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转Rs-AFP2基因小麦的分子分析及其纹枯病抗性 被引量:16
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作者 路妍 张增艳 +8 位作者 任丽娟 刘宝业 廖勇 徐惠君 杜丽璞 马鸿翔 任正隆 井金学 辛志勇 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期640-646,共7页
Rs-AFP2属于r-硫堇类抗菌肽,主要通过形成离子通道直接破坏细胞来杀灭病原菌。本研究通过基因枪介导法结合对目标基因的分子检测,证明已将外源Rs-AFP2基因转入小麦推广品种扬麦12中。通过逐株抗纹枯病接种鉴定、PCR、PCR-Southern blot... Rs-AFP2属于r-硫堇类抗菌肽,主要通过形成离子通道直接破坏细胞来杀灭病原菌。本研究通过基因枪介导法结合对目标基因的分子检测,证明已将外源Rs-AFP2基因转入小麦推广品种扬麦12中。通过逐株抗纹枯病接种鉴定、PCR、PCR-Southern blot、Southern blot和RT-PCR/荧光定量RT-PCR(Q-RT-PCR)分析,对转Rs-AFP2基因小麦T1至T4代植株跟踪检测。结果表明,Rs-AFP2在转基因小麦中能够稳定遗传,以单拷贝整合到小麦基因组中,遗传方式符合孟德尔遗传规律,并能在转录水平上表达。对转Rs-AFP2基因小麦的抗病性、主要农艺性状以及Rs-AFP2表达活性分析结果表明,与受体扬麦12相比,Rs-AFP2表达活性高的转基因小麦植株对纹枯病抗性有明显提高,其抗病性可以遗传,而主要农艺性状没有明显差异,证明可以利用Rs-AFP2基因和基因工程途径创制抗纹枯病小麦新种质。 展开更多
关键词 抗菌肽 Rs-afp2 转基因小麦 基因表达 纹枯病抗性
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prp1-1调控Rs-AFP2诱导表达对增强辣椒疫霉菌抗性的研究(英文) 被引量:1
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作者 黄真池 罗齐军 +1 位作者 欧阳乐军 曾富华 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期892-897,共6页
病原物诱导型启动子能精确控制抗病基因在侵染位点的表达,是抗病基因工程的有效工具。prp1-1是来自马铃薯谷胱甘肽巯基转移酶基因启动子的一个273bp的片段,能够快速准确地启动被侵染位点抗病基因的表达;Rs-AFP2是具有对致病性丝状真菌... 病原物诱导型启动子能精确控制抗病基因在侵染位点的表达,是抗病基因工程的有效工具。prp1-1是来自马铃薯谷胱甘肽巯基转移酶基因启动子的一个273bp的片段,能够快速准确地启动被侵染位点抗病基因的表达;Rs-AFP2是具有对致病性丝状真菌的广谱抗性。该研究构建prp1-1调控Rs-AFP2基因表达的载体,经农杆菌介导转化法导入辣椒。逆转录PCR检测发现,转基因辣椒只在受到疫霉菌孢子侵染时,才由prp1-1启动Rs-AFP2基因的转录。用疫霉菌孢子灌根接种转基因辣椒T1代植株,35株T1代辣椒中有29株表现出明显的疫霉菌抗性。另将23株T1代辣椒种于人工气候箱,发现其形态和发育特征与相同条件下的非转基因植株无明显区别。研究表明,prp1-1调控Rs-AFP2的诱导表达达到了增强辣椒疫霉菌抗性的目的,而且避免了负面效应的发生。 展开更多
关键词 辣椒 prp1-1 Rs-afp2 疫霉菌
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AFP2基因调控拟南芥茉莉酸合成与开花时间的分析 被引量:1
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作者 安敏敏 杨立明 罗玉明 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期3259-3266,共8页
拟南芥AFPs (ABI five interaction proteins)是一类与植物激素脱落酸(ABA)信号途径中转录因子ABI5互作的蛋白,以前报道它们可以通过促进ABI5的降解来调控种子萌发,但是AFPs的新功能鲜有报道。我们发现过表达AFPs家族成员之一AFP2可以... 拟南芥AFPs (ABI five interaction proteins)是一类与植物激素脱落酸(ABA)信号途径中转录因子ABI5互作的蛋白,以前报道它们可以通过促进ABI5的降解来调控种子萌发,但是AFPs的新功能鲜有报道。我们发现过表达AFPs家族成员之一AFP2可以促进拟南芥小苗茉莉酸(JA)的合成并延迟开花,反之,拟南芥突变体afp2表现为较低的茉莉酸积累与较早的开花时间。突变茉莉酸合成酶LOX2或受体COI1都可以部分缓解AFP2-ox的晚花表型,同时过表达AFP2增强了AFP2类转录因子TOE1结合到成花素FT启动子区域的能力,并抑制FT的转录导致晚花。以上结果揭示了AFP2参与ABA与JA信号调控开花时间的新功能。 展开更多
关键词 拟南芥 afp2 茉莉酸 开花时间
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AFP2 Coordinates the Activity of PIF7 for Thermomorphogenesis in Arabidopsis Seedlings 被引量:2
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作者 Guoli Deng Songbei Ying +3 位作者 Sasa Jing Jun Zhou Shiyan Lu Ping Li 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2021年第4期1089-1101,共13页
Ambient temperature induces the hypocotyl elongation of seedling,called as thermomorphogenesis.It has been reported that the bHLH transcriptional factor PIF7 acts as the critical component to modulate plant thermomorp... Ambient temperature induces the hypocotyl elongation of seedling,called as thermomorphogenesis.It has been reported that the bHLH transcriptional factor PIF7 acts as the critical component to modulate plant thermomorphogenesis,but the underlying mechanism remains elusive.The phytohormone abscisic acid(ABA)suppresses the hypocotyl elongation under high temperature(HT)stress.As the ABI5 binding protein,AFP2 acts as the negative factor to control ABA signaling.In this study,we first identified AFP2 as the interaction protein of PIF7 in vitro and in vivo.Phenotype analysis revealed that overexpressing AFP2 reduced the hypocotyl elongation,while loss-of-function afp2 mutant showed longer hypocotyl under HT.Consistently,overexpressing AFP2 impaired the transactivation effect of PIF7 on auxin biosynthesis related genes YUC8 and IAA19,which possibly resulted into the shorter hypocotyl in the transgenic line overexpressing AFP2 or co-overexpressing AFP2 and PIF7.Thus,these data suggest that AFP2 suppressed PIF7 activity to suppress hypocotyl elongation.Furthermore,we found that HT gradually induced the degradation of AFP2 that possibly released the inhibitory effect of AFP2 on PIF7,thus induced hypocotyl elongation under HT.Taken together,our result reveals the novel function of AFP2 in coordinating thermomorphogenesis through sophistically modulating PIF7 activity. 展开更多
关键词 Thermomorphogenesis afp2 PIF7 hypocotyl elongation
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抗菌肽Rs-AFP_2的原核表达及抑菌活性 被引量:10
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作者 路妍 刘宝业 +1 位作者 井金学 张增艳 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期84-88,共5页
为了明确人工合成的萝卜抗菌肽Rs-AFP2基因编码产物是否对一些重要农作物病原真菌有抑制作用,本文将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建成GST-Rs-AFP2融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了... 为了明确人工合成的萝卜抗菌肽Rs-AFP2基因编码产物是否对一些重要农作物病原真菌有抑制作用,本文将该基因编码序列亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建成GST-Rs-AFP2融合蛋白表达载体。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式表达的GST-Rs-AFP2重组蛋白。经过裂解、洗涤、溶解、复性、离心等处理,获得了纯化的GST-Rs-AFP2融合蛋白。对重要作物病原真菌进行体外抑菌分析的结果表明,Rs-AFP2可以显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯病菌、小麦根腐病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌的菌丝生长,说明Rs-AFP2可作为上述植物病害抗性基因育种的潜在基因。 展开更多
关键词 抗菌蛋白Rs-afp2 复性 抑制真菌 植物病原真菌
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几丁质酶基因与抗真菌蛋白基因、葡聚糖酶基因双价表达载体的构建及农杆菌工程菌株的重组 被引量:4
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作者 王华 周鹏 郭安平 《西北植物学报》 CAS CSCD 2002年第2期250-256,共7页
几丁质酶 (Chitinase,Chi.)、β- 1 ,3 -葡聚糖酶 (β- 1 ,3 - Glucanase,Glu.)和萝卜抗真菌蛋白 (Rs- AFP2 )是植物体内正常的表达产物 ,它们对防御植物的真菌病害具有重要的作用。基于它们在功能上具有协同作用 ,本研究利用基因工程... 几丁质酶 (Chitinase,Chi.)、β- 1 ,3 -葡聚糖酶 (β- 1 ,3 - Glucanase,Glu.)和萝卜抗真菌蛋白 (Rs- AFP2 )是植物体内正常的表达产物 ,它们对防御植物的真菌病害具有重要的作用。基于它们在功能上具有协同作用 ,本研究利用基因工程技术构建了几丁质酶和抗真菌蛋白、几丁质酶和葡聚糖酶双价表达载体 ,通过农杆菌直接转化技术将双价表达载体转入农杆菌EH A1 0 5 ,最后采用 PCR、DNA dot 展开更多
关键词 几丁质酶 葡聚糖酶 抗真菌蛋白 双价表达载体 农杆菌工程菌株 重组
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