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基于转录组测序技术探讨隐丹参酮对A2780/DDP顺铂耐药细胞的影响及潜在机制
1
作者 陈家鑫 蒋诗情 +3 位作者 陈芯媛 詹子欣 江明华 游翠芳 《中草药》 北大核心 2025年第2期546-557,共12页
目的 基于转录组测序技术探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)联合顺铂(cisplatin,DDP)干预对A2780/DDP细胞的影响及其潜在作用机制。方法 体外培养人卵巢癌A2780和A2780/DDP细胞,将细胞分为对照组、DDP组、DDP+CPT给药组,采用MTS细胞... 目的 基于转录组测序技术探讨隐丹参酮(cryptotanshinone,CPT)联合顺铂(cisplatin,DDP)干预对A2780/DDP细胞的影响及其潜在作用机制。方法 体外培养人卵巢癌A2780和A2780/DDP细胞,将细胞分为对照组、DDP组、DDP+CPT给药组,采用MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒检测细胞存活率、划痕实验检测迁移能力、Transwell实验检测迁移和侵袭能力,探究DDP+CPT干预下对A2780/DDP细胞的影响。获取各组的细胞mRNA进行转录组测序,筛选差异表达基因,拓扑分析得到CPT改善A2780/DDP对DDP耐药的核心靶点,对差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,采用分子对接技术研究CPT与核心靶点的结合能力,实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测核心靶点的mRNA表达情况。结果 A2780/DDP细胞的耐药指数为4;DDP+CPT干预可显著抑制A2780/DDP耐药株的细胞存活率、细胞迁移和细胞侵袭能力(P<0.001)。差异表达基因筛选结果表明,给药组与模型组相比共有253个差异表达基因,其中JUN原癌基因(JUN proto-oncogene gene,JUN)、Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)显著上调(P<0.05),而趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)显著下降(P<0.05)。GO和KEGG结果表明,CPT可能影响TLR信号通路、B细胞受体信号通路、白细胞介素-17等信号通路,从而改善A2780/DDP细胞对DDP的耐药性;RT-qPCR结果表明,CPT可上调JUN、TLR2、NOS2、NQO1的mRNA表达(P<0.001),抑制CXCR4的mRNA表达(P<0.001),改善A2780/DDP对DDP的耐药性。结论 CPT可改善A2780/DDP耐药细胞对DDP的耐药性,其机制可能与CPT上调JUN、TLR2、NOS2、NQO1的mRNA表达,下调CXCR4的mRNA表达有关。 展开更多
关键词 隐丹参酮 顺铂 a2780/DDP细胞 转录组测序 分子对接
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雷帕霉素联合紫杉醇诱导卵巢癌细胞A2780和SKOV3凋亡及其分子机制 被引量：12
2
作者 马湘一 王世宣 +3 位作者 刘琰 刘荣华 卢运萍 马丁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第4期367-370,共4页
背景与目的:研究表明,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在恶性肿瘤发生发展中起重要作用,本研究观察特异性mTOR抑制剂雷帕霉素联合紫杉醇对卵巢癌细胞A2780和SKOV3的作用,并探讨其内在的分子机制。方法:A278... 背景与目的:研究表明,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在恶性肿瘤发生发展中起重要作用,本研究观察特异性mTOR抑制剂雷帕霉素联合紫杉醇对卵巢癌细胞A2780和SKOV3的作用,并探讨其内在的分子机制。方法:A2780、SKOV3细胞经雷帕霉素和紫杉醇处理后,以MTT法检测细胞的增殖情况,金正均法计算q值判断两药的相互作用。以流式细胞仪检测细胞凋亡,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测survivin的表达。结果:雷帕霉素联合紫杉醇可抑制A2780和SKOV3细胞增殖,且随时间延长抑制作用越显著,当两药合用72h时抑制率分别达到34.9%(A2780)和37.1%(SKOV3),与单独用药组相比差异有显著性(P<0.01),金正均法显示各时间点q值均>1.15,显示二者有协同作用。雷帕霉素和紫杉醇可使A2780和SKOV3细胞发生凋亡,并且在两者联用时凋亡率达到最高。经雷帕霉素和紫杉醇作用后的A2780和SKOV3细胞表达survivin较处理前明显下降。结论:体外雷帕霉素和紫杉醇可抑制A2780和SKOV3细胞增殖并诱导其发生凋亡,并可使survivin基因的表达下调,且两者联合应用时可显著增加其抑制作用,具有协同作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 紫杉醇 卵巢肿瘤 a2780细胞 SKOV3细胞 Survivin 凋亡
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PI-3K/Akt抑制剂LY294002对卵巢癌细胞A2780/Taxol多药耐药性的逆转作用 被引量：15
3
作者 石小燕 蔡晓军 +3 位作者 类建翔 曹凤军 潘东风 陈萍 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第4期343-347,共5页
背景与目的:磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)可抑制细胞凋亡,对PI-3K抑制剂的研究可以更好地了解PI-3K的促癌机制,为多种癌症如卵巢癌、乳腺癌等的基因治疗提供线索。本研究目的在于探讨PI-3K/Akt信号通路抑制剂LY294... 背景与目的:磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol 3 kinase,PI-3K)可抑制细胞凋亡,对PI-3K抑制剂的研究可以更好地了解PI-3K的促癌机制,为多种癌症如卵巢癌、乳腺癌等的基因治疗提供线索。本研究目的在于探讨PI-3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对卵巢癌耐紫杉醇细胞株A2780/Taxol多药耐药的逆转作用。方法:用LY294002处理A2780/Taxol细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,MTT法检测细胞对紫杉醇的药物敏感性,RT-PCR检测MDR1mRNA的表达,Western blot方法分析LY294002作用前后磷酸化Akt及P-gp蛋白的表达。结果:10和50μmol/L LY294002干预A2780/Taxol细胞24h后,A2780/Taxol细胞凋亡率分别为(8.84±1.65)%和(20.78±2.47)%,显著高于未干预细胞的凋亡率(1.25±0.78)%(P<0.05);A2780/Taxol细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01),相对逆转效率最高可达(78.08±0.37)%;MDR-1mRNA、磷酸化Akt及P-gp蛋白均明显降低。结论:PI-3K/Akt信号通路的激活与卵巢癌细胞多药耐药的产生有关,PI-3K/Akt抑制剂LY294002可逆转卵巢癌细胞A2780/Taxol的多药耐药。 展开更多
关键词 PI3K/AKT通路 LY294002 卵巢肿瘤 a2780/Taxol细胞 逆转 多药耐药
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橙盖鹅膏菌中过氧麦角甾醇对人卵巢癌A2780S细胞增殖的影响 被引量：9
4
作者 罗禹 周静 +2 位作者 吴瑕 高平 袁小红 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1108-1112,共5页
为了解橙盖鹅膏菌中分离得到的过氧麦角甾醇对人卵巢癌A2780S细胞增殖的影响及其可能的机制,取对数生长期的A2780S细胞,经1.10、2.19、4.38、8.75、17.5、35μmol/d L等浓度下的过氧麦角甾醇作用,以CCK-8法测试24、48和72 h后细胞增殖;... 为了解橙盖鹅膏菌中分离得到的过氧麦角甾醇对人卵巢癌A2780S细胞增殖的影响及其可能的机制,取对数生长期的A2780S细胞,经1.10、2.19、4.38、8.75、17.5、35μmol/d L等浓度下的过氧麦角甾醇作用,以CCK-8法测试24、48和72 h后细胞增殖;经2.19、4.38、8.75μmol/d L浓度的过氧麦角甾醇作用24 h后,倒置显微镜下观察细胞形态,DAPI染色法观察细胞核形态,Annexin V/PI双染流式细胞术测定细胞的早期凋亡率,PI单染流式细胞术测定细胞周期.结果显示,过氧麦角甾醇作用于人卵巢癌A2780S细胞后,17.5μmol/d L、35μmol/d L浓度组48 h、72 h出现大量细胞死亡,贴壁存活细胞数目明显减少,细胞核呈现核浓缩的高量区域及月牙状的特征,细胞早期凋亡率、细胞S期比例显著增加.本研究表明过氧麦角甾醇对A2780S细胞增殖具有明显抑制作用,可能与其阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡有关. 展开更多
关键词 过氧麦角甾醇 a2780S细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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氯化两面针碱对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780 Taxol细胞耐药性的逆转作用 被引量：12
5
作者 冯燕英 刘华钢 +3 位作者 梁燕 张华君 梁乔芳 李俊威 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第13期95-99,共5页
目的:研究氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780 Taxol细胞耐药性的逆转作用及机制。方法:氯化两面针碱干预A2780 Taxol后,应用MTT比色法检测多柔比星(adriamycin,ADM),依托泊苷(etoposide,VP-16),羟基... 目的:研究氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780 Taxol细胞耐药性的逆转作用及机制。方法:氯化两面针碱干预A2780 Taxol后,应用MTT比色法检测多柔比星(adriamycin,ADM),依托泊苷(etoposide,VP-16),羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对A2780Taxol细胞的抑制率;实时荧光定量PCR检测不同给药组对多药耐药基因(MDR1 mRNA)表达的影响;HE染色法观察肿瘤细胞结构的改变;TUNEL法分析其对细胞凋亡的影响。结果:耐药细胞A2780 Taxol对ADM,VP-16,HCPT的耐药倍数分别为1.87,1.07,3.25;经氯化两面针碱干预后,降低了A2780Taxol细胞对抗肿瘤药ADM,VP-16,HCPT的IC50值,可下降A2780 Taxol细胞的多药耐药(MDR1)基因的表达,HE染色可见NC给药组改变了A2780 Taxol细胞的形态结构,TUNEL染色凋亡细胞明显增多,凋亡指数为(58.03±1.46)%。结论:氯化两面针碱能有效逆转A2780 Taxol多药耐药性,具有良好的抗肿瘤药物多药耐药逆转作用。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 多药耐药性 a2780 Taxol细胞 逆转录
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HDAC抑制剂TSA增强卵巢癌细胞株A2780对腺病毒基因转染效率的体外研究 被引量：6
6
作者 陈刚 王蓓蓓 +4 位作者 李辅军 刘德艳 周剑锋 卢运萍 马丁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1196-1200,共5页
背景与目的:腺病毒感染依赖于靶细胞表面柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的表达,肿瘤细胞CAR表达的缺失和下调是造成腺病毒为载体基因治疗效果不佳的根本原因。本研究通过观察组氨酸去乙酰化酶(histone deace... 背景与目的:腺病毒感染依赖于靶细胞表面柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)的表达,肿瘤细胞CAR表达的缺失和下调是造成腺病毒为载体基因治疗效果不佳的根本原因。本研究通过观察组氨酸去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂TrichostatinA(TSA)对卵巢癌细胞株A2780CAR表达水平的影响,探讨HDAC抑制剂在腺病毒载体基因治疗中应用的可能性。方法:分别在TSA作用A2780细胞前后检测CARmRNA和蛋白水平的表达,同时采用流式细胞术测定病毒转染效率,MTT实验评价腺病毒携带的胸苷激酶(ADV/TK)的体外抗瘤效应。结果:TSA处理后,A2780细胞内CARmRNA和蛋白表达明显增高。通过流式细胞仪分析GFP/ADV转染后GFP的表达发现,未处理组细胞转染率为(1.24±0.14)%;5nmol/L和100nmol/LTSA处理48h后,细胞的转染效率分别为(7.58±0.32)%和(7.94±0.28)%。MTT结果表明,ADV/TK介导的体外杀伤作用在5nmol/L和100nmol/LTSA处理组较未处理组增强了4～10倍。结论:TSA可以增强针对卵巢癌细胞的腺病毒基因转染效率,为增强卵巢癌基因治疗效果提供可能的方法。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 a2780细胞株 组氨酸去乙酰化酶 TRICHOSTATIN A/拮抗剂和抑制剂 腺病毒 基因转染 基因疗法 体外实验
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丹皮酚对人卵巢癌细胞A2780s增殖的影响 被引量：5
7
作者 李秉枢 付琼 +3 位作者 孙青 胡敏 陈璐 洪莉 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期122-125,共4页
目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)在体外对人卵巢癌A2780s细胞增殖的影响。方法:将不同浓度的Pae作用于人卵巢癌A2780s细胞,应用MTT法检测Pae对细胞增殖的抑制作用,FCM法检测Pae对细胞周期分布及细胞凋亡率的影响。结果:7.81～250.00mg/LPa... 目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)在体外对人卵巢癌A2780s细胞增殖的影响。方法:将不同浓度的Pae作用于人卵巢癌A2780s细胞,应用MTT法检测Pae对细胞增殖的抑制作用,FCM法检测Pae对细胞周期分布及细胞凋亡率的影响。结果:7.81～250.00mg/LPae对A2780s细胞的增殖均有抑制作用,且随着Pae浓度的增加和作用时间的延长,其增殖抑制作用增强。FCM检测结果显示,31.25～250.00mg/LPae作用48h后,G0/G1期和G2/M期细胞比率下降,S期细胞比率上升;细胞出现凋亡,凋亡率随着Pae浓度的增加而上升。结论:一定浓度的Pae具有抑制人卵巢癌细胞增殖和诱导其凋亡的作用。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 细胞凋亡 丹皮酚 a2780s细胞 体外研究
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丹皮酚通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制人卵巢癌A2780细胞增殖的实验研究 被引量：18
8
作者 李倩男 王琳琳 +1 位作者 汤剑明 洪莉 《中华实用诊断与治疗杂志》 2017年第11期1062-1066,共5页
目的探讨丹皮酚对人卵巢癌A2780细胞的生长抑制及诱导凋亡作用,揭示Wnt/β-catenin信号转导通路分子机制。方法对数生长期人卵巢癌A2780细胞分为对照组(0mmol/L丹皮酚)和0.4、0.8、1.6mmol/L丹皮酚组,采用CCK-8法检测丹皮酚作用24、48、... 目的探讨丹皮酚对人卵巢癌A2780细胞的生长抑制及诱导凋亡作用,揭示Wnt/β-catenin信号转导通路分子机制。方法对数生长期人卵巢癌A2780细胞分为对照组(0mmol/L丹皮酚)和0.4、0.8、1.6mmol/L丹皮酚组,采用CCK-8法检测丹皮酚作用24、48、72h时人卵巢癌A2780细胞增殖活性;丹皮酚作用48h后,应用流式细胞仪检测人卵巢癌A2780细胞周期,采用Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、β-catenin和c-Myc蛋白表达水平;丹皮酚作用0、24、48h,采用划痕实验检测人卵巢癌A2780细胞迁移能力。结果丹皮酚作用24、48、72h,人卵巢癌A2780细胞增殖活性在对照组为(100.00±3.28)%、(100.00±2.34)%、(100.00±2.89)%,在0.4 mmol/L丹皮酚组为(93.26±4.21)%、(80.23±5.43)%、(72.04±4.89)%,在0.8mmol/L丹皮酚组为(81.25±3.13)%、(71.65±4.78)%、(62.32±4.39)%,在1.6mmol/L丹皮酚组为(60.85±2.35)%、(45.89±5.34)%、(35.74±3.19)%,除0.4mmol/L丹皮酚组作用24h外,0.4、0.8、1.6mmol/L丹皮酚组不同作用时间人卵巢癌A2780细胞增殖活性均低于对照组(P<0.05),0.8 mmol/L丹皮酚组作用24h,1.6mmol/L丹皮酚组作用24、48、72h人卵巢癌A2780细胞增殖活性均低于0.4 mmol/L丹皮酚组(P<0.05),1.6mmol/L丹皮酚组作用24、48、72h人卵巢癌A2780细胞增殖活性均低于0.8 mmol/L丹皮酚组(P<0.05),0.4、0.8、1.6mmol/L丹皮酚组作用72h人卵巢癌A2780细胞增殖活性低于24h(P<0.05);丹皮酚作用48h,0.4、0.8、1.6mmol/L组G1期细胞比例(73.08%,68.46%、52.95%)低于对照组(78.30%),S期细胞比例(19.61%、26.11%、39.05%)高于对照组(17.48%)(P<0.05);丹皮酚作用48h,0.4、0.8、1.6mmol/L组Bax蛋白表达明显高于对照组,0.8、1.6mmol/L组Bcl-2、β-catenin和c-Myc蛋白表达明显低于对照组(P<0.05);划痕实验结果表明,细胞迁移能力随丹皮酚浓度增加和作用时间延长明显下降(P<0.05)。结论丹皮酚可抑制人卵巢癌A2780细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号转导通路有关。 展开更多
关键词 卵巢癌 a2780细胞 丹皮酚 凋亡 细胞周期 细胞迁移
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姜黄素诱导卵巢癌细胞株A2780细胞周期阻滞和凋亡 被引量：7
9
作者 郑丽端 童强松 +1 位作者 吴翠环 曾甫清 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期209-211,215,共4页
目的　探讨姜黄素对卵巢癌细胞株 A2 780的生长抑制作用及其机制。方法　 10～ 5 0μm ol/ L姜黄素作用 6～2 4 h后 ,MTT比色法检测细胞生长活性 ,流式细胞仪测定细胞周期时相变化 ,末端 Td T酶标记技术和 DNA L adder检测细胞凋亡 ;透... 目的　探讨姜黄素对卵巢癌细胞株 A2 780的生长抑制作用及其机制。方法　 10～ 5 0μm ol/ L姜黄素作用 6～2 4 h后 ,MTT比色法检测细胞生长活性 ,流式细胞仪测定细胞周期时相变化 ,末端 Td T酶标记技术和 DNA L adder检测细胞凋亡 ;透射电镜观察细胞超微结构变化。结果　姜黄素能显著抑制卵巢癌细胞株 A 2 780的体外生长 ,呈时间与剂量依赖性 ;细胞周期阻滞于 G0 / G1 期 ;部分细胞出现凋亡形态学改变 ,凝胶电泳可见“梯形”条带 ,凋亡率为 6 .4 1%～ 2 8.4 8% (P<0 .0 1)。结论　姜黄素通过抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡等机制 。 展开更多
关键词 卵巢癌 a2780细胞株 姜黄素 中药 细胞周期阻滞 细胞凋亡 作用机制
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丹参酮ⅡA对人卵巢癌A2780细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用 被引量：11
10
作者 祝敏 陈萍 +4 位作者 陈丹 石小燕 孔霞 郭凌郧 郑飞 《中国中医急症》 2009年第4期596-597,共2页
目的研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人卵巢癌A2780细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法以四甲基偶氮唑蓝(M TT)法测定TanⅡA对人卵巢癌A2780细胞的增殖抑制;流式细胞仪检测细胞周期。结果TanⅡA对人卵巢癌A2780细胞的生长具有抑制作用,其作用... 目的研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人卵巢癌A2780细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用。方法以四甲基偶氮唑蓝(M TT)法测定TanⅡA对人卵巢癌A2780细胞的增殖抑制;流式细胞仪检测细胞周期。结果TanⅡA对人卵巢癌A2780细胞的生长具有抑制作用,其作用强度随药物作用时间及浓度的增加而增强。实验组较对照组G0/G1期细胞数量增多,而S期细胞数量减少。4.0mg/L TanⅡA作用0、24、48、72h后的凋亡率分别为4.52%、19.7%、25.3%、40.4%,随时间的延长而凋亡细胞增多。结论TanⅡA对人卵巢癌A2780细胞有明显的增殖抑制和诱导凋亡的作用,且其作用呈时间-剂量依赖性。 展开更多
关键词 TAN ⅡA 卵巢癌 a2780细胞细胞凋亡
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miR-574-3p通过下调CBX2增强了卵巢癌A2780细胞对紫杉醇的敏感性 被引量：6
11
作者 谢文阳 熊员焕 郭桃英 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期950-956,共7页
目的探讨miR-574-3p通过染色体盒同源物2(chromobox homolog 2,CBX2)调控卵巢癌A2780细胞对紫杉醇敏感性的影响。方法采用RT-qPCR方法检测miR-574-3p在正常卵巢上皮IOSE386和IOSE397细胞以及卵巢癌A2780细胞和紫杉醇耐药A2780/Tax细胞... 目的探讨miR-574-3p通过染色体盒同源物2(chromobox homolog 2,CBX2)调控卵巢癌A2780细胞对紫杉醇敏感性的影响。方法采用RT-qPCR方法检测miR-574-3p在正常卵巢上皮IOSE386和IOSE397细胞以及卵巢癌A2780细胞和紫杉醇耐药A2780/Tax细胞中的表达水平。CCK-8检测A2780/Tax细胞增殖活力;Transwell实验检测A2780/Tax细胞侵袭情况;双荧光素酶报告基因验证miR-574-3p与CBX2的调控关系;Western blot检测CBX2蛋白的表达。结果miR-574-3p在A2780细胞和A2780/Tax细胞中低表达,且在紫杉醇耐药A2780/Tax细胞中表达最低。过表达miR-574-3p可显著抑制A2780/Tax细胞增殖和侵袭。双荧光素酶报告基因结果证实miR-574-3p靶向下调CBX2的表达水平。证实过表达miR-574-3p通过下调CBX2抑制A2780/Tax细胞增殖和侵袭。结论miR-574-3p靶向下调CBX2增强了A2780细胞对紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 卵巢癌 a2780细胞 miR-574-3p CBX2 紫杉醇 化疗敏感性
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TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用及其对MCM2和CA-Ⅸ mRNA表达的影响 被引量：2
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作者 吕昌帅 张友忠 +2 位作者 丁佰娟 姜侃 刘洪丽 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期850-855,F0002,共7页
目的:观察四-(N-甲基-4-吡啶基)卟啉(TMPyP4)对人卵巢癌A2780细胞的光动力学杀伤作用及其对微型染色体维持蛋白2(MCM2)和碳酸酐酶Ⅸ(CA-Ⅸ)mRNA表达水平的影响,阐明TMPyP4-PDT(光动力疗法)对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用机制。方法:体... 目的:观察四-(N-甲基-4-吡啶基)卟啉(TMPyP4)对人卵巢癌A2780细胞的光动力学杀伤作用及其对微型染色体维持蛋白2(MCM2)和碳酸酐酶Ⅸ(CA-Ⅸ)mRNA表达水平的影响,阐明TMPyP4-PDT(光动力疗法)对人卵巢癌A2780细胞的杀伤作用机制。方法:体外培养人卵巢癌A2780细胞株,按不同处理因素分为空白对照组、单纯TMPyP4组、单纯PDT组和TMPyP4-PDT组。采用CCK-8法检测TMPyP4-PDT对A2780细胞株的增殖抑制作用。流式细胞术测定不同浓度TMPyP4对A2780细胞株凋亡的影响。光镜下观察各组细胞HE染色的形态学变化。实时荧光定量PCR法检测MCM2和CA-IX mRNA表达水平的变化。结果:与空白对照组比较,单纯TMPyP4组随着药物浓度的增加,细胞的增殖抑制率逐渐增加(P<0.05);单纯PDT组细胞增殖抑制率增加不明显(P>0.05);TMPyP4-PDT组细胞增殖抑制率随着药物浓度及激光能量密度的增加而增加(P<0.05)。流式细胞术检测,TMPyP4-PDT可诱导A2780细胞凋亡,在激光能量密度为4J.cm-2的条件下,3、6、15、30和60μmol.L-1 TMPyP4作用4h,A2780细胞凋亡率分别为(9.46±0.04)%、(17.7±0.3)%、(25.4±0.2)%、(30.2±0.2)%和(66.3±0.3)%。光镜下可观察到空白对照组及单纯PDT组贴壁细胞多,无核固缩及核碎裂样改变;单纯TMPyP4组及TMPyP4-PDT组贴壁细胞减少,出现核固缩、空泡及部分胞浆溶解样改变。实时荧光定量PCR法检测,在激光能量密度为4J.cm-2的条件下,3、6、15、30和60μmol.L-1TMPyP4作用4h,MCM2和CA-IX mRNA表达水平明显降低,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:TMPyP4-PDT对人卵巢癌A2780细胞有明显杀伤作用,其机制可能与负性调节MCM2和CA-Ⅸ的表达有关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 a2780细胞 四-(N-甲基-4-吡啶基)卟啉 光动力治疗 微型染色体维持蛋白 碳酸酐酶Ⅸ
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丹皮酚协同顺铂对人卵巢癌细胞A2780s的增殖抑制及促凋亡作用 被引量：2
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作者 付琼 洪莉 +2 位作者 李秉枢 陈璐 胡敏 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第1期28-31,68,共5页
目的:探讨丹皮酚(Pae)单药及联合顺铂(CDDP)对人卵巢癌细胞A2780s的增殖抑制,凋亡诱导作用及对细胞周期分布的影响。方法:以不同浓度的Pae、CDDP和两药联合作用于人卵巢癌细胞A2780s,采用MTT法测定药物对体外培养的人卵巢癌细胞A2780s... 目的:探讨丹皮酚(Pae)单药及联合顺铂(CDDP)对人卵巢癌细胞A2780s的增殖抑制,凋亡诱导作用及对细胞周期分布的影响。方法:以不同浓度的Pae、CDDP和两药联合作用于人卵巢癌细胞A2780s,采用MTT法测定药物对体外培养的人卵巢癌细胞A2780s增殖的抑制作用,应用两药相互作用指数(CDI)进行联合用药分析,流式细胞仪测定细胞凋亡情况及细胞周期分布的变化。结果:Pae(7.81-250mg/L)和CDDP(0.625-20mg/L)单独应用均对人卵巢癌细胞A2780s有抑制作用,呈现剂量-时间依赖效应关系。Pae在62.5mg/L与CDDP在5mg/L联合应用时协同作用最为显著(CDI=0.615)。流式细胞仪检测联合用药组(Pae62.5mg/L+CDDP5mg/L)凋亡率(44.9%)明显高于对照组和单独用药组。结论:Pae与CDDP均能抑制人卵巢癌细胞A2780s的增殖并诱导其发生凋亡,联合应用具有明显协同抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 丹皮酚 顺铂 a2780s细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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Twist1与Jagged1基因在人卵巢癌A2780细胞顺铂耐药中的作用 被引量：5
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作者 杨将 邢辉 +4 位作者 洪莉 卢丹华 李倩男 刘耀丹 何松明 《中华实用诊断与治疗杂志》 2017年第11期1067-1071,共5页
目的探讨碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist basic helix-loop-helix transcription factor 1,Twist1)与Notch信号通路配体Jagged1(Notch ligand Jagged-1,Jagged1)在人卵巢癌A2780细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药中的作用。方法实验分为敏... 目的探讨碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist basic helix-loop-helix transcription factor 1,Twist1)与Notch信号通路配体Jagged1(Notch ligand Jagged-1,Jagged1)在人卵巢癌A2780细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药中的作用。方法实验分为敏感组(人卵巢癌DDP敏感A2780细胞),耐药组(DDP耐药A2780/DDP细胞),转染组[应用小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术转染A2780/DDP细胞,干扰Twist1基因表达为A2780/DDP/si-Twist1、干扰Jagged1基因表达为A2780/DDP/si-Jagged1、空转不干扰Twist1及Jagged1基因表达为A2780/DDP/si-NC]。采用Western blot法检测3组Twist1、Jagged1蛋白表达水平;采用CCK-8比色法检测耐药组和转染组细胞DDP敏感性,生长曲线分析耐药组和转染组细胞增殖状况,流式细胞仪检测耐药组和转染组细胞凋亡情况。结果耐药组A2780/DDP细胞Twist1和Jagged1蛋白表达水平均高于敏感组A2780细胞(P<0.05);转染组A2780/DDP/si-Twist1细胞Twist1和Jagged1蛋白表达水平均低于耐药组A2780/DDP细胞和转染组A2780/DDP/si-NC细胞(P<0.05);转染组A2789/DDP/si-Jagged1细胞Jagged1蛋白表达水平低于耐药组A2780/DDP细胞和转染组A2780/DDP/si-NC细胞(P<0.05),Twist1蛋白表达水平与耐药组A2780/DDP细胞和转染组A2780/DDP/si-NC细胞比较差异无统计学意义(P>0.05);转染组A2780/DDP/si-Twist1细胞对DDP的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)[(19.53±0.32)mg/L]低于耐药组A2780/DDP细胞[(30.57±0.27)mg/L]和转染组A2780/DDP/si-NC细胞[(29.61±0.35)mg/L],细胞凋亡率[(34.74±3.15)%]高于耐药组A2780/DDP细胞[(21.56±1.99)%]和转染组A2780/DDP/si-NC细胞[(23.49±2.27)%](P<0.05)。结论 Twist1可通过调控Jagged1基因表达,介导人卵巢癌A2780细胞的增殖和凋亡,参与对DDP耐药的调节。 展开更多
关键词 卵巢癌 a2780细胞 碱性螺旋-环-螺旋转录因子1 JAGGED1 小干扰RNA 顺铂 耐药
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KDM2A对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780增殖和凋亡的影响及机制研究 被引量：2
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作者 卢丹华 洪莉 +2 位作者 杨将 高利昆 曾婉玲 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第16期3001-3006,3011,共7页
目的:探讨赖氨酸脱甲基酶2A(Lysine-specific demethylase 2A,KDM2A)对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的人卵巢癌细胞A2780细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制。方法:通过构建慢病毒载体转染A2780/DDP,分为A2780、A2780/DDP、A2780/DDP/KDM... 目的:探讨赖氨酸脱甲基酶2A(Lysine-specific demethylase 2A,KDM2A)对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的人卵巢癌细胞A2780细胞增殖和凋亡的影响及其可能作用机制。方法:通过构建慢病毒载体转染A2780/DDP,分为A2780、A2780/DDP、A2780/DDP/KDM2A(转染KDM2A)、A2780/DDP/Jagged1(转染Jagged1)以及A2780/DDP/NC(转染病毒载体)组。采用Western blot检测3组KDM2A、Jagged1、Bcl2和BAX蛋白表达,CCK8和平板克隆形成实验检测细胞对顺铂的敏感性,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:A2780/DDP细胞KDM2A和Jagged1的蛋白表达水平均显著高于A2780细胞(P<0.05),且A2780/DDP/KDM2A细胞中KDM2A和Jagged1的蛋白表达均低于A2780/DDP以及阴性对照组A2780/DDP/NC(P<0.05);A2780/DDP/Jagged1细胞的Jagged1蛋白表达低于A2780/DDP以及A2780/DDP/NC(P<0.05),而其KDM2A蛋白的表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同浓度DDP处理的A2780/DDP/KDM2A细胞的生长抑制率均显著高于A2780/DDP/NC和A2780/DDP细胞(P<0.05),A2780/DDP/KDM2A细胞克隆形成数量亦明显高于A2780/DDP/NC和A2780/DDP细胞(P<0.05)。A2780/DDP/KDM2A细胞凋亡率为(25.84±3.27)%,明显高于A2780/DDP细胞[(14.29±1.96)%](P<0.05)和A2780/DDP/NC细胞[(12.46±2.15)%](P<0.05)。A2780/DDP/KDM2A细胞中Bcl-2蛋白表达明显低于A2780/DDP细胞(P<0.05),而A2780/DDP/KDM2A细胞Bax的表达水平却高于A2780/DDP细胞(P<0.05)。结论:KDM2A可能通过上调Jagged1的表达,促进人卵巢癌细胞A2780的增殖并抑制其凋亡,进而降低人卵巢癌耐药细胞A2780的顺铂敏感性。 展开更多
关键词 卵巢癌 a2780细胞 KDM2A JAGGED1 顺铂 耐药
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下调Beclin1抑制卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的耐药性 被引量：2
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作者 郭云鸿 田晓予 +1 位作者 邓巧子 张克群 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期615-621,共7页
目的:探究敲减Beclin1表达对卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药的影响及其相关机制。方法:以Western blotting及qPCR检测卵巢癌细胞株A2780及耐药细胞株A2780/DDP中Beclin1的表达情况;A2780/DDP细胞转染Beclin1 siRNA后,用MTT法检测细胞对顺铂... 目的:探究敲减Beclin1表达对卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药的影响及其相关机制。方法:以Western blotting及qPCR检测卵巢癌细胞株A2780及耐药细胞株A2780/DDP中Beclin1的表达情况;A2780/DDP细胞转染Beclin1 siRNA后,用MTT法检测细胞对顺铂敏感性的变化,克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成情况,流式细胞术检测各组细胞的凋亡,MDC荧光染色检测细胞的自噬情况,Western blotting检测自噬相关蛋白、溶酶体相关膜蛋白Lamp-2以及组织蛋白酶Cathepsin B的表达情况。结果:顺铂耐药细胞株A2780/DDP中Beclin1 mRNA及蛋白的表达水平均明显高于A2780细胞株(均P<0.05),在A2780细胞中加入顺铂刺激后Beclin1蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。敲减Beclin1表达可促进顺铂诱导的A2780/DDP细胞的凋亡(P<0.05)、抑制细胞自噬的发生(P<0.05)、减少细胞克隆形成(P<0.05)和增加细胞对顺铂的敏感性(P<0.05);Western blotting结果显示,敲减Beclin1可上调A2780/DDP细胞中cleaved-caspase 3和Cathepsin B的蛋白水平,下调Atg3、Atg7、LC3Ⅱ/Ⅰ、Lamp-2的表达水平(均P<0.05)。结论:敲减Beclin1表达可提高A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与调节自噬相关蛋白表达抑制细胞保护性自噬和影响溶酶体功能,从而促进顺铂诱导耐药细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 BECLIN1 卵巢癌 a2780细胞 顺铂 耐药 细胞自噬 凋亡
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藤茶双氢杨梅树皮素对Hela细胞及A2780细胞增殖的抑制作用 被引量：4
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作者 张玉萌 郑作文 伦玉宁 《中国药业》 CAS 2009年第7期6-7,共2页
目的探讨藤茶双氢杨梅树皮素(ampelopsin,APS)的抗肿瘤作用。方法以四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)、克隆形成法观察APS对Hela细胞及A2780细胞的体外抑制作用。结果APS均能明显抑制体外培养的Hela细胞及A2780细胞的生长,MTT法的半数抑制浓... 目的探讨藤茶双氢杨梅树皮素(ampelopsin,APS)的抗肿瘤作用。方法以四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)、克隆形成法观察APS对Hela细胞及A2780细胞的体外抑制作用。结果APS均能明显抑制体外培养的Hela细胞及A2780细胞的生长,MTT法的半数抑制浓度(IC50)分别为24.6μg/mL和1.2μg/mL,集落形成法中APS质量浓度在4.4～22.2μg/mL时抑制率均为100%。结论藤茶APS对体外培养的Hela细胞及A2780细胞均有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 藤茶 抗肿瘤作用 HELA细胞 a2780细胞
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哥纳三醇类似物抗A2780肿瘤细胞活性及三维定量构效关系研究 被引量：2
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作者 闫冬 陈虹 +4 位作者 徐鑫 程卯生 王火 李爱秀 史莉莉 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期571-576,共6页
以合成的54个哥纳三醇类似物为研究对象, 测试了其体外抑制肿瘤A2780细胞株的活性, 对其中的37个化合物用比较分子力场(CoMFA)研究了哥纳三醇类似物结构与抑制A2780肿瘤细胞活性的三维定量构效关系, 提出了对哥纳香醇甲结构改造的方法,
关键词 哥纳三醇类似物 a2780肿瘤细胞 抗肿瘤活性 三维定量构效关系 比较分子力场 结构改造
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核糖体蛋白RPL41对人卵巢癌A2780细胞增殖和凋亡的影响及其机制 被引量：4
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作者 张洁 杨菁 +2 位作者 程艳香 黄志欣 杨冬咏 《临床和实验医学杂志》 2020年第1期20-23,共4页
目的研究核糖体蛋白RPL41对人卵巢癌A2780细胞增殖和凋亡的影响,并分析其潜在凋亡机制。方法不同浓度RPL41(0μM、20μM、50μM、100μM)处理A2780细胞,分为对照组和RPL41低、中、高剂量组。采用MTT法检测人卵巢癌A2780细胞活力变化;采... 目的研究核糖体蛋白RPL41对人卵巢癌A2780细胞增殖和凋亡的影响,并分析其潜在凋亡机制。方法不同浓度RPL41(0μM、20μM、50μM、100μM)处理A2780细胞,分为对照组和RPL41低、中、高剂量组。采用MTT法检测人卵巢癌A2780细胞活力变化;采用Hoechst染色法检测A2780细胞凋亡情况;采用流式细胞仪检测A2780细胞周期;采用蛋白印记(Western Blot)法检测A2780细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达;采用RNA干扰技术沉默RPL41,分为NC组和si RPL41组,Western Blot检测沉默RPL41后A2780细胞中Bcl-2和Bax的表达。结果与对照组相比,糖体蛋白RPL41可以抑制人卵巢癌A2780细胞的增殖,具有剂量依赖性(P<0.05);RPL41剂量依赖性引起A2780细胞凋亡(P<0.05);RPL41可以显著上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达,呈浓度依赖性(P<0.05);沉默RPL41表达后,A2780细胞中Bcl-2的表达较NC组显著上升,Bax的表达较NC组显著下降(P<0.05)。结论RPL41可呈剂量依赖性抑制卵巢癌A2780细胞的增殖,并可能通过上调Bax表达、下调Bcl-2表达,参与细胞程序化死亡机制,导致A2780细胞凋亡。 展开更多
关键词 人卵巢癌a2780细胞 核糖体蛋白RPL41 细胞增殖 细胞凋亡 Bcl-2 BAX
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华蟾素联合顺铂对卵巢癌细胞A2780增殖及凋亡的影响 被引量：7
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作者 王成双 佐满珍 《肿瘤学杂志》 CAS 2017年第1期30-34,共5页
[目的]研究华蟾素联合顺铂对卵巢癌细胞A2780增殖、凋亡的影响。[方法]采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测华蟾素联合顺铂对卵巢癌细胞A2780的半数抑制浓度(IC_(50))和细胞生长抑制率,采用流式细胞术检测细胞周期,Hoechst... [目的]研究华蟾素联合顺铂对卵巢癌细胞A2780增殖、凋亡的影响。[方法]采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测华蟾素联合顺铂对卵巢癌细胞A2780的半数抑制浓度(IC_(50))和细胞生长抑制率,采用流式细胞术检测细胞周期,Hoechst染色检测细胞凋亡。[结果]华蟾素及顺铂能抑制细胞增殖,华蟾素IC_(50)为0.56mg/ml;顺铂IC_(50)为2.8μg/ml;药物对癌细胞的生长抑制率随时间延长而增强。华蟾素和顺铂对A2780细胞表现出凋亡作用,华蟾素使A2780细胞周期停滞于S期(P<0.01),顺铂使A2780细胞周期停滞于G0/G1期(P<0.05)。[结论 ]华蟾素联合顺铂可诱导A2780细胞周期阻滞和细胞凋亡,从而抑制A2780细胞生长。 展开更多
关键词 华蟾素 顺铂 细胞增殖 细胞凋亡 卵巢肿瘤 a2780细胞
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