期刊文献+
共找到271篇文章
< 1 2 14 >
每页显示 20 50 100
黄瓜离体培养再生技术及农杆菌介导的ACS1转化 被引量:15
1
作者 李泠 潘俊松 +2 位作者 何欢乐 吴爱忠 蔡润 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2007年第1期17-23,29,共8页
利用诱导分化培养基(MS+BA 1.5mg·L-1+ABA 0.5mg·L-1+AgNO3 2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,pH5.8)对26个黄瓜自交系的子叶进行离体再生培养,其中的S52、S94、S04、S17S44和S47等6个自交系具有较高的不... 利用诱导分化培养基(MS+BA 1.5mg·L-1+ABA 0.5mg·L-1+AgNO3 2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂5.8g·L-1,pH5.8)对26个黄瓜自交系的子叶进行离体再生培养,其中的S52、S94、S04、S17S44和S47等6个自交系具有较高的不定芽分化率,最高达93%(S44),最低为57%(S94)。除草剂PPT对这6个材料再生分化的抑制程度品种间差异较大。以S52(ff)的子叶为外植体,以pEZT-ACS1为中间载体,利用优化的S52诱导分化培养基MS+BA 2.0mg·L-1+ABA 2.0mg·L-1+AgNO3 2.0mg·L-1进行农杆菌(LBA4404)介导的遗传转化,选择培养基中PPT浓度为2.0mg·L-1,生根培养基中PPT浓度为1.0mg·L-1,获得抗性再生苗,经PCR检测有15株为阳性株,炼苗移栽到温室。 展开更多
关键词 黄瓜 acs1 PPT 子叶 不定芽
在线阅读 下载PDF
无花果ACS1基因RNAi植物表达载体构建 被引量:2
2
作者 唐霞 张帅 +1 位作者 马俊莲 张子德 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期62-65,共4页
通过构建无花果ACS1基因的RNA干扰植物表达载体,为研究ACS基因的功能及采用生物技术方法培育无花果耐贮新品种奠定基础。本试验根据已克隆的无花果ACS1基因序列及植物表达载体pBI221、pBI121的酶切位点,设计2对带相应酶位点的特异性引物... 通过构建无花果ACS1基因的RNA干扰植物表达载体,为研究ACS基因的功能及采用生物技术方法培育无花果耐贮新品种奠定基础。本试验根据已克隆的无花果ACS1基因序列及植物表达载体pBI221、pBI121的酶切位点,设计2对带相应酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,进行PCR扩增,获得正、反向扩增片段,分别正、反向插入到pBI221载体中的CaMV35S启动子和gusA基因之间,构建成无花果ACS1基因的RNAi中间表达载体。再将中间载体中的正、反向片段和gusA基因以双酶切方式连接到表达载体pBI121上,构建成pBI121-RNAi-ACS1植物表达载体。通过各种限制性内切酶的酶切鉴定,成功构建了无花果ACS1基因的RNA干扰植物表达载体。 展开更多
关键词 无花果 acs1基因 植物表达
在线阅读 下载PDF
Cs-ACS1基因克隆与转化黄瓜研究 被引量:3
3
作者 曲淑娟 宋波 +3 位作者 夏蓓蓓 谢玉会 苏承刚 张兴国 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期79-82,共4页
采用PCR方法,从全雌系黄瓜基因组DNA中扩增出2333bp的基因片段,BLAST分析结果表明:所克隆的基因序列与Cs-ACS1仅有1个碱基的差异,与Cs-ACS1G的核苷酸序列同源性为98%,而推导氨基酸完全一致;结果表明所克隆的基因为Cs-ACS1基因.构建了该... 采用PCR方法,从全雌系黄瓜基因组DNA中扩增出2333bp的基因片段,BLAST分析结果表明:所克隆的基因序列与Cs-ACS1仅有1个碱基的差异,与Cs-ACS1G的核苷酸序列同源性为98%,而推导氨基酸完全一致;结果表明所克隆的基因为Cs-ACS1基因.构建了该基因的正义表达载体,并导入黄瓜,获得2株转基因植株. 展开更多
关键词 Cs-acs1基因 植物基因表达载体 转基因黄瓜
原文传递
苏云金芽胞杆菌可视化快速表达载体的构建与特性分析
4
作者 张静安 胡孝龙 +5 位作者 曹蓓蓓 廖敏 束长龙 张杰 王奎 操海群 《生物技术通报》 北大核心 2025年第1期95-102,共8页
【目的】构建可以快速高效表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫基因的表达载体,提高Bt杀虫基因发掘及功能研究效率。【方法】以pUC18载体为基础,构建一个以cry1Ac基因启动子p1Ac指导、融合绿色荧光蛋白GFP的可视化快速... 【目的】构建可以快速高效表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫基因的表达载体,提高Bt杀虫基因发掘及功能研究效率。【方法】以pUC18载体为基础,构建一个以cry1Ac基因启动子p1Ac指导、融合绿色荧光蛋白GFP的可视化快速表达载体p1Ac-GFP,并从生物活性、碱溶性、抗胰蛋白酶稳定性、培养条件等方面对其进行分析。【结果】p1Ac-GFP在大肠杆菌中指导表达的Cry1Ac蛋白与Bt来源的蛋白在杀虫活性方面无明显差异。同时,p1Ac-GFP表达的Cry1Ac蛋白能够溶解于50 mmol/L Na_(2)CO_(3)溶液中,可溶性组分可被胰蛋白酶消化为60 kD大小的核心活性片段。此外,p1Ac-GFP大肠杆菌宿主菌株可以发出绿色荧光,培养菌液荧光强度与所表达的Bt蛋白浓度呈较好的线性关系。培养条件优化结果显示,37℃、培养液与装瓶体积比为5/5、48 h的培养时间最适合p1Ac-GFP表达Bt Cry1Ac蛋白。【结论】p1Ac-GFP表达Bt蛋白时可以直接使用菌液荧光强度作为生物活性测定的浓度指示依据,有助于Bt基因杀虫活性功能的快速批量筛选。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 杀虫基因 cry1Ac启动子 大肠杆菌 表达载体
在线阅读 下载PDF
Species-specific evolution of lepidopteran TspC5 tetraspanins associated with dominant resistance to Bacillus thuringiensis toxin Cry1Ac
5
作者 Chenyang Wang Yinuo Zhang +4 位作者 Qiming Sun Lin Li Fang Guan Yazhou He Yidong Wu 《Journal of Integrative Agriculture》 2025年第8期3127-3140,共14页
Transgenic crops producing insecticidal proteins from the bacterium Bacillus thuringiensis(Bt)have proven to be highly effective in managing some key pests.However,the evolution of resistance by the target pests threa... Transgenic crops producing insecticidal proteins from the bacterium Bacillus thuringiensis(Bt)have proven to be highly effective in managing some key pests.However,the evolution of resistance by the target pests threatens the sustainability of Bt crops.The L31S mutation in a tetraspanin encoded by Harm TspC5(previously known as Ha TSPAN1)has been shown to confer dominant resistance to the Bt protein Cry1Ac in Helicoverpa armigera,a globally damaging lepidopteran pest.However,the broader implications of the L31S mutation in the tetraspanins of other lepidopteran species remain unclear.The evolutionary analyses in this study indicate that TspC5s have evolved in a species-specific manner among the lepidopteran insects.To investigate the role of TspC5s in conferring dominant resistance to Cry1Ac,we used the piggyBac-based transformation system to generate four transgenic H.armigera strains that express exogenous TspC5 variants from three phylogenetically close species(Helicoverpa zea,Helicoverpa assulta and Heliothis virescens)and one phylogenetically distant species(Plutella xylostella).In comparison with the background SCD strain of H.armigera,the transgenic strains expressing HzeaTspC5-L31S,HassTspC5-L31S,or HvirTspC5-L31S exhibited significant resistance to Cry1Ac(10.0-,21.4-,and 81.1-fold,respectively),whereas the strain expressing PxylTspC5-L27S remained susceptible.Furthermore,the Cry1Ac resistant phenotypes followed an autosomal dominant inheritance pattern and were closely linked to the introduced mutant TspC5s.These findings reveal the conserved role of TspC5s from Helicoverpa and Heliothis species in mediating the dominant resistance to Cry1Ac,and they provide crucial insights for assessing resistance risks related to mutant tetraspanins and devising adaptive resistance management strategies for these major lepidopteran pests. 展开更多
关键词 TETRASPANIN Bt resistance CRY1AC piggyBac system Helicoverpa armigera
在线阅读 下载PDF
Impact of Seed Halopriming on Germination,Morphological Traits,and Cry1Ac Gene Expression in Bt Cotton(Gossypium hirsutum)
6
作者 Wenqi Shi Binyameen Bin Shafqat +6 位作者 Muhammad Arif Ayesha Fazal Nawaz Muhammad Amir Zia Xu Ling Dingli Hong Ruhong Xu Luhua Li 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 2025年第1期229-241,共13页
Seed priming is an effective seed pretreatment technology that enhances germination and overall crop performance by optimizing seed hydration and metabolic processes before planting.Seed quality is a critical determin... Seed priming is an effective seed pretreatment technology that enhances germination and overall crop performance by optimizing seed hydration and metabolic processes before planting.Seed quality is a critical determinant of cotton(Gossypium hirsutum)crop performance,influencing germination,plant vigor,and yield.This study evaluates the effects of seed priming with potassium salts(1%and 2%KCl and K2SO4)on germination,morphological traits,and Cry1Ac gene expression in three Bt cotton cultivars(IUB-2013,NIAB-878B,FH-142)as Cry1Ac enhance the pest resistance in Bt cotton and reduce the plant’s dependence on chemical insecticides.Seeds were primed for six hours,air-dried,and sown in the field.Germination rates,plant height,number of bolls per plant,boll weight,seed cotton yield,and ginning outturn(GOT)were assessed at crop maturity.Cry1Ac gene expression was quantified to explore the influence of priming treatments on transgene activity.Results demonstrated that 1%K2SO4 priming significantly enhanced germination and yield-related traits,with Cry1Ac expression peaking in the IUB-2013 cultivar under 1%K2SO4 treatment.These findings suggest that potassium-based halopriming improves cotton seedling establishment and Bt gene expression.This study addresses the critical gaps in understanding the effects of seed halopriming on morphological traits,germination,and expression of the Cry1Ac gene in Bt cotton while providing a novel eco-friendly and cost-effective halopriming approach,offering the potential to improve cotton production. 展开更多
关键词 COTTON seed priming halopriming CRY1AC Bt cotton GERMINATION yield traits
在线阅读 下载PDF
65Mn钢奥氏体连续冷却转变曲线(CCT图) 被引量:29
7
作者 李红英 耿进锋 +1 位作者 龚美涛 张宇航 《材料科学与工艺》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期302-304,共3页
利用膨胀法结合金相———硬度法,在Gleeble-1500热模拟机上测定了65Mn钢的临界点Ar1、Ar3、Ac1和Ac3以及Ms;测定了该钢在不同冷却速度下连续冷却时的膨胀曲线,获得了该钢的连续冷却转变曲线(CCT曲线);研究了65Mn钢连续冷却过程中奥氏... 利用膨胀法结合金相———硬度法,在Gleeble-1500热模拟机上测定了65Mn钢的临界点Ar1、Ar3、Ac1和Ac3以及Ms;测定了该钢在不同冷却速度下连续冷却时的膨胀曲线,获得了该钢的连续冷却转变曲线(CCT曲线);研究了65Mn钢连续冷却过程中奥氏体转变过程及转变产物的组织和性能,大致确定了避免网状铁素体、贝氏体以及魏氏组织铁素体的冷却速度,找出了生产65Mn钢盘条的控冷速度范围,为生产实践和新工艺的制定提供了参考依据. 展开更多
关键词 连续冷却转变曲线 65MN钢 奥氏体 CCT图 冷却速度 CCT曲线 组织和性能 网状铁素体 热模拟机 膨胀曲线 转变过程 冷却过程 魏氏组织 生产实践 硬度法 合金相 膨胀法 临界点 Ac1 贝氏体 钢盘条 测定 控冷
在线阅读 下载PDF
转基因抗虫水稻对水稻害虫群落的影响 被引量:24
8
作者 刘雨芳 苏军 +5 位作者 尤民生 汪琼 胡斯琴 刘文海 赵士熙 王锋 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期544-553,共10页
本文应用吸虫器法与剥查法,研究了转Cry1Ac+SCK基因水稻及其杂交后代对水稻害虫群落的影响。结果显示:转Cry1Ac+SCK基因水稻MSA与MSB对稻纵卷叶螟具有极强的抗性,转Cry1Ac+SCK基因稻的杂交后代21S/MSB与Ⅱ-32A/MSB都获得了对稻纵卷叶螟... 本文应用吸虫器法与剥查法,研究了转Cry1Ac+SCK基因水稻及其杂交后代对水稻害虫群落的影响。结果显示:转Cry1Ac+SCK基因水稻MSA与MSB对稻纵卷叶螟具有极强的抗性,转Cry1Ac+SCK基因稻的杂交后代21S/MSB与Ⅱ-32A/MSB都获得了对稻纵卷叶螟的高抗性。虽然MSA、MSB、21S/MSB与Ⅱ-32A/MSB对水稻害虫的物种丰富度、个体数量、多样性与均匀度时间动态都有一定程度的影响,但生长全期的调查结果显示,与对应的对照比较,它们对水稻害虫群落的这些参数均无显著影响,且转基因水稻田与各自对照田在害虫与主要害虫物种组成上具有较高的相似性。靶标害虫种群数量的降低,并未对水稻害虫群落的组成与结构产生明显的影响,也没有引起优势种成分的变化。 展开更多
关键词 转基因水稻 生物安全性 CRY1AC SCK 抗虫性 群落参数
在线阅读 下载PDF
小菜蛾对Bt毒素Cry1Ac和Bt制剂抗性的选育及其抗性种群的生物学适应性 被引量:27
9
作者 杨峰山 吴青君 +3 位作者 徐宝云 曹丽波 朱国仁 张友军 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期64-69,共6页
用Bt制剂和Bt毒素Cry1Ac分别对源自深圳田间的小菜蛾Plutellaxylostella在室内进行抗性种群选育,获得相对抗性倍数分别为24.36、38.16倍的抗性种群DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46。对这2个抗性种群及其敏感种群(DBM.Bt_S)的生长发育、存活及... 用Bt制剂和Bt毒素Cry1Ac分别对源自深圳田间的小菜蛾Plutellaxylostella在室内进行抗性种群选育,获得相对抗性倍数分别为24.36、38.16倍的抗性种群DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46。对这2个抗性种群及其敏感种群(DBM.Bt_S)的生长发育、存活及繁殖特征进行了详细地观察与比较,并以甘蓝为饲喂材料构建了2个抗性实验种群的生命表。结果表明,DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46种群较DBM.Bt_S种群的产卵量和孵化率下降,幼虫发育历期延长,雌雄比显著降低,雌成虫数量、寿命减少。DBM.1Ac_R30和DBM.Bt_R46种群相对于DBM.Bt_S种群的相对适合度分别为0.75和0.65,抗性种群在繁殖能力上存在明显的生存劣势。 展开更多
关键词 小菜蛾 BT制剂 Bt毒素Cry1Ac 抗性选育 生物学特性
在线阅读 下载PDF
转cry1 Ac/sck基因抗虫水稻对稻田寄生蜂群落影响的评价 被引量:21
10
作者 刘雨芳 贺玲 +4 位作者 汪琼 胡斯琴 刘文海 陈康贵 尤民生 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期955-962,共8页
以转cry1Ac/sck双基因抗虫水稻MSA、MSB、MSA4(对照:MH86)及其杂交稻KF6-304(对照:Ⅱ-YM86)为材料,系统地研究了转基因抗虫水稻对稻田寄生蜂群落的影响及生态安全性。结果表明:在群落水平上,转基因抗虫水稻MSA、MSB、MSA4及杂交稻KF6-30... 以转cry1Ac/sck双基因抗虫水稻MSA、MSB、MSA4(对照:MH86)及其杂交稻KF6-304(对照:Ⅱ-YM86)为材料,系统地研究了转基因抗虫水稻对稻田寄生蜂群落的影响及生态安全性。结果表明:在群落水平上,转基因抗虫水稻MSA、MSB、MSA4及杂交稻KF6-304对稻田寄生蜂的物种丰富度、多样性指数、均匀性指数和优势集中性指数的总体情况与时间动态以及个体总数无明显负面影响,但在生长中期转基因稻可降低稻田寄生蜂的个体数量。按寄生蜂功能团分析,MSA与MSA4在水稻生长发育的后期初始,提高卵寄生蜂的数量,MSA、MSB、MSA4及杂交稻KF6-304显著降低以靶标害虫稻纵卷叶螟为寄主的寄生蜂功能团的个体数量,对其他寄生蜂无明显负面影响。 展开更多
关键词 转基因水稻 cry1Ac/sck基因 抗虫性 寄生蜂群落 功能团
在线阅读 下载PDF
转基因水稻及其杂交后代对稻纵卷叶螟的田间抗性检测 被引量:22
11
作者 刘雨芳 王锋 +4 位作者 尤民生 汪琼 胡斯琴 刘文海 赵士熙 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期725-729,共5页
用剥查法,研究了转cry1Ac+SCK 基因水稻及其杂交后代对稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)的大田抗性。结果显示,在自然生产条件下,转cry1Ac+SCK 基因的两个株系MSA 与MSB 对稻纵卷叶螟具有极强的抗性。转cry1Ac+SCK 基因稻的杂交后... 用剥查法,研究了转cry1Ac+SCK 基因水稻及其杂交后代对稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis)的大田抗性。结果显示,在自然生产条件下,转cry1Ac+SCK 基因的两个株系MSA 与MSB 对稻纵卷叶螟具有极强的抗性。转cry1Ac+SCK 基因稻的杂交后代21S/MSB 与II-32A/MSB 都获得了高抗稻纵卷叶螟性状。MSA、MSB、21S/MSB 与II-32A/MSB 上的稻纵卷叶螟数量、卷叶率、卷叶株率与带虫株率均极显著低于常规对照稻。 展开更多
关键词 转基因水稻 杂交后代 稻纵卷叶螟 田间抗性 CRY1AC基因 SCK基因
在线阅读 下载PDF
Cry1Ac毒蛋白对粘虫生长发育、繁殖及飞行能力的影响 被引量:13
12
作者 蒋善军 罗礼智 +1 位作者 胡毅 张蕾 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1360-1366,共7页
为了更全面地评价转基因作物对粘虫Mythimna separata(Walker)(鳞翅目:夜蛾科)的影响,在室内用生测法研究了粘虫初孵幼虫连续取食含不同浓度的Cry1Ac毒蛋白的人工饲料后,其生长发育、繁殖及飞行能力的变化。结果表明:取食0(对照),3,6,12... 为了更全面地评价转基因作物对粘虫Mythimna separata(Walker)(鳞翅目:夜蛾科)的影响,在室内用生测法研究了粘虫初孵幼虫连续取食含不同浓度的Cry1Ac毒蛋白的人工饲料后,其生长发育、繁殖及飞行能力的变化。结果表明:取食0(对照),3,6,12,24,48和96μg/gCry1Ac毒蛋白人工饲料6d后的幼虫头宽、体长、18d后的体重随着毒蛋白浓度的升高显著降低,幼虫发育历期显著延长,死亡率显著升高。取食含毒蛋白浓度>12μg/g饲料的幼虫不能正常化蛹;取食含0,3和6μg/g毒蛋白饲料的幼虫能正常化蛹、羽化,化蛹率随着毒蛋白浓度的升高而显著降低、蛹历期显著延长;取食含0,3和6μg/g毒蛋白饲料的幼虫羽化的成虫繁殖能力有显著差异,产卵前期随毒蛋白浓度的升高显著延长,产卵量显著降低;而1日龄成虫飞行能力(飞行距离、时间和速度)则随毒蛋白浓度的升高显著降低。这些结果表明,Cry1Ac毒蛋白对粘虫的生长发育、繁殖及飞行具有显著影响,从而为完善转Bt作物的生态安全性风险评估提供了重要的实验依据。 展开更多
关键词 Cry1Ac毒蛋白 粘虫 生长 发育 繁殖 飞行能力
原文传递
农杆菌介导Cry1Ac基因转化菊花 被引量:18
13
作者 蒋细旺 包满珠 +2 位作者 吴家和 张献龙 田颖川 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期65-69,共5页
用农杆菌介导法,以茎段(节间)为外植体,将含有苏云金芽孢杆菌(Bt)毒蛋白Cry1Ac基 因的植物遗传载体导入菊花(切花菊)品种‘日本黄’中,得到126株抗性植株,PCR检测及基因组DNA 的Southern杂交分析表明Cry1Ac基因已整合到菊花总DNA... 用农杆菌介导法,以茎段(节间)为外植体,将含有苏云金芽孢杆菌(Bt)毒蛋白Cry1Ac基 因的植物遗传载体导入菊花(切花菊)品种‘日本黄’中,得到126株抗性植株,PCR检测及基因组DNA 的Southern杂交分析表明Cry1Ac基因已整合到菊花总DNA中,共获得6株转基因植株。利用棉铃虫做转基 因植株的盆栽和叶片平皿试验,发现其中2株对棉铃虫具有很高抗性,校正死亡率达90%以上;1株对棉 铃虫具有高抗性,校正死亡率达80%以上;3株对棉铃虫抗性较明显,校正死亡率44.7%~60.9%。 展开更多
关键词 菊花 苏云金芽孢杆菌 CRY1AC基因 抗虫性 转基因植株 棉铃虫 根癌农杆菌
在线阅读 下载PDF
根癌农杆菌介导Cry1Ac基因转化‘雪青’梨获得转基因植株 被引量:11
14
作者 汤绍虎 孙敏 +2 位作者 廖志华 周启贵 李道高 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期59-62,共4页
以‘雪青’梨叶片愈伤组织为外植体,经根癌农杆菌介导将CaMV35S启动子调控下的Cry1Ac基因导入‘雪青’梨。698块愈伤组织和231个Kanr芽与携带表达载体质粒pBX203的根癌农杆菌菌株LBA4404共培养3d后,转入含50mg.L-1Kan的筛选培养基培养30... 以‘雪青’梨叶片愈伤组织为外植体,经根癌农杆菌介导将CaMV35S启动子调控下的Cry1Ac基因导入‘雪青’梨。698块愈伤组织和231个Kanr芽与携带表达载体质粒pBX203的根癌农杆菌菌株LBA4404共培养3d后,转入含50mg.L-1Kan的筛选培养基培养30d,15d转接1次。结果表明,在MS+5mg.L-16-BA+0.1mg.L-1IAA筛选培养基中,Kanr芽率为34.24%,在1/2MS+2mg.L-1IBA+0.5mg.L-16-BA+500mg.L-1AC筛选培养基中,15.58%Kanr芽生根。共获得再生植株32株,经PCR和Southern-blot分析证明,其中4株的基因组已成功导入和整合Cry1Ac基因。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 CRY1AC基因 遗传转化
在线阅读 下载PDF
大肠杆菌中利用苏云金芽胞杆菌强启动子p1Ac指导Cry1Ac蛋白表达的特性分析 被引量:5
15
作者 马君兰 束长龙 +3 位作者 刘东明 张杰 宋福平 黄大昉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期80-84,共5页
对利用苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)强启动子——cry1Ac基因启动子p1Ac指导cry基因在大肠杆菌中的表达进行了研究。结果显示,大肠杆菌中由启动子p1Ac指导表达的Cry1Ac蛋白与苏云金芽胞杆菌来源的Cry1Ac蛋白在碱溶性、胰... 对利用苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)强启动子——cry1Ac基因启动子p1Ac指导cry基因在大肠杆菌中的表达进行了研究。结果显示,大肠杆菌中由启动子p1Ac指导表达的Cry1Ac蛋白与苏云金芽胞杆菌来源的Cry1Ac蛋白在碱溶性、胰蛋白酶活化、杀虫活性等方面有较好的一致性,从而解决了目前商业化载体大肠杆菌表达cry基因时形成不易溶解的包涵体问题。同时,还对p1Ac指导的cry1Ac基因在大肠杆菌中表达的发酵条件进行了初步探索。 展开更多
关键词 cry1Ac基因启动子p1Ac 大肠杆菌 Cry1Ac蛋白 表达 发酵条件
在线阅读 下载PDF
转cry1Ac1基因抗虫水稻的培育 被引量:11
16
作者 杨瑞芳 白建江 +1 位作者 朴钟泽 李刚夑 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1103-1111,共9页
本研究以粳稻"秀水134"为受体材料,通过根癌农杆菌介导的遗传转化方法导入抗虫基因cry1Ac1,获得12个独立转基因株系。经过PCR确认转基因植株均为cry1Ac1阳性植株。半定量RT-PCR实验表明,目的基因在所有转化体中都能够表达。用荧光定量... 本研究以粳稻"秀水134"为受体材料,通过根癌农杆菌介导的遗传转化方法导入抗虫基因cry1Ac1,获得12个独立转基因株系。经过PCR确认转基因植株均为cry1Ac1阳性植株。半定量RT-PCR实验表明,目的基因在所有转化体中都能够表达。用荧光定量PCR分析拷贝数,结果表明有3个转化体携带单拷贝目的基因。通过TAIL-PCR方法对单拷贝转化体基因插入位点分析,发现其中一个转化体的目的基因插入到基因间区,位于第2染色体Os02G0539500(Chr.2:20858661~20860159)基因上游约2.4 kb处,未对受体材料的已知功能基因造成破坏。通过此单拷贝转化体自交后,从后代群体中获得纯系并进行田间农艺性状及抗虫性调查,结果显示此纯系抗虫效果佳,并且没有造成主要农艺性状的明显改变。研究结果表明,我们已经获得cry1Ac1基因在水稻植株中可以稳定表达,并且主要农艺性状没有明显改变的高抗虫水稻转基因材料。 展开更多
关键词 水稻 农杆菌介导的遗传转化 cry1Ac1基因 抗虫性
原文传递
不同光质LED光源对转基因杨树叶片Bt毒蛋白含量及叶绿素荧光参数的影响 被引量:14
17
作者 张文林 任亚超 +2 位作者 张益文 刘红梅 张军 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1639-1645,共7页
为探明不同光质对杨树幼苗生长的影响,以转基因741杨株系Pb29为试材,利用LED精量调制光源,设置红光、蓝光、红蓝光、白光4个处理,测定不同光质处理下Pb29的Cry1Ac毒蛋白含量、形态指标、光合色素含量及叶绿素荧光参数。结果表明,蓝光处... 为探明不同光质对杨树幼苗生长的影响,以转基因741杨株系Pb29为试材,利用LED精量调制光源,设置红光、蓝光、红蓝光、白光4个处理,测定不同光质处理下Pb29的Cry1Ac毒蛋白含量、形态指标、光合色素含量及叶绿素荧光参数。结果表明,蓝光处理下的Cry1Ac毒蛋白的表达量最大,白光次之。除了叶片长/宽的值在蓝光处理下最大外,红蓝光处理下的741杨叶片数、叶片长、叶片宽、叶面积及株高均高于其它处理。除叶绿素b的含量在红光处理下最大外,叶绿素a、叶绿素a+b、类胡萝卜素含量及叶绿素a/b比值均在白光处理下最大,红蓝光次之,且白光与红蓝光间无显著差异。叶绿素荧光参数(ΦPSⅡ、ETR、q P)在蓝光和红蓝光处理下高于其它处理,在白光和红蓝光处理下的Fv/Fm高于其它处理,q N在红光处理下最大。由此可知,不同光质对杨树幼苗的生长具有调控作用。本试验结果为深入研究不同光质对杨树的生长发育进行调控提供了科学依据。 展开更多
关键词 741杨 光质 Cry1Ac毒蛋白 光合色素 叶绿素荧光
在线阅读 下载PDF
转修饰cry1 Ac基因籼稻明恢81经花药培养获得抗虫DH系 被引量:16
18
作者 曾千春 吴茜 +3 位作者 冯德江 周开达 刘翔 朱祯 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期442-446,共5页
对基因枪法获得的明恢 81转修饰的cry1Ac基因当代植株进行花药培养 ,共接种花药 2 6 0 0枚 ,获得 83份花培植株 ,其中双倍体植株 43份 ,单倍体植株 40份。PCR结果表明含有cry1Ac基因的植株 5 5份 ,花培植株群体中转基因与非转基因植株... 对基因枪法获得的明恢 81转修饰的cry1Ac基因当代植株进行花药培养 ,共接种花药 2 6 0 0枚 ,获得 83份花培植株 ,其中双倍体植株 43份 ,单倍体植株 40份。PCR结果表明含有cry1Ac基因的植株 5 5份 ,花培植株群体中转基因与非转基因植株的比值为 2∶1(5 5 2 8)。进一步结合Southernblot和ELISA分析 ,于花培植株当代筛选到转基因纯合株系 36份。外源蛋白表达量上 ,花药来源于同一克隆的DH系的不同植株之间基本一致 ,最高的Cry1Ac含量达 0 2 5 %。田间抗虫性试验表明 ,经花药培养纯合获得的部分转基因纯合系植株对二化螟 (Chilosuppressalis)表现出高抗 ,而且主要农艺性状保持不变。以上结果表明水稻花药培养可以加速转基因的纯合与育种利用。 展开更多
关键词 修饰cry1Ac基因 籼稻 明恢81 花药培养 抗虫DH系 转基因水稻 生物检测 二化螟
在线阅读 下载PDF
转sck+cry1Ac基因水稻对二化螟及二化螟绒茧蜂存活和生长发育的影响 被引量:15
19
作者 姜永厚 傅强 +3 位作者 程家安 祝增荣 蒋明星 张志涛 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期554-560,共7页
在实验室研究了转sck+cry1Ac基因水稻(MSB)对二化螟Chilosuppressalis(Walker)生长、存活以及经寄主对二化螟绒茧蜂Apanteleschilonis(Munakata)生物学特性的影响。连续取食转sck+cry1Ac基因水稻的二化螟,体重下降、死亡率上升,从第2天... 在实验室研究了转sck+cry1Ac基因水稻(MSB)对二化螟Chilosuppressalis(Walker)生长、存活以及经寄主对二化螟绒茧蜂Apanteleschilonis(Munakata)生物学特性的影响。连续取食转sck+cry1Ac基因水稻的二化螟,体重下降、死亡率上升,从第2天开始,其体重显著低于取食明恢86的对照组;从第6天开始,死亡率极显著高于对照组。二化螟取食MSB36h后移至对照水稻上继续取食3、6、9、12天后,死亡率与对照差异都不显著;但体重均低于对照,其中第3天的体重差异达显著水平。二化螟绒茧蜂分别以取食MSB一定时间的3、4、5龄二化螟幼虫为寄主时,寄生率均低于以对照组,其中对4龄幼虫的寄生率差异显著;结茧率与对照差异均不显著;寄生在取食MSB的5龄二化螟幼虫体内的蜂、蛹期显著长于对照,而所结茧的茧长显著短于对照;但卵-幼虫历期、每茧块茧数、羽化率、雌性率、成蜂寿命和前翅长与对照无显著差异。结果表明转sck+cry1Ac基因水稻不仅对二化螟生长和存活有显著影响,而且可经寄主二化螟影响到二化螟绒茧蜂的一些生物学特性。 展开更多
关键词 转sck+cry1Ac基因水稻 二化螟 二化螟绒茧蜂 存活 生长发育
在线阅读 下载PDF
741杨双Bt基因的遗传转化及转基因株系的抗虫性 被引量:10
20
作者 王桂英 杨敏生 +2 位作者 霍雪梅 王艳平 李珊珊 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期42-49,共8页
以含有Cry3Aa基因的重组质粒pBCC3为基础,利用PCR和DNA重组技术,从pBCC3中克隆出抗虫基因Cry3Aa,将其正向插入载体pCAMBIA1305的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成pCAMBIA1305-Cry3Aa植物表达载体,并导入根癌农杆菌EHA105。采用农杆... 以含有Cry3Aa基因的重组质粒pBCC3为基础,利用PCR和DNA重组技术,从pBCC3中克隆出抗虫基因Cry3Aa,将其正向插入载体pCAMBIA1305的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成pCAMBIA1305-Cry3Aa植物表达载体,并导入根癌农杆菌EHA105。采用农杆菌介导的遗传转化法,将Cry3Aa基因转入已转Cry1Ac+API基因的741毛白杨无性系pB29中,获得转双Bt基因的741杨。在含潮霉素的培养基中进行多次继代筛选,获得抗性稳定的无性系9个,编号为pCCA1—pCCA9。采用特异引物分别对转基因植株进行PCR检测,结果显示Cry1Ac基因稳定存在于pB29中,Cry3Aa基因已整合到各无性系的基因组DNA中。ELISA毒蛋白检测,转基因株系都有Cry1Ac和Cry3Aa杀虫蛋白表达。用转基因植株叶片进行柳蓝叶甲(鞘翅目)和美国白蛾(鳞翅目)室内饲虫试验结果表明,转基因植株具有双抗性。根据对测试昆虫的致死率划分高中低3个抗性水平,其中pCCA2,pCCA5,pCCA6,pCCA9具有双高抗;pCCA3,pCCA4和pCCA7对柳蓝叶甲表现出中、低抗性,对美国白蛾则高抗;而pCCA1表现对美国白蛾的极低抗性,对柳蓝叶甲则高抗。 展开更多
关键词 载体构建 CRY1AC基因 Cry3Aa基因 双Bt741杨 抗虫性
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 14 下一页 到第
使用帮助 返回顶部