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参芪地黄汤介导ACSL4/LPCAT3/ALOX15轴抑制花生四烯酸相关性铁死亡改善小鼠糖尿病肾病肾功能 被引量:5
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作者 吴源陶 王智槟 +4 位作者 傅馨莹 邹晓玲 胡文孝 邹译娴 冯君 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第12期140-149,共10页
目的:探讨参芪地黄汤对糖尿病肾病(DKD)的治疗作用及其机制,重点考察其对花生四烯酸相关性铁死亡的影响。方法:将60只C57BL/6小鼠分为正常组10只,造模组50只,其中43只造模成功。将造模成功小鼠分为模型组,参芪地黄汤低、中、高剂量组,... 目的:探讨参芪地黄汤对糖尿病肾病(DKD)的治疗作用及其机制,重点考察其对花生四烯酸相关性铁死亡的影响。方法:将60只C57BL/6小鼠分为正常组10只,造模组50只,其中43只造模成功。将造模成功小鼠分为模型组,参芪地黄汤低、中、高剂量组,达格列净组,达格列净组予以达格列净药液(0.13 mg·kg^(-1))灌胃,参芪地黄汤组分别予以参芪地黄汤水溶液(4.68、9.36、18.72 g·kg^(-1))灌胃,正常组与模型组分别予以等容生理盐水灌胃。电子天平和血糖仪分别监测小鼠体质量和小鼠尾尖空腹血糖变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;苏木素-伊红(HE)染色、马松染色(Masson)、过碘酸雪夫(PAS)染色检测肾组织病理变化;倒置荧光显微镜观察冰冻切片中活性氧(ROS)的荧光强度,以评估肾脏组织中的亚铁离子(Fe^(2+))及脂质过氧化水平;对小鼠肾组织谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)免疫荧光染色,以检测其定位定量表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测铁死亡关键蛋白如GPX4、胱氨酸谷氨酸反向转运蛋白(xCT)和花生四烯酸代谢通路相关蛋白如ACSL4、溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶3(LPCAT3)、花生四烯酸-15-脂氧合酶(ALOX15)的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠肾组织中铁死亡关键蛋白如溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、GPX4及花生四烯酸代谢通路相关mRNA的表达。结果:与正常组比较,DKD模型组小鼠体质量显著下降(P<0.01),血糖水平显著升高(P<0.01),24 h尿蛋白、血清Scr和BUN水平均显著升高(P<0.01),肾小球系膜细胞增生、基膜增厚、肾小管萎缩和肾小管间质炎症细胞浸润等严重的病理损伤,肾组织中Fe^(2+)、丙二醛(MDA)、脂质过氧化物(LPO)及ROS水平显著升高(P<0.01),GPX4、xCT显著降低(P<0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX15显著升高(P<0.01),GPX4、SLC7A11 mRNA均显著降低(P<0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX15 mRNA显著升高(P<0.01)。与模型组比较,参芪地黄汤低、中、高剂量组和达格列净组小鼠体质量显著升高(P<0.01),血糖水平显著下降(P<0.01),24 h尿蛋白、血清Scr水平均显著降低(P<0.01),肾小球和肾小管病变均有不同程度减少,肾小球和肾小管纤维化程度均有不同程度降低,参芪地黄汤高剂量组和达格列净组小鼠Fe^(2+)、MDA、LPO、ROS水平均显著降低(P<0.01),参芪地黄汤中、高剂量组和达格列净组小鼠肾组织中GPX4、xCT显著增加(P<0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX15明显下降(P<0.05,P<0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX15 mRNA显著下降(P<0.01)。结论:参芪地黄汤能够通过抑制铁死亡来改善DKD,其机制可能与降低铁离子水平、抑制脂质过氧化、上调GPX4表达及下调ACSL4表达有关。该研究为中医药治疗DKD提供了新的思路和理论依据,并为开发新型DKD治疗药物提供了潜在靶点。 展开更多
关键词 参芪地黄汤 糖尿病肾病 铁死亡 花生四烯酸代谢 酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acsl4)/溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶3(lpcat3)/花生四烯酸-15-脂氧合酶(ALOX15)轴 中医药
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基于YAP1/ACSL4/LPCAT3信号通路探讨槲皮素对LPS诱导的急性肺组织损伤小鼠铁死亡的抑制作用 被引量:1
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作者 杨昊若 袁果 +2 位作者 任军华 樊茂蓉 杨斌 《中成药》 北大核心 2025年第4期1315-1320,共6页
目的探讨槲皮素对LPS诱导的急性肺组织损伤(ALI)小鼠铁死亡的抑制作用。方法小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组(5 mg/kg)及槲皮素高、低剂量组(100、10 mg/kg),每组10只,给药组灌胃给予相应剂量药物,对照组、模型组灌胃给予等体... 目的探讨槲皮素对LPS诱导的急性肺组织损伤(ALI)小鼠铁死亡的抑制作用。方法小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组(5 mg/kg)及槲皮素高、低剂量组(100、10 mg/kg),每组10只,给药组灌胃给予相应剂量药物,对照组、模型组灌胃给予等体积生理盐水,每天1次,连续21 d。除对照组外,其余各组小鼠经鼻滴法给予LPS(50μg)构建ALI模型。测定双肺组织湿/干重比(W/D),细胞计数仪计数BALF炎性细胞总数,ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10水平,生化比色法及TBA法检测肺组织Fe^(2+)、MDA、4-HNE、GSH水平,HE染色观察肺组织病理变化,普鲁士蓝染色检测肺组织Fe^(2+)沉积,免疫荧光法检测肺组织ROS水平,免疫组化法及RT-qPCR法检测YAP1、ACSL4、LPCAT3、GPX4蛋白、mRNA表达。结果与对照组比较,模型组小鼠肺组织水肿严重,肺泡肿胀、变性,肺泡壁增厚,肺组织炎性细胞浸润明显,BALF炎症细胞总数及上清TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P<0.01),IL-10水平降低(P<0.01),肺组织MDA、4-HNE、ROS、Fe^(2+)水平升高(P<0.01),GSH水平降低(P<0.01),ACSL4、LPCAT3蛋白及mRNA表达升高(P<0.01),YAP1、GPX4蛋白及mRNA表达降低(P<0.01);与模型组比较,槲皮素各剂量组及地塞米松组肺组织水肿及肺组织细胞变性、坏死程度减轻,炎细胞浸润减少,肺组织病理损伤明显改善,BALF炎症细胞总数及上清TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05),IL-10水平升高(P<0.05),肺组织MDA、4-HNE、Fe^(2+)、ROS水平均降低(P<0.05),GSH水平升高(P<0.05),ACSL4、LPCAT3蛋白及mRNA表达降低(P<0.05),YAP1、GPX4蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。结论槲皮素可抑制LPS诱导的急性肺组织损伤小鼠铁死亡,进而缓解肺组织病理损伤,修复肺组织功能,其机制可能与调控YAP1/ACSL4/LPCAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 槲皮素 急性肺组织损伤 铁死亡 炎症 YAP1/acsl4/lpcat3信号通路
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芒柄花素通过影响ACSL4/LPCAT3/GPX4表达缓解脑缺血再灌注损伤中神经元铁死亡
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作者 马强 欧阳心怡 +2 位作者 颜思阳 刘利娟 周德生 《湖南中医药大学学报》 2025年第6期989-999,共11页
目的探讨芒柄花素在脑缺血再灌注损伤(CIRI)中是否通过调控ACSL4/LPCAT3/GPX4信号轴,干预神经元铁死亡,发挥神经保护作用。方法采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,设立假手术组,模型组,芒柄花素低、中、高剂量组... 目的探讨芒柄花素在脑缺血再灌注损伤(CIRI)中是否通过调控ACSL4/LPCAT3/GPX4信号轴,干预神经元铁死亡,发挥神经保护作用。方法采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)模型,设立假手术组,模型组,芒柄花素低、中、高剂量组及依达拉奉对照组。采用改良神经功能评分(mNSS)评分评估神经功能,HE、尼氏及镀银染色观察脑组织病理改变,TUNEL染色检测神经元凋亡。同时检测Fe^(2+)、丙二醛(MDA)、脂质过氧化物(LPO)、还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)及活性氧(ROS)水平以评价铁死亡程度,并采用Western blot、流式细胞术、免疫荧光检测铁死亡关键蛋白ACSL4、LPCAT3、ALOX1和GPX4表达。结果与模型组相比,芒柄花素显著改善大鼠神经功能缺损和组织病理改变,降低凋亡细胞比例及铁死亡相关指标(Fe^(2+)、MDA、LPO、ROS),并提高抗氧化水平(GSH/GSSG)(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,芒柄花素下调ACSL4、LPCAT3、ALOX15蛋白表达,上调GPX4蛋白表达;流式细胞术结果显示,芒柄花素显著降低了ACSL4/LPCAT3双阳性细胞表达比例(P<0.01);免疫荧光结果显示芒柄花素降低了脑组织中ACSL4和LPCAT3表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论芒柄花素可通过调控ACSL4/LPCAT3/GPX4蛋白表达,抑制铁死亡,缓解CIRI所致神经损伤,为其在缺血性脑卒中辅助治疗中的应用提供理论支持。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 芒柄花素 铁死亡 acsl4/lpcat3/GPX4轴 神经保护
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铁死亡通路中ACSL4、LPCAT3蛋白表达在特发性炎性肌病中的研究 被引量:1
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作者 王虎年 柴克霞 张莉 《系统医学》 2023年第11期190-193,198,共5页
在近些年的细胞程序性死亡研究中,发现细胞死亡与铁死亡存在密切的相关性,即铁死亡是细胞内脂质氧化产物的过量积累,造成细胞发生不可逆的损伤,最终导致细胞死亡。研究发现,组织细胞中的多种生物化学过程均与铁死亡存在一定的关联。疾... 在近些年的细胞程序性死亡研究中,发现细胞死亡与铁死亡存在密切的相关性,即铁死亡是细胞内脂质氧化产物的过量积累,造成细胞发生不可逆的损伤,最终导致细胞死亡。研究发现,组织细胞中的多种生物化学过程均与铁死亡存在一定的关联。疾病方面涉及风湿免疫疾病、肿瘤、缺血再灌注损伤等。目前,铁死亡通路下的ACSL4、LPCAT3蛋白表达与特发性炎性肌病发生的相关性还鲜有研究报道,深入研究该通路有助于更加准确掌握疾病的发生与治疗。 展开更多
关键词 铁死亡 铁代谢 氨基酸代谢 acsl4lpcat3蛋白 特发性炎性肌病的骨骼肌蛋白损伤
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调中化湿汤调控ACSL4/LPCAT3/POR通路对GERD大鼠食管细胞铁死亡的效应机制
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作者 杨成宁 王宇青 +7 位作者 黎丽群 谢胜 李建锋 韦金秀 陈南 罗佐媚 刘礼剑 陈广文 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1328-1332,共5页
目的探讨调中化湿汤调控ACSL4/LPCAT3/POR通路对胃食管反流病(Gastroesophageal Reflux Disease,GERD)模型大鼠食管细胞铁死亡的效应机制。方法将34只SPF级SD大鼠采用随机数字表法,随机分为假手术组、模型组、西药组、中药组,每组8只。... 目的探讨调中化湿汤调控ACSL4/LPCAT3/POR通路对胃食管反流病(Gastroesophageal Reflux Disease,GERD)模型大鼠食管细胞铁死亡的效应机制。方法将34只SPF级SD大鼠采用随机数字表法,随机分为假手术组、模型组、西药组、中药组,每组8只。除假手术组,其余组均构建GERD模型大鼠。西药组予以枸橼酸莫沙必利分散片联合兰索拉唑肠溶片灌胃,中药组予以调中化湿汤中剂量为最佳有效剂量灌胃,疗程持续2周。光镜下观察食管组织的病理结构改变及进行食管黏膜损伤指数评分,免疫组化法(Immunohistochemistry,IHC)及免疫印迹法(Western Blot,WB)观察食管下段组织ACSL4、LPCAT3、POR蛋白表达。结果GERD模型大鼠精神不振,活动减弱,口角偶见食物残渣,光镜下观察食管鳞状上皮基底细胞中度增生,基底细胞层增厚,固有层乳头延长,大量炎性细胞浸润,食管黏膜损伤指数评分增加(P<0.01)。经西药及调中化湿汤干预后大鼠毛发光亮,无精神不振,体重稍增加,食管黏膜结构基本恢复正常,鳞状上皮修复完整,黏膜固有层未见明显的炎症细胞浸润,食管黏膜损伤指数评分降低(P<0.01)。WB结果显示,与假手术组比较,模型组ACSL4、LPCAT3蛋白表达降低(P<0.01),POR蛋白表达下降(P<0.05);与模型组相比较,西药组及中药组ACSL4、LPCAT3蛋白表达显著升高(P<0.01),西药组POR蛋白表达升高(P<0.05),中药组POR蛋白表达上升明显(P<0.01);中、西药组组间比较,西药组ACSL4蛋白表达高于中药组(P<0.01),西药组LPCAT3蛋白表达高于中药组(P<0.05),西药组POR蛋白表达低于中药组(P<0.05)。IHC结果示,与假手术组比较,模型组ACSL4、LPCAT3蛋白表达降低(P<0.05),POR蛋白表达下降(P>0.05);与模型组相比,西药组ACSL4、LPCAT3与中药组POR蛋白表达均升高(P<0.01),西药组POR与中药组ACSL4、LPCAT3蛋白表达上升(P>0.05);中、西药组比较,西药组ACSL4蛋白表达高于中药组(P<0.01),西药组LPCAT3蛋白表达高于中药组(P<0.05),西药组POR蛋白表达低于中药组(P<0.01)。结论GERD发病与ACSL4/LPCAT3/POR通路介导的食管细胞铁死亡减少密切相关;枸橼酸莫沙必利分散片联合兰索拉唑肠溶片和调中化湿汤均可有效修复GERD模型大鼠食管黏膜损伤,改善炎性浸润,其机制可能与激活ACSL4/LPCAT3/POR通路,促进食管细胞铁死亡相关。 展开更多
关键词 GERD 调中化湿汤 acsl4/lpcat3/POR通路 铁死亡
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幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞铁死亡相关脂代谢蛋白表达及脂质过氧化水平的影响 被引量:5
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作者 黄婷婷 陈定宇 +4 位作者 桂书琴 赵艳 王琴容 周建奖 谢渊 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第11期1277-1282,共6页
目的探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对胃上皮细胞和C57BL/6小鼠胃组织中铁死亡相关脂代谢蛋白ACSL4、LPCAT3表达及对脂质过氧化物降解产物丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平的影响。方法用HpGZ7和Hp26695菌株感染正常... 目的探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对胃上皮细胞和C57BL/6小鼠胃组织中铁死亡相关脂代谢蛋白ACSL4、LPCAT3表达及对脂质过氧化物降解产物丙二醛(MDA)和4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平的影响。方法用HpGZ7和Hp26695菌株感染正常胃上皮GES-1细胞和胃癌AGS细胞,感染复数为50∶1,6 h、24 h、48 h后分别收集细胞总蛋白和细胞裂解液,Western blot检测ACSL4和LPCAT3的蛋白表达,试剂盒检测细胞裂解液MDA、4-HNE水平。用Hp灌胃感染C57BL/6小鼠1、3、6月,取胃黏膜组织并制备切片,免疫组织化学染色检测ACSL4、LPCAT3蛋白的表达。结果与未感染组比较,Hp感染GES-1(F值分别为18.82、13.07,4.28、13.03)和AGS(F值分别为14.51、25.88,17.90、16.62)细胞ACSL4、LPCAT3蛋白表达水平均增加,并随着感染时间的延长表达呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。与未感染对照组比较,Hp感染C57BL/6小鼠胃组织中ACSL4、LPCAT3的表达水平均显著升高,其中LPCAT3表达水平增加更显著(F值分别为27.11,103.62,P<0.05)。MDA含量均高于未感染组(Hp感染AGS细胞6 h、24 h、48 h后分别为0.27±0.06、1.13±0.14、0.83±0.12,0.56±0.13、0.86±0.11、0.72±0.16。Hp感染GES-1细胞6h、24 h、48 h后分别为0.22±0.08、0.29±0.09、0.80±0.08,0.17±0.06、0.40±0.08、0.63±0.09),差异有统计学意义(F值分别为27.29、10.56,30.85、18.42,P<0.05)。4-HNE含量均高于未感染组(Hp感染AGS细胞6 h、24 h、48 h后分别为0.12±0.03、0.20±0.06、0.25±0.04,0.06±0.02、0.21±0.03、0.30±0.04。Hp感染GES-1细胞6 h、24 h、48 h后分别为0.23±0.06、0.36±0.06、0.63±0.09,0.19±0.04、0.19±0.05、0.41±0.07),差异有统计学意义(F值分别为7.48、32.31,16.83、12.55,P<0.05)。结论Hp感染可引起胃上皮细胞和C57BL/6小鼠胃组织中铁死亡相关脂代谢蛋白ACSL4、LPCAT3表达增加,细胞内脂质过氧化物降解产物MDA与4-HNE积累,提示Hp可能通过影响其感染细胞内的脂代谢水平,诱导胃上皮细胞发生铁死亡。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 铁死亡 脂代谢 acsl4 lpcat3
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