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犬ADMSCs对低氧缺糖模型RSC96细胞增殖、迁移及相关基因表达的影响
1
作者 林昊烨 陈淑仪 +5 位作者 徐麟 李暄 王丙云 陈志胜 刘璨颖 陈胜锋 《四川畜牧兽医》 2022年第9期22-24,27,共4页
为了探究犬脂肪间充质干细胞(ADMSCs)促进髓鞘修复的分子机制,本试验以大鼠施万细胞(RSC96)为对象,模拟脊髓损伤(SCI)时脊髓组织低氧缺糖的微环境,制备低氧缺糖RSC96细胞模型,通过离体试验研究犬ADMSC对低氧缺糖RSC96细胞增殖、迁移及... 为了探究犬脂肪间充质干细胞(ADMSCs)促进髓鞘修复的分子机制,本试验以大鼠施万细胞(RSC96)为对象,模拟脊髓损伤(SCI)时脊髓组织低氧缺糖的微环境,制备低氧缺糖RSC96细胞模型,通过离体试验研究犬ADMSC对低氧缺糖RSC96细胞增殖、迁移及相关基因表达的影响。设空白对照组、模型对照组、MSC共培养组及空白培养基组,空白对照组为常规培养的RSC96细胞,其余三组为低氧缺糖模型RSC96细胞。在37℃5%CO_(2)培养箱中培养细胞,在造模后0、12、24h对不同组别进行拍照并使用软件测定划痕面积,计算迁移率。24 h后采取CCK-8法检测各组间OD值,并测定细胞增殖(NGF、NT-3)、迁移(Nrg-1)相关基因mRNA的表达情况。结果表明,24h后MSC共培养组的OD值和迁移率显著高于空白培养基组与模型对照组(P<0.05),且相关基因的mRNA表达量均高于其他三组,说明脂肪间充质干细胞可通过与RSC96共同作用来促进髓鞘修复。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞(admscs) RSC96 共培养 低氧缺糖模型
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CPO-PCL微粒在缺氧条件下对脂肪间充质干细胞体外增殖及成骨分化作用的影响
2
作者 罗浙 练雷栋 +3 位作者 胡珂琦 顾仕荣 周珂 干开丰 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第8期1051-1061,共11页
目的:探究聚己内酯(polycaprolactone,PCL)包载过氧化钙(calcium peroxide,CPO)的CPO-PCL微粒在缺氧条件下对脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cell,ADMSC)体外增殖及成骨分化作用的影响。方法:提取大鼠ADMSC,并加入... 目的:探究聚己内酯(polycaprolactone,PCL)包载过氧化钙(calcium peroxide,CPO)的CPO-PCL微粒在缺氧条件下对脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cell,ADMSC)体外增殖及成骨分化作用的影响。方法:提取大鼠ADMSC,并加入制备的CPO-PCL微粒,在缺氧/常氧环境下,正常培养或成骨分化培养细胞,分别于培养第7天和第14天MTT实验检测ADMSC增殖,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP水平;茜素红染色观察钙化结节情况,免疫荧光染色观察ADMSC核心转录因子-2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(Osteocalcin)和骨桥蛋白(Osteopontin)的荧光表达量。结果:在缺氧成骨分化培养条件下,1.00%CPO-PCL微粒显著促进细胞增殖(P<0.05),0.50%和1.00%CPO-PCL微粒显著增加ADMSC ALP和钙结节生成量(P<0.001),促进RUNX2、Osteocalcin和Osteopontin蛋白表达(P<0.05)。在缺氧正常培养条件下,1.00%CPO-PCL微粒增加ADMSC ALP含量,促进RUNX2、Osteocalcin和Osteopontin蛋白表达(P<0.05)。在常氧成骨分化培养条件下,1.00%CPO-PCL微粒增加ALP和钙结节生成量,0.50%和1.00%CPO-PCL微粒促进RUNX2、Osteocalcin蛋白表达(P<0.001)。在常氧正常培养条件下,0.50%和1.00%CPO-PCL微粒促进RUNX2、Osteocalcin和Osteopontin蛋白表达(P<0.05),但对细胞成骨分化无显著影响。结论:1.00%CPO-PCL微粒在缺氧成骨分化培养条件下能够促进ADMSC体外增殖及成骨分化。 展开更多
关键词 CPO-PCL微粒 ADMSC 成骨分化 细胞增殖 缺氧
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肝纤维化炎症微环境对间充质干细胞Hedgehog信号通路调控的研究 被引量：1
3
作者 李灿 马燕 +6 位作者 刘漪沦 孙静 郭莉娜 谭悦浩 王航宇 刘卫华 邓峰美 《成都医学院学报》 CAS 2019年第2期137-144,共8页
目的探索脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)的Hedgehog信号通路在肝纤维化炎症微环境中的活化情况。方法 ADMSCs原代提取及培养,流式鉴定Sca-1、CD44、CD34、CD45。利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α),干扰素-... 目的探索脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)的Hedgehog信号通路在肝纤维化炎症微环境中的活化情况。方法 ADMSCs原代提取及培养,流式鉴定Sca-1、CD44、CD34、CD45。利用肿瘤坏死因子-α(TNF-α),干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的协同作用方式构建模拟肝纤维化炎症微环境,将ADMSCs分为对照组(PBS组)、试验组(TNF-α+IFN-γ+TGF-β1协同刺激组)。将12只雄性C57BL/6小鼠随机分为两组,对照组(橄榄油,n=6)和试验组(四氯化碳,CCl4,n=6),ADMSCs转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP)慢病毒,用于细胞的体内示踪,稳转细胞通过小鼠尾静脉注射,3d后安乐死,取脾脏及肝脏,制作组织冰冻切片。通过qRT-PCR、Western blot、免疫荧光方法检测Hedgehog通路中Smo和Gli1的表达情况。结果实验组的Smo和Gli1mRNA和蛋白表达量高于对照组(P<0.05);肝纤维化小鼠肝脏中ADMSCs数量多于对照小鼠(P<0.05),而两组小鼠的脾脏中ADMSCs数量差异无统计学意义(P>0.05)。组织免疫荧光实验发现,肝纤维化小鼠肝脏中的ADMSCs的Smo和Gli1蛋白表达高于对照小鼠。结论肝纤维化炎症微环境能够促进ADMSCs的Gli1、Smo分子表达,激活Hedgehog信号通路。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞(admscs) HEDGEHOG通路 肝纤维化炎症微环境
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脂肪间充质干细胞移植对输血相关急性肺损伤大鼠巨噬细胞表面TLR4及CD40的影响 被引量：1
4
作者 王景顺 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第24期6050-6054,共5页
目的探讨脂肪间充质干细胞(ADMSCs)移植对输血相关急性肺损伤(TRALI)大鼠巨噬细胞表面Toll样受体(TLR)4及共刺激分子CD40的影响。方法体外培养ADMSCs,雄性SD大鼠30只随机分为假手术组(采用假手术处理)、TRALI组[腹腔注射脂多糖(LPS)2 mg... 目的探讨脂肪间充质干细胞(ADMSCs)移植对输血相关急性肺损伤(TRALI)大鼠巨噬细胞表面Toll样受体(TLR)4及共刺激分子CD40的影响。方法体外培养ADMSCs,雄性SD大鼠30只随机分为假手术组(采用假手术处理)、TRALI组[腹腔注射脂多糖(LPS)2 mg/kg,2 h后静脉输注人血浆(1 ml/只)]、移植组[腹腔注射LPS 2 mg/kg,2 h后静脉输注入血浆(1 ml/只)+ADMSCs悬液1 ml],各10只。荧光显微镜观察氯甲基苯甲酰氨(CM-DiI)标记的ADMSCs存活及分布情况;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清及肺组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β及缺血预适应上调蛋白(MIP)-2的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠肺组织TLR4、CD40、核转录因子(NF)-κB基因相对表达量,取外周血巨噬细胞检测TLR4、CD40、NF-κB的mRNA表达量;取肺组织,采用放射免疫沉淀试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟嘌呤(OhdG)的含量;采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肺组织病理及湿干比变化。结果 CM-DiI标记的ADMSCs在荧光显微镜下呈红色荧光,阳性标记率达98%以上。TRALI组大鼠血清及肺组织TNF-α、IL-1β、MIP-2含量显著高于假手术组,移植组显著低于TRALI组(P<0. 05)。TRALI组大鼠肺组织及血清中TLR4、CD40、NF-κB的mRNA表达量均显著高于假手术组,移植组显著低于TRALI组(P<0. 05)。TRALI组大鼠肺脏组织SOD、GSH含量显著低于假手术组,移植组显著高于TRALI组;MDA、8-OhdG含量显著高于假手术组,移植组显著低于TRALI组(P<0. 05)。TRALI组大鼠肺组织出现肺泡间隔增厚等病理变化,移植组各种病理变化较TRALI组明显好转。结论 TRALI后TLR4及CD40表达量明显上升,诱发炎症等一系列反应,从而导致肺损伤,ADMSCs移植可减轻肺损伤程度。 展开更多
关键词 输血相关急性肺损伤 脂肪间充质干细胞(admscs) 巨噬细胞表面Toll样受体(TLR)4 CD40
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