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aFGF磺化壳寡糖温敏凝胶的制备与缓释研究
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作者 刘艳梅 《广东化工》 CAS 2024年第1期31-33,58,共4页
通过合成反应制备了P407-P188泊洛沙姆和磺化壳寡糖复合温敏凝胶并负载aFGF,用于对aFGF进行缓释保护。SEM结果表明该复合温敏凝胶呈疏松多孔,层状分布,有助于吸附aFGF蛋白。体外释放实验结果表明在5d以后,aFGF的释放基本呈缓慢持续增长... 通过合成反应制备了P407-P188泊洛沙姆和磺化壳寡糖复合温敏凝胶并负载aFGF,用于对aFGF进行缓释保护。SEM结果表明该复合温敏凝胶呈疏松多孔,层状分布,有助于吸附aFGF蛋白。体外释放实验结果表明在5d以后,aFGF的释放基本呈缓慢持续增长,说明复合温敏凝胶具有缓控释放的效果。生物相容性评价表明aFGF磺化壳寡糖温敏凝胶在小鼠体内存在异物性,但并没有毒性和抗原性,且具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 afgf 磺化壳寡糖 温敏凝胶 缓释研究 生物相容性
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红花遗传转化受体系统的建立及转酸性成纤维细胞生长因子aFGF的初步研究 被引量:14
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作者 杨晶 李海燕 +2 位作者 付宏歧 刘秀明 李校堃 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期411-414,共4页
目的:将aFGF与红花的油体蛋白融合,转入红花中,直接通过提取红花油来实现红花与aFGF的双重功效。方法:以不同日龄的红花子叶为外植体,采取正交试验设计的方法,摸索出红花再生体系的最佳条件。然后通过农杆菌介导法将aFGF基因转入到红花... 目的:将aFGF与红花的油体蛋白融合,转入红花中,直接通过提取红花油来实现红花与aFGF的双重功效。方法:以不同日龄的红花子叶为外植体,采取正交试验设计的方法,摸索出红花再生体系的最佳条件。然后通过农杆菌介导法将aFGF基因转入到红花中,对不同浓度的抗生素进行筛选,进行PCR鉴定,计算阳性率。结果:根据不同的激素配比,确定了红花分化的最佳培养基为MS+BA1.0 mg.L-1+NAA0.2 mg.L-1;生根的最适培养基为1/4 MS+NAA2.0 mg.L-1+IAA0.5 mg.L-1。3种不同种类和浓度的抑菌抗生素对红花浸染后的抑菌效果略有不同,结合抑菌效果,污染率,芽的分化率以及成本问题等因素的综合考虑,抑菌抗生素选择用Tim,质量浓度为400 mg.L-1即可抑制细菌的生长,同时有利于芽的分化;hyg的筛选压力则选择6 mg.L-1为它的临界浓度;对8棵转化植株进行鉴定,阳性率为25%。结论:通过器官发生途径,确定出红花分化与生根的最佳激素组合与配比,建立了红花的再生体系;确定出最适的抑菌抗生素与筛选抗生素的浓度;经过筛选获得的再生植株,通过PCR检测,部分扩增出aFGF目的基因,证实了aFGF基因整合到红花基因组中。这为红花作为植物生物反应器的研究奠定了扎实的基础。 展开更多
关键词 红花 再生体系 afgf 遗传转化
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Genistein对aFGF诱导的AGZY-83A细胞增殖的抑制作用 被引量:13
3
作者 孙黎光 马际 +1 位作者 侯伟健 邢伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期10-11,14,共3页
目的 :探讨酪氨酸蛋白激酶 (TPK)抑制剂 Genistein对酸性成纤维细胞生长因子 (a FGF)诱导的肺腺癌细胞株 AGZY- 83A细胞增殖的抑制作用。方法 :以不同浓度的 a FGF刺激 AGZY- 83A细胞 ,再对由 a FGF引起增殖的细胞施加不同浓度的 Genist... 目的 :探讨酪氨酸蛋白激酶 (TPK)抑制剂 Genistein对酸性成纤维细胞生长因子 (a FGF)诱导的肺腺癌细胞株 AGZY- 83A细胞增殖的抑制作用。方法 :以不同浓度的 a FGF刺激 AGZY- 83A细胞 ,再对由 a FGF引起增殖的细胞施加不同浓度的 Genistein,用细胞计数器计数细胞 ,观察 Genistein对细胞增殖的抑制作用。结果 :a FGF可使该细胞株增殖比明显增加 ,而 Genistein可引起细胞增殖比明显下降 ,其程度均随浓度增高而增强。结论 :该细胞株中 a FGF受体有 TPK活性 ,Genistein对 a 展开更多
关键词 TPK 抑制剂 GENISTEIN 细胞增殖 afgf 肿瘤
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大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究 被引量:6
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作者 盖玉红 王旺 +5 位作者 金潇 王嘉琪 李宏博 王刚 杨晶 魏健 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1898-1904,共7页
目的:利用红花表达酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF),为利用植物生物反应器规模化生产aFGF奠定基础。方法:将人源aFGF基因改造为植物偏好性的aFGF基因序列,通过PCR搭桥技术克隆植物偏好的aFGF基因,利用酶... 目的:利用红花表达酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF),为利用植物生物反应器规模化生产aFGF奠定基础。方法:将人源aFGF基因改造为植物偏好性的aFGF基因序列,通过PCR搭桥技术克隆植物偏好的aFGF基因,利用酶切连接方法构建植物油体表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌EHA105,利用农杆菌介导的方法转化到塔城红花中,对转化红花进行PCR,Southern杂交,RT-PCR分子检测。结果:扩增出植物偏好的aFGF基因的全长序列,并与大豆油体蛋白基因Doil基因融合,成功地插入到改造好的含有大豆油体蛋白启动子表达载体中,探索了进行红花遗传转化的最佳条件,成功获得单位点插入的3个独立转化红花植株,在转录水平都有大小一致的aFGF的表达。结论:该实验成功构建了含aFGF植物油体表达载体,并筛选出最佳的遗传转化条件,A为0.6,侵染时间为10 min,共培养3 d,获得了aFGF转录水平表达的转基因红花植株,这将红花油体蛋白本身的皮肤保护作用,与FGFs的创伤修复作用累加,快速开发出外用创伤药物奠定基础。 展开更多
关键词 afgf 油体蛋白 红花
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aFGF、bFGF和EGF对小鼠皮肤成纤维细胞生长及蛋白酶活化受体1的影响 被引量:4
5
作者 靳波 徐盈斌 +2 位作者 刘旭盛 唐锦明 曹鹏飞 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期180-182,186,共4页
目的比较酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)对小鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用以及对蛋白酶活化受体1(PAR1)的影响,探讨PAR1与促进成纤维细胞增殖的关系。方法取出生3周体质量为15-... 目的比较酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)对小鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用以及对蛋白酶活化受体1(PAR1)的影响,探讨PAR1与促进成纤维细胞增殖的关系。方法取出生3周体质量为15-20 g的NIH小鼠皮肤进行成纤维细胞培养,采用MTT法测定细胞数和活度,免疫细胞学XTT法检测aFGF、bFGF和EGF对小鼠皮肤成纤维细胞生长的影响,RT-PCR法检测小鼠皮肤成纤维细胞中PAR1 mRNA的表达。结果小鼠皮肤成纤维细胞健康生长,aFGF、bFGF和EGF对小鼠皮肤成纤维细胞生长的促进作用在实验组与对照组间有显著性差异(P〈0.05),其对成纤维细胞作用浓度梯度较为明显;小鼠皮肤成纤维细胞存在PAR1 mRNA的表达,且三种生长因子对其表达的影响有差异,以aFGF组表达最显著。结论aFGF、bFGF和EGF均能促进成纤维细胞增殖,以aFGF的促进作用最强,PAR1可能参与成纤维细胞的增殖。 展开更多
关键词 afgf BFGF 表皮生长因子 成纤维细胞 PAR1
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aFGF和bFGF在卵巢癌中的表达及对细胞增殖的影响 被引量:8
6
作者 张颐 尚海 +2 位作者 孙黎光 刘宁 于卉影 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1162-1165,共4页
背景与目的:近年研究发现,成纤维细胞生长因子(fibroblast growthfactor,FGF)在多种恶性肿瘤中均有过度表达,在卵巢癌中已发现存在高表达的碱性FGF(basic FGF,bFGF),但在原发性卵巢癌中,尚未见有关酸性FGF(acidic FGF,aFGF)的报道。本... 背景与目的:近年研究发现,成纤维细胞生长因子(fibroblast growthfactor,FGF)在多种恶性肿瘤中均有过度表达,在卵巢癌中已发现存在高表达的碱性FGF(basic FGF,bFGF),但在原发性卵巢癌中,尚未见有关酸性FGF(acidic FGF,aFGF)的报道。本研究拟检测卵巢癌组织中aFGF和bFGF的表达,以及外源性aFGF和bFGF对卵巢癌细胞株OVCA3细胞增殖的影响,以探讨aFGF和bFGF在卵巢癌发生、发展中的意义。方法:应用逆转录-聚合酶链反应技术(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)对40例上皮性卵巢癌组织中aFGF mRNA和bFGF mRNA的表达进行分析;通过MTT比色法,观察aFGF和bFGF对卵巢癌细胞增殖的影响。结果:aFGF mRNA和bFGF mRNA在上皮性卵巢癌组织中分别为0.981±0.130和1.023±0.131,与正常卵巢(0.636±0.084和0.724±0.079)、卵巢瘤样病变(0.696±0.067和0.742±0.094)及卵巢良性肿瘤(0.694±0.106和 0.737±0.089)相比,差异有统计学意义(P<0.05),在Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌中的表达水平明显高于Ⅰ~Ⅱ期。OVCA3细胞株中加入外源性aFGF和bFGF后,增殖比明显增加,并与aFGF和bFGF浓度呈显著正相关。当aFGF浓度为1.2μg/ml时,OVCA3细胞增殖比为对照组的1.51倍;bFGF浓度为100ng/ml时,OVCA3细胞增殖比为对照组的1.85倍。结? 展开更多
关键词 afgf BFGF 卵巢癌 细胞增殖 成纤维细胞生长因子 碱性成纤维细胞生长因子
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aFGF植物表达载体构建及转化紫花苜蓿的初步研究 被引量:4
7
作者 蒋世翠 王义 +3 位作者 孙春玉 王艳芳 李校堃 张美萍 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期180-186,共7页
主要将aFGF基因按照植物偏爱的密码子进行基因优化,同时加上信号肽、6-组氨酸标签及凝血酶切割因子,合成全基因,再将基因插入到改造的TΩ4AB质粒中,将aFGF基因和质粒上的增强子、启动子、Ω序列及ployA加尾序列双酶切,命名为TΩ4AB-aF,... 主要将aFGF基因按照植物偏爱的密码子进行基因优化,同时加上信号肽、6-组氨酸标签及凝血酶切割因子,合成全基因,再将基因插入到改造的TΩ4AB质粒中,将aFGF基因和质粒上的增强子、启动子、Ω序列及ployA加尾序列双酶切,命名为TΩ4AB-aF,将TΩ4AB-aF插入到pBI121载体中命名为pBI121-TΩ4AB-aF。利用三亲融合法将pBI121-TΩ4AB-aF转入到农杆菌菌株LBA4404中,转化苜蓿。转基因苗用卡那霉素进行筛选;并对抗性苗进行PCR、RT-PCR、Western Blot检测。结果表明,aFGF在苜蓿中得到表达。为苜蓿作为植物生物反应器奠定理论基础。 展开更多
关键词 afgf 植物生物反应器 紫花苜蓿
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aFGF基因在大鼠脑皮质损伤神经元的表达 被引量:5
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作者 王清华 徐如祥 钟世镇 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期170-171,共2页
目的 :为aFGF对成年大鼠脑损伤后脑内神经元的作用提供理论依据。方法 :应用原位杂交和免疫组织化学方法观察了大鼠脑损伤后aFGF基因mRNA和蛋白在皮质神经元的表达变化。结果 :脑损伤后 15min及 30min伤侧大脑皮质神经元aFGFmRNA和蛋白... 目的 :为aFGF对成年大鼠脑损伤后脑内神经元的作用提供理论依据。方法 :应用原位杂交和免疫组织化学方法观察了大鼠脑损伤后aFGF基因mRNA和蛋白在皮质神经元的表达变化。结果 :脑损伤后 15min及 30min伤侧大脑皮质神经元aFGFmRNA和蛋白表达增加 ,aFGFmRNA表达于伤后 6h达高峰 ,持续至伤后 2 4h ,以后表达逐步降低 ,于伤后 72h恢复至正常水平。神经元aFGF蛋白表达于伤后 1h达高峰 ,持续至伤后 3h ,伤后 2 4h表达恢复正常。结论 :脑损伤后皮质神经元aFGF基因表达增加与神经元抗损伤修复机制有关。 展开更多
关键词 颅脑损伤 afgf 基因表达 神经元 大鼠 脑皮质损伤 原位杂交 免疫组织化学
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非促分裂型haFGF对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量:5
9
作者 谭毓治 蔡飒 +2 位作者 李校堃 刘峰 胡华良 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期738-741,共4页
目的研究非促分裂型人类aFGF(nm-haFGF)对脑缺血/再灌注损伤的保护作用及初步机制。方法采用跳台法和Y型电迷宫法,观察nm-haFGF对脑缺血/再灌注损伤小鼠学习记忆的影响;测定进入脑组织的依文思蓝的多少,观察nm-haFGF对脑缺血/再灌注损... 目的研究非促分裂型人类aFGF(nm-haFGF)对脑缺血/再灌注损伤的保护作用及初步机制。方法采用跳台法和Y型电迷宫法,观察nm-haFGF对脑缺血/再灌注损伤小鼠学习记忆的影响;测定进入脑组织的依文思蓝的多少,观察nm-haFGF对脑缺血/再灌注损伤小鼠血脑屏障损伤修复程度的影响;测定实验小鼠脑组织中NO含量,观察nm-haF-GF对脑缺血/再灌注损伤小鼠脑组织生化指标的影响。结果nm-haFGF能提高脑缺血/再灌注损伤小鼠的学习记忆功能,降低其脑组织依文思蓝和NO的含量。结论nm-haFGF可改善脑缺血/再灌注损伤小鼠的学习记忆功能,改善和减轻血脑屏障损伤程度,降低脑缺血/再灌注损伤引起的NO增高,对脑血管、脑神经组织具有保护效应。 展开更多
关键词 非促分裂型人类afgf 脑缺血保护作用 学习记忆 NO
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aFGF对新生大鼠缺氧缺血后VEGF的表达及脑血管新生的作用 被引量:6
10
作者 柳国胜 邱锐琴 +5 位作者 杨慧 山艳春 康举龄 关洁宾 聂川 罗先琼 《小儿急救医学》 CAS 2005年第3期174-176,共3页
目的探讨外源性酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤血管新生的作用及可能机制。方法以7日龄SD大鼠制作HIBD的动物模型,应用免疫组织化学染色方法观察各组脑血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达及血管新生情况。结果... 目的探讨外源性酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤血管新生的作用及可能机制。方法以7日龄SD大鼠制作HIBD的动物模型,应用免疫组织化学染色方法观察各组脑血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达及血管新生情况。结果免疫组化检测VEGF的表达,治疗组VEGF的表达从缺氧后第1天开始增加,到第3天时明显高于对照组(P<0.01),第7天3组之间无统计学差别。治疗组的微血管数目在缺氧缺血后第1天显著高于对照组(P<0.01),第3天还高于对照组(P<0.05),第7天仍高于假手术组(P<0.01)。结论aFGF使缺氧缺血大鼠脑组织VEGF表达增多,可能是促进脑组织新生血管形成的重要因素之一,提示早期应用外源性aFGF对于HIBD新生大鼠有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 血管内皮生长因子 新生血管形成 afgf
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重组人aFGF治疗深Ⅱ度烧伤的疗效观察 被引量:3
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作者 孙瑞朋 赵连魁 +6 位作者 孙静 马菊英 李东军 郑文立 李明 杨高松 孙卫海 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期639-640,共2页
目的总结采用重组人aFGF(recombinant human aFGF,rhaFGF)治疗深Ⅱ度烧伤创面的疗效。方法 2008年6月-2010年6月,收治66例深Ⅱ度烧伤患者,分别采用含rhaFGF(A组,24例)、生理盐水(B组,22例)及bFGF(C组,20例)的纱布覆盖创面治疗。3组患者... 目的总结采用重组人aFGF(recombinant human aFGF,rhaFGF)治疗深Ⅱ度烧伤创面的疗效。方法 2008年6月-2010年6月,收治66例深Ⅱ度烧伤患者,分别采用含rhaFGF(A组,24例)、生理盐水(B组,22例)及bFGF(C组,20例)的纱布覆盖创面治疗。3组患者性别、年龄、烧伤面积、病程等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。结果 A、B、C组创面愈合时间分别为(19.83±3.00)、(24.50±2.97)、(22.60±3.93)d,A组与B、C组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组术后15、18、27 d创面愈合率与B、C组比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);术后21、24 d A组创面愈合率明显高于B、C组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组治疗前后血、尿常规及肝、肾功能检测均在正常范围,无不良反应。各组患者均获随访3个月,创面无再次破溃。A组创面瘢痕增生程度较B、C组轻。结论与bFGF和生理盐水相比,rhaFGF可明显促进深Ⅱ度烧伤创面愈合,且无不良反应。 展开更多
关键词 重组人 afgf 深Ⅱ度烧伤 创面修复
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aFGF透皮给药治疗缺血皮瓣的临床应用 被引量:6
12
作者 郑健生 郑庆亦 +1 位作者 陈锦河 蔡少甫 《中国美容医学》 CAS 2008年第9期1284-1285,共2页
目的:观察酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)透皮给药治疗反流轴型皮瓣血液循环障碍的疗效。方法:应用aFGF透皮给药治疗出现血液循环障碍的反流轴型皮瓣,观察皮瓣的转归。结果:自2006年以来在临床上应用11例,用药后皮瓣血液循环全部得到明... 目的:观察酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)透皮给药治疗反流轴型皮瓣血液循环障碍的疗效。方法:应用aFGF透皮给药治疗出现血液循环障碍的反流轴型皮瓣,观察皮瓣的转归。结果:自2006年以来在临床上应用11例,用药后皮瓣血液循环全部得到明显改善,存活良好。结论:应用aFGF透皮给药可明显改善反流轴型皮瓣的血液灌流,促进皮瓣成活。 展开更多
关键词 afgf 反流轴型皮瓣 血液灌注
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改构体aFGF对颈动脉窦损伤的保护作用 被引量:6
13
作者 胡世凤 黄巨恩 +1 位作者 李校坤 谢露 《解剖学研究》 CAS 2003年第3期175-177,共3页
目的 探讨损伤大白鼠颈动脉窦压力感受器神经末梢后 ,改构体aFGF的保护作用。方法 将Wistar大鼠随机分成对照组、改构体aFGF1组、改构体aFGF2 组、改构体aFGF3 每组各 10只。改构体组分别经静脉注射 0 14 μg/ml、0 4 3μg/ml、1 30... 目的 探讨损伤大白鼠颈动脉窦压力感受器神经末梢后 ,改构体aFGF的保护作用。方法 将Wistar大鼠随机分成对照组、改构体aFGF1组、改构体aFGF2 组、改构体aFGF3 每组各 10只。改构体组分别经静脉注射 0 14 μg/ml、0 4 3μg/ml、1 30 μg/ml的改构体aFGF(1ml/ 10 0g) ,而对照组注射同剂量的生理盐水。 2 0min后 ,用蘸有 80 %乙醇的棉球轻轻擦拭右颈动脉窦区 ,损伤颈动脉窦压力感受器神经末梢 ,并放置 5min。观察记录各组损伤前后夹闭颈总动脉血压即 :收缩压 (SP)、舒张压(DP)、平均动脉压 (MP)和心率 (HR)的变化。结果  (1)损伤右颈动脉窦前 ,夹闭右颈总动脉 ,实验组和对照组血压均升高 ,夹闭前后相比差异均有统计学意义 (P <0 0 1) ;(2 )损伤右颈动脉窦后 ,夹闭右颈总动脉 ,改构体aFGF1组、对照组血压不变 ,夹闭前后相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;改构体aFGF2 组、改构体aFGF3 组血压升高 ,夹闭前后相比差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,夹闭前后两组的血压差分别与对照组的差值相比有统计学意义 (P <0 0 5 )。在本实验中 ,HR均无明显变化。结论 改构体aFGF对颈动脉窦损伤有保护作用 。 展开更多
关键词 改构体afgf 颈动脉窦损伤 WISTAR大鼠 血压 心率 压力感受器 神经营养
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aFGF在高温致神经管畸形中作用的免疫组织化学研究 被引量:5
14
作者 高英茂 马金龙 管英俊 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期37-40,共4页
在已建立的高温致神经管畸形的动物模型上,用免疫组织化学方法,对高温处理后的孕鼠之不同发育阶段的胚胎进行酸性成纤维细胞生长因子免疫组织化学染色,观察其在各期胚胎的神经上皮及其周围间充质、内界膜和脊索中的分布和变化.结果:在... 在已建立的高温致神经管畸形的动物模型上,用免疫组织化学方法,对高温处理后的孕鼠之不同发育阶段的胚胎进行酸性成纤维细胞生长因子免疫组织化学染色,观察其在各期胚胎的神经上皮及其周围间充质、内界膜和脊索中的分布和变化.结果:在高温处理后的各期胚胎的上述结构中,酸性成纤维细胞生长因子的免疫组织化学染色均明显减弱,甚至呈阴性着色,不同发育阶段及不同结构的着色强度也不同,说明酸性成纤维细胞生长因子在高温致神经管畸形中有重要作用. 展开更多
关键词 神经管畸形 胚胎 afgf 高温 动物模型
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一种新型天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体融合蛋白S的构建及表达 被引量:3
15
作者 苏志坚 吴晓萍 +4 位作者 郑青 黄亚东 庞实锋 冯雅 李校堃 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2004年第4期420-425,共6页
目的 :构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子 (acidicfibroblastgrowthfactor ,aFGF)突变体的融合蛋白S ,在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF... 目的 :构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子 (acidicfibroblastgrowthfactor ,aFGF)突变体的融合蛋白S ,在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF突变体。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD基因和aFGF突变体基因。再利用两者作为模板 ,用PCR方法扩增出编码融合蛋白S的DNA。将该DNA片段插入到载体pPICZαA中 ,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd116 8中 ,Zeocin抗性筛选重组转化子。甲醇诱导 72h ,SDS -PAGE电泳检测融合蛋白S的表达 ,并用Western -blot杂交检测融合蛋白S的免疫原性。结果 :筛选出的重组转化株在甲醇诱导后能表达相对分子质量约为 190 0 0的融合蛋白S ,而该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应。结论 :用PCR方法获得编码含凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体的融合蛋白SDNA 。 展开更多
关键词 天蚕素杂合肽AD afgf突变体 融合蛋白S
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利用红花瞬时表达aFGF-GFP融合基因的研究 被引量:2
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作者 杨晶 郭咏昕 +3 位作者 任素平 周婷婷 李海燕 李校堃 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期281-284,共4页
目的:利用红花表达aFGF可以使aFGF的组织创伤修复的活性和红花的活血通经、散瘀止痛以及跌打损伤等功效累加,直接用于外伤修复。方法:利用分子生物学方法构建aFGF与GFP的融合基因载体,通过农杆菌介导法将其转化到红花中,形成抗性红花愈... 目的:利用红花表达aFGF可以使aFGF的组织创伤修复的活性和红花的活血通经、散瘀止痛以及跌打损伤等功效累加,直接用于外伤修复。方法:利用分子生物学方法构建aFGF与GFP的融合基因载体,通过农杆菌介导法将其转化到红花中,形成抗性红花愈伤组织后,利用荧光显微镜进行检测。结果:通过PCR分别扩增了aFGF和GFP基因片段,确定出PCR反应体系和最佳反应条件,合成了融合基因片段aFGF-GFP,成功构建了植物荧光表达载体pCAMBIA1390::35S::aFGF-GFP,用其转化红花,获得的抗性愈伤组织在蓝色光激发下能发出强烈的绿色荧光。结论:抗性红花愈伤组织中的GFP表达效果良好,初步判断aFGF基因在植物细胞中也已经表达。 展开更多
关键词 afgf-GFP 表达载体 红花 瞬时表达
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aFGF对原代培养的鼠胚神经上皮细胞的影响 被引量:1
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作者 管英俊 高英茂 +1 位作者 郝晶 邴鲁军 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期84-89,共6页
选用10d金黄地鼠胚胎,取神经管原代培养。通过形态学观察、MTT自动比色定量检测、神经细胞蛋白总量测定以及NSE免疫细胞化学方法,研究了aFGF对神经上皮细胞发育的影响。结果发现,aFGF可明显促进突起生长,增加神经... 选用10d金黄地鼠胚胎,取神经管原代培养。通过形态学观察、MTT自动比色定量检测、神经细胞蛋白总量测定以及NSE免疫细胞化学方法,研究了aFGF对神经上皮细胞发育的影响。结果发现,aFGF可明显促进突起生长,增加神经细胞存活数,提高线粒体酶的活性,增加神经细胞蛋白总量,诱导细胞分化。上述结果表明,aFGF具有支持原代培养的鼠胚神经上皮细胞的存活、突起生长。 展开更多
关键词 afgf 神经上皮 细胞培养 免疫细胞化学 金黄地鼠
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aFGF和genistein对大肠癌细胞株CCL229 PKC及ERK活性的影响 被引量:2
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作者 尚海 张颐 单吉贤 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第9期1389-1391,共3页
目的:观察aFGF及TPK抑制剂genistein对大肠癌细胞株CCL229细胞内PKC及ERK活性的影响,探讨其信号传导途径.方法:以不同浓度的aFGF(0.15 mg/L,0.30 mg/L,0.60mg/L,1.20 mg/L)和genistein(6.00mg/L,12.00mg/L,24.00mg/L,48.00mg/L)诱导CCL... 目的:观察aFGF及TPK抑制剂genistein对大肠癌细胞株CCL229细胞内PKC及ERK活性的影响,探讨其信号传导途径.方法:以不同浓度的aFGF(0.15 mg/L,0.30 mg/L,0.60mg/L,1.20 mg/L)和genistein(6.00mg/L,12.00mg/L,24.00mg/L,48.00mg/L)诱导CCL229细胞,利用[γ-^(32)P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定PKC及ERK活性.结果:随着aFGF浓度的增加,PKC及ERK活性随之升高,与aFGF浓度呈显著正相关(P<0.05).当aFGF浓度为1.20mg/L时,PKC(胞质),PKC(胞膜)和ERK活性分别为对照组的2.60,2.79,1.77倍.genistein抑制细胞内PKC及ERK活性,且与 genistein 浓度呈剂量依赖效应(P<0.05).当genistein浓度为48.00mg/L时,PKC(胞质),PKC(胞膜)和ERK活性分别为对照组的0.41,0.36,0.50倍.genistein对aFGF诱导的PKC及ERK活性抑制更显著.结论:大肠癌细胞株CCL229中aFGF受体具有TPK活性,TPK激活后促进蛋白质和酶磷酸化,导致PKC和ERK活性升高,进一步证明PKC及ERK确是TPK的下游信号分子. 展开更多
关键词 afgf GENISTEIN 大肠癌 CCL229细胞株 PKC ERK 细胞增生 有丝分裂
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aFGF对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用 被引量:2
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作者 郭艳芹 安丽荣 关亚新 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期244-246,共3页
目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞凋亡的保护作用。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst332582-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞Bax和Bcl-2基因mRNA的表达,West... 目的探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对β淀粉样肽25-35(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞凋亡的保护作用。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst332582-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞Bax和Bcl-2基因mRNA的表达,Western印迹检测PC12细胞Bax和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量(10、20、30mg/L)aFGF预处理PC12细胞1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡,提高PC12细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的PC12细胞核固缩、凝聚和碎裂,降低Bax基因mRNA表达及蛋白表达,增加bcl-2基因mRNA表达及蛋白表达。结论aFGF可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因Bax和上调抗凋亡基因Bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 酸性成纤维细胞生长因子(afgf) AΒ25-35 PC12细胞 细胞凋亡
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aFGF重组腺病毒体外诱导血管新生的实验研究 被引量:1
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作者 顾俊彦 黄盛东 +1 位作者 梅举 张宝仁 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1053-1054,F003,共3页
促血管生长因子可以刺激内皮细胞分裂、分化 ,诱导血管新生。为探讨其基因转染是否具有相同的作用 ,作者用构建好的携带人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)DNA的重组腺病毒载体 (Ad .aFGF)转染人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)。免疫荧光染色表... 促血管生长因子可以刺激内皮细胞分裂、分化 ,诱导血管新生。为探讨其基因转染是否具有相同的作用 ,作者用构建好的携带人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)DNA的重组腺病毒载体 (Ad .aFGF)转染人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)。免疫荧光染色表明 ,转染了Ad .aFGF的HUVECs有明显的aFGF表达 ;ELISA检测显示aFGF能分泌至细胞外 ;MTT实验显示Ad .aFGF转染后HUVECs显著增生 ,并且当它们种植于Matrigel基质时可分化形成毛细血管样结构 ,对照组则无此现象。这些结果说明Ad .aFGF在体外具有促进血管新生的作用 。 展开更多
关键词 afgf 腺病毒 体外诱导 血管新生 实验研究 缺血性心脏病
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