目的:探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核-巨噬细胞THP-1后,S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A4,S100A4)通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激...目的:探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核-巨噬细胞THP-1后,S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A4,S100A4)通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬的调控作用。方法:采用S100A4小干扰RNA(S100A4 small interfering RNA,si-S100A4)转染或PI3K抑制剂LY294002预处理THP-1巨噬细胞,并经BCG感染,设置不同处理组和对照组,通过Western blot方法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白和自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3-II(microtubule-associated protein 1 light chain 3-II,LC3-II)、自噬相关蛋白7(autophagy-related protein 7,Atg7)和beclin-1]的表达,mRFP-GFP-LC3自噬双标腺病毒方法检测自噬流,透射电子显微镜观察细胞中自噬体和自噬溶酶体数量变化。结果:与未感染组相比,BCG感染组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.05)。与BCG感染组相比,si-S100A4+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著升高(P<0.05),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.01);LY294003+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.05),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01)。与si-S100A4+BCG组相比,si-S100A4+LY294002+BCG组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.01),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01),胞内菌载量显著减少(P<0.01)。结论:干扰S100A4经由PI3K/AKT/mTOR信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬具有抑制作用。展开更多
利托那韦(ritonavir,RTV)作为抗病毒药物广泛应用于临床,但其肝毒性机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)激活促进RTV肝毒性的分子机制。本实验获得郑州大学生命科学伦理审查委员会批准(批准号:ZZUIRB20...利托那韦(ritonavir,RTV)作为抗病毒药物广泛应用于临床,但其肝毒性机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)激活促进RTV肝毒性的分子机制。本实验获得郑州大学生命科学伦理审查委员会批准(批准号:ZZUIRB2022-142)。构建Pxr基因敲除小鼠,给予PXR激动剂和RTV处理,检测肝功能指标、代谢酶、内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激和细胞凋亡相关基因的表达及RTV主要活性代谢产物,并在细胞水平进行验证。结果显示,PXR激活加剧RTV所致小鼠肝损伤,伴随相关代谢酶上调、RTV活性代谢产物积累、ER应激、细胞死亡及组织损伤相关分子表达上调;在HepG2细胞中,过表达PXR联合利福平使RTV肝细胞毒性增加,而敲低细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP) 3A4后毒性得以逆转。机制上,PXR激活通过上调CYP3A4加速RTV代谢为毒性产物,后者触发ER应激,促进肝细胞毒性。本研究揭示了PXR-CYP3A4轴通过触发ER应激在RTV肝毒性中的核心作用,为靶向调控PXR以减轻药物性肝损伤提供新策略。展开更多
钙结合蛋白S100A(calcium binding protein S100A,S100A)4是经RNA互作组技术发现的一种新型RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)[1],能够识别特定RNA结合域并与RNA相互作用,在转录后基因表达调控中起着重要作用[2]。先前的研究发现,...钙结合蛋白S100A(calcium binding protein S100A,S100A)4是经RNA互作组技术发现的一种新型RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)[1],能够识别特定RNA结合域并与RNA相互作用,在转录后基因表达调控中起着重要作用[2]。先前的研究发现,S100A4不仅在银屑病患者皮肤的真皮组织中表达上调,而且能通过影响表皮细胞增殖和真皮血管增生参与银屑病的发生发展,然而其中潜在的调控机制尚不清楚[3]。展开更多
目的探讨3例儿童糖原累积病Ib型(glycogen storage disease type Ib,GSDIb)的临床特征和基因变异特点,分析恩格列净治疗GSDIb患儿的临床效果。方法回顾性分析2020年6月至2023年5月在郑州大学附属儿童医院就诊的3例GSDIb型患儿临床资料...目的探讨3例儿童糖原累积病Ib型(glycogen storage disease type Ib,GSDIb)的临床特征和基因变异特点,分析恩格列净治疗GSDIb患儿的临床效果。方法回顾性分析2020年6月至2023年5月在郑州大学附属儿童医院就诊的3例GSDIb型患儿临床资料及基因检测结果。3例患儿均接受恩格列净治疗及饮食干预,随访1~3年,并回顾相关文献。结果3例患儿均为男性,就诊年龄7个月~1岁,主要临床表现为肝脏增大及智力运动发育落后,代谢异常均表现为肝功能异常、空腹低血糖、血清乳酸及三酰甘油升高,均伴有中性粒细胞减少,3例患儿均检出SLC37A4基因复合杂合变异。应用恩格列净治疗年龄分别为1岁2个月、1岁、1岁10个月,随访时间分别为12、17、36个月,均未发生低血糖、泌尿系统感染、肝肾功能异常等不良反应,临床症状得到改善。本研究发现SLC37A4基因1个新变异位点c.1287_1290del,拓展了SLC37A4基因变异谱。结论GSDIb型患儿的临床表现多样,存在中性粒细胞减少及功能缺陷,确诊依赖于基因检测,恩格列净可增加GSDIb患儿中性粒细胞数目,改善患儿临床症状,尽早应用可避免炎症性肠病的发生。展开更多
文摘目的:探究牛结核分枝杆菌减毒株卡介苗(bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核-巨噬细胞THP-1后,S100钙结合蛋白A4(S100 calcium-binding protein A4,S100A4)通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬的调控作用。方法:采用S100A4小干扰RNA(S100A4 small interfering RNA,si-S100A4)转染或PI3K抑制剂LY294002预处理THP-1巨噬细胞,并经BCG感染,设置不同处理组和对照组,通过Western blot方法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白和自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3-II(microtubule-associated protein 1 light chain 3-II,LC3-II)、自噬相关蛋白7(autophagy-related protein 7,Atg7)和beclin-1]的表达,mRFP-GFP-LC3自噬双标腺病毒方法检测自噬流,透射电子显微镜观察细胞中自噬体和自噬溶酶体数量变化。结果:与未感染组相比,BCG感染组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.05)。与BCG感染组相比,si-S100A4+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著升高(P<0.05),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著降低(P<0.01);LY294003+BCG组上述磷酸化蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.05),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01)。与si-S100A4+BCG组相比,si-S100A4+LY294002+BCG组中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平显著降低(P<0.01),LC3-II、Atg7和beclin-1蛋白水平显著升高(P<0.01),自噬体和自噬溶酶体数量显著增多(P<0.01),胞内菌载量显著减少(P<0.01)。结论:干扰S100A4经由PI3K/AKT/mTOR信号通路对BCG诱导的巨噬细胞自噬具有抑制作用。
文摘钙结合蛋白S100A(calcium binding protein S100A,S100A)4是经RNA互作组技术发现的一种新型RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)[1],能够识别特定RNA结合域并与RNA相互作用,在转录后基因表达调控中起着重要作用[2]。先前的研究发现,S100A4不仅在银屑病患者皮肤的真皮组织中表达上调,而且能通过影响表皮细胞增殖和真皮血管增生参与银屑病的发生发展,然而其中潜在的调控机制尚不清楚[3]。
文摘目的探讨3例儿童糖原累积病Ib型(glycogen storage disease type Ib,GSDIb)的临床特征和基因变异特点,分析恩格列净治疗GSDIb患儿的临床效果。方法回顾性分析2020年6月至2023年5月在郑州大学附属儿童医院就诊的3例GSDIb型患儿临床资料及基因检测结果。3例患儿均接受恩格列净治疗及饮食干预,随访1~3年,并回顾相关文献。结果3例患儿均为男性,就诊年龄7个月~1岁,主要临床表现为肝脏增大及智力运动发育落后,代谢异常均表现为肝功能异常、空腹低血糖、血清乳酸及三酰甘油升高,均伴有中性粒细胞减少,3例患儿均检出SLC37A4基因复合杂合变异。应用恩格列净治疗年龄分别为1岁2个月、1岁、1岁10个月,随访时间分别为12、17、36个月,均未发生低血糖、泌尿系统感染、肝肾功能异常等不良反应,临床症状得到改善。本研究发现SLC37A4基因1个新变异位点c.1287_1290del,拓展了SLC37A4基因变异谱。结论GSDIb型患儿的临床表现多样,存在中性粒细胞减少及功能缺陷,确诊依赖于基因检测,恩格列净可增加GSDIb患儿中性粒细胞数目,改善患儿临床症状,尽早应用可避免炎症性肠病的发生。
