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高粱AAP蛋白家族基因鉴定及表达分析 被引量:1
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作者 孙丽莎 宋巨奇 +5 位作者 彭晶晶 阮美丽 魏金鹏 徐晶宇 李佐同 赵长江 《分子植物育种》 北大核心 2025年第10期3202-3211,共10页
氨基酸通透酶(amino acid permease,AAP)是一种跨膜转运蛋白,广泛参与植物氨基酸的吸收和转运。本研究采用生物信息学方法解析高粱AAP家族基因的特征,并通过盐和低温处理高粱转录组数据,分析SbAAPs基因表达谱。研究发现,在高粱全基因组... 氨基酸通透酶(amino acid permease,AAP)是一种跨膜转运蛋白,广泛参与植物氨基酸的吸收和转运。本研究采用生物信息学方法解析高粱AAP家族基因的特征,并通过盐和低温处理高粱转录组数据,分析SbAAPs基因表达谱。研究发现,在高粱全基因组水平上共鉴定出21个高粱AAPs基因,根据进化关系将其划分为7个亚族,分布在9条染色体上。其中SbAAP3、SbAAP5和SbAAP21预测定位在细胞质中,其余均定位在细胞质膜上。高粱生育期组织数据库分析发现,SbAAP13、SbAAP1、SbAAP2、SbAAP15、SbAAP18、SbAAP14和SbAAP19在高粱的叶片、茎和根部表达量较高。在低温胁迫下,SbAAP13、SbAAP19、SbAAP2、SbAAP18、SbAAP7、SbAAP15、SbAAP1、SbAAP9和SbAAP17与对照相比呈现下调表达的趋势,SbAAP8和SbAAP14与对照相比呈现上调表达的趋势;在盐胁迫处理下,SbAAP2、SbAAP7、SbAAP17、SbAAP6、SbAAP19和SbAAP13与对照相比呈现下调表达的趋势,SbAAP18、SbAAP16和SbAAP9则呈现上调表达的趋势。表达数据与基因启动子区存在大量激素和非生物胁迫相关顺式作用元件有一定的关联。本研究可为高粱AAP家族基因功能解析提供理论基础。 展开更多
关键词 高粱 aap 基因家族 生物信息学
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玉米AAPs家族基因的全基因组鉴定与表达规律分析
2
作者 马文骁 马睿 +4 位作者 藏金萍 张康 曹宏哲 邢继红 董金皋 《河北农业大学学报》 北大核心 2025年第5期117-125,共9页
氨基酸通透酶(Amino acid permeases,AAPs)是一类广泛存在于植物中的重要蛋白,在植物的生长发育、抵抗逆境过程中发挥着关键作用。为探究玉米AAPs家族基因的功能,本研究利用生物信息学方法,对玉米AAPs家族成员的系统进化关系、保守结构... 氨基酸通透酶(Amino acid permeases,AAPs)是一类广泛存在于植物中的重要蛋白,在植物的生长发育、抵抗逆境过程中发挥着关键作用。为探究玉米AAPs家族基因的功能,本研究利用生物信息学方法,对玉米AAPs家族成员的系统进化关系、保守结构域、保守基序、染色体定位、组织表达特异性以及生物和非生物胁迫下的表达规律进行了分析;利用qRT-PCR技术,对该家族基因在茉莉酸(JA)、水杨酸(SA)处理和禾谷镰孢(Fusarium graminearum)侵染下的表达规律进行了分析;进一步获得了ZmAAP13基因的转座子插入突变体Zmaap13,通过对突变体进行抗病性检测明确其在玉米抗病过程中的功能。结果发现,玉米基因组中包含23个AAPs家族成员,与水稻AAPs家族成员的亲缘关系最近;23个ZmAAPs家族成员均含有Aa_trans保守结构域,具有明显的组织表达特异性,在抵抗生物和非生物胁迫的过程中呈现出不同的表达规律;禾谷镰孢侵染后,ZmAAP3、ZmAAP13和ZmAAP21等基因的表达水平显著上调;与野生型相比,ZmAAP13基因的突变体Zmaap13对禾谷镰孢的侵染表现出更为敏感。结果表明,AAPs家族基因在玉米的生长发育以及抵抗生物和非生物胁迫的过程中发挥重要的作用,为阐明玉米AAPs家族基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 玉米 aaps家族基因 生物胁迫 非生物胁迫 生物信息学
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我校与企业合作开发的国家化学1类新药“注射用AAPB”获得药物临床试验批准通知书
3
作者 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期245-245,共1页
近日,由多靶标天然药物全国重点实验室、江苏省代谢性疾病药物重点实验室张奕华/黄张建教授团队与江苏康缘药业股份有限公司合作的国家化学1类新药“注射用AAPB”获得国家药品监督管理局的药物临床试验批准通知书,适应症为急性缺血性脑... 近日,由多靶标天然药物全国重点实验室、江苏省代谢性疾病药物重点实验室张奕华/黄张建教授团队与江苏康缘药业股份有限公司合作的国家化学1类新药“注射用AAPB”获得国家药品监督管理局的药物临床试验批准通知书,适应症为急性缺血性脑卒中。AAPB项目采取校企联合的方式,由我校张奕华教授、黄张建研究员、吴建兵副研究员的团队设计并确定优势候选物,江苏康缘药业进行后期的临床前研究与评价,双方共同推进、共享成果。2024年1月,学校和企业共同提交临床申请(两个注射剂规格);3月获得药物临床试验批准通知书(中国药科大学排名第一)。 展开更多
关键词 药物临床试验 中国药科大学 重点实验室 临床前研究 校企联合 代谢性疾病 aap 天然药物
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玉米AAP基因密码子偏性与进化分析
4
作者 王宇 罗希帆 +3 位作者 葛均筑 陈帅君 杨红澎 吴疆 《天津农学院学报》 CAS 2024年第3期17-22,共6页
氨基酸透性酶(AAP)通过参与植物体内氨基酸吸收和转运,从而改变植物生长发育。研究其密码子偏好性,对AAP基因异源表达、功能验证及完善其遗传转化体系具有指导意义。使用Codon W、EMBOSS、Origin 2021以及SPSS等程序软件,对25个物种的AA... 氨基酸透性酶(AAP)通过参与植物体内氨基酸吸收和转运,从而改变植物生长发育。研究其密码子偏好性,对AAP基因异源表达、功能验证及完善其遗传转化体系具有指导意义。使用Codon W、EMBOSS、Origin 2021以及SPSS等程序软件,对25个物种的AAP基因密码子进行聚类、中性、ENC以及PR2绘图分析,选择玉米AAP最佳异源表达受体及遗传转化受体。结果表明:玉米AAP基因的CAI、ENc、GC值分别为0.269、35.48、65.3%,表明其密码子偏好性较弱,且在编码蛋白过程中偏好以G/C结尾;RSCU聚类分析表明,玉米AAP基因与单子叶禾本科植物的使用偏好性相近,且同源关系也较近;而中性、ENC以及PR2绘图分析显示,玉米AAP基因密码子偏好性受自然选择影响较大;密码子使用频率分析表明,大肠杆菌比酵母表达系统更适合作为玉米AAP基因的异源表达受体,水稻更适合作为遗传转化受体。本研究为今后玉米AAP的功能验证及转基因植物培育等提供了研究基础。 展开更多
关键词 玉米 aap基因 密码子偏性 聚类分析 异源表达
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抗碱性磷酸酶单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其APAAP的制备与初步鉴定 被引量:6
5
作者 欧阳斌 刘燕 史良如 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期141-144,共4页
本文报道用碱性磷酸酶Sigma Ⅰ型粗酶免疫Balb/c小鼠,采用酶联免疫吸附反应筛选细胞融合后杂交瘤培养上清,最后获7株稳定分泌抗碱性磷酸酶单抗的杂交瘤细胞株,对其中6株进行了特性鉴定。取其中1株AAP1/323腹水制成APAAP试剂盒,应用于EL... 本文报道用碱性磷酸酶Sigma Ⅰ型粗酶免疫Balb/c小鼠,采用酶联免疫吸附反应筛选细胞融合后杂交瘤培养上清,最后获7株稳定分泌抗碱性磷酸酶单抗的杂交瘤细胞株,对其中6株进行了特性鉴定。取其中1株AAP1/323腹水制成APAAP试剂盒,应用于ELISA和免疫组化染色表明:该试剂盒灵敏度高,本底低,无内源性酶干扰现象,对比好,背景清晰,结果容易判断,能满足临床检测的要求。 展开更多
关键词 aap APaap 免疫组织化学 染色
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拟南芥AAP1基因的克隆及植物表达载体的构建 被引量:7
6
作者 崔喜艳 佟珊珊 +3 位作者 范贝 王阔 胡广宇 刘相国 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期564-569,共6页
拟南芥氨基酸透性酶1(AAP1,也叫NAT1)是植物中第一个被分离的氨基酸转运蛋白,在拟南芥主根、侧根、根毛及根表皮细胞中均有增加氨基酸含量的作用。本研究利用RT-PCR的方法,从拟南芥中克隆了该基因,测序结果与GenBank(NM-104616.4)中已... 拟南芥氨基酸透性酶1(AAP1,也叫NAT1)是植物中第一个被分离的氨基酸转运蛋白,在拟南芥主根、侧根、根毛及根表皮细胞中均有增加氨基酸含量的作用。本研究利用RT-PCR的方法,从拟南芥中克隆了该基因,测序结果与GenBank(NM-104616.4)中已发表的拟南芥AAP1(AtAAP1)基因的同源性高达99.93%;并将AtAAP1基因与pCAMBIA3300构建p3300-AAP1植物表达载体,为过表达AtAAP1基因,提高作物氨基酸含量,从而改善作物氮素利用效率提供参考。 展开更多
关键词 拟南芥 氨基酸透性酶1(aap1) 克隆 植物表达载体
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转AAP1基因玉米游离氨基酸与可溶性蛋白质含量变化关系的研究 被引量:7
7
作者 李慧杰 齐家兴 +3 位作者 单冬冬 王羽 王爽 崔喜艳 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期39-44,共6页
氨基酸通透酶1(AAP1)是位于细胞膜上与氨基酸转运有关的载体蛋白。以转组成型启动子(UBI)的AAP1玉米植株(N7-30、N7-26)、转胚乳特异性启动子(Glu)的AAP1玉米植株(KF8-33、KF8-39、KF9-22)为材料,探究转AAP1基因玉米中游离氨基酸和可溶... 氨基酸通透酶1(AAP1)是位于细胞膜上与氨基酸转运有关的载体蛋白。以转组成型启动子(UBI)的AAP1玉米植株(N7-30、N7-26)、转胚乳特异性启动子(Glu)的AAP1玉米植株(KF8-33、KF8-39、KF9-22)为材料,探究转AAP1基因玉米中游离氨基酸和可溶性蛋白质含量之间的变化关系。结果表明,转AAP1基因玉米的根部和叶片中游离氨基酸含量在抽丝期最高;根部可溶性蛋白质含量在成熟期最高;叶片中可溶性蛋白质含量在抽丝期最高。叶片中游离氨基酸含量与可溶性蛋白质含量随着生育期的变化均呈现低-高-低的趋势,抽丝期达到最高值;种子中游离氨基酸的含量与可溶性蛋白质含量呈显著正相关性。转胚乳特异性启动子玉米种子中游离氨基酸含量、脯氨酸含量、赖氨酸含量均显著高于转组成型启动子玉米种子。AAP1可以提高植物对游离氨基酸的吸收与转运,进而提高植物对氮素的利用效率。 展开更多
关键词 玉米 氨基酸通透酶1(aap1) 游离氨基酸 脯氨酸 赖氨酸 可溶性蛋白质
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血清丙氨酸氨基肽酶(AAP)测定在诊断肝胆疾病中的应用 被引量:2
8
作者 涂向东 陈敏 +1 位作者 朱忠勇 胡望平 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2002年第6期344-345,共2页
为观察血清丙氨酸氨基肽酶 (AAP)水平对肝胆疾病的临床诊断价值。用自动分析仪速率法测定 2 2 9名肝胆疾病患者和 70名健康人血清AAP活力。结果显示肝癌、各类肝炎、胆道阻塞病人血清AAP活力明显高于健康对照组 (P <0 0 1) ,且与γ ... 为观察血清丙氨酸氨基肽酶 (AAP)水平对肝胆疾病的临床诊断价值。用自动分析仪速率法测定 2 2 9名肝胆疾病患者和 70名健康人血清AAP活力。结果显示肝癌、各类肝炎、胆道阻塞病人血清AAP活力明显高于健康对照组 (P <0 0 1) ,且与γ -谷氨酰转肽酶 (γ -GT)、碱性磷酸酶 (ALP)活力呈正相关 ;与血清总胆红素 (T -Bil)、丙氨酸转氨酶 (ALT)不存在明显相关性。结论 :在肝胆疾病诊断中 。 展开更多
关键词 诊断 丙氨酸氨基肽酶 肝胆疾病 aap
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过二硫酸铵氧化4-AAP光度法测定环境水质中挥发酚 被引量:4
9
作者 黄玉明 刘希东 《西南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第4期399-402,共4页
讨论了用过二硫酸铵作氧化剂,4-个氨基安替比林作显色剂的分光光度法测定废水中挥发酚的方法.该法所生成的有色络合物在水溶液中可稳定3h.该法最低检测浓度为9μg/L,测定上限为1800μg/L对环境水样的测定结果与推荐... 讨论了用过二硫酸铵作氧化剂,4-个氨基安替比林作显色剂的分光光度法测定废水中挥发酚的方法.该法所生成的有色络合物在水溶液中可稳定3h.该法最低检测浓度为9μg/L,测定上限为1800μg/L对环境水样的测定结果与推荐的标准方法测定结果相吻合. 展开更多
关键词 挥发酚 水质分析 光度法 过二硫酸铵 aap
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尿AAP测定在紫癜性肾炎中的初步观察 被引量:3
10
作者 侯巍 杨述红 +2 位作者 刘晓梅 杨静 邵丽敏 《吉林医学》 CAS 2000年第1期19-20,共2页
为探讨尿 AAP测定在紫癜性肾炎中的临床意义 ,本文应用速率法和放射免疫法测定 32例紫癜性肾炎患儿尿AAP和 m Alb。经观察尿 AAP与 m Alb呈正相关 (γ=0 .712 ) ,2 0例对照组尿 AAP活性为 8.84± 2 .6 1u/ g.Cr,患儿组尿 AAP活性为 ... 为探讨尿 AAP测定在紫癜性肾炎中的临床意义 ,本文应用速率法和放射免疫法测定 32例紫癜性肾炎患儿尿AAP和 m Alb。经观察尿 AAP与 m Alb呈正相关 (γ=0 .712 ) ,2 0例对照组尿 AAP活性为 8.84± 2 .6 1u/ g.Cr,患儿组尿 AAP活性为 16 .6± 5 .94u/ g.Cr,两者有非常显著性差异 (P<0 .0 0 1)。 14例患儿治疗前与缓解后尿 AAP分别为 19.40± 5 .6 8,11.0 8±4.72 u/ g.Cr,差异非常显著 (P<0 .0 0 1)。4例尿检阴性紫癜性肾炎患儿与对照组相比有显著性差异 (P<0 .0 5 )。资料显示 :尿 AAP活性可较特异的反应肾脏早期损伤情况 。 展开更多
关键词 aap 紫癜性肾炎 尿酶 尿微量白蛋白
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贵州产黄珠子草总黄酮毒性及抗CCl_4、AAP中毒小鼠肝损伤实验 被引量:3
11
作者 谢珊 贾宪生 《贵州医药》 CAS 2005年第1期74-75,共2页
黄珠子草为大戟科叶下珠属(Phyllanthus)植物,贵州产叶下珠属植物黄珠子草(Phyllanthus Virgatus Forst.f.)广泛分布于兴义、兴仁、织金、贞丰等地[1].我们采用贵州产黄珠子草已进行其总黄酮的提取分离方法与含量测定[2],但资料查新未... 黄珠子草为大戟科叶下珠属(Phyllanthus)植物,贵州产叶下珠属植物黄珠子草(Phyllanthus Virgatus Forst.f.)广泛分布于兴义、兴仁、织金、贞丰等地[1].我们采用贵州产黄珠子草已进行其总黄酮的提取分离方法与含量测定[2],但资料查新未见有关贵州产黄珠子草总黄酮毒性与抗肝损伤等方面的研究报道.为此我们特进行了贵州产黄珠子草总黄酮毒性及抗CCl4、AAP中毒小鼠肝损伤实验,现将其研究结果报告如下. 展开更多
关键词 黄珠子草 总黄酮 aap 抗C 鼠肝 肝损伤 小鼠 查新 实验 贵州
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槟榔AcAAP3基因cDNA克隆及其组织表达特性分析 被引量:1
12
作者 李佳 曹先梅 +1 位作者 谢赛 刘立云 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期215-221,共7页
【目的】克隆槟榔氨基酸通透酶(AAP3)基因(AcAAP3),分析其生物学信息,并检测其组织表达特性,为探究AAP3在氨基酸转运及氮素利用机制提供理论依据。【方法】利用反转录PCR(RT-PCR)从槟榔品种热研1号中扩增AcAAP3基因cDNA序列,利用生物信... 【目的】克隆槟榔氨基酸通透酶(AAP3)基因(AcAAP3),分析其生物学信息,并检测其组织表达特性,为探究AAP3在氨基酸转运及氮素利用机制提供理论依据。【方法】利用反转录PCR(RT-PCR)从槟榔品种热研1号中扩增AcAAP3基因cDNA序列,利用生物信息学方法对其编码蛋白的理化性质、亲疏水性、亚细胞定位、功能域及二、三级结构等进行预测分析,并利用实时荧光定量PCR检测AcAAP3基因在槟榔根、叶、茎、雄花和雌花中的表达特异性。【结果】克隆获得AcAAP3基因cDNA序列全长为1440 bp,编码479个氨基酸,蛋白理论分子量为52.834 kD,等电点(pI)为8.76,具有9个跨膜结构域,定位在细胞质膜上,为疏水性非分泌蛋白,具有1个保守的PF01490结构域(氨基酸转运结构域Aa_trans),属于氨基酸转运蛋白家族和APC超家族成员,其二级结构主要由α螺旋(45.72%)和不规则卷曲(34.66%)构成。AcAAP3蛋白氨基酸序列与椰枣(XP008799058.1)、油棕(XP010912574.1)、香蕉(XP009404321.1)和菠萝(XP020107563.1)AAPs蛋白的氨基酸序列相似性分别为91%、90%、84%和83%,说明不同植物的AAPs蛋白具有高度保守性。植物AAPs蛋白家族可分成两个亚类,即单子叶亚类和双子叶亚类,其中,AcAAP3蛋白与单子叶亚类的椰枣(XP008799058.1)和油棕(XP010912574.1)AAPs的亲缘关系较近。AcAAP3基因在槟榔各组织均有表达,表达量依次为根>叶>茎>雄花>雌花。【结论】AcAAP3基因具有明显的组织特异性,其编码蛋白可能在槟榔从外界吸收氨基酸及其体内氨基酸转运中发挥重要作用。 展开更多
关键词 槟榔 氨基酸通透酶(aap3) 基因克隆 生物信息学 组织表达
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树枝状胺基聚合物(AAP)的界面性质研究 被引量:1
13
作者 张艳娜 孙金声 +1 位作者 蒋欢 杨泽星 《油田化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期331-334,共4页
以10%孤岛原油模拟油为油相,蒸馏水为水相,研究了树枝状胺基聚合物(AAP)支化代和浓度对油水界面张力和界面剪切黏度的影响。结果表明,AAP可降低水的表面张力和油水界面张力。随着AAP浓度的增加,水溶液表面张力降低。半代AAP水溶液的表... 以10%孤岛原油模拟油为油相,蒸馏水为水相,研究了树枝状胺基聚合物(AAP)支化代和浓度对油水界面张力和界面剪切黏度的影响。结果表明,AAP可降低水的表面张力和油水界面张力。随着AAP浓度的增加,水溶液表面张力降低。半代AAP水溶液的表面张力随支化代的增加而降低。在整代AAP浓度低于50 mg/L时,随着支化代的增加,水的表面张力降低;当浓度大于50 mg/L时,由于空间位阻效应,3.0G AAP水溶液的表面张力高于2.0G AAP水溶液。随着AAP支化代、浓度的增加,油水界面张力降低。AAP使油水界面剪切黏度大幅降低。在剪切速率为0.3 rad/s时,界面剪切黏度降至最低,约0.015 mN.s/m(空白值为0.017 mN.s/m)。AAP浓度的增加有利于界面剪切黏度的降低。 展开更多
关键词 树枝状胺基聚合物aap 支化度 浓度 表面张力 界面张力 界面剪切黏度
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AAP延衰胶囊的药效学研究 被引量:1
14
作者 李颖 舒若 《中国老年保健医学》 2015年第6期34-36,共3页
目的观察AAP对家蚕生长发育和生命周期的影响。方法将同种同龄且生长发育相似的三眠蚕200只随机均分为4组。两个组分别喂饲1%和2%的AAP溶液;另两个组,一个喂饲1%的参茸丸溶液作药物对照,另外一组喂饲同容积的蒸馏水作空白对照。药和水... 目的观察AAP对家蚕生长发育和生命周期的影响。方法将同种同龄且生长发育相似的三眠蚕200只随机均分为4组。两个组分别喂饲1%和2%的AAP溶液;另两个组,一个喂饲1%的参茸丸溶液作药物对照,另外一组喂饲同容积的蒸馏水作空白对照。药和水均涂在桑叶上。给药前及给药后每隔4天分别称体重和量身长1次。记录幼蚕龄期(孵出至结茧)、蛹期(结茧后第三天至蛹羽化)以及蚕蛾寿期(蛹羽化至死亡时间)。最后计算各组的全生育期。结果AAP对家蚕的体重和身长无明显影响,但能显著延长家蚕各龄期的时间(P<0.01),其中以延长蚕蛾寿期最显著。此外,研究还发现AAP同时具有显著提高红细胞超氧化物歧化酶的活性和降低血浆脂质的过氧化作用以及显著提高实验动物的非特异性(巨噬细胞的吞噬)和特异性(体液和细胞免疫)的免疫功能。参茸丸也具有上述相似的药效。结论 AAP能明显延长家蚕各阶段的生命周期、提高实验动物体内的抗氧化能力以及增强机体的免疫力。 展开更多
关键词 aap 延缓衰老 抗氧化 免疫
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aap交锁髓内钉在胫骨骨折治疗中的应用
15
作者 章良忠 吴恙 +1 位作者 童鑫 张春 《浙江创伤外科》 2003年第4期223-224,共2页
关键词 aap交锁髓内钉 胫骨骨折 治疗 应用 术后处理
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表皮葡萄球菌8-32-B株aap基因domain B的原核表达
16
作者 李英 陈伟 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1723-1729,共7页
为获得表皮葡萄球菌aap基因domain B片段的原核表达产物,采用PCR方法扩增引起新疆南疆地区奶牛乳房炎的表皮葡萄球菌株aap基因domain B片段,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-32a(+)-aap,将重组质粒转化至宿主菌E.coli... 为获得表皮葡萄球菌aap基因domain B片段的原核表达产物,采用PCR方法扩增引起新疆南疆地区奶牛乳房炎的表皮葡萄球菌株aap基因domain B片段,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组质粒pET-32a(+)-aap,将重组质粒转化至宿主菌E.coli BL21中诱导表达。结果表明,克隆得到aap基因domain B片段为2 316bp,Aap蛋白分子质量184.5ku。在宿主菌E.coli BL21中表达的最佳诱导时间为4h,IPTG最佳诱导浓度为0.75mmol/L;纯化时洗杂缓冲液中咪唑浓度为40mmol/L,洗脱缓冲液中咪唑浓度为200mmol/L时可以获得单一Aap蛋白。 展开更多
关键词 表皮葡萄球菌 aap 原核表达
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测定挥发酚时提纯4-AAP的方法及应注意的问题
17
作者 张苒 余萍 《福建环境》 2002年第3期42-44,共3页
针对 4- AAP易潮解氧化不易保存 ,优质的 4- AAP不易购买等情况 ,用氯仿提纯 4- AAP可以有效降低空白值 ,满足方法的灵敏度 ,且快捷、方便 ,同时提出在提纯 4- AAP时 。
关键词 挥发酚 提纯 4-aap 注意事项 水质监测
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橄榄果实氨基酸转运蛋白基因CaAAP1、CaAAP2和CaAAP4的克隆与表达分析 被引量:1
18
作者 邱娜娜 谢倩 +4 位作者 叶清华 王威 樊玥 罗培润 陈清西 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第8期2517-2526,共10页
氨基酸通透酶(amino acid permease, AAP)参与植物氨基酸的转运、吸收、氮代谢等途径。为了解橄榄果实AAP基因在不同品种果实成熟发育过程的表达模式,本研究以呈味差异显著的两个品种普通橄榄‘长营’和清橄榄‘梅埔2号’为试验材料,通... 氨基酸通透酶(amino acid permease, AAP)参与植物氨基酸的转运、吸收、氮代谢等途径。为了解橄榄果实AAP基因在不同品种果实成熟发育过程的表达模式,本研究以呈味差异显著的两个品种普通橄榄‘长营’和清橄榄‘梅埔2号’为试验材料,通过RT-PCR方法克隆了3个APP基因的cDNA序列全长,并对其进行了生物学信息分析与亚细胞定位分析,同时利用实时荧光定量PCR技术分析了两个不同品种果实在不同发育时期的CaAAPs表达情况。结果表明:3个基因的序列长度分别为1 254 bp (CaAAP1)、405 bp (CaAAP2)、633 bp (CaAAP4),其编码的蛋白均为不稳定疏水性蛋白,分别含有7、1、5个跨膜区,保守基序差异较大;亚细胞定位结果表明,CaAAP1、CaAAP2主要在细胞质膜上表达。荧光定量结果表明随着果实的发育,CaAAP1、CaAAP2和CaAAP4在‘长营’果实的表达量均呈显著上升趋势,在‘梅埔2号’的表达量变化趋势较平缓,且在170 d时显著下降,两个品种CaAAPs家族基因表达量差异大,表明CaAAP1、CaAAP2、CaAAP4基因可能对橄榄果实游离氨基酸转运和吸收起着重要作用。该研究结果为进一步研究CaAAPs在橄榄果实氨基酸合成代谢中的功能提供理论依据。 展开更多
关键词 橄榄 aaps 克隆 亚细胞定位 表达分析
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水稻氨基酸透性酶基因OsAAP14启动子克隆及时空表达特性分析 被引量:2
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作者 李泓雨 张林 +5 位作者 聂圣松 杨过 杭俊楠 黄玮婷 方中明 查仁明 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2857-2867,共11页
【目的】克隆水稻氨基酸透性酶基因OsAAP14的启动子序列并分析其时空表达特性,为解析氨基酸转运基因生物学功能及了解水稻对有机氮源的响应和氨基酸吸收利用提供理论依据。【方法】PCR扩增OsAAP14基因的启动子序列,并与p CAMBIA1391Z空... 【目的】克隆水稻氨基酸透性酶基因OsAAP14的启动子序列并分析其时空表达特性,为解析氨基酸转运基因生物学功能及了解水稻对有机氮源的响应和氨基酸吸收利用提供理论依据。【方法】PCR扩增OsAAP14基因的启动子序列,并与p CAMBIA1391Z空载体质粒连接构建出启动子-GUS表达载体,并通过农杆菌介导侵染水稻中花11愈伤组织,获得OsAAP14基因的启动子-GUS转基因植株,通过对转基因植株不同组织部位进行GUS染色,并采用石蜡切片技术观察各组织细胞部位表达,经5种不同氨基酸处理后进行根部GUS染色,结合实时荧光定量PCR检测OsAAP14基因在GUS染色部位的相对表达量,最后综合分析该基因的时空表达特性。【结果】克隆获得OsAAP14基因启动子序列为1993 bp,与参考序列日本晴OsAAP14(LOC_Os04g56470)序列一致。该启动子序列含有MBS、P-box、ABRE、CGTCA-motif等激素或胁迫响应元件。从OsAAP14基因的启动子-GUS植株T0代中鉴定获得16个阳性转基因株系。T1代材料不同组织部位GUS染色及实时荧光定量PCR结果均显示,OsAAP14基因在水稻芽伸长的基部和叶片相对表达量较高,在根、叶鞘和穗也有一定表达,但在茎中的相对表达量最低。石蜡切片分析结果显示,OsAAP14基因在根部皮层薄壁细胞、叶片的叶肉细胞、穗的颖壳内部细胞有较高的表达。碱性氨基酸的组氨酸处理下根中的OsAAP14基因表达量随着处理时间的增加显著提高(P<0.05,下同),且赤霉素和脱落酸处理下,根中的OsAAP14基因相对表达量也显著提高。【结论】OsAAP14基因在水稻不同组织均有表达,正常情况(未处理)下在水稻基部和叶片中相对表达量较高,但外源氨基酸和激素处理时,在根中该基因被诱导表达上调,说明OsAAP14基因正常情况下可能主要参与调控水稻地上部分氨基酸的运输,但当外界氨基酸和激素含量增加时则参与调控水稻根部氨基酸的运输。 展开更多
关键词 水稻 氨基酸透性酶(aap) 氨基酸转运 启动子 基因表达
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玉米氨基酸转运蛋白ZmAAP基因的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 单冬冬 徐华祥 +3 位作者 姜云涛 秦智 刘慧婧 崔喜艳 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期598-604,共7页
克隆得到玉米中AAP基因的核酸序列,通过对其编码蛋白理化性质、跨膜区、高级结构等方面进行生物信息学分析,为进一步深入研究玉米AAP基因的功能提供理论依据。采用同源克隆技术得到含有完整编码阅读框的一段玉米未知功能基因,使用ProtPa... 克隆得到玉米中AAP基因的核酸序列,通过对其编码蛋白理化性质、跨膜区、高级结构等方面进行生物信息学分析,为进一步深入研究玉米AAP基因的功能提供理论依据。采用同源克隆技术得到含有完整编码阅读框的一段玉米未知功能基因,使用ProtParam、ProtScale、TargetP v1.01 server、SignalP4.1 server、TMHMM services v.2.0、SOPMA、Phyre2、DNAman等软件对该基因进行生物信息学分析。结果表明:克隆的玉米未知功能基因全长cDNA序列为1396 bp,包括1212 bp的开放阅读框,编码的氨基酸数403个,分子质量42.88 kD,理论等电点9.24,正、负电荷残基总数分别是18和30,在组成蛋白编码的20种氨基酸中丝氨酸所占比例最高,为13.4%,而组氨酸比例最低,为1.0%。AAP蛋白包含信号肽,剪切位点位于38、39残基处;编码区核苷酸序列与其他作物对比后发现,与大麦AAP1基因的相似性最高,相似度为87%。通过生物信息学分析初步证明从玉米中克隆的基因为AAP的核酸序列,命名为ZmAAP。 展开更多
关键词 玉米 aap基因 克隆 生物信息学
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