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小鼠精子特异性ADAM3基因靶向siRNA的筛选研究
1
作者 高斯 赵萍 +1 位作者 刘晓雅 方桂杰 《湖北工业大学学报》 2025年第5期74-78,共5页
为在细胞水平靶向筛选出小鼠精子特异性ADAM3基因的最适siRNA序列,构建ADAM3过表达载体,将其转染至GC-2细胞后,通过Western Blot检测ADAM3蛋白表达情况;同时基于ADAM3基因序列设计并合成3对siRNA序列,将ADAM3过表达载体与各siRNA共转染... 为在细胞水平靶向筛选出小鼠精子特异性ADAM3基因的最适siRNA序列,构建ADAM3过表达载体,将其转染至GC-2细胞后,通过Western Blot检测ADAM3蛋白表达情况;同时基于ADAM3基因序列设计并合成3对siRNA序列,将ADAM3过表达载体与各siRNA共转染至GC-2细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测siRNA干扰效率,筛选干扰效率最高的siRNA序列。结果显示,ADAM3过表达载体在GC-2细胞中成功表达,ADAM3蛋白表达显著升高;设计合成的3对siRNA均能有效干扰ADAM3基因的表达,与未干扰组相比差异具有统计学意义(P<0.05),其中ADAM3-siRNA-2干扰效率最高,约76.33%。实验成功实现了ADAM3基因在GC-2细胞中的异位表达,并在细胞水平筛选出干扰小鼠ADAM3基因的最适siRNA序列,为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 解聚素与金属蛋白酶3 基因表达 SIRNA GC-2细胞 干扰效率
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ADAM33基因F+1多态性、IgE、维生素D与乌鲁木齐地区维吾尔族、汉族哮喘儿童的相关性研究 被引量：3
2
作者 王建荣 吕既寿 多力坤.木扎帕尔 《新疆医科大学学报》 CAS 2017年第1期62-65,70,共5页
目的探讨乌鲁木齐地区维吾尔族、汉族支气管哮喘儿童ADAM33基因F+1位点多态性、Ig E、维生素D(Vit D)水平及其相关性,期望从基因水平为防治儿童支气管哮喘提供理论依据。方法选取2014年2月-2015年6月在新疆医科大学第五附属医院及新疆... 目的探讨乌鲁木齐地区维吾尔族、汉族支气管哮喘儿童ADAM33基因F+1位点多态性、Ig E、维生素D(Vit D)水平及其相关性,期望从基因水平为防治儿童支气管哮喘提供理论依据。方法选取2014年2月-2015年6月在新疆医科大学第五附属医院及新疆医科大学第一附属医院门诊及入院支气管哮喘患儿197例(其中汉族111例,维吾尔族86例)作为试验组,同时设立对照组120例(汉族64例,维吾尔族56例),首先采用PCR聚合酶链反应对ADAM 33基因F+1位点进行单核苷酸多态性(SNP)分型,并用ELISA法检测Ig E、Vit D水平,进一步根据民族进行组内分层,进行F+1位点SNP、Ig E、Vit D分析并进行相关性分析。结果 (1)试验组和对照组ADAM33基因F+1位点3种基因型频率分布差异无统计学意义(χ2=0.130,P=0.940),同时等位基因频率差异也无统计学意义(χ2=0.150,P=0.700)。(2)维吾尔族、汉族支气管哮喘儿童中F+1位点分布差异均无统计学意义(χ2=2.955,P=0.228;χ2=1.746,P=0.418)。(3)试验组Ig E-OD水平高于对照组,Vit D-OD水平低于对照组,差异有统计学意义(χ2=13.250,P=0.000;χ2=4.793,P=0.000)。(4)试验组组内维吾尔族支气管哮喘儿童Ig E水平高于汉族儿童,Vit D水平低于汉族支气管哮喘儿童,差异有统计学意义(χ2=2.434,P=0.016;χ2=2.956,P=0.004);对照组组内维吾尔、汉族儿童Ig E、Vit D水平比较差异无统计学意义(χ2=1.072,P=0.286;χ2=0.619,P=0.537)。(5)ADAM 33基因F+1位点与Ig E、Vit D水平均不相关(r=0.050,P=0.377;r=-0.044,P=0.439)。结论 ADAM33基因F+1位点与乌鲁木齐地区维吾尔族、汉族支气管哮喘儿童发病均不相关,ADAM 33基因F+1位点不影响Ig E及Vit D水平。 展开更多
关键词 adam3 3 F＋1 位点多态性 维吾尔族 汉族 支气管哮喘儿童 乌鲁木齐 adam33
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ADAM3A基因拷贝数差异与先天性膈疝相关性分析
3
作者 熊瑛 叶伟萍 古航 《临床儿科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期655-657,共3页
目的通过对先天性膈疝胎儿多基因位点的检测,评价基因拷贝数变化与胎儿先天性膈疝之间的关系。方法采用Affymetrix Cytoscan 750 k平台微阵列分析11例先天性膈疝新生儿的多基因位点(其中1例为双胎,其异卵双胞胎兄弟被诊断为胎儿肠扩张)... 目的通过对先天性膈疝胎儿多基因位点的检测,评价基因拷贝数变化与胎儿先天性膈疝之间的关系。方法采用Affymetrix Cytoscan 750 k平台微阵列分析11例先天性膈疝新生儿的多基因位点(其中1例为双胎,其异卵双胞胎兄弟被诊断为胎儿肠扩张)。结果在1例先天性膈疝新生儿中发现一个纯合子缺失,8 p11.22 arr[hg19],并最终证实为解聚素和金属蛋白酶(ADAM)3A基因的1~15外显子发生纯合缺失。结论 ADAM3A拷贝数的改变可能是先天性膈疝的发病原因。 展开更多
关键词 微阵列芯片 先天性膈疝 adam3A基因 拷贝数改变
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三七总皂苷通过ADAM10/Notch3信号通路干预大鼠PASMCs增殖
4
作者 黄曼 白相书 +5 位作者 田云娜 徐俊鹏 王肖婷 张赛 袁琳波 王万铁 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第4期487-492,共6页
目的:探讨在野百合碱(MCT)作用下三七总皂苷(PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的干预作用及其机制。方法:体外培养的PASMCs随机分为正常对照(Control)组、野百合碱(MCT)组、三七总皂苷(PNS)组、敲低(M+Si ADAM10)组、敲低后处理(... 目的:探讨在野百合碱(MCT)作用下三七总皂苷(PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的干预作用及其机制。方法:体外培养的PASMCs随机分为正常对照(Control)组、野百合碱(MCT)组、三七总皂苷(PNS)组、敲低(M+Si ADAM10)组、敲低后处理(M+P+Si ADAM10)组、过表达(M+OE ADAM10)组和过表达后处理(M+P+OE ADAM10)组。造模结束后,采用CCK-8法测各组细胞活力;蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)、细胞神经源性基因座notch同源蛋白-3(Notch3)蛋白的表达情况。结果:在MCT作用下,PASMCs活力显著增强(P<0.05或P<0.01);0~400 mg/L的PNS对正常细胞活力无毒性,100 mg/L的PNS可显著抑制MCT诱导的细胞活力(P<0.01)。在敲低ADAM10后PASMCs活力显著减弱(P<0.01),PCNA蛋白表达明显下降(P<0.05),尤以M+P+Si ADAM10组为著;ADAM10、Notch3蛋白表达均显著下降(P<0.05或P<0.01),尤以M+P+Si ADAM10组为著。过表达ADAM10后PASMCs活力显著增强(P<0.01),PCNA蛋白表达明显增高(P<0.01),M+P+OE ADAM10组PCNA值稍偏高(P>0.05),ADAM10、Notch3蛋白表达均显著升高(P<0.05);而过表达ADAM10的同时使用PNS的PASMCs与敲低ADAM10的PASMCs相比,PCNA蛋白表达显著下降(P<0.01),ADAM10、Notch3蛋白表达不同程度降低(P>0.05)。结论:PNS可能通过抑制ADAM10/Notch3信号通路,减弱大鼠MCT诱导的PASMCs增殖。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 三七总皂苷 野百合碱 ADAM10/Notch3通路 大鼠
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三七总皂苷对野百合碱诱导的PASMCs增殖、凋亡及ADAM10/Notch3信号通路的影响
5
作者 黄曼 张赛 +4 位作者 田云娜 徐俊鹏 王肖婷 陈玲珑 王万铁 《湖南中医杂志》 2024年第8期197-202,共6页
目的:探讨在野百合碱(MCT)作用下三七总皂苷(PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖、凋亡及其解整合素金属蛋白酶10/神经源性基因座notch同源蛋白-3(ADAM10/Notch3)通路的影响。方法:将体外培养的PASMCs随机分为正常组(C组)、野百合... 目的:探讨在野百合碱(MCT)作用下三七总皂苷(PNS)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖、凋亡及其解整合素金属蛋白酶10/神经源性基因座notch同源蛋白-3(ADAM10/Notch3)通路的影响。方法:将体外培养的PASMCs随机分为正常组(C组)、野百合碱组(M组)和野百合碱+三七总皂苷组(P组),采用CCK-8法测各组细胞活力;EdU法检测细胞增殖;qPCR法和Western blot法分别检测细胞ADAM10、Notch3、人源重组蛋白1(Hes-1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(p27)、增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)mRNA和蛋白的表达情况。结果:在MCT作用下,PASMCs细胞活力增强,EdU阳性率增加;ADAM10、Notch3、Hes-1、PCNA的mRNA以及蛋白表达上调(P<0.05,P<0.01),p27和Caspase-3的mRNA以及蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01);使用PNS可下调MCT作用下的上述作用(P<0.05,P<0.01)。结论:三七总皂苷可通过抑制ADAM10/Notch3信号通路,减弱大鼠PASMCs增殖、促进PASMCs凋亡。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 三七总皂苷 野百合碱 ADAM10/Notch3通路
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基于运动连接的机构尺寸误差分析 被引量：8
6
作者 谢小正 杨东亚 +1 位作者 强建国 陈惠贤 《兰州理工大学学报》 CAS 北大核心 2007年第3期46-49,共4页
介绍机构运动分析与误差分析的向量环路线性规划法,分析运用运动分析灵敏度进行误差分析的可能性,提出在机构误差分析模型中用基本运动连接元素(运动副)对尺寸误差进行等价替换,使误差分析向量环路线性规划法在ADAMS中实现.分析仿真过... 介绍机构运动分析与误差分析的向量环路线性规划法,分析运用运动分析灵敏度进行误差分析的可能性,提出在机构误差分析模型中用基本运动连接元素(运动副)对尺寸误差进行等价替换,使误差分析向量环路线性规划法在ADAMS中实现.分析仿真过程中在误差等价替换运动连接中引入虚拟速度并逐一进行单步仿真,从而提取误差灵敏度.结果表明,误差分析的等价运动连接替换法实现了计算机辅助分析,解决了向量环路分析计算量繁琐的弊端,使机构误差分析简易可靠. 展开更多
关键词 误差分析 线性规划法 等价误差连接 灵敏度 ADAMS
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三七总皂苷通过抑制ADAM10/Notch3信号通路改善野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压 被引量：4
7
作者 张赛 田云娜 +5 位作者 宋正阳 王肖婷 王新雨 徐俊鹏 袁琳波 王万铁 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期503-511,共9页
本研究旨在探讨三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS)对肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension, PAH)肺血管重构的作用及对ADAM10/Notch3通路的影响。建立PAH大鼠模型,随机将雄性Sprague Dawley (SD)大鼠分为对照组、野... 本研究旨在探讨三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS)对肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension, PAH)肺血管重构的作用及对ADAM10/Notch3通路的影响。建立PAH大鼠模型,随机将雄性Sprague Dawley (SD)大鼠分为对照组、野百合碱(monocrotaline, MCT)组、MCT+PNS组,每组各10只。对照组每日腹腔注射等体积生理盐水;MCT组第一天腹腔注射60 mg/kg MCT,之后每日腹腔注射等体积生理盐水;MCT+PNS组第一天腹腔注射60 mg/kg MCT,之后每日腹腔注射50 mg/kg PNS,各组造模时间持续21天。造模结束后,采用右心导管插管技术测量肺动脉平均压(meanpulmonaryarterialpressure,mPAP),计算右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index, RVHI),HE和Masson染色观察肺血管壁微观形态与变化,Western blot和qPCR检测大鼠肺血管组织ADAM10、Notch3、Hes-1、P27、PCNA、Caspase-3蛋白及mRNA的表达,免疫荧光染色检测Notch3和α-SMA蛋白表达和定位,免疫组织化学染色检测ADAM10蛋白表达量。结果显示:与对照组相比,MCT组mPAP、RVHI明显升高,肺血管明显增厚以及胶原纤维显著增多,ADAM10、Notch3、Hes-1、PCNA mRNA及蛋白的表达显著升高;同时P27、Caspase-3 mRNA及蛋白的表达则明显降低;与MCT组相比,MCT+PNS组mPAP、RVHI降低,肺血管得到明显改善以及胶原纤维显著减少,ADAM10、Notch3、Hes-1、PCNA mRNA及蛋白的表达有所下降,同时P27、Caspase-3 mRNA及蛋白的表达则轻微升高。免疫荧光染色结果显示Notch3和α-SMA染色可以重叠,证明Notch3表达于平滑肌细胞,MCT组Notch3表达量明显增加,给予PNS干预后,Notch3的表达量低于MCT组。免疫组织化学染色结果显示,与对照组对比,MCT组ADAM10表达量明显增多,与MCT组相比,MCT+PNS组ADAM10表达量减少。这些结果表明,PNS可改善MCT诱导的大鼠PAH,其机制可能是通过抑制ADAM10/Notch3信号通路而实现的。 展开更多
关键词 肺动脉高压 ADAM10/Notch3通路 三七总皂苷 野百合碱 SD大鼠
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