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shRNA静默CD4~+ T细胞AHNAK1基因对小鼠甲状腺相关性眼病进程的抑制作用 被引量:1
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作者 陈华新 于少硕 +1 位作者 周维明 张意 《国际眼科杂志》 CAS 2014年第2期225-228,共4页
目的:构建表达小鼠CD4+T细胞钙支架蛋白AHNAK1的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,并研究其对小鼠甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)的抑制效应。方法:设计并筛选对AHNAK1具有良好干扰效力的shRNA... 目的:构建表达小鼠CD4+T细胞钙支架蛋白AHNAK1的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,并研究其对小鼠甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)的抑制效应。方法:设计并筛选对AHNAK1具有良好干扰效力的shRNA序列,慢病毒载体包装干扰序列,感染小鼠CD4+T细胞,检测AHNAK1静默对T细胞功能的抑制作用,采用实验动物模型观察AHNAK1体内抑制甲状腺相关性眼病的效果。结果:成功筛选出具有良好干扰效力的shRNA,并包装入慢病毒。病毒滴度为1.0×106TU/mL,转染慢病毒的CD4+T细胞展现出失能倾向,抑制炎症免疫反应;在动物模型中抑制T细胞中AHNAK1表达可以有效控制甲状腺眼病的发生发展,显著降低治疗组T细胞中IL-2、IL-1β和IFN-γ的表达。结论:成功构建了表达小鼠AHNAK1 shRNA的慢病毒,具有抑制T细胞分泌IL-2、IL-1β和IFN-γ的表达效应,能够有效抑制甲状腺眼病的发生发展。 展开更多
关键词 ahnak1 T细胞 RNA干扰 甲状腺相关性眼病 免疫调控
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