呕吐毒素对人心肌细胞AC16增殖和凋亡的影响

1

作者 张百刚 李阳 +1 位作者 焦禄 付炳刚 《现代食品科技》 北大核心 2025年第4期109-116,共8页

该研究旨在探讨呕吐毒素对人心肌细胞AC16增殖和凋亡的影响。不同浓度的呕吐毒素处理人心肌细胞AC16后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察细胞形态学变化,通过乳酸脱氢酶释放检测细胞毒性,Annexin V-FITC流式细胞法检测凋... 该研究旨在探讨呕吐毒素对人心肌细胞AC16增殖和凋亡的影响。不同浓度的呕吐毒素处理人心肌细胞AC16后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察细胞形态学变化,通过乳酸脱氢酶释放检测细胞毒性,Annexin V-FITC流式细胞法检测凋亡率的变化,JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位的变化。Western blotting测定Bax和Bcl-2凋亡相关蛋白的表达水平。结果表明,呕吐毒素显著抑制AC16细胞增殖并诱导凋亡,呈现明显的剂量效应关系。2、4、8μmol/L的呕吐毒素处理24 h后,细胞凋亡率分别为14.89%、43.20%和51.40%。线粒体膜电位表达水平的变化暗示吐毒素可能通过线粒体途径引起AC16细胞凋亡。Western blotting结果表明,呕吐毒素上调了Bax蛋白表达,下调了Bcl-2蛋白表达。综上所述,呕吐毒素对AC16细胞有毒性效应,具有明显的抑制增殖效果,并促使细胞发生凋亡,线粒体膜电位的变化显示呕吐毒素可能是通过线粒体途径诱导了人心肌细胞AC16的凋亡。该研究为进一步研究呕吐毒素对心肌和细胞的损伤机制提供了理论支持。 展开更多

关键词 呕吐毒素 ac16细胞 凋亡 增殖

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RRM2过表达对苯肾上腺素诱导的AC16心肌细胞肥大及凋亡的影响

2

作者 段晓蕾 徐伟峰 卞伟华 《滨州医学院学报》 2025年第4期350-354,360,共6页

目的探讨核糖核苷酸还原酶M2亚基(ribonucleotide reductase M2 subunit,RRM2)对苯肾上腺素(phenylephrine,PE)诱导的心肌细胞肥大及凋亡的作用。方法分别用10、50、100μM PE处理AC16细胞,筛选诱导心肌细胞肥大模型的最佳PE浓度,并分析... 目的探讨核糖核苷酸还原酶M2亚基(ribonucleotide reductase M2 subunit,RRM2)对苯肾上腺素(phenylephrine,PE)诱导的心肌细胞肥大及凋亡的作用。方法分别用10、50、100μM PE处理AC16细胞,筛选诱导心肌细胞肥大模型的最佳PE浓度,并分析RRM2表达情况。将AC16心肌细胞分为慢病毒转染对照(LV-NC)组、慢病毒转染对照+PE处理(LV-NC+PE)组和慢病毒转染过表达RRM2+PE处理组(LV-RRM2+PE),分别采用蛋白免疫印迹法(Western blot)和逆转录定量聚合酶链式反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测各组细胞RRM2、心肌细胞肥大标志物(ANP、BNP和β-MHC)和凋亡相关标志物(Bax和Bcl2)含量的变化,采用免疫荧光法用TRITC标记的鬼笔环肽检测心肌细胞横截面积,采用流式细胞术检测心肌细胞凋亡率的变化。结果50μM PE处理AC16细胞48 h可构建理想的心肌细胞肥大模型。AC16心肌细胞肥大模型中RRM2的RNA水平和蛋白水平明显下调(P<0.05或P<0.01)。与LV-NC+PE组相比,LV-RRM2+PE组AC16的细胞面积显著降低(P<0.05)。RRM2过表达能抑制心肌细胞肥大标志物ANP、BNP和β-MHC的mRNA和蛋白质水平(P<0.05),并且减少了PE诱导的细胞凋亡的比例(P<0.01)。结论RRM2过表达可减轻PE诱导的AC16心肌细胞肥大及凋亡。 展开更多

关键词 ac16 心肌细胞肥大 核酸核苷酸还原酶M2亚基 苯肾上腺素

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槲皮素通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制AC16心肌细胞增殖

3

作者 钟小妹 沈芳 +3 位作者 沃达 彭军 朱伟东 任丹妮 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第3期643-651,共9页

目的 本研究拟通过体外实验研究槲皮素(Quercetin,QCT)与AC16心肌细胞增殖的关系,探析QCT阻止AC16心肌细胞增殖作用与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法 选用不同浓度QCT对AC16细胞进行干预,使用倒置显微镜拍照观察法、台盼蓝计数法和... 目的 本研究拟通过体外实验研究槲皮素(Quercetin,QCT)与AC16心肌细胞增殖的关系,探析QCT阻止AC16心肌细胞增殖作用与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法 选用不同浓度QCT对AC16细胞进行干预,使用倒置显微镜拍照观察法、台盼蓝计数法和CCK-8法检测QCT对AC16细胞增殖的影响。Western blot检测QCT对磷酸化-β-连环蛋白(Phosphorylated β-catenin,p-β-catenin)、细胞性骨髓瘤样癌基因(c-Myc)、β-连环蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(Low density lipoprotein receptor-related protein 5,LRP5)和低密度脂蛋白受体相关蛋白6(Low density lipoprotein receptor-related protein 6,LRP6)表达的影响。台盼蓝计数法检测过表达β-catenin ΔN、LRP5和LRP6基因后研究QCT对细胞增殖的影响以及沉默LRP5和LRP6基因后研究QCT对细胞增殖的影响。结果 与对照组比,QCT使得AC16细胞活细胞数下降,抑制增殖率,且具有浓度依赖性。条件摸索显示10和20μmol/L的QCT会导致AC16细胞中p-β-catenin蛋白修饰水平显著增加(P<0.05),c-Myc、β-catenin、LRP5和LRP6蛋白表达水平显著下调(P<0.05),因此后续实验选择10μmol/L的QCT作为干预浓度。而AC16细胞中过表达β-catenin ΔN、LRP5和LRP6基因,与单独给药组相比,过表达相关基因后10μmol/L的QCT引起的细胞增殖抑制现象被有效逆转(P<0.05)。另外,沉默LRP5和LRP6再联合10μmol/L的QCT干预,AC16细胞的增殖抑制并未产生协同现象(P>0.05)。结论 QCT可以通过下调LRP5/6表达以抑制Wnt/β-catenin信号通路从而发挥其阻止AC16心肌细胞增殖的作用。 展开更多

关键词 QCT ac16心肌细胞 LRP5 LRP6 WNT/Β-CATENIN信号通路

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基于TGF-β1/Smad3信号通路探讨黄芪多糖对阿霉素诱导的AC16心肌细胞凋亡的影响

4

作者 汪对 党莉娟 +3 位作者 张强 赵晓彬 李晓宇 张正峰 《药学前沿》 2025年第12期2009-2016,共8页

目的基于转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD家族成员3(Smad3)信号通路探讨黄芪多糖对阿霉素诱导的心肌细胞损伤的影响。方法将AC16心肌细胞随机分为空白组、模型组、黄芪多糖组、阳性对照组。除空白组,其余各组用阿霉素(1μmol/L)刺激构建... 目的基于转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD家族成员3(Smad3)信号通路探讨黄芪多糖对阿霉素诱导的心肌细胞损伤的影响。方法将AC16心肌细胞随机分为空白组、模型组、黄芪多糖组、阳性对照组。除空白组,其余各组用阿霉素(1μmol/L)刺激构建心肌细胞损伤模型,黄芪多糖组(50μmol/L黄芪多糖)和阳性对照组(10μmol/L厄贝沙坦)处理细胞24 h,用CCK-8法检测细胞活力;Western Blot法检测各组AC16细胞中TGF-β1受体1(TGF-βR1)、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(collagen-Ⅰ)蛋白的表达;流式细胞仪检测AC16心肌细胞凋亡。结果与空白组相比,模型组细胞的增殖能力降低,TGF-βR1、p-Smad3、α-SMA、collagen-Ⅰ蛋白表达水平以及细胞凋亡水平显著增加(P<0.01)。与模型组相比,黄芪多糖组和阳性对照组细胞增殖能力升高,TGF-βR1、p-Smad3、α-SMA、collagen-Ⅰ蛋白表达水平以及细胞凋亡水平下降(P<0.01)。各组间Smad3蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪多糖能够降低TGF-βR1、p-Smad3蛋白表达水平,减少细胞凋亡,改善阿霉素所致的心肌损伤,减轻心脏毒性。 展开更多

关键词 黄芪多糖 阿霉素 心肌损伤 TGF-β1/Smad3信号通路 中医 ac16 心肌细胞 凋亡

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黄芩苷对酯多糖损伤AC16心肌细胞的保护作用及机制研究 被引量：10

5

作者 王智 王娟 +1 位作者 包斯图 翟羽佳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期428-433,共6页

本研究主要探讨黄芩苷对酯多糖损伤AC16心肌细胞的保护作用。设置对照组、LPS组、黄芩苷高、中、低剂量组、黄芪总黄酮组,共同培养6 h,检测细胞生存率及生存状况;荧光素法检测细胞内ATP浓度变化; Western blot检测各组细胞中Cyt C、Apa... 本研究主要探讨黄芩苷对酯多糖损伤AC16心肌细胞的保护作用。设置对照组、LPS组、黄芩苷高、中、低剂量组、黄芪总黄酮组,共同培养6 h,检测细胞生存率及生存状况;荧光素法检测细胞内ATP浓度变化; Western blot检测各组细胞中Cyt C、Apaf-1、caspase-3、caspase-9表达。结果发现与LPS组相比,黄芩苷高、中、低剂量组及黄芪总黄酮组细胞生存状况及生存率明显改善,细胞内ATP浓度升高,凋亡率降低,细胞内Cyt C、Apaf-1、caspase-3及caspase-9表达均降低。说明黄芩苷对酯多糖损伤的AC16心肌细胞具有保护作用,其机制可能与降低Cyt C/Apaf-1/caspase-3/caspase-9通路表达有关。 展开更多

关键词 黄芩苷 心肌细胞 ac16心肌细胞 线粒体 酯多糖

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阿托伐他汀通过内质网应激调节乙醇作用下AC16心肌细胞超微结构及脂质合成代谢 被引量：4

6

作者 李宁 张航 于波 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期828-832,共5页

目的探讨阿托伐他汀通过内质网应激(ERS)对乙醇作用下AC16心肌细胞超微结构及脂质合成代谢的影响及机制。方法建立乙醇作用下AC16心肌细胞ERS模型,并通过Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达,确认ERS模型建立成功。使用... 目的探讨阿托伐他汀通过内质网应激(ERS)对乙醇作用下AC16心肌细胞超微结构及脂质合成代谢的影响及机制。方法建立乙醇作用下AC16心肌细胞ERS模型,并通过Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达,确认ERS模型建立成功。使用不同浓度(1、10、100μmol/L)阿托伐他汀处理乙醇作用下AC16心肌细胞,采用Western blotting检测GRP78蛋白的表达,电镜观察心肌细胞超微结构,检测脂质合成代谢关键蛋白固醇调节原件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、甘油三酯含量变化。结果成功建立乙醇作用下AC16心肌细胞ERS模型。相对于乙醇组,1、10、100μmol/L阿托伐他汀组GRP78、SREBP-1c和甘油三酯含量均显著降低。乙醇组细胞形态异常、细胞内线粒体数量明显减少、线粒体增大、线粒体嵴结构紊乱,随着阿托伐他汀干预浓度增加,细胞形态及线粒体结构逐渐趋于正常,其中100μmol/L阿托伐他汀组可见大量线粒体,呈椭圆形,线粒体嵴结构整齐,同正常组。结论阿托伐他汀可抑制乙醇作用下ERS相关因子GRP78的表达,改善酒精性心肌病细胞模型细胞体态、线粒体等超微结构及脂代谢情况。 展开更多

关键词 阿托伐他汀 内质网应激 心肌细胞ac16 超微结构 脂质合成代谢

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Carabin过表达对人心室肌细胞AC16氧糖剥夺后凋亡的影响 被引量：4

7

作者 吴庆 姚浩旗 +5 位作者 程阔菊 唐建芳 黄河 陈建 李洪 杨天德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期2068-2073,共6页

目的探讨Carabin基因过表达对氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)诱导的人心室肌细胞株AC16凋亡的作用。方法构建Carabin过表达及空载稳定细胞株,将AC16细胞分为空载常氧组、Carabin过表达常氧组、空载OGD 24 h组和Carabin过表达... 目的探讨Carabin基因过表达对氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)诱导的人心室肌细胞株AC16凋亡的作用。方法构建Carabin过表达及空载稳定细胞株,将AC16细胞分为空载常氧组、Carabin过表达常氧组、空载OGD 24 h组和Carabin过表达OGD 24 h组。空载常氧组及Carabin过表达常氧组置于正常条件下培养;空载OGD 24 h组和Carabin过表达OGD 24 h组置于Hanks液中放入缺氧恒温细胞培养箱培养24 h(1%O_(2)-5%CO_(2)-94%N2)。采用倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率及存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;通过酶标仪检测心肌细胞凋亡蛋白酶Caspase-3和心肌细胞损伤标志物LDH的活性;Western blot检测细胞凋亡蛋白Caspase-3的表达水平。结果AC16细胞OGD 24 h后,细胞内Carabin的mRNA及蛋白水平显著降低。与空载常氧组比较,空载OGD 24 h组及Carabin过表达OGD 24 h组的细胞凋亡率、Caspase-3活性、LDH活性及Caspase-3蛋白表达水平均显著升高(P〈0.05)。与空载OGD 24 h组比较,Carabin过表达OGD 24 h组的细胞凋亡率、Caspase-3活性、LDH活性及Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P〈0.05)。结论Carabin过表达能显著减轻OGD诱导后AC16细胞的凋亡。 展开更多

关键词 人心室肌ac16细胞 Carabin 氧糖剥夺 细胞凋亡

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参附注射液对脂多糖诱导AC16脓毒症心肌细胞模型的抗氧化及抗炎机制研究 被引量：4

8

作者 李莹鸿 郑柳怡 +3 位作者 肖谢养 冯彩玲 靳利利 赵锋利 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期201-206,共6页

目的 探讨参附注射液(SFI)对脂多糖(LPS)诱导的AC16脓毒症心肌细胞模型的作用及其相关氧化因子、炎症因子表达的影响。方法 以不同浓度SFI及N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理AC16细胞,采用CCK-8法分别检测2种药物对细胞存活率的影响,筛选合适的... 目的 探讨参附注射液(SFI)对脂多糖(LPS)诱导的AC16脓毒症心肌细胞模型的作用及其相关氧化因子、炎症因子表达的影响。方法 以不同浓度SFI及N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理AC16细胞,采用CCK-8法分别检测2种药物对细胞存活率的影响,筛选合适的药物浓度;采用CCK-8法检测不同浓度LPS以及不同干预时间对AC16细胞存活率的影响,筛选LPS诱导脓毒症细胞模型条件。采用NAC(5 mmol·L^(-1))及不同浓度的SFI(10、20、40μL·mL^(-1))干预经LPS(25μg·mL^(-1)LPS)诱导36 h后的AC16细胞,采用CCK-8法测定细胞存活率;采用DCFH-DA探针检测AC16细胞活性氧(ROS)水平;采用RT-qPCR法及Western Blot法检测AC16细胞中氧化因子(NOX4)、炎症因子(NLRP3、IL-18、IL-1β)基因及蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组AC16细胞的存活率显著降低(P<0.01),ROS水平显著升高(P<0.01),细胞NOX4、NLRP3、IL-18、IL-1βmRNA表达及NOX4、NLRP3、IL-18蛋白表达均显著上调(P<0.01)。与模型组比较,SFI各浓度组的AC16细胞的存活率明显升高(P<0.05,P<0.01);SFI高、中浓度组AC16细胞的ROS水平显著下降(P<0.01),细胞NOX4、NLRP3、IL-18、IL-1β mRNA表达均明显下调(P<0.05,P<0.01);SFI各浓度组AC16细胞NOX4、NLRP3、IL-18蛋白表达均明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论 SFI能促进AC16脓毒症心肌细胞模型的细胞增殖,对细胞具有保护作用,其机制可能与抑制氧化应激及炎症反应相关因子的表达有关。 展开更多

关键词 参附注射液 脂多糖 脓毒症 ac16心肌细胞 炎症因子 氧化应激

原文传递

乙醇通过干预PGC-1α表达水平调节AC16心肌细胞线粒体生成 被引量：2

9

作者 张明慧 孙靖涵 +4 位作者 CHOUMI TCHAMBA Alida 赵莹 于洋 张琳 于波 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1094-1099,共6页

目的探究不同浓度乙醇干预下AC16心肌细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)及其下游蛋白核呼吸因子1(NRF-1)、线粒体转录因子A(TFAM)表达水平的变化以及心肌细胞线粒体结构功能的改变。方法应用MTT法检测细胞存活率... 目的探究不同浓度乙醇干预下AC16心肌细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)及其下游蛋白核呼吸因子1(NRF-1)、线粒体转录因子A(TFAM)表达水平的变化以及心肌细胞线粒体结构功能的改变。方法应用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位改变,电镜下观察细胞超微结构改变,应用实时定量PCR、Western blotting技术分别在基因及蛋白水平检测细胞PGC-1α、NRF-1、TFAM表达水平的变化。结果低浓度乙醇组(50 mmol/L)线粒体数量增加,线粒体膜电位升高,PGC-1α、NRF-1、TFAM表达上调;高浓度乙醇组(200 mmol/L)线粒体数量减少、畸变,线粒体膜电位下降,PGC-1α、NRF-1、TFAM表达下调。结论乙醇对心血管疾病的影响主要是通过调节心肌细胞中PGC-1α、NRF-1、TFAM表达水平从而影响心肌细胞线粒体生成实现的。 展开更多

关键词 乙醇 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α 核呼吸因子1 线粒体转录因子A ac16心肌细胞 线粒体生成

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一种基于MC9S08AC16的正弦波逆变器设计 被引量：1

10

作者 李永鹤 殳国华 张士文 《电测与仪表》 北大核心 2013年第1期106-111,共6页

给出了一种将低压直流电转换为220V/50Hz交流电的方案,阐述了电路的基本结构及控制策略。逆变控制芯片采用Freescale单片机MC9S08AC16,利用其中心对齐PWM模式产生SPWM,在不同类型负载下实现了低谐波系数、低负载调整率的纯正弦波输出。... 给出了一种将低压直流电转换为220V/50Hz交流电的方案,阐述了电路的基本结构及控制策略。逆变控制芯片采用Freescale单片机MC9S08AC16,利用其中心对齐PWM模式产生SPWM,在不同类型负载下实现了低谐波系数、低负载调整率的纯正弦波输出。制作了实验样机并对方案进行了验证。 展开更多

关键词 逆变器 TL494 MC9S08ac16 正弦脉宽调制

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龙牙楤木总皂苷及楤木皂苷A对缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡的影响 被引量：6

11

作者 梁芳 鲁卫星 +1 位作者 周天琪 王胤博 《环球中医药》 CAS 2022年第6期970-975,共6页

目的探讨龙牙楤木总皂苷及其组分楤木皂苷A能否减轻缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡。方法将AC16细胞随机分为正常组、模型组、龙牙楤木总皂苷组、楤木皂苷A组。通过缺氧24小时、复氧12小时建立AC16细胞缺氧/复氧模型,药物组缺氧/复... 目的探讨龙牙楤木总皂苷及其组分楤木皂苷A能否减轻缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡。方法将AC16细胞随机分为正常组、模型组、龙牙楤木总皂苷组、楤木皂苷A组。通过缺氧24小时、复氧12小时建立AC16细胞缺氧/复氧模型,药物组缺氧/复氧损伤前6小时给予药物处理。CCK-8检测细胞存活率,乳酸脱氢酶检测试剂盒检测细胞受损程度,透射电子显微镜观察AC16细胞形态学变化,比色法检测Fe^(2+)水平,酶联免疫试剂盒检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,DHE荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,蛋白免疫印迹法检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11、SAT1、GLS2的表达。结果与正常组相比,模型组AC16细胞存活率明显下降,细胞受损程度明显升高,细胞内的线粒体皱缩、内嵴增厚、膜电子密度增高,Fe^(2+)、ROS、MDA水平明显上升,GSH活力明显下降,铁死亡相关蛋白p53、SAT1、GLS2蛋白表达明显升高,SLC7A11蛋白表达明显降低,以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,龙牙楤木总皂苷组及楤木皂苷A组AC16细胞存活率明显上升,细胞受损程度明显降低,细胞内的线粒体形态趋于正常状态,Fe^(2+)、ROS、MDA水平下降,GSH活力升高,铁死亡相关蛋白p53、SAT1、GLS2蛋白表达下调,SLC7A11蛋白表达上调,以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论龙牙楤木总皂苷及其组分楤木皂苷A能减轻缺氧/复氧诱导的AC16心肌细胞铁死亡,其机制可能与抑制p53、SAT1、GLS2蛋白表达,上调SLC7A11蛋白表达有关。 展开更多

关键词 铁死亡 龙牙楤木总皂苷 楤木皂苷A 缺氧/复氧损伤 ac16心肌细胞

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大质粒转染人源心室肌Ac16细胞条件探究

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作者 李亚欢 范承昊 +1 位作者 向晨莹 廉虹 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2022年第2期299-305,共7页

该研究主要针对大质粒转染人源心室肌Ac16细胞的方式及最适条件进行摸索。采用人源心室肌Ac16细胞作为研究模型,分别用Lip3000转染、核酸脂质体(Hieff Trans;Liposomal)转染和慢病毒转染三种方法将外源大质粒pLenti-CasRx-EGFP导入Ac16... 该研究主要针对大质粒转染人源心室肌Ac16细胞的方式及最适条件进行摸索。采用人源心室肌Ac16细胞作为研究模型,分别用Lip3000转染、核酸脂质体(Hieff Trans;Liposomal)转染和慢病毒转染三种方法将外源大质粒pLenti-CasRx-EGFP导入Ac16细胞中,通过统计表达绿色荧光蛋白的阳性细胞比例,分析外源基因的转染效率,探索大质粒pLenti-CasRx-EGFP的最佳转染方式和转染条件。结果表明,Lip3000转染Ac16细胞的最适转染条件为:质粒与Lip3000的比例为1:2;核酸脂质体转染Ac16细胞的最适条件为:质粒与脂质体的比例为1:3;慢病毒感染Ac16细胞的最适MOI值为200;通过比较三种转染方式的转染效率发现慢病毒的转染效率最高。最后得出大于10 Kb的大型质粒(pLenti-CasRx-EGFP)转染人源心室肌Ac16细胞最适合的方式是利用慢病毒转染,最佳MOI值为200。 展开更多

关键词 ac16细胞 转染 CasRx

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AC16型沥青混凝土混合料配合比设计与施工控制 被引量：2

13

作者 杨明达 《科技创新导报》 2013年第14期99-99,共1页

AC16型沥青混凝土混合料的科学配合比设计,是确保沥青混凝土质量及施工控制的重要基础。该文首先从目标配合比设计、生产配合比设计两个方面,阐述了AC16型沥青混凝土混合料配合比设计。进而从拌合、运输、摊铺、碾压等环节,论述AC16型... AC16型沥青混凝土混合料的科学配合比设计,是确保沥青混凝土质量及施工控制的重要基础。该文首先从目标配合比设计、生产配合比设计两个方面,阐述了AC16型沥青混凝土混合料配合比设计。进而从拌合、运输、摊铺、碾压等环节,论述AC16型沥青混凝土混合料的施工控制。本文旨在强化AC16型沥青混凝土混合料配比设计认识,并为今后相关领域的研究提供一定的参考资料。 展开更多

关键词 ac16型沥青混凝土 混合料配合比 施工控制

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应用CRISPR/Cas9系统构建敲除APE1基因的AC16心肌细胞株

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作者 郭润民 卫月 +2 位作者 姜佳美 陈铭亮 王志强 《解剖学研究》 CAS 2019年第5期438-441,共4页

目的应用CRISPR/Cas9系统构建敲除APE1基因的AC16心肌细胞株,为研究APE1在心肌细胞的功能提供研究基础。方法根据RISPR/Cas9靶向原理设计人APE1基因的导向RNA(sgRNA),构建sgRNA-LentiCRISPRV2重组质粒并转入293T细胞制备sgRNA-Cas9慢病... 目的应用CRISPR/Cas9系统构建敲除APE1基因的AC16心肌细胞株,为研究APE1在心肌细胞的功能提供研究基础。方法根据RISPR/Cas9靶向原理设计人APE1基因的导向RNA(sgRNA),构建sgRNA-LentiCRISPRV2重组质粒并转入293T细胞制备sgRNA-Cas9慢病毒;该病毒浸染AC16心肌细胞,嘌呤霉素筛选出阳性细胞并稀释至单克隆。免疫印迹法测定单克隆细胞中APE1蛋白表达。结果免疫印迹法检测的结果显示,筛选出的单克隆细胞的APE1蛋白表达完全缺失;PCR产物测序结果表明,靶向敲除APE1的心肌细胞,不存在sgRNA介导CRISPR-Cas9随机的核苷酸插入。结论应用CRISPR/Cas9系统成功构建了敲除APE1基因的AC16心肌细胞株。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9系统 脱嘌呤/嘧啶核酸内切酶1 ac16心肌细胞株 基因敲除

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SIRT1/p66Shc介导小檗碱对阿霉素诱导心肌毒性拮抗作用研究 被引量：1

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作者 武彦昭 张兰 +5 位作者 武子笑 单菊彤 时萍 刘妍 杨菲 熊晨 《广州中医药大学学报》 CAS 2022年第6期1374-1382,共9页

【目的】基于细胞水平观察小檗碱对阿霉素诱导心肌细胞沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)/p66Shc通路的影响,探讨小檗碱抗阿霉素所致心肌毒性作用的机制。【方法】应用阿霉素(1μmol/L)处理人心肌细胞系AC16建立阿霉素心肌毒性模型。... 【目的】基于细胞水平观察小檗碱对阿霉素诱导心肌细胞沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)/p66Shc通路的影响,探讨小檗碱抗阿霉素所致心肌毒性作用的机制。【方法】应用阿霉素(1μmol/L)处理人心肌细胞系AC16建立阿霉素心肌毒性模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率,二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色荧光显微镜照像测定细胞活性氧簇(ROS)水平,罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照像测定线粒体膜电位(MMP),荧光染料Rhod2-AM(分子探针)测定线粒体Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]m),蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定细胞SIRT1、p66Shc及凋亡蛋白Bax的表达水平。【结果】用1μmol/L小檗碱预处理可明显抑制1μmol/L阿霉素引起的AC16心肌细胞毒性作用,使细胞存活率升高,表现为抑制阿霉素引起的细胞内ROS生成增多、抑制阿霉素致细胞凋亡(使凋亡蛋白Bax表达下调)和减轻线粒体损伤。阿霉素处理的AC16心肌细胞中p66Shc表达增强且SIRT1蛋白表达下降;预先加用小檗碱组中,阿霉素上调p66Shc及下调SIRT1表达的效应显著减弱;而1μmol/L EX527(SIRT1抑制剂)预处理则加重阿霉素引起的AC16细胞损伤,这种细胞损伤未能被小檗碱预处理所改善。【结论】小檗碱可通过SIRT1介导的p66Shc抑制保护AC16心肌细胞对抗阿霉素诱导的心肌毒性。 展开更多

关键词 小檗碱 阿霉素 心肌毒性 SIRT1/p66Shc通路 线粒体损伤 氧化损伤 钙超载 细胞凋亡 ac16细胞

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基于NR3C1/p53/SLC7A11通路探讨龙牙楤木总皂苷及其成分楤木皂苷A对缺氧/复氧诱导的心肌细胞铁死亡的影响 被引量：12

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作者 梁芳 鲁卫星 +1 位作者 周天琪 王胤博 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2022年第5期63-68,共6页

目的基于NR3C1/p53/SLC7A11通路观察龙牙楤木总皂苷(As)及其成分楤木皂苷A(As A)对缺氧/复氧(H/R)诱导的AC16心肌细胞铁死亡的影响。方法通过缺氧24 h/复氧12 h建立AC16细胞H/R损伤模型,采用细胞转染法调控NR3C1表达,将细胞分为正常组、... 目的基于NR3C1/p53/SLC7A11通路观察龙牙楤木总皂苷(As)及其成分楤木皂苷A(As A)对缺氧/复氧(H/R)诱导的AC16心肌细胞铁死亡的影响。方法通过缺氧24 h/复氧12 h建立AC16细胞H/R损伤模型,采用细胞转染法调控NR3C1表达,将细胞分为正常组、H/R组、As组(As+H/R)、As A组(As A+H/R)、过表达空载体组(过表达空载体+H/R)、NR3C1过表达组(NR3C1过表达+H/R)、沉默对照组(si-NC+As+H/R)和NR3C1沉默组(si-NR3C1+As+H/R),分别进行相应干预,荧光探针检测活性氧(ROS)水平,ELISA检测丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,Western blot检测NR3C1、p53和SLC7A11蛋白表达,免疫荧光染色检测NR3C1和p53蛋白表达。结果与正常组比较,H/R组AC16细胞ROS和MDA水平明显升高,GSH水平明显降低(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显降低,p53蛋白表达明显升高(P<0.05);与H/R组比较,As组、As A组和NR3C1过表达组AC16细胞ROS和MDA水平明显降低,GSH水平明显升高(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显升高,p53蛋白表达明显降低(P<0.05);与过表达空载体组比较,As组和NR3C1过表达组AC16细胞ROS和MDA水平明显降低,GSH水平明显升高(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显升高,p53蛋白表达明显降低(P<0.05);与As组及沉默对照组比较,NR3C1沉默组AC16细胞ROS、MDA水平明显升高,GSH水平明显降低(P<0.05),NR3C1和SLC7A11蛋白表达明显降低,p53蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论As及As A可能通过上调NR3C1、SLC7A11蛋白表达,下调p53蛋白表达,抑制H/R诱导的AC16心肌细胞铁死亡。 展开更多

关键词 缺氧/复氧损伤 龙牙楤木总皂苷 楤木皂苷A NR3C1 P53 SLC7A11 铁死亡 ac16细胞

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LncRNA BRE-AS1在急性心肌梗死患者血清中表达及对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响 被引量：3

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作者 李现立 胡丰朝 韩兆帅 《中国循证心血管医学杂志》 2021年第1期34-37,46,共5页

目的探究lncRNA BRE-AS1在急性心肌梗死(AMI)患者血清中表达和对缺氧/复氧(H/R)诱导心肌细胞AC16损伤的影响。方法QPCR检测AMI患者血清和H/R处理12 h、24 h、48 h后AC16细胞中lncRNA BRE-AS1表达;将lncRNA BRE-AS1 siRNA和对照siRNA转染... 目的探究lncRNA BRE-AS1在急性心肌梗死(AMI)患者血清中表达和对缺氧/复氧(H/R)诱导心肌细胞AC16损伤的影响。方法QPCR检测AMI患者血清和H/R处理12 h、24 h、48 h后AC16细胞中lncRNA BRE-AS1表达;将lncRNA BRE-AS1 siRNA和对照siRNA转染至AC16细胞中,qPCR检测检测转染后细胞中lncRNA BRE-AS1表达;利用试剂盒检测细胞中氧化应激指标MDA、SOD和GSH-PX含量,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中p38/MAPK信号通路蛋白表达。结果与健康志愿者和常氧组AC16细胞相比,AMI患者血清和H/R处理12 h、24 h、48 h后细胞中lncRNA BRE-AS1表达显著增加(P<0.01)。与沉默对照组比较,沉默BRE-AS1组AC16细胞中lncRNA BRE-AS1表达显著降低(P<0.01)。与常氧组比较,H/R组AC16细胞中MDA含量、细胞凋亡率、p38/MAPK信号通路蛋白p-p38、p-ERK1/2表达显著增加,SOD和GSH-PX含量及细胞增殖能力显著降低(P<0.01);与H/R+沉默对照组比较,H/R+沉默BRE-AS1组AC16细胞中MDA含量、细胞凋亡率、p38/MAPK信号通路蛋白p-p38、p-ERK1/2表达显著降低,SOD和GSH-PX含量及细胞增殖能力显著增加(P<0.01)。结论LncRNA BRE-AS1在AMI患者血清中高表达,沉默lncRNA BRE-AS1能够抑制H/R诱导的心肌细胞损伤,其机制可能与抑制p38/MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 LncRNA BRE-AS1 急性心肌梗死 ac16 p38/MAPK信号通路

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心肌细胞株的特性及其在心血管疾病研究中的应用

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作者 田香勤 郭志坤 《解剖学杂志》 CAS 2021年第5期437-441,共5页

心肌细胞株是研究心血管疾病发病机制和药物筛选的重要材料,不同的心肌细胞株其生物学特性存在较大差异。在心血管疾病研究中,心肌细胞株的选择与研究结果密切相关。现围绕当前心肌细胞株的生物学特性及其在研究中的应用展开综述,并提... 心肌细胞株是研究心血管疾病发病机制和药物筛选的重要材料,不同的心肌细胞株其生物学特性存在较大差异。在心血管疾病研究中,心肌细胞株的选择与研究结果密切相关。现围绕当前心肌细胞株的生物学特性及其在研究中的应用展开综述,并提出了研究展望,以进一步拓展对于心肌细胞株的认识,为心血管疾病研究提供参考。 展开更多

关键词 心肌细胞株 H9C2细胞 HL-1细胞 ac16细胞 心血管疾病

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高迁移率族蛋白1通过调控自噬因子P62调节心肌细胞纤维化 被引量：1

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作者 聂雅琴 乌日娜 +5 位作者 金慧 张广平 李永明 智利 薛仕煊 娜日格乐 《国际心血管病杂志》 2024年第2期109-113,共5页

目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)通过调控自噬活性对心肌纤维化的影响及作用机制。方法:将人心肌细胞AC16培养于DMEM培养基中,用不同浓度的HMGB1(0、4、20、100μg/L)干预AC16细胞6 h,免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化的标志性蛋白... 目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)通过调控自噬活性对心肌纤维化的影响及作用机制。方法:将人心肌细胞AC16培养于DMEM培养基中,用不同浓度的HMGB1(0、4、20、100μg/L)干预AC16细胞6 h,免疫荧光染色检测心脏成纤维细胞活化的标志性蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平,Western blot法检测心肌自噬相关蛋白哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、磷酸肌醇-3-激酶3(PIK3C3)、可溶性及不可溶性P62、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)在AC16中的表达水平。免疫共沉淀检测α-SMA与P62之间的互相作用。结果:不同浓度的HMGB1刺激AC16细胞,AC16细胞中心肌纤维化标志蛋白CollagenⅠ与α-SMA的表达水平呈浓度依赖性升高,自噬蛋白PIK3C3、不可溶性P62的蛋白表达水平,p-mTOR与mTOR的比值,LC3-Ⅱ与LC3-Ⅰ的比值呈浓度依赖性升高,可溶性P62的蛋白表达水平呈浓度依赖性降低。各组间的差异均有统计学意义(P均<0.01)。免疫共沉淀实验显示P62与α-SMA存在相互作用。结论:外源性HMGB1可抑制AC16细胞中的自噬流,诱导AC16细胞纤维化。 展开更多

关键词 高迁移率族蛋白1 ac16细胞 自噬 心肌纤维化

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miR-1306-5p靶向水通道蛋白1对糖尿病心肌病变的调控作用 被引量：5

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作者 张凌 张旋 +1 位作者 程峣 廖鑫 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2021年第2期236-241,共6页

目的:探究miR-1306-5p对糖尿病心肌病变的影响和可能机制。方法:体外培养人心肌细胞AC16,分为对照组和高糖组,作用24 h后,收集细胞上清液,采用全自动生化分析仪检测心肌酶CK、LDH和AST水平,采用Western blot检测AC16细胞中心肌病变相关... 目的:探究miR-1306-5p对糖尿病心肌病变的影响和可能机制。方法:体外培养人心肌细胞AC16,分为对照组和高糖组,作用24 h后,收集细胞上清液,采用全自动生化分析仪检测心肌酶CK、LDH和AST水平,采用Western blot检测AC16细胞中心肌病变相关蛋白ANF、β-MHC、TGF-β的表达以及水通道蛋白1(AQP1)的表达,采用qRT-PCR检测miR-1306-5p和AQP1 mRNA的表达。采用双荧光素酶实验验证miR-1306-5p与AQP1的靶向关系。另取AC16细胞,观察抑制miR-1306-5p的表达或同时抑制miR-1306-5p和AQP1的表达对心肌酶的分泌、心肌病变相关蛋白表达、凋亡率以及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响。结果:高糖处理提高了AC16细胞心肌酶CK、LDH和AST的分泌,心肌病变相关蛋白ANF、β-MHC、TGF-β以及miR-1306-5p的表达,降低了AQP1的表达(P<0.05)。miR-1306-5p与AQP1存在负向靶控关系。抑制miR-1306-5p表达降低了高糖诱导的AC16细胞凋亡率、心肌酶的分泌及心肌病变相关蛋白和Bax蛋白的表达水平,提高了Bcl-2蛋白的表达水平(P<0.05);抑制AQP1逆转了抑制miR-1306-5p对高糖诱导的AC16细胞上述指标的改善作用(P<0.05)。结论:抑制miR-1306-5p表达可能通过靶向上调AQP1减轻高糖诱导的心肌细胞损伤。 展开更多

关键词 miR-1306-5p 水通道蛋白1 糖尿病心肌病 ac16细胞

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