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人肺腺癌耐药细胞株A549/CDDP中相关泛素化蛋白质研究 被引量：3
1
作者 秦霞 邱宗荫 +2 位作者 邱峰 粟林 屈灿 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期866-869,共4页
目的研究肺腺癌中与耐药相关的泛素化或类泛素化蛋白质及其与耐药的关系。方法从经顺铂处理和未处理的A549细胞及其耐顺铂细胞株中分离泛素化、类泛素化蛋白质,通过1D SDS-PAGE和Chip HPLC-MS/MS分析鉴别蛋白,Western blot法验证质谱结... 目的研究肺腺癌中与耐药相关的泛素化或类泛素化蛋白质及其与耐药的关系。方法从经顺铂处理和未处理的A549细胞及其耐顺铂细胞株中分离泛素化、类泛素化蛋白质,通过1D SDS-PAGE和Chip HPLC-MS/MS分析鉴别蛋白,Western blot法验证质谱结果;MTT法检测细胞对顺铂的耐药性。结果鉴定出发生类泛素化修饰蛋白质-PKM2,并发现其在耐药细胞株中低表达;以蛋白酶体抑制剂MG132干预细胞后,PKM2表达上调;CDDP和MG132联合作用细胞后,细胞耐药性下降。结论细胞中PKM2表达水平与肿瘤细胞耐药程度呈负相关,PKM2受蛋白质类泛素化修饰-SUMO化修饰调节,提示PKM2可能与肿瘤耐药的发生密切相关。 展开更多
关键词 a549细胞 a549/cddp细胞 丙酮酸激酶M2 肿瘤耐药 泛素化 SUMO化
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托瑞米芬逆转肺癌耐药细胞株A549/cDDP耐药性的研究 被引量：3
2
作者 刘利则 夏莉 +1 位作者 刘玉侠 段北野 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1078-1081,共4页
目的:探讨托瑞米芬(TOR)对耐顺铂(cDDP)细胞株A549的逆转作用,为临床应用提供实验数据。方法:用不同浓度的托瑞米芬单独及与cDDP联合与耐药细胞A549共同培养,通过MTT法和流式细胞仪法检测其对A549/cDDP的逆转及增敏效果。结果:经不同浓... 目的:探讨托瑞米芬(TOR)对耐顺铂(cDDP)细胞株A549的逆转作用,为临床应用提供实验数据。方法:用不同浓度的托瑞米芬单独及与cDDP联合与耐药细胞A549共同培养,通过MTT法和流式细胞仪法检测其对A549/cDDP的逆转及增敏效果。结果:经不同浓度的托瑞米芬单独及与cDDP联合与耐药细胞A549共同培养后,单独TOR(5μmol/L、10μmol/L)对A549/cDDP细胞的增殖均无明显影响,各组间数据无明显差异(P>0.05)。当cDDP与TOR联合作用时无论TOR终浓度5μmol/L或10μmol/L,均能明显增加cDDP对A549/cDDP细胞的敏感性(P<0.05,P<0.001)。其IC50值分别为39.06μmol/L和30.64μmol/L,逆转倍数分别为2.05倍和2.65倍。cDDP+TOR终浓度5μmol/L与cDDP+TOR终浓度10μmol/L之间除了在cDDP浓度为200μmol/L时两者有差异(P<0.05)外其它均无明显差异。结论:托瑞米芬与DDP联合应用可以提高A549/cDDP的逆转及治疗效果。 展开更多
关键词 托瑞米芬 a549 cddp耐药细胞 逆转
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大黄酸对耐顺铂A549/cDDP细胞株的耐药逆转作用及机制研究 被引量：2
3
作者 陈奕芝 刘锦新 +3 位作者 谭烁 李铁锋工 廖镜云 钱有为 《热带医学杂志》 CAS 2013年第10期1218-1220,1230,共4页
目的观察大黄酸对耐顺铂(cDDP)A549/cDDP细胞的耐药逆转作用并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的大黄酸与耐药细胞A549/cDDP共同培养,通过MTT法检测细胞增殖抑制率并确定大黄酸逆转耐药最佳浓度;将对数生长期的细胞随机分成2组,... 目的观察大黄酸对耐顺铂(cDDP)A549/cDDP细胞的耐药逆转作用并探讨其可能的作用机制。方法用不同浓度的大黄酸与耐药细胞A549/cDDP共同培养,通过MTT法检测细胞增殖抑制率并确定大黄酸逆转耐药最佳浓度;将对数生长期的细胞随机分成2组,对照组分别加入不同浓度的cDDP,实验组在对照组基础上加入2μg/ml的大黄酸,同时设空白对照组,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,计算两组细胞cDDP的半数抑制浓度(IC50)及大黄酸的逆转耐药倍数;将对数生长期的细胞分为2组,对照组加入2μg/ml cDDP,实验组在对照组的基础上加入2μg/ml的大黄酸,同时设空白对照组,流式细胞仪检测各组细胞P蛋白(P-gp)及多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)的表达。结果随着大黄酸浓度的增加,其细胞增殖抑制率不断增加(P<0.05),大黄酸逆转耐药的最佳浓度为2μg/ml;对照组IC50为31.642μg/ml,实验组IC50为21.412μg/ml,大黄酸的逆转耐药倍数为1.48倍;大黄酸能下调A549/cDDP细胞P-gp及MRP的表达。结论大黄酸可逆转耐cDDP的A549/cDDP细胞株的耐药性,其作用机制可能与下调P-gp及MRP-1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 大黄酸 a549 cddp细胞 顺铂 P蛋白 多药耐药相关蛋白-1
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人肺腺癌耐顺铂细胞A549/CDDP获得侵袭转移能力的分子机制 被引量：1
4
作者 陈新来 胡惠军 +4 位作者 潘勇权 邹伟文 周文泉 古彩红 王昊 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第8期1670-1674,共5页
目的:研究人肺腺癌耐顺铂细胞A549/CDDP获得侵袭转移能力的分子机制。方法:细胞划痕实验和Transwell侵袭实验比较A549和A549/CDDP的转移侵袭能力的差别,以及LY294002对A549/CDDP侵袭转移能力的影响。蛋白质免疫印迹技术检测AKT,NF-κB,S... 目的:研究人肺腺癌耐顺铂细胞A549/CDDP获得侵袭转移能力的分子机制。方法:细胞划痕实验和Transwell侵袭实验比较A549和A549/CDDP的转移侵袭能力的差别,以及LY294002对A549/CDDP侵袭转移能力的影响。蛋白质免疫印迹技术检测AKT,NF-κB,STAT3信号通路的激活情况,MTT法检测A549和A549/CDDP对顺铂的敏感性,以及PI3K/AKT通路抑制剂LY294002对A549/CDDP细胞对顺铂的敏感性的影响。结果:A549/CDDP对顺铂的耐药性以及侵袭转移能力相对于A549有明显增强。Western blot结果表明:A549/CDDP细胞AKT通路被激活,NF-κB,STAT3通路没有明显变化。LY294002能够明显抑制A549/CDDP的侵袭转移能力并且能够提高A549/CDDP对于顺铂的敏感性。结论:A549/CDDP细胞相对于A549细胞的侵袭转移能力明显增强,其机制与PI3K/AKT信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 a549 cddp 侵袭转移 耐药 PI3K AKT LY294002
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A549/CDDP多药耐药细胞系的建立
5
作者 赵云峰 胡尊丽 《聊城大学学报（自然科学版）》 2008年第2期82-84,共3页
以顺铂(CDDP)为诱导物,采用间歇逐步增加剂量法建立了人肺腺癌多药耐药细胞系A549/CDDP;MTT法测定A549/CDDP对顺铂、丝裂霉素C、5-氟尿嘧啶、长春新碱、表阿霉素及紫杉醇等的耐药指数.A549/CDDP细胞较亲本细胞略小,核质比增加,倍增时间... 以顺铂(CDDP)为诱导物,采用间歇逐步增加剂量法建立了人肺腺癌多药耐药细胞系A549/CDDP;MTT法测定A549/CDDP对顺铂、丝裂霉素C、5-氟尿嘧啶、长春新碱、表阿霉素及紫杉醇等的耐药指数.A549/CDDP细胞较亲本细胞略小,核质比增加,倍增时间没有明显变化;MTT法测定A549/CDDP的药物敏感性,对顺铂的耐药指数是20.29,对丝裂霉素C、5-氟尿嘧啶、长春新碱、表阿霉素及紫杉醇等药物有不同程度的耐药性,但对卡氮芥和羟基喜树碱无耐药性;A549/CDDP对顺铂的敏感性降低,其顺铂的含量较亲本细胞下降. 展开更多
关键词 人肺腺癌a549细胞 多药耐药 cddp 耐药指数
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Tanshinone Ⅱ A on human A549/CDDP apoptosis and drug resistance protein expression in
6
作者 WANG jiang-feng ZHOU xie-lai +2 位作者 YUAN hong HUANG xiao-hui LIUxiao-ling 《中国药理通讯》 2010年第3期27-28,共2页
关键词 a549/cddp 肺癌 治疗 疗效
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黄芩素对人肺癌细胞A549耐顺铂株顺铂细胞毒性及Akt/NF-kB信号通路关系分析 被引量：8
7
作者 邓帅 高峰 田青 《四川中医》 2018年第8期50-53,共4页
目的:分析黄芩素对人肺癌细胞A549耐顺铂株(A549/CDDP细胞株)顺铂细胞毒性的关系,并探讨其作用机制。方法:选取人肺癌细胞A549细胞株和A549/CDDP细胞株,比较黄芩素联合顺铂组与单独顺铂组对A549/CDDP细胞株细胞存活率的影响;分别比较有... 目的:分析黄芩素对人肺癌细胞A549耐顺铂株(A549/CDDP细胞株)顺铂细胞毒性的关系,并探讨其作用机制。方法:选取人肺癌细胞A549细胞株和A549/CDDP细胞株,比较黄芩素联合顺铂组与单独顺铂组对A549/CDDP细胞株细胞存活率的影响;分别比较有无黄芩素作用下,A549/CDDP细胞株EMT相关指标差异;分析黄芩素逆转A549/CDDP细胞株EMT与Akt及NF-kb信号通路关系。结果:黄芩素与顺铂合用组A549/CDDP细胞株细胞存活率显著低于单独顺铂组细胞存活率,差异有统计学意义(P<0.05);A549/CDDP细胞株发生细胞侵袭(206.3±43.1)个、转移(395.4±62.8)个,A549细胞株发生细胞侵袭(51.2±10.4)个,转移(104.3±21.2)个,两组相比,A549/CDDP细胞株细胞侵袭转移能力显著高于A549细胞株,差异有统计学意义(P<0.05),发生了EMT;黄芩素作用于A549/CDDP细胞株,EMT发生逆转,p-Akt、Akt水平显著降低,且降低程度与黄芩素浓度呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);黄芩素作用于A549/CDDP细胞株,NF-k B信号通路活性降低,且降低程度与黄芩素浓度呈正相关。结论:黄芩素能够增强人肺癌细胞A549/CDDP细胞株顺铂细胞的毒性,其机制可能是阻断细胞内Akt/NF-k B信号通路,从而抑制EMT的发生。 展开更多
关键词 黄芩素 a549/cddp细胞株 EMT Akt/NF-kB
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miR-140—3p在人肺腺癌A549细胞顺铂化疗敏感性中的作用研究 被引量：1
8
作者 欧阳永日 朱保义 +6 位作者 王希 林芳 陈曦 任继鸿 张惠中 卫军霞 董轲 《现代检验医学杂志》 CAS 2013年第4期5-8,共4页
目的 探讨miR-140-3p与人肺腺癌A549细胞顺铂药物敏感性的关系.方法 化学合成miR-140-3p mimics及inhibitor,脂质体2000介导其转染入人肺腺癌A549细胞,利用荧光定量PCR方法观察转染细胞中miR-140-3p表达水平的变化;噻唑蓝（MTT）法检测A... 目的 探讨miR-140-3p与人肺腺癌A549细胞顺铂药物敏感性的关系.方法 化学合成miR-140-3p mimics及inhibitor,脂质体2000介导其转染入人肺腺癌A549细胞,利用荧光定量PCR方法观察转染细胞中miR-140-3p表达水平的变化;噻唑蓝（MTT）法检测A549细胞对顺铂作用的敏感性.结果 转染miR-140-3p mimics/inhibitor可分别升高（约30%）或降低（约30%）人肺腺癌A549细胞中miR-140-3p表达;同时,与对照组相比,转染miR-140-3p inhibitor的人肺腺癌A549细胞对顺铂药物作用的敏感度显著增加,细胞增殖速率降低33%（P〈0.05）;而转染miR-140-3p mimics的A549细胞对顺铂药物作用的敏感度显著降低,细胞增殖速率升高32%（P〈0.05）.结论 miR-140-3p的表达水平与人肺腺癌A549细胞对顺铂药物的敏感度呈负相关,提示miR-140-3p可能在A549细胞顺铂耐药过程中发挥重要作用. 展开更多
关键词 miR-140—3p 非小细胞肺癌 a549 顺铂 化疗敏感度
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晚期非小细胞肺癌中Survivin表达对顺铂敏感性和预后的预测价值 被引量：2
9
作者 李伟 丁静 陈余清 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期1216-1221,共6页
目的:探讨Survivin预测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂敏感性的价值。方法:RT-PCR、Western blot法检测人肺腺癌细胞株A549和耐药株A549/CDDP中Survivin表达,Survivin siRNA转染A549/CDDP细胞,MTT、流式细胞术检测细胞生长与凋亡;免疫组... 目的:探讨Survivin预测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂敏感性的价值。方法:RT-PCR、Western blot法检测人肺腺癌细胞株A549和耐药株A549/CDDP中Survivin表达,Survivin siRNA转染A549/CDDP细胞,MTT、流式细胞术检测细胞生长与凋亡;免疫组织化学和RT-PCR检测晚期NSCLC组织中Survivin mRNA和蛋白表达。结果:A549/CDDP中Survivin mRNA和蛋白表达均高于A549细胞(P<0.01);A549/CDDP细胞中Survivin siRNA+CDDP组的生长抑制率达76.4%,IC_(50)为(34.12+3.55)μg/mL,耐药指数为6.71倍,均低于对照组(P<0.05)。该组的细胞凋亡率高于对照组(P<0.01);93例NSCLC蜡块组织中,Survivin蛋白表达阴性组接受含顺铂方案化疗有效率(44.4%)高于阳性组(19.3%,P<0.01);Survivin表达阴性组总生存、无疾病进展时间较阳性组长,但差异无统计学意义(P>0.05)。Cox多因素分析结果显示Survivin蛋白表达水平不是影响预后的独立因素。20例新鲜组织中Survivin mRNA低表达组反应率(RR)(60%)和蛋白表达阴性组RR(66.7%)高于mRNA高表达组(10%)和蛋白表达阳性组(9%,P<0.05)。结论:NSCLC组织中Survivin表达阳性提示顺铂耐药,检测Survivin表达对晚期NSCLC筛选含顺铂化疗方案具有指导意义。 展开更多
关键词 SURVIVIN 非小细胞肺癌 顺铂 a549 a549/cddp
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survivin反义寡核苷酸提高人肺腺癌A549耐药细胞系对顺铂敏感性的研究 被引量：18
10
作者 张梅春 胡成平 陈琼 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期408-412,共5页
目的探讨存活素反义寡核苷酸(ASODN)体外转染对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/ CDDP凋亡及其对顺铂(CDDP)敏感性的影响。方法常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的survivin ASODN转染细胞,采用RT-PCR法和免疫细胞化学法检测survivin mRN... 目的探讨存活素反义寡核苷酸(ASODN)体外转染对耐顺铂人肺腺癌细胞A549/ CDDP凋亡及其对顺铂(CDDP)敏感性的影响。方法常规体外培养A549/CDDP细胞,以脂质体包裹的survivin ASODN转染细胞,采用RT-PCR法和免疫细胞化学法检测survivin mRNA及蛋白表达。通过形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳、caspase-3酶活性及细胞凋亡率(AI)的测定,评价细胞凋亡程度。采用MTT法测定细胞存活率和生长抑制率,计算半效抑制浓度(IC_(50))及耐药倍数(RI)。结果转染组survivin mRNA及蛋白表达下调明显,分别达41．56%和0．864±0．045,与其他各组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。细胞形态学显示有细胞凋亡改变,表现为细胞核固缩、核边集和核碎裂等；DNA凝胶电泳可见DNA梯形条带；ASODN转染组细胞凋亡率和caspase-3相对活性分别增高至34．03%和1．1298±0．2502,而ASODN+CDDP组增高更为明显,分别达65．85%和1．6805±0．2758,与其他各组比较,差异均有统计学意义(P＜0．05)。ASODN转染组和ASODN+CDDP组生长抑制率分别增高至59．3%和83．7%(P＜0．05)；而ASODN转染组细胞对CDDP的IC_(50)由对照组的(225．03±10．59)μmol/L减低至(158．84±4．26)μmol/L,RI由11．9减至8．4。结论survivin ASODN通过下调survivin的表达,自身诱导了细胞凋亡,并逆转细胞对CDDP诱导的细胞凋亡的耐受,降低凋亡阈值,从而增强了人肺腺癌细胞对CDDP的敏感性。 展开更多
关键词 SURVIVIN ASODN 顺铂 凋亡 人肺腺癌细胞系a549/cddp 耐药性
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