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[Gly14]-humanin对人脐静脉内皮细胞胆固醇外排的促进作用研究
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作者 祝娃娃 王健达 +1 位作者 张险峰 俞灵莺 《浙江医学》 CAS 2020年第21期2257-2261,2277,共6页
目的探讨[Gly14]-humanin(HNG)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞胆固醇外排的作用,进而阐明在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中HNG对腺苷三磷酸结合盒转运体A-1(ABCA-1)和腺苷三磷酸结合盒转运体G-1(ABCG-1)蛋白表达的影响。方法以H... 目的探讨[Gly14]-humanin(HNG)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的内皮细胞胆固醇外排的作用,进而阐明在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中HNG对腺苷三磷酸结合盒转运体A-1(ABCA-1)和腺苷三磷酸结合盒转运体G-1(ABCG-1)蛋白表达的影响。方法以HUVECs为研究动脉粥样硬化的工具细胞。将对数生长期的HUVECs细胞接种于6孔板中并随机分组,其中采用ox-LDL处理的5组:0μg/ml ox-LDL组、30μg/ml ox-LDL组、60μg/ml ox-LDL组、90μg/ml ox-LDL组、120μg/ml ox-LDL组;采用HNG处理的5组:0 nM HNG组、50 nM HNG组、100 nM HNG组、1μM HNG组、10μM HNG组;联合用药处理的5组:空白组、ox-LDL组、ox-LDL+100 nM HNG组、ox-LDL+1μM HNG组、ox-LDL+10μM HNG组,分别使用不同浓度的HNG预处理HUVECs细胞1 h,随之加入60μg/ml ox-LDL;经培养及不同药物作用12 h后收集细胞样品。另设HNG作用不同时间5组:0 h HNG组、3 h HNG组、6 h HNG组、12 h HNG组、24 h HNG组,将1μM的HNG按上述时间处理细胞后再收集细胞样品。采用Western blot法检测各组ABCA-1、ABCG-1蛋白的表达水平。结果与0μg/ml ox-LDL组相比,60、90、120μg/ml ox-LDL组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。与0 nM HNG组相比,1、10μM HNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。与0 h HNG组相比,12、24 h HNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。与空白组比较,ox-LDL组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05);而与ox-LDL组相比,ox-LDL+1μM HNG组、ox-LDL+10μM HNG组ABCA-1、ABCG-1蛋白表达水平均明显升高(均P<0.05)。结论HNG通过上调ABCA-1和ABCG-1的蛋白表达而促进胆固醇的外排,可减少内皮细胞脂质的蓄积。 展开更多
关键词 [Gly14]-humanin 人脐静脉内皮细胞 腺苷三磷酸结合盒转运体A-1 腺苷三磷酸结合盒转运体G-1
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