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慢病毒介导的CRISPR/Cas9靶向ACTB基因sgRNA的设计及活性验证 被引量:1
1
作者 朱新宇 何燕华 +3 位作者 李晓娇 刘子敬 张晓爱 罗成龙 《广东畜牧兽医科技》 2024年第2期23-29,36,共8页
该实验旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对鸡β-肌动蛋白(β-actin,ACTB)基因外显子2上设计的4条sgRNA进行切割活性验证,为在ACTB基因位点定点敲入外源基因提供工作基础。本实验通过网站设计四条特异性识别ACTB基因的sgRNA序列,构建到... 该实验旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对鸡β-肌动蛋白(β-actin,ACTB)基因外显子2上设计的4条sgRNA进行切割活性验证,为在ACTB基因位点定点敲入外源基因提供工作基础。本实验通过网站设计四条特异性识别ACTB基因的sgRNA序列,构建到带有表达绿色荧光蛋白的慢病毒载体上,在293T细胞上包装慢病毒,然后将慢病毒液感染稳定表达Cas9蛋白的鸡成纤维细胞系(DF-1)验证sgRNA的切割活性。通过细胞荧光表达分析、T7E1内切酶和体外活性检测,鉴定出有切割活性的3条sgRNA,为后续在DF-1细胞上进行功能验证、基因定点敲入奠定了实验基础,同时为后续在鸡这一物种中进行基因编辑提供了研究材料。 展开更多
关键词 切割活性 sgRNA actb基因
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ACTB基因第4外显子遗传变异分析及其与种公牛精液品质的关系 被引量:1
2
作者 岳续朋 贺洪涛 +3 位作者 张志刚 戴立胜 赵锐锋 张嘉保 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期551-553,共3页
采用PCR-SSCP技术对45头种公牛的ACTB(β肌动蛋白)基因的第4外显子的单核甘酸多态性进行了检测。结果显示:在ACTB基因第4外显子上存在2种基因型,即AA型和AB型。对该多肽片段克隆测序,结果在ACTB基因第4外显子上存在G378C突变。用最小二... 采用PCR-SSCP技术对45头种公牛的ACTB(β肌动蛋白)基因的第4外显子的单核甘酸多态性进行了检测。结果显示:在ACTB基因第4外显子上存在2种基因型,即AA型和AB型。对该多肽片段克隆测序,结果在ACTB基因第4外显子上存在G378C突变。用最小二乘法分析ACTB基因的第4外显子不同基因型与精液品质的相关性,发现ACTB基因第4外显子AA型精子浓度、鲜精畸形率以及冻精畸形率显著高于AB型(P<0.05),AA型鲜精活力、鲜精活精子比率极显著高于AB型(P<0.01),AA型冻精活精子比率显著低于AB型(P<0.05)。 展开更多
关键词 actb基因 PCR SSCP 单核甘酸多态性(SNP)
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贵州香猪ACTB基因的原核表达 被引量:1
3
作者 曹龙凯 郭春华 艾丹 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第1期73-76,共4页
以贵州香猪ACTB基因的RNA序列为模板,运用PCR技术成功扩增出香猪ACTB基因的CDS区,将其插入到pET-32a原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-ACTB并转化至BL21(DE3)宿主菌中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测,pET-32a-ACTB在宿主菌BL21(DE3)... 以贵州香猪ACTB基因的RNA序列为模板,运用PCR技术成功扩增出香猪ACTB基因的CDS区,将其插入到pET-32a原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-ACTB并转化至BL21(DE3)宿主菌中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测,pET-32a-ACTB在宿主菌BL21(DE3)中表达出融合蛋白,结果分析表明ACTB基因在宿主菌中获得了高效表达,表达出的蛋白大小与预期结果相符. 展开更多
关键词 贵州香猪 actb基因 原核表达
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贵州香猪ACTB基因的克隆与序列分析
4
作者 曹龙凯 郭春华 《饲料博览》 2012年第2期7-10,共4页
以贵州香猪肌动蛋白基因的RNA序列为模板,运用PCR技术扩增香猪ACTB基因的CDS区,将其插入PMD19-T克隆载体中,导入工程菌E.coliDH5α感受态细胞中,并进行相关的分析。结果表明,PCR产物长度为1596bp,编码一个由376个氨基酸组成的多肽,与Gen... 以贵州香猪肌动蛋白基因的RNA序列为模板,运用PCR技术扩增香猪ACTB基因的CDS区,将其插入PMD19-T克隆载体中,导入工程菌E.coliDH5α感受态细胞中,并进行相关的分析。结果表明,PCR产物长度为1596bp,编码一个由376个氨基酸组成的多肽,与GeneBank上发表的序列大小相符。 展开更多
关键词 贵州香猪 actb基因 基因克隆 序列分析
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ACTB基因引物的设计及其在医学本科分子生物学实验教学中的应用 被引量:2
5
作者 宋辉 张婷 禹文峰 《高教学刊》 2020年第14期97-100,共4页
目的针对ACTB基因设计引物,并在医学本科分子生物实验教学中通过聚合酶链式反应(PCR)让学生认识真核基因内含子和外显子结构的特点。方法通过在线软件Primer-BLAST设计针对ACTB基因的引物,通过改变退火温度,优化PCR体系,同时,结合实验... 目的针对ACTB基因设计引物,并在医学本科分子生物实验教学中通过聚合酶链式反应(PCR)让学生认识真核基因内含子和外显子结构的特点。方法通过在线软件Primer-BLAST设计针对ACTB基因的引物,通过改变退火温度,优化PCR体系,同时,结合实验教学结果评价引物的特异性。结果针对ACTB基因外显子3和外显子4设计了两对引物,引物1和引物2。引物1在退火温度68℃时,表现出较高的特异性和PCR产量。以基因组DNA(gDNA)和cDNA为模板,PCR产物大小相差441bp。以此条件,引物1在实验教学中也表现出较好的效果,目的基因扩增成功率达到90%以上。结论引物1在退火温度68℃时,利用PCR技术结合琼脂糖凝胶电泳结果,学生们可以形象的理解真核生物基因的结构特点,值得在医学本科分子生物学实验教学中推广。 展开更多
关键词 actb PCR 真核基因结构 分子生物学 实验教学
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ACTB基因在肝细胞癌中的研究进展
6
作者 冯润林 梁雪婷 +5 位作者 王一芃 汪毓寅 陆文杰 张佳欣 王虹粤 李永盛 《现代医药卫生》 2025年第11期2532-2536,共5页
旨在深入探讨β-肌动蛋白(ACTB)在肝细胞癌(HCC)发生与进展中的多重作用机制,以期为临床诊疗和靶向治疗提供新的思路。首先,基于国内外HCC流行病学数据,强调了该病高发、早诊困难与治疗选择有限的现实困境,指出细胞骨架蛋白在肿瘤生物... 旨在深入探讨β-肌动蛋白(ACTB)在肝细胞癌(HCC)发生与进展中的多重作用机制,以期为临床诊疗和靶向治疗提供新的思路。首先,基于国内外HCC流行病学数据,强调了该病高发、早诊困难与治疗选择有限的现实困境,指出细胞骨架蛋白在肿瘤生物学中尚未被充分挖掘的潜力;随后,通过整合大规模转录组和单细胞测序数据,系统揭示了ACTB在HCC组织和细胞模型中异常上调的表达模式,并进一步证明其与肿瘤细胞增殖加速、迁移侵袭性增强及对常规化疗耐药性的提高密切相关;在分子层面,阐明了ACTB通过重构肌动蛋白网络,并激活Wnt/β-catenin、PI3K/AKT等关键信号通路,协同调控上皮-间质转化、细胞骨架动力学及肿瘤微环境免疫逃逸;最后,该文针对ACTB的小分子抑制剂、特异性抗体及RNA干扰策略的发展进程,分析了药物递送和肿瘤特异性靶向的挑战,并提出结合患者个体化基因表达谱、运用高通量功能筛选与精准医疗平台的联合诊疗新模式,以期显著提升HCC患者的预后和生活质量。 展开更多
关键词 actb基因 肝细胞癌 肿瘤 治疗策略 综述
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ACTB基因变异致新生儿脑额面综合征1例
7
作者 羊钦裕 陈佳 《中华新生儿科杂志(中英文)》 CAS CSCD 2024年第1期45-46,共2页
报告1例足月顺产小于胎龄儿,具有特殊面容、脑功能障碍和智力运动发育迟缓,经头颅MRI、视频脑电图、全基因外显子组测序等检查,诊断ACTB基因杂合错义变异致新生儿脑额面综合征。予以左乙拉西坦抗癫痫、呼吸支持、营养支持,非医嘱出院后... 报告1例足月顺产小于胎龄儿,具有特殊面容、脑功能障碍和智力运动发育迟缓,经头颅MRI、视频脑电图、全基因外显子组测序等检查,诊断ACTB基因杂合错义变异致新生儿脑额面综合征。予以左乙拉西坦抗癫痫、呼吸支持、营养支持,非医嘱出院后未正规随访治疗。1岁时电话随访,患儿仍存在生长发育和智力运动发育迟缓、癫痫发作。 展开更多
关键词 脑额面综合征 actb基因 脑功能障碍
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微量血痕中18SrRNA与ACTBmRNA变化的时间规律性研究 被引量:5
8
作者 单迪 郑吉龙 +1 位作者 任鹏 李军 《中国刑警学院学报》 2014年第2期49-51,共3页
制备不同时间的血痕样品,采用实时定量PCR检测不同时间点18SrRNA和ACTB mRNA含量,并进行统计学分析。结果发现在10周内,随血痕经过时间延长,18SrRNA基因片段和ACTBmRNA基因片段发生了较明显降解,具有一定的时间规律性。18SrRNA基因片段... 制备不同时间的血痕样品,采用实时定量PCR检测不同时间点18SrRNA和ACTB mRNA含量,并进行统计学分析。结果发现在10周内,随血痕经过时间延长,18SrRNA基因片段和ACTBmRNA基因片段发生了较明显降解,具有一定的时间规律性。18SrRNA基因片段较ACTB mRNA降解速度快。采用实时定量PCR技术检测18SrRNA和ACTBmRNA含量变化,为推断血痕经过时间提供了新的方法和客观依据。 展开更多
关键词 实时定量PCR 血痕形成时间 18SrRNA actb 降解
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7p部分三体综合征的表型和基因型关系研究
9
作者 张月萍 徐建忠 +2 位作者 殷民 吴佳龙 孙晓溪 《现代妇产科进展》 CSCD 2014年第3期161-164,共4页
目的:探讨7p部分三体综合征的起源,分析患者表型和基因型的关联性,同时研究单核苷酸多态-微阵列比较基因组杂交技术(SNP aCGH)在检测亚细胞遗传学改变中的应用价值。方法:对外院核型报告正常的1例特殊面容、低智合并先心患儿复查染色体,... 目的:探讨7p部分三体综合征的起源,分析患者表型和基因型的关联性,同时研究单核苷酸多态-微阵列比较基因组杂交技术(SNP aCGH)在检测亚细胞遗传学改变中的应用价值。方法:对外院核型报告正常的1例特殊面容、低智合并先心患儿复查染色体,G带发现其4q35.2区域疑似有额外片断附着,进一步用SNP aCGH进行全基因组扫描,并用4号染色体长臂末端和7号染色体短臂末端探针与患儿淋巴细胞杂交(FISH)以验证SNP aCGH结果,同时对患儿进行家系调查及部分成员染色体检查。结果:患儿核型46,XX,add(4)(q35.2)?全基因组扫描显示,患儿7p21.1-pter区域有20.78Mb的重复,而4q35.2-qter区域有3.24Mb的缺失。FISH发现,患儿外周血淋巴细胞含3个拷贝的7号染色体短臂末端和1个拷贝的4号染色体长臂末端。家系调查发现,患儿父亲及祖父均为46,XY,t(4;7)(q35.2;p21.1)。综合以上结果,确定患儿核型为46,XX,der(4)t(4;7)(q35.2;p21.1)pat,异常核型由父亲传递,系精子在减数分裂中通过邻近分离-I所形成的不平衡产物。患儿不平衡片断包含与颅骨发育异常相关的TWIST基因、与先心相关的MOX2基因以及与颅面部异常特征相关的ACTB基因。结论:亲代平衡易位导致的子代小片断不平衡是7p部分三体综合征等出生缺陷的重要原因;SNP aCGH是鉴别小片断不平衡的有效手段;7p部分三体综合征患者异常表型可能与TWIST、MOX2、ACTB等基因有关。 展开更多
关键词 7p部分三体综合征 单核苷酸多态-微阵列比较基因组杂交技术 平衡易位 TWIST基因 MOX2基因 actb基因
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Experimental and Numerical Investigation on Erosion Corrosion of the Air Cooler Tube Bundle in a Residue Hydrotreating Unit 被引量:4
10
作者 Jin Haozhe Yu Chenyang +4 位作者 Gu Youjie Qian Guangwei Liu Xiaofei Ou Guofu Jia Yongna 《China Petroleum Processing & Petrochemical Technology》 SCIE CAS 2022年第4期151-162,共12页
Corrosion leakage occurred in the 14th tube bundle in the first row of a residual oil hydrotreating air cooler after operating for two years.The failure location was 0.5 m from the outlet header box.In this paper,the ... Corrosion leakage occurred in the 14th tube bundle in the first row of a residual oil hydrotreating air cooler after operating for two years.The failure location was 0.5 m from the outlet header box.In this paper,the erosion corrosion of the air cooler tube bundle was investigated by experimental and numerical methods.Visual inspection,scanning electron microscopy(SEM),and X-ray diffraction(XRD)experiments were performed,and the failure morphology and material composition confirmed that the damage was caused by erosion corrosion.The shear stress transport k–ωturbulence model(SST-k–ω)was then used to investigate the flow and erosion corrosion characteristics,combined with mass transfer,corrosion rate,and ionization equilibrium models.The numerical simulation results revealed that the water phase volume fraction increased with flow and heat transfer in the fluid,which increased the mass flow rate and concentration of hydrogen sulfide.The mass transfer coefficient and corrosion rate were proposed as important parameters to characterize erosion corrosion.Moreover,the local concentration of wall shear stress was found to increase the risk of erosion corrosion.The predicted high-risk area was consistent with the actual failure area,which verified that this failure incident was attributable to erosion corrosion by the water phase. 展开更多
关键词 erosion corrosion air cooler tube bundle(actb) RESIDUE THINNING hydrogen sulfide
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SNP rs951781影响食管癌患者的术后生存 被引量:1
11
作者 孙琳 宋昕 +11 位作者 魏梦霞 赵学科 徐瑞华 李贝 范宗民 韩雪娜 陈亚杰 钟侃 乔佳欣 马琳琳 谢叶真 王立东 《食管疾病》 2022年第1期1-4,共4页
目的探讨巢蛋白(NES)基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs951781对食管癌进展和预后的影响。方法对来自高发地区医院的199例食管癌患者的癌组织和癌旁配对组织,采用全外显子测序(WES)方法检测NES-rs951781基因SNP,比较不同SNP型(野生型纯合... 目的探讨巢蛋白(NES)基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs951781对食管癌进展和预后的影响。方法对来自高发地区医院的199例食管癌患者的癌组织和癌旁配对组织,采用全外显子测序(WES)方法检测NES-rs951781基因SNP,比较不同SNP型(野生型纯合子CC型、突变型杂合子CT和突变型纯合子TT)分布频率,并用K-M曲线比较不同SNP型患者的生存期,用表达数量性状基因座(eQTL)技术对其进行功能注释。结果NES-rs951781存在SNP,野生型纯合子CC型占79.40%,突变型杂合子CT型占18.60%,突变型纯合子TT型占2.01%;野生型纯合子CC型的0.5、1、1.5 a生存率(87.97%、71.52%、58.23%)均低于突变型纯合子TT型。NES-rs951781对β-肌动蛋白(ACTB)的转录表达水平有trans-eQTL作用,使ACTB蛋白表达下调(beta=-0.43)。结论NES-rs951781位点TT基因型患者生存最好;NES-rs951781可能通过下调ACTB蛋白表达影响食管癌的发生发展。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性 食管癌 Β-肌动蛋白 全外显子测序 生存分析
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Baraitser-Winter综合征患者感音神经性聋发生机制的研究进展
12
作者 任丽瑶 刘勇智 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第3期405-409,共5页
Baraitser-Winter综合征(Baraitser-Winter syndrome,BWS)是一种罕见的常染色体显性遗传发育障碍疾病,可伴有进行性感音神经性聋。有研究显示1%的人类基因表达与听觉功能有关。目前为止,已发现超过1000个基因突变可导致遗传性听力损失... Baraitser-Winter综合征(Baraitser-Winter syndrome,BWS)是一种罕见的常染色体显性遗传发育障碍疾病,可伴有进行性感音神经性聋。有研究显示1%的人类基因表达与听觉功能有关。目前为止,已发现超过1000个基因突变可导致遗传性听力损失。伴有感音神经性聋的BWS主要是由胞质表达的肌动蛋白基因ACTB或ACTG1发生错义突变而引起。本文就BWS患者中感音神经性聋相关基因突变位点的研究进展进行探讨,以期为遗传性耳聋患者的病因诊断提供一定价值与帮助。 展开更多
关键词 Baraitser-Winter综合征 遗传性耳聋 感音神经性聋 actb ACTG1
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利用主动回溯技术防御DOS攻击 被引量:1
13
作者 田一华 王明政 李建华 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期186-189,共4页
在传统的对抗DOS攻击的回溯技术(Trace-back)基础上,利用主动网络的主动代码分配机制,提出了一种新的对抗DOS攻击的方法——主动回溯(ACTB).该方法通过逐跳回溯,逼近攻击源,在靠近攻击源处形成防护.实验结果表明,与现有的回溯技术相比,A... 在传统的对抗DOS攻击的回溯技术(Trace-back)基础上,利用主动网络的主动代码分配机制,提出了一种新的对抗DOS攻击的方法——主动回溯(ACTB).该方法通过逐跳回溯,逼近攻击源,在靠近攻击源处形成防护.实验结果表明,与现有的回溯技术相比,ACTB具有更高的安全性和灵活性. 展开更多
关键词 拒绝服务攻击 主动网 回溯 主动回溯
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