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牛结节性皮肤病病毒A33R蛋白的截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
1
作者 包燕玲 宋昱庆 +6 位作者 户鑫兵 钟匀汝 田占成 苟惠天 关贵全 殷宏 独军政 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第3期335-341,共7页
为了建立一种快速准确的牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ELISA抗体检测方法,本研究参考GenBank中的LSDV A33R基因序列,设计截去编码跨膜区片段,密码子优化后合成该截短基因并克隆至原核表达质粒pET-28a,构建了重组质粒pET-28a-A33R_(Δ45-67 a... 为了建立一种快速准确的牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ELISA抗体检测方法,本研究参考GenBank中的LSDV A33R基因序列,设计截去编码跨膜区片段,密码子优化后合成该截短基因并克隆至原核表达质粒pET-28a,构建了重组质粒pET-28a-A33R_(Δ45-67 aa),IPTG诱导表达A33R_(Δ45-67 aa)蛋白,纯化后以其作为诊断抗原建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示,利用大肠杆菌成功表达并纯化获得分子质量为21 k Da的重组A33R_(Δ45-67aa)蛋白,并建立了LSDV间接ELISA抗体检测方法,该方法具有良好的特异性和敏感性。批间和批内重复试验变异系数均低于10%,表明该间接ELISA方法重复性良好,稳定性高。该方法与IDScreen^(®)Capripox双抗原夹心ELISA试剂盒检测结果总符合率为97.7%,表明其可用于LSDV的抗体检测,将为LSD的防控提供技术支撑。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 a33R_(Δ45-67aa)蛋白 截短表达 间接ELISA
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7A33铝合金薄板热处理工艺研究 被引量：1
2
作者 赵永军 《轻合金加工技术》 CAS 北大核心 2010年第10期39-42,共4页
试验研究了退火、淬火、双级时效工艺参数对7A33铝合金薄板力学性能和组织的影响;测定了该合金试样的晶间腐蚀性能、应力腐蚀性能和电导率;确定了能使该合金薄板获得较好综合性能的O状态退火工艺制度为390℃-410℃、保温2 h;T62状态热... 试验研究了退火、淬火、双级时效工艺参数对7A33铝合金薄板力学性能和组织的影响;测定了该合金试样的晶间腐蚀性能、应力腐蚀性能和电导率;确定了能使该合金薄板获得较好综合性能的O状态退火工艺制度为390℃-410℃、保温2 h;T62状态热处理工艺制度为淬火温度460℃、水淬,双级时效制度75℃1 h＋150℃20 h。工业化生产出了符合要求的7A33铝合金薄板。 展开更多
关键词 7a33铝合金薄板 O状态 T62状态
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稳定表达HLA-A33蛋白细胞系的建立
3
作者 王健 邹宁 +1 位作者 潘煦文 刘思当 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期212-215,共4页
旨在构建能稳定表达HLA-A33蛋白的细胞系,并观察其在细胞中的表达水平。首先克隆取得HLA-A33基因,并将其插入慢病毒载体,经酶切和测序鉴定,确定载体构建正确。通过慢病毒系统感染正常RD细胞,将HLA-A33基因整合进RD细胞的基因组。提取构... 旨在构建能稳定表达HLA-A33蛋白的细胞系,并观察其在细胞中的表达水平。首先克隆取得HLA-A33基因,并将其插入慢病毒载体,经酶切和测序鉴定,确定载体构建正确。通过慢病毒系统感染正常RD细胞,将HLA-A33基因整合进RD细胞的基因组。提取构建细胞系的基因组做PCR鉴定,并通过免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测,结果显示,HLA-A33基因成功整合入RD细胞基因组中,且在重组细胞系中成功表达。该细胞系可为A33等位基因与HBV感染后的慢性化以及EV71感染的相关研究提供试验参考。 展开更多
关键词 RD细胞 HLA-a33 细胞系 稳定表达
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人A33基因5′调控区的组织特异性表达元件 被引量：3
4
作者 山松 朱云艳 +2 位作者 翟鹏 毛泽斌 童坦君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期440-444,共5页
在对人A33基因 5′调控区初步研究的基础上 ,进一步采用体外足迹法、电泳迁移率变更分析(EMSA)和定点突变等实验对A33启动子的 - 10 4～ + 2 5bp区域进行了重点研究 .在A33启动子的- 10 4～ + 2 5bp区域内存在两个转录正调控元件 ,它们... 在对人A33基因 5′调控区初步研究的基础上 ,进一步采用体外足迹法、电泳迁移率变更分析(EMSA)和定点突变等实验对A33启动子的 - 10 4～ + 2 5bp区域进行了重点研究 .在A33启动子的- 10 4～ + 2 5bp区域内存在两个转录正调控元件 ,它们分别位于转录起始位点上游 - 86～ - 6 8区(A)和 - 40～ - 19区 (B) .通过对转录因子数据库的查找 ,发现A区与转录因子GKLF (gut enrichedKr櫣ｐｐｅｌ likefactor)的结合位点吻合 ,而B区则没有找到与之相应的转录因子 .EMSA实验表明 ,A区与核蛋白的结合存在组织特异性 ,而B区的结合则无组织特异性 .推测A区所包含的顺式调控元件很可能是决定A33基因组织特异性表达的关键元件 .根据B区所处的位置和富含AT来分析 ,它极有可能是和通用转录因子及RNA聚合酶结合的区域 .A和B两个区域的点突变都可使A33启动子的活性丧失 85 展开更多
关键词 人a33基因 5′调控区 组织特异性表达元件 启动子区 顺式调控元件
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人肠组织特异抗原A33基因5′调控区的克隆及其功能分析 被引量：2
5
作者 山松 翟鹏 +2 位作者 朱云艳 毛泽斌 童坦君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期317-322,共6页
用基因组步行法 (genomewalker)克隆了人A33抗原基因的 5′调控区 94 0bp片段 ,并用PCR法鉴定了这一克隆的正确性 .将该序列提交GenBank ,登录号为AF2 0 0 6 2 6 .用引物延伸法 (primerex tension)确定了A33基因的转录起始位点 ,发现该... 用基因组步行法 (genomewalker)克隆了人A33抗原基因的 5′调控区 94 0bp片段 ,并用PCR法鉴定了这一克隆的正确性 .将该序列提交GenBank ,登录号为AF2 0 0 6 2 6 .用引物延伸法 (primerex tension)确定了A33基因的转录起始位点 ,发现该位点位于一个TATA盒下游 10个碱基处 .以增强型绿色荧光蛋白为报告基因构建了不同长度的A33启动子 5′缺失载体 ,用脂质体介导的方法将这些载体转染LoVo、HeLa、2 93等细胞 ,比较了EGFP的表达水平 .研究发现 ,A33启动子上主要转录调控元件以及与组织特异性表达相关的转录调控元件位于A33启动子的 - 10 4～ + 2 展开更多
关键词 人肠组织特异抗原 a33基因 5′调控区 克隆 功能 启动子区 转录调控
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日产风度A33轿车巡航控制系统的检修
6
作者 付百学 《汽车电器》 2003年第1期17-19,共3页
介绍了日产风度A33轿车巡航控制系统部件的位置及该系统主要部件的检查与测试。
关键词 日产风度a33轿车 检修 巡航控制系统 部件位置 检查 测试
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A33启动子结肠癌特异性探究及SV40增强子对其转录活性影响 被引量：1
7
作者 钟丹 郑水娣 +2 位作者 谌贺宽子 袁素敬 章康健 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第11期1241-1247,共7页
为了探究A33核心启动子结肠癌特异性及SV40增强子对其转录水平的影响,该研究通过构建A33核心启动子和带SV40增强子的A33核心启动子(eA33)的荧光素酶报告基因载体pGL3-A33和pGL3-eA33,与内参照pRL-SV40质粒共转染至不同的细胞系中,利用... 为了探究A33核心启动子结肠癌特异性及SV40增强子对其转录水平的影响,该研究通过构建A33核心启动子和带SV40增强子的A33核心启动子(eA33)的荧光素酶报告基因载体pGL3-A33和pGL3-eA33,与内参照pRL-SV40质粒共转染至不同的细胞系中,利用双荧光素酶检测系统检测分析了A33和eA33启动子在不同细胞系中的转录活性。结果显示,A33核心启动子在结肠癌细胞系中具有转录活性低,但结肠癌特异性好的特点,而在其他类型癌细胞中基本没有活性。同时发现,eA33在各类癌细胞中的转录水平与A33相比,均呈大幅度提高,有显著性差异(P<0.01),但SV40增强子能显著增强A33启动子转录活性的同时减低了其结肠癌特异性。这为靶向癌症基因—病毒治疗策略在结肠癌的生物治疗应用中寻找结肠癌特异性的启动子奠定了研究基础。 展开更多
关键词 a33核心启动子 SV40增强子 结肠癌特异性 基因-病毒治疗
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让穷人用上AM2——精威A33G
8
作者 魔之左手 《大众硬件》 2006年第11期61-61,共1页
对于喜爱AMD处理器的用户而言,尽管Socket 939接口处理器在能力和性价比方面还相当诱人,但大部分DIYer都会注意到内存市场的尴尬局面,那就是在内存价格普遍增长的同时,DDR400内存的价格甚至已经超过了DDR2800内存。同时由于AM2处理器的... 对于喜爱AMD处理器的用户而言,尽管Socket 939接口处理器在能力和性价比方面还相当诱人,但大部分DIYer都会注意到内存市场的尴尬局面,那就是在内存价格普遍增长的同时,DDR400内存的价格甚至已经超过了DDR2800内存。同时由于AM2处理器的价格下降,快速进入主流,已经开始从中端市场替代Socket 764/939处理器,甚至拥有更高的性价比。所以对倾向于选择AMD处理器的用户而言,AM2处理器无疑是目前的首选,但相对于处理器而言,用于搭配的主板却更难选择,采用新型芯片组的主板价格仍然高高在上,对资金有限的用户来说并不合算,而精威A33G正是满足低端用户的一款AM2主板。 展开更多
关键词 精威a33G AM2 内存
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A33抗体修饰的外泌体给药系统的构建及体外评价
9
作者 李艳 高申 +2 位作者 夏清明 宫春爱 郭慧玲 《药学服务与研究》 CAS 2018年第2期87-91,95,共6页
目的:构建A33抗体修饰的外泌体(exosomes,EXO)包载多柔比星(doxorubicin,DOX)给药系统并进行体外评价。方法:通过化学交联法将A33抗体与羧基化的超顺磁性纳米粒(ultrasmall superparamagnetic iron oxide nanoparticles,USPIO)连接制备... 目的:构建A33抗体修饰的外泌体(exosomes,EXO)包载多柔比星(doxorubicin,DOX)给药系统并进行体外评价。方法:通过化学交联法将A33抗体与羧基化的超顺磁性纳米粒(ultrasmall superparamagnetic iron oxide nanoparticles,USPIO)连接制备探针(A33-USPIO),并利用动态光散射和红外光谱法对连接前后的USPIO进行表征。采用超速离心法分离出人结肠癌细胞株LIM1215细胞来源的EXO包载DOX,并通过透射电镜观察形态。用ELISA法测定EXO和探针结合的最适比例。透析法测定A33抗体修饰的载DOX的EXO给药系统(A33-US-EXO/DOX)体外释放特性。将不同的DOX制剂分别与LIM1215共培养后,用流式细胞仪测定细胞摄取DOX的情况,利用荧光显微镜验证A33-US-EXO/DOX的体外靶向能力。结果:透射电镜下EXO直径约为100nm,2.5μg探针约能与32μg的EXO结合,结合后平均粒径为(187.83±6.76)nm,聚合物分散指数(polymer dispersity index,PDI)为0.21。在pH 7.4、6.0、5.0条件下,DOX组、EXO/DOX组和A33-US-EXO/DOX组的48h累积释药量分别为24.32%、34.07%、62.82%,细胞摄取效率分别为(13.10±1.08)%、(51.53±3.56)%和(85.11±3.91)%。荧光观察显示,A33-US-EXO/DOX与A33抗原阳性的LIM1215细胞大量结合,而与A33抗原阴性的RAW264.7细胞结合较少。结论:本研究成功构建了A33抗原靶向的EXO给药系统,体外实验表明其具有较高的摄取效率和良好的靶向性。 展开更多
关键词 a33抗体 超顺磁性纳米粒 外泌体 多柔比星
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2001年产日产风度A33
10
《汽车与驾驶维修》 2008年第11期40-40,共1页
故障现象：用户反映该车最近油耗过高，80～100km／h匀速行驶时有犯闯的现象，并且熄火后起动困难。
关键词 日产风度a33 故障现象 起动困难 油耗 行驶 熄火
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日产风度A33车ABS故障诊断与维修(二)
11
作者 于京诺 《汽车维护与修理》 2003年第11期3-4,共2页
2 ABS故障诊断 2.1 轮速传感器电路或传感器转子故障诊断故障代码21、22、25、26、31、32、35、36或18所示轮速传感器电路或传感器转子故障的诊断步骤如下。 a.脱开ABS电控单元-执行器连接器和故障代码所示轮速传感器连接器。
关键词 日产风度a33 ABS 故障诊断 维修 轿车
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风度A33车
12
作者 黄勇 《汽车维护与修理》 2010年第7期38-38,共1页
故障现象 一辆日产风度A33轿车，当行驶经过路面上的减速带时后尾部出现金属撞击声。 检查分析接手该车进行路试，确有上述现象。取出后备箱内的备胎、工具等后试车，故障依旧。车主反映曾因此在其他修理厂换过4只减振器及减振弹簧。... 故障现象 一辆日产风度A33轿车，当行驶经过路面上的减速带时后尾部出现金属撞击声。 检查分析接手该车进行路试，确有上述现象。取出后备箱内的备胎、工具等后试车，故障依旧。车主反映曾因此在其他修理厂换过4只减振器及减振弹簧。用举升机升起该车后检查后悬架系统。 展开更多
关键词 日产风度a33轿车 撞击声 金属 尾部 行驶 故障现象 检查分析 减振弹簧
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日产风度A33两缸不点火
13
作者 潘良华 《汽车维修技师》 2005年第4期49-49,48,共2页
关键词 日产风度a33 怠速不稳 轿车 发动机 大修 点火 故障现象
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日产风度A33发动机——电控系统故障检测(六)
14
作者 吉国光 《汽车维修与保养》 2003年第6期20-23,共4页
21.点火系统的检测 (1).检查全面功能 ①.使用CONSULT-Ⅱ诊断仪 a.关闭点火开关,并重新启动发动机,发动机应运转; b.用该诊断仪在"ACTIVE TEST(主动测试)"模式中执行"POWERBANLANCE(功率平衡)"测试,如图46所示;
关键词 日产风度a33 发动机 电控系统 故障检测 故障分析 维修 轿车
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日产风度A33怠速游车,尾气超标
15
作者 李巍 封友国 刘大强 《汽车维修技师》 2005年第1期45-45,共1页
关键词 日产风度a33 发动机怠速 节气门体 加速性能 自动变速器 游车 尾气 超标 汽油 车型
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2004年产日产风度A33 3．0L轿车
16
作者 戴圻春 《汽车与驾驶维修》 2009年第7期37-37,共1页
故障现象：一辆2004年产日产风度30L轿车，车主称制动不灵，制动踏板工作行程过大（俗称制动踏板高）。检查分析：首先确认车主所述故障现象，原地踩制动踏板就能感觉到踏板工作行程过大，快速放松踏板再迅速踏下，此时制动踏板位置能... 故障现象：一辆2004年产日产风度30L轿车，车主称制动不灵，制动踏板工作行程过大（俗称制动踏板高）。检查分析：首先确认车主所述故障现象，原地踩制动踏板就能感觉到踏板工作行程过大，快速放松踏板再迅速踏下，此时制动踏板位置能够变低。 展开更多
关键词 日产风度a33 轿车 制动踏板 故障现象 工作行程 检查分析 制动不灵 自由行程
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2000款日产风度A33左侧围受撞(上)
17
作者 吉国光 《汽车维修技师》 2009年第5期73-74,共2页
一辆正常行驶的2000款日产风度A33轿车突然在十字路口受到左侧开来的违章（闯红灯）车的快速撞击，致使风度轿车抛锚、左侧围前部严重受损，由交警拖来我厂进行检修。
关键词 日产风度a33轿车 侧围 十字路口 风度轿车 闯红灯 行驶 抛锚 交警
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日产风度A33发动机电控系统故障检测(三)
18
作者 吉国光 《汽车维修与保养》 2003年第3期32-35,共4页
8.曲轴位置传感器的检测 发动机上装有两种曲轴位置传感器:一是曲轴位置传感器(参考),位于(上)油底壳上(图11),面向曲轴皮带轮,用于检测上止点信号(120°信号);二是曲轴位置传感器(位置),位于油底壳上(图12),面向信号盘(飞轮)的齿牙... 8.曲轴位置传感器的检测 发动机上装有两种曲轴位置传感器:一是曲轴位置传感器(参考),位于(上)油底壳上(图11),面向曲轴皮带轮,用于检测上止点信号(120°信号);二是曲轴位置传感器(位置),位于油底壳上(图12),面向信号盘(飞轮)的齿牙(轮齿),用于检测曲轴位置信号(1°信号).两种传感器均由永磁铁、铁饼和线圈组成.当发动机运转时,传感器与齿牙之间的间隙周期性变化,传感器附近的磁导率也相应变化.由于磁导率的变化,铁芯附近的磁通量也跟着变化.因此,线圈中产生的信号电压随着变化.ECM接收到电压信号,并检测出曲轴120°信号或1°信号. 展开更多
关键词 日产风度轿车 故障分析 故障诊断 a33发动机 电控系统 故障检测
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日产A33 CEFIRO故障模拟检测(基础篇)
19
《汽车维修与保养》 2003年第4期44-45,共2页
有时候,当故障车辆到汽修厂时,症状不再出现,因此需要去模拟故障发生时的情形和环境,否则无法检测出故障.下面列出一些方法,以模拟客户所经历电控故障时的情形和环境.
关键词 “日产a33 CEFIRO” 故障模拟检测 发动机抖动 电控故障 轿车 维修
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日产风度A33加速不畅
20
作者 孙文学 《汽车维修技师》 2004年第12期47-48,共2页
关键词 日产风度a33 加速 行驶 发动机型号 现象
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