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基于扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应法的A1/A2牛奶鉴别试剂盒的开发及应用 被引量：3
1
作者 张娟 于文杰 +1 位作者 王楠 陈爱亮 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第7期133-140,共8页
目的基于扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应(amplification refractory mutation system polymerase chain reaction,ARMS-PCR)技术,开发A1A2牛奶鉴别试剂盒,并对市场上A2牛奶产品进行检测应用,实现对A2牛奶的鉴别检测。方法本研究先利用... 目的基于扩增阻滞突变系统-聚合酶链式反应(amplification refractory mutation system polymerase chain reaction,ARMS-PCR)技术,开发A1A2牛奶鉴别试剂盒,并对市场上A2牛奶产品进行检测应用,实现对A2牛奶的鉴别检测。方法本研究先利用D-loop基因片段设计了牛内参基因引物探针组(标记FAM荧光)。随后,在β-酪蛋白基因突变位点分别设计了A1基因引物探针组和A2基因引物探针组(均标记VIC荧光)。基于ARMS-PCR技术构建了双通道ARMS-PCR反应体系与程序,进而成功开发了A1A2牛奶实时荧光ARMS-PCR试剂盒。为进一步验证试剂盒性能,将其应用于市场上A2牛奶的检测,并将检测结果与DNA测序法结果对比。结果本试剂盒特异性强,检测DNA灵敏度为0.1 ng/L;10份市售实际样品的应用检测结果与测序结果一致。结论本试剂盒特异性好,灵敏度高、准度度高,适用于A2牛奶的真实性鉴别。 展开更多
关键词 a2牛奶 Β-酪蛋白 扩增阻滞突变系统聚合酶链式反应反应技术 鉴别 试剂盒
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北京地区奶牛场A2基因型纯合个体的调查 被引量：3
2
作者 吕小青 杨宇泽 +4 位作者 赵凤 刘林 麻柱 赵春颖 路永强 《中国奶牛》 2021年第9期28-31,共4页
牛奶蛋白主要分为乳清蛋白和酪蛋白,其中酪蛋白的45%为β-酪蛋白,β-酪蛋白有两个主要的变异型,即A1型和A2型。为了解北京地区奶牛场A2型β-酪蛋白的分布情况,本研究采用PCR扩增牛β-酪蛋白(CSN2)部分基因片段后,用DdeⅠ对扩增产物进行... 牛奶蛋白主要分为乳清蛋白和酪蛋白,其中酪蛋白的45%为β-酪蛋白,β-酪蛋白有两个主要的变异型,即A1型和A2型。为了解北京地区奶牛场A2型β-酪蛋白的分布情况,本研究采用PCR扩增牛β-酪蛋白(CSN2)部分基因片段后,用DdeⅠ对扩增产物进行酶切,建立了PCR-RFLP检测A2基因的方法。根据对北京地区155头荷斯坦公牛β-酪蛋白基因型检测的结果统计,A2A2基因型的种公牛大约占34.2%。之后通过对A2A2公牛家系进行血统分析,筛选出A2纯合型公牛后代女儿2035头,并利用PCR-RFLP对这些奶牛个体进行A2基因型检测,发现1137头A2A2纯合型个体。本研究为纯A2型β-酪蛋白牛群的选育提供了基础。 展开更多
关键词 奶牛 Β-酪蛋白 a2奶 基因型
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液相色谱-高分辨串联质谱法检测牛奶中A1和A2β-酪蛋白 被引量：9
3
作者 刘泽阳 李明 +2 位作者 吴佩泽 宁杨 梁大鹏 《吉林大学学报（理学版）》 CAS 北大核心 2021年第3期696-702,共7页
建立一种基于液相色谱-高分辨串联质谱(LC-HRMS/MS)方法检测牛奶中A1和A2β-酪蛋白.采用等电点沉淀法从牛奶中提取酪蛋白,经胰蛋白酶酶解后,将酶解产物进行LC-HRMS/MS分析,选择含有差异氨基酸残基(第67位)的肽段作为特征肽段对A1和A2β... 建立一种基于液相色谱-高分辨串联质谱(LC-HRMS/MS)方法检测牛奶中A1和A2β-酪蛋白.采用等电点沉淀法从牛奶中提取酪蛋白,经胰蛋白酶酶解后,将酶解产物进行LC-HRMS/MS分析,选择含有差异氨基酸残基(第67位)的肽段作为特征肽段对A1和A2β-酪蛋白进行区分.采用Tris-HCl缓冲溶液充分溶解酪蛋白,在酶解反应体系中添加乙腈以提高酶解效率.采用高分辨质谱和串联质谱技术,进一步排除杂质产生的干扰信号.采用该方法对市售4种普通牛奶和2种A2牛奶进行检测,结果表明,普通牛奶中A1β-酪蛋白的含量约为A2β-酪蛋白含量的2~4倍,个别A2牛奶样品含微量A1β-酪蛋白.该方法可检测牛奶中的A1和A2β-酪蛋白,具有高可靠性、高灵敏度等优点,为A2奶源筛选和质量控制提供支持. 展开更多
关键词 Β-酪蛋白 a2牛奶 液相色谱 串联质谱
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稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1型和A2型β-酪蛋白含量 被引量：5
4
作者 冯鑫 吕佳 +7 位作者 别玮 韩深 张晓梅 王金花 鲍蕾 汪龙飞 梁成珠 吕美玲 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第24期80-86,共7页
目的建立基于纯化蛋白和稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(ultra performance liquid chromatography coupled triple quadrupole mass spectrometry,UPLC-MS/MS)定性及定量测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1和A2β-... 目的建立基于纯化蛋白和稳定同位素稀释-超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(ultra performance liquid chromatography coupled triple quadrupole mass spectrometry,UPLC-MS/MS)定性及定量测定牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中A1和A2β-酪蛋白变异体的分析方法。方法首先将β-酪蛋白标准品中A1和A2β-酪蛋白变异体在高效液相色谱仪上分离,通过各自的纯化蛋白确定两种变异体在标准品中的含量,再将试样中的β-酪蛋白经胰蛋白酶酶解成肽,经UPLC-MS/MS检测。通过筛选的特异肽段,经β-酪蛋白标准品及稳定同位素稀释内标法计算,获得试样中β-酪蛋白A1变异体和A2变异体的含量。结果本研究采用的β-酪蛋白标准对照品中A1和A2β-酪蛋白变异体含量分别为20.8%和55.1%,且在检测中标准曲线的线性相关系数均大于0.99,方法重现性中相对标准偏差为2.290%~4.720%。结论本方法溯源性及精密度好,适用于牛奶及牛源性婴幼儿配方乳粉中两种β-酪蛋白变异体的测定。 展开更多
关键词 Β-酪蛋白 a2β-酪蛋白 a2牛奶 婴幼儿配方乳粉 超高效液相色谱-三重四极杆质谱法
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A2奶的研究进展及其上游奶源的筛选培养 被引量：1
5
作者 吴宇银 刘安琪 +1 位作者 李庆雷 陈志伟 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2023年第12期43-47,共5页
面对日益增长的乳品品质需求,A2奶作为一种有效提高人体消化能力,易于营养物质吸收的高品质乳品,因其营养特点成为近年来的研究热点,同时也推动了乳蛋白成分之一的A2型β-酪蛋白成为研究热点之一。研究发现,A2奶的β-酪蛋白更接近于母... 面对日益增长的乳品品质需求,A2奶作为一种有效提高人体消化能力,易于营养物质吸收的高品质乳品,因其营养特点成为近年来的研究热点,同时也推动了乳蛋白成分之一的A2型β-酪蛋白成为研究热点之一。研究发现,A2奶的β-酪蛋白更接近于母乳蛋白质,可以满足糖尿病患者和乳糖不耐受人群对乳品营养的需求。本文介绍了A2奶的优点和发展现状、A1和A2型β-酪蛋白的检测方法、A2奶与人体健康的关系、并且总结了A2型上游奶源的筛选培养等。 展开更多
关键词 a2奶 检测方法 人体健康 上游奶源 筛选培养
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奶牛A2型β-酪蛋白基因多态性及其与产奶性状、乳房性状育种值的关联分析 被引量：4
6
作者 李艳艳 卜建华 +3 位作者 韩丽云 张伟英 李青澄 母童 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第17期65-69,共5页
为了探讨A2型β-酪蛋白基因作为中国荷斯坦奶牛产奶性状和乳房性状候选基因的可能性,试验以467头中国荷斯坦奶牛为研究对象,采集血液样本,采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)方法对宁夏地区荷斯坦奶牛A2型β-酪蛋白基因多态性进行研究,... 为了探讨A2型β-酪蛋白基因作为中国荷斯坦奶牛产奶性状和乳房性状候选基因的可能性,试验以467头中国荷斯坦奶牛为研究对象,采集血液样本,采用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)方法对宁夏地区荷斯坦奶牛A2型β-酪蛋白基因多态性进行研究,并与奶牛产奶性状和乳房性状育种值进行关联分析。结果表明:从467头中国荷斯坦奶牛中共检测到2种A2型β-酪蛋白等位基因A1和A2,3种基因型A1A1、A1A2和A2A2。中国荷斯坦奶牛A2型β-酪蛋白基因未偏离Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),呈中度多态(0.25<PIC<0.5)。A2基因为优势等位基因,等位基因频率为0.646;杂合A1A2基因型为优势基因型,基因型频率为0.437,纯合A2A2基因型的频率(0.426)仅次于杂合A1A2基因型。中国荷斯坦奶牛A2型β-酪蛋白基因与部分产奶性状和乳房性状显著相关(P<0.05),其中A1A1基因型奶牛的乳脂量和乳脂率育种值显著高于A2A2基因型(P<0.05),A2A2基因型奶牛的体细胞评分育种值最高(P<0.05)。A1A1基因型奶牛的前乳房附着和后乳房附着高育种值显著高于A2A2基因型(P<0.05)。说明A2型β-酪蛋白基因的多态位点有可能成为奶牛泌乳性状和乳房性状选育的分子标记。 展开更多
关键词 中国荷斯坦奶牛 a2型β-酪蛋白基因 产奶性状 乳房性状 关联分析
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A2β-酪蛋白基因型奶牛鉴别及选育
7
作者 黄萌 李红宇 +8 位作者 邵广 王德香 郭春晖 刘文 姜兴刚 王树茂 阿晓辉 赵文江 贾斌 《现代畜牧科技》 2022年第11期73-76,共4页
A2牛奶是婴幼儿奶源,A2β-酪蛋白基因型奶牛又是生产A2牛奶的唯一途径。本文综述近10年A2β-酪蛋白基因型奶牛的研究,包括A2牛奶和β-酪蛋白基因型、A2β-酪蛋白基因型奶牛的辨别方法、A2β-酪蛋白基因型奶牛的选育和扩繁以及A2β-酪蛋... A2牛奶是婴幼儿奶源,A2β-酪蛋白基因型奶牛又是生产A2牛奶的唯一途径。本文综述近10年A2β-酪蛋白基因型奶牛的研究,包括A2牛奶和β-酪蛋白基因型、A2β-酪蛋白基因型奶牛的辨别方法、A2β-酪蛋白基因型奶牛的选育和扩繁以及A2β-酪蛋白基因型奶牛的营养需要,旨在为A2β-酪蛋白基因型奶牛鉴别和选育及其进一步研究提供科学依据。 展开更多
关键词 奶牛选育 a2β-酪蛋白基因型 a2牛奶 基因检测 扩繁
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β-酪蛋白不同基因型荷斯坦奶牛瘤胃微生物群落特征和功能分析 被引量：1
8
作者 赵金燕 王川川 +4 位作者 禹保军 马若霜 胡佳欢 张娟 顾亚玲 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期537-550,共14页
β-酪蛋白是乳汁中最重要的蛋白质之一,在荷斯坦奶牛中存在A1和A2这2种主要基因型。为探究β-酪蛋白不同基因型荷斯坦奶牛瘤胃微生物群落的差异,试验选取体况良好、第1胎次的A1A1、A1A2和A2A2基因型荷斯坦奶牛各15头(各基因型奶牛乳脂... β-酪蛋白是乳汁中最重要的蛋白质之一,在荷斯坦奶牛中存在A1和A2这2种主要基因型。为探究β-酪蛋白不同基因型荷斯坦奶牛瘤胃微生物群落的差异,试验选取体况良好、第1胎次的A1A1、A1A2和A2A2基因型荷斯坦奶牛各15头(各基因型奶牛乳脂率和乳蛋白率相近),采集瘤胃液后通过Illumina HiSeq 2000平台进行宏基因组测序,并利用Diamond 0.9.7软件进行分类和功能注释,分析3种基因型奶牛瘤胃微生物群落的组成和功能。结果表明:1)A1A1基因型奶牛瘤胃中特征微生物有Intestinibaculum、戴阿利斯特杆菌属(Dialister)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)和不动杆菌属(Acinetobacter)等;A1A2基因型奶牛瘤胃中特征微生物有普雷沃氏菌科(Prevotellaceae)的帕拉普雷沃氏菌属(Paraprevotella)和Paraprevotella xylaniphila;A2A2基因型奶牛瘤胃中特征微生物包括醋杆菌属(Acetobacter)和黄单胞菌属(Xanthomonas)等。2)A1A2和A2A2基因型奶牛瘤胃中富含与木质纤维素和纤维素降解相关的酶;A1A2基因型奶牛瘤胃参与淀粉和蔗糖代谢、脂肪酸生物合成、蛋白质消化与吸收、精氨酸和脯氨酸代谢以及RNA降解通路的基因数量更多;A2A2基因型奶牛瘤胃参与炎症介质调节通路的基因数量更多。由此可知,A1A1基因型荷斯坦奶牛的瘤胃标志物微生物是Intestinibaculum和戴阿利斯特杆菌属,可能与减少甲烷排放和A1型β-酪蛋白以及部分疾病存在潜在关联;A1A2基因型奶牛的瘤胃标志微生物是普雷沃氏菌科,可能对饲粮消化有促进作用;A2A2基因型奶牛的瘤胃标志微生物是醋杆菌属,其相对丰度对乳脂含量有调节作用。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 Β-酪蛋白 a2奶 瘤胃微生物 宏基因组学
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牛乳中β-酪蛋白基因分型及β-酪啡肽-7的研究进展 被引量：14
9
作者 陈龙 付王艳 +3 位作者 方琼燕 唐果 刘论 向松涛 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2019年第8期29-34,共6页
牛乳营养丰富,乳蛋白是牛乳中最有营养价值的成分。β-酪蛋白约占乳蛋白总量的30%,A1和A2是β-酪蛋白最常见的两种类型,其中A1型为突变型。β-酪蛋白基因多态性是受常染色体上共显性基因所控制的,可通过蛋白水平或分子水平进行检测。A1... 牛乳营养丰富,乳蛋白是牛乳中最有营养价值的成分。β-酪蛋白约占乳蛋白总量的30%,A1和A2是β-酪蛋白最常见的两种类型,其中A1型为突变型。β-酪蛋白基因多态性是受常染色体上共显性基因所控制的,可通过蛋白水平或分子水平进行检测。A1型β-酪蛋白在人体内消化酶解后可产生多种特定的氨基酸残基片段,其中β-酪啡肽-7(β-casomorphin-7,BCM-7)是具有阿片活性的七肽物质,推测其可能与1型糖尿病、心血管疾病、自闭症、精神分裂症、消化功能紊乱等人体慢性非传染性疾病的发生有密切联系。本文从β-酪蛋白基因变异和分型方法、BCM-7的生成机制及其对人体健康潜在影响等方面进行了综述,为未来β-酪蛋白和A2型牛乳在乳制品行业的研究开发提供一定参考。 展开更多
关键词 a2牛乳 Β-酪蛋白 基因变异 β-酪啡肽-7(BCM-7) 人体健康
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