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结节性皮肤病病毒A27L蛋白的可溶性表达及其多克隆抗体制备
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作者 包燕玲 宋昱庆 +7 位作者 户鑫兵 张格林 田占成 关贵全 罗建勋 苟惠天 殷宏 独军政 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第8期1057-1064,共8页
旨在获得结节性皮肤病病毒(LSDV)的重组A27L蛋白并制备其多克隆抗体,将密码子优化的A27L基因进行人工合成,随后克隆至pET-28a表达载体中,成功构建重组表达质粒pET-28a-A27L,将其转化入BL21(DE3)感受态细胞中,用0.5 mmol/L IPTG进行诱导... 旨在获得结节性皮肤病病毒(LSDV)的重组A27L蛋白并制备其多克隆抗体,将密码子优化的A27L基因进行人工合成,随后克隆至pET-28a表达载体中,成功构建重组表达质粒pET-28a-A27L,将其转化入BL21(DE3)感受态细胞中,用0.5 mmol/L IPTG进行诱导表达,利用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析。经优化表达条件获得分子质量约为19 k Da的可溶性重组A27L蛋白。采用High Affinity Ni-Charged Resin FF对可溶性表达产物进行纯化,成功获得高纯度的重组A27L蛋白,将其免疫新西兰大白兔4次后收集血清,Western-blot分析和间接免疫荧光鉴定结果表明A27L多克隆抗体可特异识别BHK-21细胞中表达的重组A27L蛋白。本研究利用大肠杆菌成功表达了可溶性重组LSDV A27L蛋白,并制备出特异的A27L多克隆抗体,为深入研究A27L蛋白的生物学功能以及研发结节性皮肤病疫苗和诊断技术奠定了基础。 展开更多
关键词 结节性皮肤病病毒 a27L蛋白 可溶性表达 多克隆抗体
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基于猴痘病毒A27L蛋白的间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:6
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作者 朱俊达 王爽 +6 位作者 任书凝 张子卉 李雅睿 刘国瑞 吴文学 王永强 彭辰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第10期1-7,共7页
猴痘病毒(MPXV)是一种能引起人兽共患病的正痘病毒属(Orthopoxvirus)成员,在人群和野生动物中具有较高的感染率,对人类公共卫生安全造成重大威胁。为了建立快速、准确的MPXV感染抗体ELISA检测方法,对人群和动物中MPXV感染情况进行流行... 猴痘病毒(MPXV)是一种能引起人兽共患病的正痘病毒属(Orthopoxvirus)成员,在人群和野生动物中具有较高的感染率,对人类公共卫生安全造成重大威胁。为了建立快速、准确的MPXV感染抗体ELISA检测方法,对人群和动物中MPXV感染情况进行流行病学监测,本研究构建了MPXV-A27L蛋白的原核表达系统,以其作为包被抗原建立了MPXV间接ELISA抗体检测方法,并优化了一系列反应条件,确定了检测结果判定标准,评估了建立方法的特异性、重复性和敏感性。结果显示,成功表达了MPXV-A27L蛋白,确定了ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度为0.25μg/mL;1%BSA封闭1 h;待检血清1∶200稀释,37℃孵育30 min;酶标二抗1∶20000稀释,孵育30 min;底物显色10 min。待检血清样品OD_(450)值>0.316时判定为阳性,OD_(450)值<0.262时判定为阴性,OD_(450)值介于0.262~0.316时则判为可疑。该检测方法与山羊痘病毒属的山羊痘病毒(GTPV)、绵羊痘病毒(SPPV)和牛结节性皮肤病病毒(LSDV)阳性血清不发生交叉反应;批内变异系数为2.75%~7.45%,批间变异系数为6.55%~9.59%;该方法可检测到血清最大稀释度为1∶104。结果表明,本研究建立的MPXV间接ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、重复性和敏感性,为MPXV的临床检测和流行病学调查提供了依据,对于猴痘疫情的防控具有重要作用。 展开更多
关键词 猴痘病毒 a27L蛋白 间接ELISA
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TSD-10kW中波全固态数字调制广播发射机A27射频输出监测板可调电容故障处理 被引量:4
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作者 李霞 《西部广播电视》 2015年第12期211-211,共1页
TSD-10kW中波全固态数字调制(DAM)广播发射机是上海明珠广播电视科技有限公司生产的全固态数字调幅发射机,由于该机采用数字调制技术,克服了以往各种模拟调制难以避免的各种非线性失真,具有极好的动态响应,工作效率高,各项电声技术指... TSD-10kW中波全固态数字调制(DAM)广播发射机是上海明珠广播电视科技有限公司生产的全固态数字调幅发射机,由于该机采用数字调制技术,克服了以往各种模拟调制难以避免的各种非线性失真,具有极好的动态响应,工作效率高,各项电声技术指标优于其他类模拟调制的广播发射机。 展开更多
关键词 广播发射机 a27 TSD-10kW 数字调制 模拟调制 线性失真 故障处理 电容值 广播电视 调幅发射机
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Isolation,identification and characterization of an algicidal bacterium from Lake Taihu and preliminary studies on its algicidal compounds 被引量:16
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作者 Chuan Tian Xianglong Liu +3 位作者 Jing Tan Shengqin Lin Daotang Li Hong Yang 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第10期1823-1831,共9页
In an effort to identify a bio-agent capable of controlling cyanobacterial blooms, we isolated a bacterial strain, A27, which exhibited strong algicidal activity against the dominant bloom-forming species of Microcyst... In an effort to identify a bio-agent capable of controlling cyanobacterial blooms, we isolated a bacterial strain, A27, which exhibited strong algicidal activity against the dominant bloom-forming species of Microcystis aeruginosa in Lake Taihu. Based on 16S rRNA gene sequence analysis, this strain belongs to the genus Exiguobacterium. This is the first report of an algicidal bacterial strain belonging to the genus Exiguobacterium. Strain A27 exhibited algicidal activity against a broad range of cyanobacteria, but elicited little or no algicidal activity against the two green algal strains tested. The algicidal activity of strain A27 was shown to be dependent on the density of the bacteria and to have a threshold density of 1.5×106 CFU/mL. Our data also showed that the algicidal activity of strain A27 depended on different growth stages ofMicrocystis aeruginosa (exponential ≈ lag phase 〉 early stationary) rather than that of the bacterium itself. Our results also suggested the algicidal activity of strain A27 occurred via the production of extracellular algicidal compounds. Investigation of the algicidal compounds revealed that there were at least two different algicidal compounds produced by strain A27. These results indicated that strain A27 has great potential for use in the control of outbreaks of cyanobacterial blooms in Lake Taihu. 展开更多
关键词 algicidal bacteria freshwater cyanobacteriat bloom Microcystis aeruginosa Exiguobacterium sp. a27
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TSD-10DAM全固态中波发射机天线零位过高的原因 被引量:3
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作者 陈光宇 《西部广播电视》 2014年第10期139-141,共3页
TSD-10DAM全固态中波数字调幅发射机在工作中有时出现天线零位表指示过高,同时伴有自动降功率的现象。经技术人员检查分析,得出引起天线零位表指示过高的主要原因是:天调网络随着季节变化引起网络参数变化;射频输出取样板A26的高频接地... TSD-10DAM全固态中波数字调幅发射机在工作中有时出现天线零位表指示过高,同时伴有自动降功率的现象。经技术人员检查分析,得出引起天线零位表指示过高的主要原因是:天调网络随着季节变化引起网络参数变化;射频输出取样板A26的高频接地不良引起A26板取样电路自激;射频输出监视板A27电路中调试开关SW1和SW5有漏电现象引起的电路误检。 展开更多
关键词 天线零位 高频接地 射频输出取样板A26 射频输出监视板a27
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