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补中益气汤对A549和A549/DDP细胞顺铂敏感性影响差异研究
1
作者 黄婧漪 刘玥彤 +3 位作者 李贺 牟琪瑞 于丹 高原 《辽宁中医药大学学报》 2025年第2期13-18,共6页
目的 探讨补中益气汤对A549和A549/DDP细胞的顺铂敏感性影响的差异性,并确定给药最佳剂量。方法 培养A549、A549/DDP细胞,不同浓度顺铂作用后应用CCK-8法检测各组生长抑制率;制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清,随机分为24组:A549细... 目的 探讨补中益气汤对A549和A549/DDP细胞的顺铂敏感性影响的差异性,并确定给药最佳剂量。方法 培养A549、A549/DDP细胞,不同浓度顺铂作用后应用CCK-8法检测各组生长抑制率;制备低、中、高剂量补中益气汤含药血清,随机分为24组:A549细胞(5%空白血清组、10%空白血清组、20%空白血清组、5%低剂量含药血清组、10%低剂量含药血清组、20%低剂量含药血清组、5%中剂量含药血清组、10%中剂量含药血清组、20%中剂量含药血清组、5%高剂量含药血清组、10%高剂量含药血清组、20%高剂量含药血清组),A549/DDP细胞(5%空白血清组、10%空白血清组、20%空白血清组、5%低剂量含药血清组、10%低剂量含药血清组、20%低剂量含药血清组、5%中剂量含药血清组、10%中剂量含药血清组、20%中剂量含药血清组、5%高剂量含药血清组、10%高剂量含药血清组、20%高剂量含药血清组),应用CCK-8法检测各组A549、A549/DDP细胞生长抑制情况及生长抑制率,应用Annexin V-FITC/PI染色法检测各组细胞凋亡率。结果 顺铂对A549、A549/DDP细胞的最佳抑制浓度均为20μg/mL;10%中剂量补中益气汤对A549细胞顺铂的凋亡率和生长抑制率最为显著,相比而言,20%高剂量补中益气汤对A549/DDP细胞的作用最为显著。结论 与A549细胞相比,A549/DDP细胞需要更高浓度更高剂量的补中益气汤含药血清才能发挥最佳顺铂增敏效果,说明补中益气汤对A549细胞的顺铂增敏作用强于A549/DDP细胞。 展开更多
关键词 补中益气汤 顺铂 a549细胞 a549/ddp细胞 非小细胞肺癌
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补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞P53、Bax、Bcl-2表达的影响 被引量：1
2
作者 于丹 王莹 刘春英 《解剖科学进展》 CAS 2024年第4期375-377,381,共4页
目的探讨Snail与凋亡因子P53、Bax、Bcl-2的相关性及补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞P53、Bax、Bcl-2表达的影响。方法20只SD大鼠,随机分成两组,分别给予将补中益气汤及生理盐水灌胃处理,采用血清药理学研究方法制备含药血清。细胞分... 目的探讨Snail与凋亡因子P53、Bax、Bcl-2的相关性及补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞P53、Bax、Bcl-2表达的影响。方法20只SD大鼠,随机分成两组,分别给予将补中益气汤及生理盐水灌胃处理,采用血清药理学研究方法制备含药血清。细胞分组:TGF-β_(1)(-)组、TGF-β_(1)(+)组(5ng/mL TGF-β_(1),作用48h)、TCM组(10%最佳含药血清组)、Snail-si组(Snail干扰组)。Western blot与Real time PCR方法分别检测各组细胞P53、Bax、Bcl-2基因及蛋白表达水平。结果与TGF-β_(1)(-)组比较,TGF-β_(1)(+)组P53、Bax蛋白及mRNA下调,Bcl-2 mRNA及蛋白表达上调。TCM组与TGF-β_(1)(+)组比较,P53、Bax蛋白及mRNA表达量增加,Bcl-2蛋白及mRNA表达量减少(P<0.05)。结论A549/DDP细胞Snail与凋亡因子P53、Bax、Bcl-2具有一定的相关性,表明补中益气汤含药血清可通过调节A549/DDP细胞Snail表达水平,干预凋亡相关因子的表达。 展开更多
关键词 补中益气汤 a549/ddp SNAIL 凋亡因子
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肺复方通过PI3K/Akt/Nrf2信号通路对A549/DDP细胞耐药性的影响
3
作者 谭小宁 梁子成 +1 位作者 柳卓 邱云 《中国中医急症》 2024年第6期963-967,共5页
目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化... 目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化,Western blotting和RT-PCR检测PI3K/Akt/Nrf2信号通路及下游血红素氧合酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达变化。结果与空白对照组、顺铂组相比,联合组引起细胞G1期阻滞,增加细胞内活性氧的累积,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与空白对照组比,肺复方组和联合组能减少Nrf2核转位,下调p-Akt、HO-1、NQO1、MRP1蛋白表达和mRNA表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论肺复方能够通过调控PI3K/Akt/Nrf2信号通路增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 肺癌 肺复方 a549/ddp细胞 PI3K/Akt/Nrf2信号通路 耐药性
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吴茱萸碱逆转人肺癌细胞株A549/DDP耐药机理的实验研究 被引量：24
4
作者 农丽 伍钢 +4 位作者 戴晓芳 赵迎超 任精华 朱芳 黄黎黎 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2010年第6期487-492,共6页
目的观察吴茱萸碱逆转人肺腺癌耐药株A549/DDP细胞耐药性的效果并探讨其与阻断NF-κB信号传导通路的相关性。方法采用MTT法检测单用吴茱萸碱、顺铂(DDP)以及两药联用在不同时间对A549/DDP细胞的增殖影响,计算IC50及耐药逆转倍数。流式... 目的观察吴茱萸碱逆转人肺腺癌耐药株A549/DDP细胞耐药性的效果并探讨其与阻断NF-κB信号传导通路的相关性。方法采用MTT法检测单用吴茱萸碱、顺铂(DDP)以及两药联用在不同时间对A549/DDP细胞的增殖影响,计算IC50及耐药逆转倍数。流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况。RT-PCR检测各组MDR1、NF-κB、Bcl-2、MMP-2和VEGF的mRNA表达。Westernblot法检测各组细胞的pIκB-α、pIKKα蛋白表达水平。结果吴茱萸碱0.125mg/L、0.25mg/L针对A549/DDP细胞对DDP的耐药逆转倍数分别为3.668和11.48。RT-PCR显示在吴茱萸碱作用下检测基因的mRNA表达随着吴茱萸碱浓度的增加和时间的延长其表达逐渐下降。当吴茱萸碱与DDP联用时,可明显提高A549/DDP细胞对化疗药的敏感性,凋亡细胞显著增加(P<0.05)。Westernblot法结果提示A549/DDP细胞中pIκB-α的表达水平随着吴茱萸碱作用时间的延长逐渐下降,pIKKα表达则无显著变化。结论吴茱萸碱可以通过抑制IκB-α的磷酸化阻断NF-κB信号通路,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加耐药细胞对DDP的敏感性。 展开更多
关键词 肺癌 多药耐药 NF-ΚB a549/ddp细胞株 吴茱萸碱 机制
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人参单体Rh_2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的体外研究 被引量：16
5
作者 周东波 胡成平 +1 位作者 苏晓丽 杨红忠 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第4期257-260,共4页
背景与目的肺癌已成为人类癌症主要死亡原因之一。从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞系凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养的人肺腺癌A54... 背景与目的肺癌已成为人类癌症主要死亡原因之一。从植物中开发抗肿瘤药物是国内外抗肿瘤新药开发的一个热点。本研究的目的是观察人参单体Rh2诱导人肺腺癌A549/DDP细胞系凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养的人肺腺癌A549/DDP细胞经不同浓度梯度的人参单体Rh2干预,分别应用MTT实验观察其对细胞增殖的影响,用流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数及相关基因表达的改变,以及用双抗体夹心ELISA法测定细胞上清液sApo-1/Fas浓度变化。结果①人参单体Rh2可抑制A549/DDP细胞的生长,并呈剂量、时间依赖作用。②人参单体Rh2处理A549/DDP细胞24h,实验组凋亡指数显著高于对照组(P<0.001),G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P<0.01),S期细胞比例显著低于对照组(P<0.01),G2/M期细胞比例与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。③实验组p53、Fas阳性表达率显著高于对照组(P<0.01,P<0.001),Bcl-2阳性表达率显著低于对照组(P<0.001)。④实验组A549/DDP细胞培养上清液于不同时间sApo-1/Fas含量均显著低于对照组(P<0.05)。结论人参单体Rh2具有诱导人肺腺癌A549/DDP细胞凋亡的作用,其分子机制可能是上调p53和Fas及下调Bcl-2的表达、通过Fas/FasL系统途径诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参单体Rh2 肺肿瘤 a549/ddp细胞株 凋亡
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补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP耐顺铂作用及对Survivin表达的影响 被引量：11
6
作者 易佳丽 王莹 +2 位作者 井欢 史妍婷 刘春英 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1250-1255,共6页
目的研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP耐顺铂作用及对Survivin表达的影响。方法采用随机对照法将24只SD大鼠分为高、中、低剂量组和空白对照组,制备补中益气汤高剂量(补中益气汤1.134 g/mL,2 mL)、中剂量(补中益气... 目的研究补中益气汤含药血清逆转人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP耐顺铂作用及对Survivin表达的影响。方法采用随机对照法将24只SD大鼠分为高、中、低剂量组和空白对照组,制备补中益气汤高剂量(补中益气汤1.134 g/mL,2 mL)、中剂量(补中益气汤0.576 g/mL,2 mL)、低剂量(补中益气汤0.284 g/mL,2 mL)含药血清,采用MTT法检测不同剂量和浓度的补中益气汤含药血清对A549及A549/DDP细胞的增殖抑制效应,计算耐药逆转倍数;采用免疫细胞化学法、Western blot技术、免疫荧光三种方法检测Survivin在两细胞株中的表达。结果补中益气汤含药血清对A549和A549/DDP细胞有明显抑制作用,10%各剂量组抑制率均高于5%相应剂量组,且随着剂量浓度的升高,抑制率也逐渐升高;与10%空白组比较,10%中、低剂量组抑制率升高(P<0.05);10%中剂量含药血清作用后,A549和A549/DDP IC50均降低(P<0.05),逆转倍数均升高,对A549/DDP细胞的逆转倍数达到2.46,使A549/DDP对顺铂的耐药性下降;与本组A549比较,免疫细胞化学法、Western blot法、免疫荧光法均检测到A549/DDP细胞中Survivin的表达量均降低(P<0.05),与10%空白组比较,10%中剂量组A549/DDP均降低(P<0.05)。结论 10%中剂量补中益气汤含药血清对A549及A549/DDP细胞都有抑制作用,并可逆转A549/DDP细胞的顺铂耐药,其逆转机制可能与减少细胞内Survivin的表达,增强A549/DDP对化疗药物的敏感性有关。 展开更多
关键词 a549/ddp细胞株 SURVIVIN蛋白 补中益气汤 顺铂耐药
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补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,mTOR表达的影响 被引量：13
7
作者 刘亚莉 易佳丽 刘春英 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期725-730,共6页
探讨补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR表达的影响。BALB/C裸鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组、顺铂组和补中益气汤高剂量+顺铂组(高联组)、补中益气汤中剂量+顺铂组(中联组)、补中益气汤低剂... 探讨补中益气汤对A549/DDP移植瘤裸鼠中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR表达的影响。BALB/C裸鼠60只随机分为空白对照组、荷瘤对照组、顺铂组和补中益气汤高剂量+顺铂组(高联组)、补中益气汤中剂量+顺铂组(中联组)、补中益气汤低剂量+顺铂组(低联组),培养A549/DDP细胞(浓度为5×106个/m L),接种于各组,观察各组成瘤情况。给予相应治疗,14 d后取瘤组织固定、切片,免疫组织化学方法、Real-time PCR方法检测各组裸鼠移植瘤中Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR蛋白和mRNA的表达水平。结果显示补中益气汤联合顺铂可降低移植瘤体积,中联组和高联组的抑瘤率与顺铂组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与荷瘤对照组比较,中联组和高联组Bad,NF-κB,Survivin,m TOR的蛋白和mRNA的表达明显减少(P<0.05),caspase-9的蛋白和mRNA在中联组和高联组的表达逐渐增多,与荷瘤对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Bad,NF-κB,caspase-9的mRNA,中联组和高联组与顺铂组、低联组、荷瘤对照组比较有统计学意义(P<0.05),低联组、顺铂组、荷瘤对照组两两比较,无统计学差异,各因子蛋白和mRNA的表达中联组和高联组比较,无统计学意义。结果表明补中益气汤与顺铂联合作用可抑制A549/DDP移植瘤的生长,补中益气汤抑制A549/DDP移植瘤的作用可能是通过调节Bad,NF-κB,caspase-9,Survivin,m TOR,促进细胞凋亡实现的。 展开更多
关键词 补中益气汤 a549/ddp 裸鼠 BAD NF-κB CASPASE-9 SURVIVIN m TOR
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消岩汤药物血清对A549/DDP多药耐药逆转作用的研究 被引量：17
8
作者 张莹 贾英杰 +1 位作者 杨洁 李小江 《天津中医药》 CAS 2010年第4期334-336,共3页
[目的]探讨消岩汤药物血清对接种S180昆明小鼠肿瘤的抑制作用,及对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/耐顺铂(DDP)的耐药逆转作用。[方法]通过建立小鼠肿瘤模型,观察消岩汤对小鼠S180移植肿瘤生长的影响;以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/... [目的]探讨消岩汤药物血清对接种S180昆明小鼠肿瘤的抑制作用,及对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/耐顺铂(DDP)的耐药逆转作用。[方法]通过建立小鼠肿瘤模型,观察消岩汤对小鼠S180移植肿瘤生长的影响;以人肺腺癌敏感细胞A549和耐药细胞A549/DDP为研究对象,采用细胞毒实验(MTT)方法,探讨消岩汤对肺癌耐药细胞的多药耐药逆转作用。[结果]消岩汤高、低剂量组的抑瘤率分别是48.36%和27.87%;消岩汤荷瘤动物含药血清高、低剂量组分别与DDP合用时,对耐药细胞A549/DDP的杀伤作用分别是DDP组的1.78倍和1.57倍。[结论]消岩汤可改善小鼠生活质量,拮抗恶病质,并能够抑制肿瘤生长;消岩汤含药血清对A549及A549/DDP均有生长抑制作用,且能增强DDP对肺癌敏感细胞和耐药细胞的杀伤作用,具有耐药逆转作用。 展开更多
关键词 中药 血清药理学 肺癌 a549/ddp 耐药性
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基因工程腺病毒H101逆转A549/DDP细胞对顺铂耐药性的实验研究 被引量：9
9
作者 徐瑞华 袁中玉 +1 位作者 管忠震 李苏 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期975-979,共5页
背景及目的:耐药性产生是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一种理想的、可应用于临床的顺铂(DDP)耐药逆转剂。本研究探讨基因工程腺病毒H101对DDP耐药性的逆转作用及其机制。方法:体外利用人肺腺癌... 背景及目的:耐药性产生是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一种理想的、可应用于临床的顺铂(DDP)耐药逆转剂。本研究探讨基因工程腺病毒H101对DDP耐药性的逆转作用及其机制。方法:体外利用人肺腺癌细胞株A549的DDP耐药模型A549/DDP,采用MTT法检测H101对A549/DDP细胞耐药性的逆转作用。用流式细胞仪(FCM)测定细胞多药耐药蛋白1(multidrugresistantprotein1,MRP1)、谷胱甘肽鄄S鄄转移酶(GST)及TOPO鄄Ⅱ蛋白表达量,荧光鄄考马斯亮蓝法检测细胞内GSH含量,原子吸收法测定细胞内铂浓度。结果:A549/DDP细胞对DDP的耐药指数为14.3。加入H101后,DDP对A549/DDP的半数抑制浓度(IC50)由352.4μmol/L降至61.6μmol/L,逆转倍数为5.7倍。FCM检测结果显示,A549/DDP细胞的GST和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均较A549细胞高,而两种细胞内均未检测到MRP1的表达,经H101处理后的A549/DDP细胞胞内GST蛋白和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均明显下降。A549/DDP胞内GSH含量比A549高2倍多;H101感染A549/DDP细胞后,胞内的GSH含量下降,随着H101剂量的增加,胞内GSH含量逐渐下降,达A549细胞内GSH水平。原子吸收法测定细胞内铂含量的结果显示,A549细胞内铂含量是A549/DDP细胞内铂含量的3倍,加入H101后,A549细胞内铂的含量无明显变化,但A549/DDP细胞内铂的含量明显增加。结论:H101能逆转A549/DDP对DDP的耐药性,H101逆转DDP耐药性的机制可能是减少A549/DDP细胞内GSH和TOPOⅡ蛋白的水平,增加了A549/DDP细胞内铂的蓄积。 展开更多
关键词 基因工程腺病毒/治疗应用 基因转染 肺肿瘤 a549/ddp细胞株 顺铂/药理学 耐药
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白花蛇舌草乙醇提取物对肺腺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及其机制 被引量：20
10
作者 高宝安 陈世雄 +2 位作者 邓红艳 杨俊 黄骥 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2714-2715,共2页
目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物在体外对肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用及对多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法MTT法测定白花蛇舌草乙醇提取物对A549/DDP细胞耐药的逆转作用;半定量RT-PCR和Western Blot分别检测肿瘤细胞MRP m... 目的探讨白花蛇舌草乙醇提取物在体外对肺腺癌A549/DDP细胞株的耐药逆转作用及对多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法MTT法测定白花蛇舌草乙醇提取物对A549/DDP细胞耐药的逆转作用;半定量RT-PCR和Western Blot分别检测肿瘤细胞MRP mRNA和蛋白的表达。结果白花蛇舌草乙醇提取物使A549/DDP细胞对DDP的耐药倍数由10.294下降至5.586;并显著降低A549/DDP MRP mRNA和蛋白的表达。结论白花蛇舌草乙醇提取物可以部分逆转肺腺癌A549/DDP细胞对DDP的耐药;其逆转作用可能通过降低细胞MRP的表达来实现。 展开更多
关键词 白花蛇舌草乙醇提取物 人肺腺癌a549/ddp细胞 多药耐药相关蛋白
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鸦胆子油乳联合siRNA-ERCC1对肺腺癌A549/DDP细胞的耐药逆转作用 被引量：16
11
作者 丁雨钦 曲杰 +1 位作者 张晶晶 吕喜英 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2012年第20期235-239,共5页
目的:探讨靶向切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的小干扰RNA片段(small interfering RNA,siRNA)和鸦胆子油乳联合应用逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的效果。方法:设计并合成针对ERCC1基因对应序列的siRNA,采用转染试剂Lipofectamine 2000... 目的:探讨靶向切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的小干扰RNA片段(small interfering RNA,siRNA)和鸦胆子油乳联合应用逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的效果。方法:设计并合成针对ERCC1基因对应序列的siRNA,采用转染试剂Lipofectamine 2000转染人肺腺癌耐药细胞A549/DDP;将实验组细胞分为:空白对照组、鸦胆子油处理组、siRNA处理组及鸦胆子油联合siRNA处理组,利用RT-PCR检测ERCC1 mRNA和Western blot检测ERCC1蛋白质的表达;MTT法检测A549/DDP细胞对顺铂的耐药逆转效果。结果:siRNA、鸦胆子油、鸦胆子油和siRNA联合应用均能降低ERCC1 mRNA和蛋白质的表达,对顺铂的敏感性明显恢复,耐药倍数分别降至9.72,8.89,7.59,6.83,鸦胆子油和siRNA联合应用效果明显提高(P<0.05)。结论:siRNA、鸦胆子油能有效地逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的多药耐药,鸦胆子油和siRNA联合应用效果明显加强。 展开更多
关键词 鸦胆子油乳 a549/ddp细胞 ERCC1 耐药逆转
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姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖活性的影响 被引量：8
12
作者 陈旭昕 张艰 +4 位作者 赵峰 宋立强 李艳 王洋 李焕章 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第24期2287-2290,共4页
目的:探讨姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖活性的影响.方法:采用细胞计数法绘制亲代A549和A549/DDP细胞生长曲线,MTT法测定A549/DDP对顺铂的耐药指数以及姜黄素对A549/DDP细胞抑制率.将不同浓度姜黄素作用于A549/DDP细胞24h后,Hoechst... 目的:探讨姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖活性的影响.方法:采用细胞计数法绘制亲代A549和A549/DDP细胞生长曲线,MTT法测定A549/DDP对顺铂的耐药指数以及姜黄素对A549/DDP细胞抑制率.将不同浓度姜黄素作用于A549/DDP细胞24h后,Hoechst33258染色荧光显微镜下观察细胞核形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率.以20μmol/L的姜黄素作用细胞24h后,流式细胞仪分析细胞周期.结果:亲代A549细胞和A549/DDP细胞的生长曲线相似,倍增时间分别为(33.24±0.24)h和(32.88±0.11)h(P>0.05);顺铂处理A549和A549/DDP细胞72h后,半数抑制浓度(IC50)分别为13.57μmol/L和146.79μmol/L,A549/DDP细胞对顺铂的耐药指数为10.82.姜黄素对A549/DDP细胞增殖有抑制作用,并且呈时间浓度依赖性(P<0.05).姜黄素作用后,Hoechst染色显示A549/DDP细胞核缩小变形,致密浓染荧光成团块分布.流式细胞仪分析结果示细胞凋亡率呈明显剂量依赖关系(P<0.05).20μmol/L的姜黄素作用细胞24h,引发G2期阻滞.结论:姜黄素对人肺腺癌A549/DDP细胞增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖.其作用可能是通过阻滞细胞周期进程和诱导细胞凋亡来实现的. 展开更多
关键词 姜黄素 肺肿瘤 a549/ddp细胞 细胞凋亡 细胞周期
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橙皮苷诱导人非小细胞肺癌A549/DDP细胞凋亡的实验研究 被引量：11
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作者 陆红玲 丁学兵 +2 位作者 刘达兴 宋永祥 徐刚 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1925-1926,共2页
目的观察橙皮苷对人非小细胞肺癌A549/DDP细胞凋亡的影响。方法培养耐顺铂的人非小细胞肺癌A549/DDP细胞,分别用6,12,24,48和96 mg/L橙皮苷作用A549/DDP细胞24 h,在荧光显微镜下观察细胞形态变化,采用流式细胞计量仪检测细胞凋亡情况。... 目的观察橙皮苷对人非小细胞肺癌A549/DDP细胞凋亡的影响。方法培养耐顺铂的人非小细胞肺癌A549/DDP细胞,分别用6,12,24,48和96 mg/L橙皮苷作用A549/DDP细胞24 h,在荧光显微镜下观察细胞形态变化,采用流式细胞计量仪检测细胞凋亡情况。结果经不同浓度的橙皮苷作用A549/DDP细胞24h后,镜下见A549/DDP细胞核缩小变形,致密浓染,荧光成团块分布;流式细胞计量仪检测结果显示,6mg/L橙皮苷即可促使A549/DDP细胞出现早期凋亡,且凋亡率随橙皮苷剂量增大而逐渐增加,呈现出明显的剂量依赖关系(P<0.05)。结论橙皮苷可以诱导A549/DDP细胞凋亡。 展开更多
关键词 橙皮苷 人非小细胞肺癌a549/ddp细胞 凋亡
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桔梗皂苷-D诱导肺腺癌A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞 被引量：7
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作者 赵若琳 周坤福 +1 位作者 张旭 陈美娟 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期1484-1489,I0007,共7页
目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(A549)和A549顺铂耐药细胞(A549/DDP)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;... 目的:探究桔梗皂苷-D(Platycodin-D,PD)诱导肺腺癌细胞(A549)和A549顺铂耐药细胞(A549/DDP)凋亡和周期抑制的作用机制,为PD治疗非小细胞肺癌和产生顺铂耐药的非小细胞肺癌提供实验基础。方法:采用MTT法检测细胞的增殖抑制率和耐药指数;流式细胞术检测细胞周期阻滞和凋亡作用;Hoechst-33258荧光染色观察细胞核形态的变化;Western-blot蛋白印迹法分析凋亡通路和细胞周期相关蛋白表达水平的变化。结果:MTT检测结果显示,PD对A549和A549/DDP细胞的增殖抑制呈浓度和时间依赖性。Hoechst 33258荧光染色发现,随着PD浓度增加,两种细胞核形态都有明显的改变。进一步流式细胞术结果表明,PD诱导A549和A549/DDP细胞凋亡和周期阻滞。Westernblot检测结果表明,PD通过上调Bax、Caspase-9、cleaved-Caspase-3和PARP的表达,下调Bcl-2和Caspase-3的表达诱导A549和A549/DDP细胞凋亡。此外,PD通过下调Cyclin-D1、Cyclin-D3、CDK4、CDK6、E2F1和p-Rb及上调P18的蛋白水平诱导A549细胞周期G0/G1阻滞。同时,PD通过下调Cyclin-B1、p-Cdc2、E2F1和p-Rb及上调P27的蛋白表达诱导A549/DDP细胞周期G2/M阻滞。结论:PD通过线粒体途径诱导A549和A549/DDP细胞凋亡诱导,并且引发A549细胞G0/G1周期阻滞和A549/DDP细胞G2/M阻滞周期阻滞。 展开更多
关键词 桔梗皂苷-D(PD) 非小细胞肺癌 凋亡 周期阻滞 a549 a549/ddp
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在顺铂耐药的A549/DDP人肺腺癌细胞中乙醛脱氢酶表达增加 被引量：8
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作者 何进喜 宋旭梅 +5 位作者 于亮 李靖 乔志雄 氿睿 余博 刘晓明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期625-629,共5页
目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在A549... 目的观察乙醛脱氢酶(ALDH)在A549/DDP人肺腺癌耐顺铂细胞中的表达及在顺铂耐药性中的功能。方法流式细胞术检测肿瘤干细胞标志分子CD44、CD90、CD73、CD105、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、ATP结合盒式超家族G成员2(ABCG2)以及ALDH在A549细胞和A549/DDP细胞表达的阳性率;MTT法检测100μmol/L二乙氨基苯甲醛(DEAB)处理前后A549/DDP细胞的增殖能力和对顺铂的敏感性;实时定量PCR检测ALDH各亚型在A549细胞与A549/DDP细胞中的mRNA水平的表达;Western blot法检测实时定量PCR有明显差异结果的ALDH的亚型ALDH1A3和ALDH1B1在A549细胞与A549/DDP细胞中的蛋白水平的表达。结果与A549细胞相比,ABCG2和ALDH在A549/DDP细胞的阳性率增加,ALDH阳性率达97.7%,在A549细胞中仅仅为4.3%;CD44、CD90、CD73、CD105在二者间阳性率无明显差异,而Ep CAM在A549/DDP细胞阳性率降低;经100μmol/L DEAB处理后,A549/DDP细胞对顺铂的耐药性显著低于未处理前;与A549细胞相比,ALDH1A3和ALDH1B1的mRNA在A549/DDP细胞中表达水平增高;ALDH1B1蛋白表达升高,ALDH1A3表达降低。结论 ALDH可作为顺铂耐药人肺腺癌细胞的标志分子之一,其中ALDH1B1在顺铂耐药性中可能发挥一定作用,为临床上治疗肺腺癌耐药患者提供新的治疗靶点和策略。 展开更多
关键词 a549/ddp 顺铂耐药 乙醛脱氢酶
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金复康口服液对耐药人肺腺癌A549/DDP膜转运蛋白LRP MRPmRNA表达的影响 被引量：12
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作者 孙建立 孙玺媛 刘嘉湘 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2009年第7期210-213,共4页
目的:从逆转多药耐药的角度,研究金复康口服液对耐药人肺腺癌细胞A549/DDP的化疗增效的作用和分子机制。方法:应用血清药理学方法,选择A549、A549/DDP细胞,实验分为实验组和空白对照组,从细胞水平、分子水平进行研究。结果:金复康口服... 目的:从逆转多药耐药的角度,研究金复康口服液对耐药人肺腺癌细胞A549/DDP的化疗增效的作用和分子机制。方法:应用血清药理学方法,选择A549、A549/DDP细胞,实验分为实验组和空白对照组,从细胞水平、分子水平进行研究。结果:金复康口服液低剂量能够逆转A549/DDP对DDP的耐药,逆转耐药倍数为3.45倍,与DDP(320μmol/L)合用,使DDP(320μmol/L)对A549/DDP细胞的抑制率由47.55%升高为73.32%,且q>1.15,表明金复康口服液与DDP合用有明显的协同增效作用,增加了DDP对A549/DDP细胞的敏感度;金复康口服液低剂量能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。结论:(1)低剂量金复康口服液与DDP合用能够增加DDP对A549/DDP的增殖抑制作用,二者具有显著的协同增效作用。(2)金复康口服液能够降低A549/DDP膜转运蛋白LRP、MRP的mRNA表达。金复康口服液可能通过降低耐药肿瘤细胞膜转运蛋白的表达而逆转肿瘤多药耐药,为扶正方药对化疗增效机理提供了新的实验依据。 展开更多
关键词 金复康口服液 扶正法 耐药人肺腺癌a549/ddp 多药耐药 LRP MRP
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肺腺癌A549/DDP细胞多药耐药机制及中药逆转剂的研究进展 被引量：4
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作者 刘小菊 刘红云 +3 位作者 王海娟 张美芝 李宁 高杰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期227-230,共4页
肺癌是严重影响人类生存的恶性肿瘤之一,其死亡率已居全球恶性肿瘤之首。目前主要采取以化疗为主的综合治疗方案,其疗效并不理想,主要原因是肺癌细胞对化疗药物产生多药耐药性(multi-drug resistance,MDR)。近年来肺腺癌耐药发生率高于... 肺癌是严重影响人类生存的恶性肿瘤之一,其死亡率已居全球恶性肿瘤之首。目前主要采取以化疗为主的综合治疗方案,其疗效并不理想,主要原因是肺癌细胞对化疗药物产生多药耐药性(multi-drug resistance,MDR)。近年来肺腺癌耐药发生率高于鳞癌,应用cis-dichlorodiamineplatinum(DDP)诱导建立的肺腺癌多药耐药细胞系A549/DDP具有代表性。因此深入研究肺腺癌A549/DDP细胞的MDR机制及寻找安全、有效的逆转剂则成为当务之急。文献检索研究表明,肺腺癌A549/DDP细胞多药耐药机制主要涉及膜转运蛋白介导的药物外排泵机制、酶介导的肿瘤细胞解毒和修复功能增强、凋亡调控基因异常、信号转导因子发挥抗凋亡机制、上皮-间质细胞转化(EMT)导致的免疫逃逸。针对肺腺癌A549/DDP细胞多药耐药的中药逆转剂则主要涉及中药单体、中药复方、单味中药及中药有效成分、提取复合物。现就近年来肺腺癌A549/DDP细胞多药耐药机制及中药逆转剂的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肺腺癌 a549/ddp细胞 多药耐药 中药 逆转
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补中益气汤与siRNA对肺腺癌A549/DDP细胞耐药逆转作用的比较 被引量：4
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作者 李璐璐 于丹 +2 位作者 王莹 井欢 刘春英 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期2473-2475,共3页
目的比较补中益气汤含药血清与siRNA技术(RNA)对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的耐药效果及对多药耐药蛋白P-gp表达的影响。方法制备补中益气汤含药血清,设计并合成针对P-gp基因对应序列的siRNA,转染A549/DDP细胞;实验分组为空白对照组、... 目的比较补中益气汤含药血清与siRNA技术(RNA)对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/DDP的耐药效果及对多药耐药蛋白P-gp表达的影响。方法制备补中益气汤含药血清,设计并合成针对P-gp基因对应序列的siRNA,转染A549/DDP细胞;实验分组为空白对照组、补中益气汤含药血清处理组、siRNA处理组,利用RT-PCR检测P-gp mRNA,Western印迹及免疫细胞化学法检测P-gp蛋白质的表达;MTT法检测A549/DDP细胞耐药逆转效果。结果补中益气汤含药血清和siRNA均能降低P-gp mRNA和蛋白质表达,恢复顺铂敏感性,耐药倍数分别降至2.01、2.73,具有统计学意义(P<0.05)。结论补中益气汤含药血清和siRNA均能有效逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的多药耐药。 展开更多
关键词 补中益气汤 SIRNA a549/ddp细胞 P-GP 耐药逆转
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去甲斑蝥酸钠对耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞耐药相关基因表达的影响 被引量：8
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作者 蒋亦燕 尹丽慧 +1 位作者 费正华 陈素秀 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期37-40,共4页
目的:研究去甲斑蝥酸钠(SNCTD)对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其对耐顺铂细胞耐药相关基因表达的影响。方法:采用CCK法筛选出SNCTD对A549/DDP的无毒浓度,并检测出顺铂及与无毒浓度SNCTD联合对耐药细胞株的IC50;采用逆转录... 目的:研究去甲斑蝥酸钠(SNCTD)对耐顺铂人肺腺癌细胞系A549/DDP的逆转作用及其对耐顺铂细胞耐药相关基因表达的影响。方法:采用CCK法筛选出SNCTD对A549/DDP的无毒浓度,并检测出顺铂及与无毒浓度SNCTD联合对耐药细胞株的IC50;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测1、2倍无毒浓度SNCTD处理细胞48h、72h后耐药相关基因mdr1mRNA,MRP1mRNA,GST-PimRNA,ERCC1mRNA表达。结果:SNCTD对A549/DDP的无毒浓度为5μg/ml,与顺铂联合用药降低A549/DDP的耐药性,逆转倍数为1.97;1、2倍无毒浓度SNCTD处理耐药细胞后mdr1,MRP1mRNA表达明显减低(P(0.05),并具有浓度依赖性,而GST-Pi,ERCC1mRNA表达无明显浓度和时间依赖性(P>0.05)。结论:SNCTD对A549/DDP具有耐药逆转作用,其作用机制可能与下调耐药相关基因mdr1,MRP1的表达,影响膜蛋白外排泵功能有关。 展开更多
关键词 去甲斑蝥酸钠 a549/ddp细胞 逆转 耐药相关基因
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补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞药物泵P-gp及LRP蛋白表达的影响 被引量：4
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作者 李璐璐 于丹 +2 位作者 王莹 井欢 刘春英 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期50-55,共6页
目的:用补中益气汤含药血清处理A549/DDP细胞,观测药物泵P-gp及LRP的表达,并同小干扰RNA片段(siRNA)靶向切除P-gp、LRP基因后对这两种蛋白表达的影响相比较.方法:补中益气汤含药血清处理A549/DDP细胞,设计并合成针对P-gp、LRP基因对应... 目的:用补中益气汤含药血清处理A549/DDP细胞,观测药物泵P-gp及LRP的表达,并同小干扰RNA片段(siRNA)靶向切除P-gp、LRP基因后对这两种蛋白表达的影响相比较.方法:补中益气汤含药血清处理A549/DDP细胞,设计并合成针对P-gp、LRP基因对应序列的siRNA,采用转染试剂对细胞进行转染.两种蛋白实验分组均为:空白对照组、含药血清处理组及siRNA处理组.采用RT-PCR检测P-gp及LRP mRNA,免疫细胞化学法检测蛋白表达及定位,WB检测蛋白表达.结果:补中益气汤含药血清可以降低两种药物泵的表达,效果同siRNA类似,具有统计学差异(P<0.05).结论:补中益气汤含药血清能降低A549/DDP细胞上P-gp和LRP的表达. 展开更多
关键词 补中益气汤1 a549/ddp细胞2 P糖蛋白3 肺耐药蛋白4 药物泵5
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