH-SY5Y细胞进行预处理,观察其对细胞的保护作用。MTT... 目的研究不同浓度的锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型的保护效果,确定有效的浓度,并探讨其对AIF凋亡通路的作用,分析其神经保护作用的机制。方法以不同浓度的锂剂对制备氧糖剥夺模型的SH-SY5Y细胞进行预处理,观察其对细胞的保护作用。MTT法描绘细胞生长曲线。Annexin V和PI双染,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。免疫荧光检测凋亡诱导因子(AIF)蛋白的变化。结果 MTT显示不同浓度的锂剂对SH-SY5Y细胞氧糖剥夺模型有较强的细胞保护作用,1mmol/L氯化锂为细胞保护的有效剂量。Annexin V和PI双染,流式细胞仪检测可见锂剂处理组凋亡细胞明显减少。免疫荧光染色可见锂剂处理组AIF蛋白发生核移位减少。结论锂剂对氧糖剥夺模型的SH-SY5Y细胞具有较强的保护作用,1mmol/L氯化锂为细胞保护的有效剂量,其作用机制之一可能是对AIF凋亡通路的抑制。 展开更多
关键词 SH—SY5Y细胞 aif凋亡通路 锂剂 氧糖剥夺模型
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低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸NO含量、NOS活性及AIF基因的变化 被引量：5
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作者 方芳 王志成 +3 位作者 刘扬 赵刚 刘娅 龚守良 《中国辐射卫生》 2010年第1期3-5,共3页
目的研究低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性及凋亡诱导因子（apoptosis inducing factor，AIF）基因的变化。方法酶法检测不同剂量（0、0．025、0．05、0．075、0．1及0．2Gy）及0．075Gy照射后... 目的研究低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸一氧化氮（NO）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性及凋亡诱导因子（apoptosis inducing factor，AIF）基因的变化。方法酶法检测不同剂量（0、0．025、0．05、0．075、0．1及0．2Gy）及0．075Gy照射后不同时间（0、3、6、12、18和24h）小鼠睾丸组织中NO含量及NOS活性的变化；Real—time PCR和Western blot法检测不同剂量（0、0．05、0．075、0．1及0．2Gy）及0．075Gy照射后不同时间（0、6、12和24h）小鼠睾丸组织中AIF mRNA表达及蛋白的表达。结果不同剂量X射线照射后12h，小鼠睾丸组织中NO含量及NOS活性随照射剂量增加而增加，0．075Gy增至最大（P〈0．05），0．1～0．2Gy一直维持较高水平（P〈0．05）；AIF mRNA随剂量增加而增加，0．1Gy时达到最大（P〈0．05）；而AIF蛋白在0．075Gy时达到最大。0．075Gy X射线照射后，NO含量与NOS活性随时间延长而增加，NO含量在24h时增到峰值（P〈0．05），而NOS活性在12h时达到峰值（P〈0．05）；AIF mRNA随时间延长而增加，在24h时达到峰值（P〈0．05）；其蛋白表达在12h时达到峰值。结论低剂量电离辐射照射后，小鼠睾丸生精细胞中NO含量、NOS活性及AIF基因表达增加，具有时程和剂量效应规律性。 展开更多
关键词 一氧化氮 一氧化氮合酶 凋亡诱导因子 睾丸 电离辐射
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AIF在细胞程序性死亡中的研究进展 被引量：6
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作者 刘娟 贾迪 杨丹 《生命的化学》 CAS CSCD 2020年第11期2043-2047,共5页
凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)是参与细胞程序性死亡的重要因子,最早在线粒体凋亡途径中被发现。AIF通过非半胱天冬酶(caspase)依赖的凋亡途径参与细胞凋亡过程,在凋亡信号刺激下,AIF从线粒体释放,引起染色质凝聚和DNA... 凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)是参与细胞程序性死亡的重要因子,最早在线粒体凋亡途径中被发现。AIF通过非半胱天冬酶(caspase)依赖的凋亡途径参与细胞凋亡过程,在凋亡信号刺激下,AIF从线粒体释放,引起染色质凝聚和DNA断裂。有研究发现,AIF参与了多聚ADP核糖聚合酶-1(poly ADP-ribose polymerase-1,PARP-1)依赖性细胞死亡(parthanatos)过程。Parthanatos是由PARP-1过度活化后诱导PAR聚合物合成和积累并与AIF结合,随后诱导AIF从线粒体释放来引起大规模的DNA断裂的过程。AIF参与的细胞凋亡和parthanatos在细胞程序性死亡的研究中具有同等重要的意义。本文以AIF为线索,对细胞凋亡和parthanatos两种细胞死亡的机制和相关疾病的研究进展进行总结。 展开更多
关键词 凋亡诱导因子 PARP-1依赖性细胞死亡 细胞凋亡 疾病治疗
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PARP-1、AIF在大鼠脊髓损伤后细胞凋亡中的作用 被引量：2
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作者 赵伟 高文杰 +2 位作者 张倩 孔庆阔 孙研 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2015年第3A期259-264,共6页
目的探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(parp-1)、凋亡诱导因子(aif)在大鼠脊髓损伤后细胞凋亡中的作用。方法脊髓损伤模型以allen’S法制备。成年健康Sd大鼠随机分为损伤组、parp-1抑制剂组和假手术组。每组再分1d、3d、7d、14d时间点。苏... 目的探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(parp-1)、凋亡诱导因子(aif)在大鼠脊髓损伤后细胞凋亡中的作用。方法脊髓损伤模型以allen’S法制备。成年健康Sd大鼠随机分为损伤组、parp-1抑制剂组和假手术组。每组再分1d、3d、7d、14d时间点。苏木精-伊红(he)染色观察脊髓组织形态学变化;用免疫组织化学方法检测各组各时间点parp-1、aif的表达变化;原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导duTp标记法(Tunel)检测细胞的凋亡水平。结果 he染色结果显示,与假手术组相比,损伤组脊髓结构破坏明显,大量炎性细胞浸润,许多神经元变性坏死;抑制剂组与损伤组比较,脊髓损伤程度减轻,存活神经元较多。免疫组化结果显示,与假手术组相比,术后1~14d损伤组脊髓parp-1、aif表达明显增强(p<0.57),且于3d达高峰(p<0.05);与损伤组相比,抑制剂组各时间点脊髓parp-1、aif阳性表达均显著降低(p<0.05)。Tunel结果显示,与假手术组比较,损伤组阳性细胞凋亡率明显升高,且在损伤后3d最高(均p<0.05);而抑制剂组各时间点细胞凋亡率均明显低于损伤组,但高于假手术组(均p<0.05)。结论大鼠脊髓损伤后存在parp-1、aif介导的细胞凋亡,二者在损伤后细胞凋亡的早期可能起重要作用。 展开更多
关键词 PARP-1 aif 细胞凋亡 脊髓损伤 大鼠
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知柏地黄汤对UU感染大鼠生精细胞凋亡及凋亡因子Cyt-c、AIF表达的影响 被引量：4
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作者 郭炫佐 何清湖 李迎秋 《湖南中医药大学学报》 CAS 2016年第1期15-18,共4页
目的探讨知柏地黄汤对解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,UU)感染大鼠精液质量、生精细胞凋亡及凋亡因子Cyt-c、AIF表达的影响。方法从60只雄性SD大鼠中随机抽取45只,经膀胱注射造成UU感染动物模型,剩余15只作为正常组。UU感染模型动... 目的探讨知柏地黄汤对解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,UU)感染大鼠精液质量、生精细胞凋亡及凋亡因子Cyt-c、AIF表达的影响。方法从60只雄性SD大鼠中随机抽取45只,经膀胱注射造成UU感染动物模型,剩余15只作为正常组。UU感染模型动物再随机分成模型组、阿奇霉素组(西药组)和知柏地黄汤组(中药组),于接种后第10 d予以模型组和正常组生理盐水灌胃,阿奇霉素组和知柏地黄汤治疗组分别予相应药物灌胃,连续干预2l d后处死动物,检测各组精子运动参数、生精细胞凋亡率及细胞凋亡因子细胞色素C(cytochrome c,Cyt-c)、细胞凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠精子质量明显降低,UU培养阳性率、生精细胞凋亡率及Cyt-c、AIF表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,中药组、西药组精子质量提高,UU培养阳性率、细胞凋亡率、Cyt-c、AIF表达均降低(P<0.01,P<0.05);与西药组比较,中药组改善精子质量较高(P<0.05,P<0.01),降低UU感染率,差异无统计学意义(P>0.05)。结论知柏地黄汤改善UU感染大鼠精子质量优于阿奇霉素,且与阿奇霉素抗UU感染作用相当,其机制可能与其降低凋亡因子Cyt-c、AIF表达相关。 展开更多
关键词 知柏地黄汤 解脲支原体 生精细胞 细胞色素C 细胞凋亡诱导因子 熟地黄 知母 黄柏
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