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穿心莲内酯体外抗肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型的作用 被引量:2
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作者 纪洵敏 梁宇恒 +7 位作者 何炽明 肖微 彭晓放 谭丽容 曾宏强 唐颜 柯昌文 张磊 《中国热带医学》 北大核心 2025年第1期62-68,共7页
目的观察穿心莲内酯体外抗肠道病毒71型(enteroviruses 71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CA16)的作用效果。方法采用细胞病变(cytopathic effect,CPE)法和噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法测定穿心莲内... 目的观察穿心莲内酯体外抗肠道病毒71型(enteroviruses 71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CA16)的作用效果。方法采用细胞病变(cytopathic effect,CPE)法和噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)法测定穿心莲内酯对人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(human rhabdomyosarcoma cells,RD)的最大无毒剂量和穿心莲内酯对感染细胞后的EV71和CA16体外抑制作用;通过荧光定量PCR法检测穿心莲内酯溶液对EV71和CA16中VP1基因,RD细胞中3种促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α在基因水平的变化。结果MTT结果显示穿心莲内酯对RD细胞的最大无毒剂量为78μg/mL;手足口病毒感染细胞,随后分别经78.00、39.00、19.50、9.75、4.88、2.44μg/mL的穿心莲内酯溶液处理,感染EV71病毒的细胞存活率增加至(82.41±1.76)%、(79.54±2.91)%、(81.02±1.99)%、(71.81±2.26)%、(52.87±1.51)%和(50.41±0.93)%,感染CA16病毒的细胞存活率增加至(81.00±0.64)%、(79.72±1.38)%、(61.59±3.47)%、(53.37±0.53)%、(52.41±1.37)%和(43.69±0.40)%,表明穿心莲内酯能明显降低EV71和CA16引起的细胞病变效应;手足口病毒感染后,用78.00、39.00、19.50、9.75μg/mL的穿心莲内酯溶液给药,显示EV71和CA16中VP1,RD细胞中促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达量与病毒对照组相比均有明显降低,结果表明手足口病毒感染后,用穿心莲内酯溶液给药,对手足口病毒的VP1基因表达产生明显抑制作用,且能降低IL-1β、TNF-α、IL-6在mRNA水平的表达。结论穿心莲内酯具有明显的体外抗EV71和CA16病毒的效果,其可能通过抑制促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达,从而发挥抗EV71和CA16病毒的作用。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒a16 抗病毒作用
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S100A16在肿瘤发生发展及药物治疗抵抗中的研究进展
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作者 金硕 程一晗 +2 位作者 艾丽萍 郑怡(综述) 张红梅(审校) 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第8期401-406,共6页
S100钙结合蛋白家族成员S100钙结合蛋白A16(S100 calcium-binding protein A16,S100A16)在多种恶性肿瘤存在差异表达,参与肿瘤演进,在肿瘤细胞增殖、凋亡、黏附、上皮-间质转化、迁移和侵袭中发挥重要作用,可作为不良预后因素。S100A16... S100钙结合蛋白家族成员S100钙结合蛋白A16(S100 calcium-binding protein A16,S100A16)在多种恶性肿瘤存在差异表达,参与肿瘤演进,在肿瘤细胞增殖、凋亡、黏附、上皮-间质转化、迁移和侵袭中发挥重要作用,可作为不良预后因素。S100A16与肿瘤微环境中免疫细胞浸润存在关联,促使肿瘤微环境趋向免疫抑制状态,肿瘤相关内皮细胞S100A16表达水平亦与抑制性免疫微环境形成相关。此外,S100A16在肿瘤化疗抵抗中亦发挥作用。本文综述S100A16在不同肿瘤的作用机制、肿瘤免疫微环境调节、药物治疗抵抗等研究进展,旨在进一步阐明不同肿瘤的防治机制,为克服肿瘤治疗抵抗提供理论依据。 展开更多
关键词 S100a16 恶性肿瘤 肿瘤微环境 内皮细胞 肿瘤治疗抵抗
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西双版纳流行柯萨奇病毒A16型B1基因亚型VP1区基因序列分析
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作者 李富雨 王家军 +10 位作者 冷珺 李柳醒 黄洁 张俊玫 周艳 李章 余俊 郑亚雄 於倩 王佳丽 王静林 《中国热带医学》 北大核心 2025年第9期1174-1180,共7页
目的了解云南省西双版纳边境地区柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CVA16)分子特征与国内外流行毒株的进化关系,为西双版纳地区CVA16感染防治及分子溯源提供科学依据。方法2024年12月在西双版纳州景洪市第一人民医院采集临床诊断为... 目的了解云南省西双版纳边境地区柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CVA16)分子特征与国内外流行毒株的进化关系,为西双版纳地区CVA16感染防治及分子溯源提供科学依据。方法2024年12月在西双版纳州景洪市第一人民医院采集临床诊断为疑似手足口病儿童的咽拭子样本,提取病毒核酸,采用巢式RT-PCR扩增病毒VP1区基因序列,使用MEGA 7.0等生物信息学软件进行序列分析。结果共采集到36份疑似手足口病儿童的咽拭子样本;CVA16-VP1特异引物扩增3份阳性(样本编号:3/JH-YN/2025、5/JH-YN/2025、6/JH-YN/2025),CVA16检出率为8.33%。序列分析结果显示,本研究获得3条序列与2022—2023年中国江西省流行的B1a基因亚型CVA16位于同一进化分支内,核苷酸同源性均在89%以上,氨基酸同源性均在92%以上;而其他基因亚型CVA16病毒位于不同进化分支内,核苷酸同源性低于89%,氨基酸同源性低于90%,提示本次景洪市12月份流行的手足口病病毒以CVA16 B1a基因亚型为主要流行基因亚型病毒;氨基酸位点分析发现,景洪市3株阳性株符合当前新型B1a基因VP1-164K/251I流行模式,16个易突变位点中有4个发生突变。第145位氨基酸未发生突变,符合E145V。第252、261位产生个体株特异性位点突变,3株阳性株第266位均出现特异性位点突变。结论2024年12月西双版纳州景洪市存在CVA16-B1a流行基因亚型流行,本次流行毒株与近年来在云南其他地区和江西流行的毒株密切相关。研究结果为该地区手足口病的诊断及预防提供科学依据。 展开更多
关键词 手足口病 柯萨奇病毒a16 VP1基因 序列分析
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柯萨奇病毒A16型培养工艺优化及关键质量属性表征
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作者 万鑫 肖奥 +5 位作者 王文辉 蔡潜 孟胜利 郭靖 王泽鋆 申硕 《中国生物制品学杂志》 2025年第4期385-391,398,共8页
目的优化柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CV-A16)培养工艺,并比较CV-A16收获液不同质量属性,以期确定关键质量属性(critical quality attribute,CQA),为CV-A16疫苗的制备工艺和质量控制方法的研发奠定基础。方法以Vero细胞为基质,... 目的优化柯萨奇病毒A16型(Coxsackievirus A16,CV-A16)培养工艺,并比较CV-A16收获液不同质量属性,以期确定关键质量属性(critical quality attribute,CQA),为CV-A16疫苗的制备工艺和质量控制方法的研发奠定基础。方法以Vero细胞为基质,病毒滴度和实壳病毒颗粒抗原含量(1H5抗原)为评价指标,优化CV-A16接种的细胞生长阶段(对数期中、对数期末、平台期)、MOI(0.01、0.001、0.0001)、培养基类型(无血清M199、DMEM、50%M199+50%DMEM)、培养基血清浓度(无血清及含1%、2%新生牛血清)及培养温度(33、35和37℃),并进一步在T25细胞瓶和10层细胞工厂中验证优化工艺。分析病毒滴度、实壳病毒颗粒抗原含量(1H5、20E8抗原)及中和表位抗原含量(3H4抗原)与免疫原性的相关性,以确定CQA。结果经单因素试验及扩大规模培养验证确定CV-A16最佳培养条件为:按MOI=0.001接种至对数期末的Vero细胞,采用无血清M199培养基于33℃培养。于4种培养条件(无血清DMEM培养基于33℃培养6 d、无血清M199培养基于33℃培养6 d、无血清DMEM培养基于37℃培养4 d、无血清M199培养基于37℃培养4 d)下获得CV-A16收获液的实壳病毒颗粒抗原含量(1H5和20E8抗原)差异较大,与病毒收获液的中和抗体滴度变化趋势不同;4种工艺条件下获得CV-A16收获液的病毒滴度及中和表位抗原含量(3H4抗原)变化较小,且与中和抗体滴度变化趋势相同。结论以免疫原性质量属性(中和抗体滴度)作为筛选依据,病毒滴度和中和表位抗原含量(3H4抗原)可作为CV-A16病毒收获液的CQA,实壳病毒颗粒抗原含量(1H5和20E8抗原)可用于CV-A16生产质量控制过程中病毒颗粒的分析研究。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒a16 VERO细胞 病毒培养 关键工艺参数 关键质量属性
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S100A16与胰腺癌的免疫浸润及预后的相关性分析
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作者 汪苗红 石欢 《系统医学》 2025年第5期35-39,共5页
目的利用生物信息数据库分析S100钙结合蛋白A16(S100 calcium binding protein A16,S100A16)在胰腺腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)中的表达水平、预后、与免疫细胞浸润的相关性。方法使用TIMER数据库分析S100A16在PAAD组织与正... 目的利用生物信息数据库分析S100钙结合蛋白A16(S100 calcium binding protein A16,S100A16)在胰腺腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)中的表达水平、预后、与免疫细胞浸润的相关性。方法使用TIMER数据库分析S100A16在PAAD组织与正常组织的表达差异,并进一步分析S100A16在PAAD各分期的表达水平及预后,并研究其与免疫浸润细胞的相关性。结果S100A16在PAAD组织中的表达水平高于正常组织,且各分期表达水平比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。与低表达组相比,S100A16高表达组的预后较差,差异有统计学意义(P均<0.05)。S100A16表达与CD4+T细胞、CD8+T细胞、巨噬细胞和树突状细胞浸润呈负相关(r=-0.152、-0.217、-0.245、-0.169,P均<0.05)。结论S100A16具备成为胰腺癌的诊断、预后、药物治疗生物标记物的潜力。 展开更多
关键词 S100a16 胰腺癌 GEPIA2数据库 TIMER数据库 预后
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2019-2023年青海省手足口病病原谱及CVA16和EV-A71基因特征分析 被引量:1
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作者 李倩兰 赵生仓 +7 位作者 韩志萍 李崇亥 王晓彤 周蕾 于力恒 张华一 严冬梅 范丽霞 《病毒学报》 北大核心 2025年第1期117-127,共11页
为了解2019-2023年青海省手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原构成以及柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)和肠道病毒A组71型(Enterovirus A71,EV-A71)的基因特征,本研究对青海省2019-2023年实验室确诊的2028名... 为了解2019-2023年青海省手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)的病原构成以及柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)和肠道病毒A组71型(Enterovirus A71,EV-A71)的基因特征,本研究对青海省2019-2023年实验室确诊的2028名HFMD病例的核酸检测结果进行统计分析,利用RT-PCR方法对CVA16和EV-A71病毒毒株扩增VP1编码区并进行基因序列测定,使用MEGA、BioEdit等软件对CVA16和EV-A71进行分型与进化关系分析。结果发现,2021年开始,青海省HFMD病原构成的优势血清型别由CVA16和EV-A71转变成其他肠道病毒,在每年检出的病原体中占比均超过50.0%。对2019-2023年全省上送的CVA16及EV-A71阳性标本进行病毒分离,共收获122株CVA16毒株和36株EV-A71毒株。122株CVA16毒株均属于B1基因亚型,其中B1b亚型100株,B1a亚型22株。B1b亚型毒株VP1区的核苷酸同源性为92.8%~100%,氨基酸同源性为97.9%~100%,B1a亚型毒株VP1区的核苷酸同源性为95.9%~100%,氨基酸同源性为97.9%~100%。36株EV-A71分离株均属于C4基因亚型的C4a进化分支,VP1区核苷酸序列同源性为95.8%~100%,氨基酸序列同源性为97.6%~100%。氨基酸置换熵值分析发现,2019-2023年青海省CVA16分离株的VP1编码区无易突变氨基酸位点;EV-A71分离株的VP1编码区存在3个高度可变的氨基酸位点为VP1-164、VP1-241和VP1-262。VP1-164位点在2021年出现N突变,并在2023年取代D成为此位点优势氨基酸;VP1-241位点上,2020年开始出现T突变,并在2021年取代S成为优势突变(94.12%),2023年此位点又完全替换为S;VP1-262位点上,2020年开始I取代V成为此位点优势氨基酸(94.12%),2023年此位点又完全替换为V。本研究揭示了2019-2023年青海省HFMD病原谱的变化情况,探究了CVA16和EV-A71的分子遗传进化特征,为青海地区制定HFMD的预防控制策略提供了理论依据。 展开更多
关键词 手足口病 病原构成 柯萨奇病毒A组16型 肠道病毒A组71型 基因特征
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基于单细胞测序的柯萨奇A16型病毒中和性单克隆抗体筛选
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作者 李静 马传敏 +3 位作者 全传松 李玉明 张振杰 史卫峰 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 2025年第1期1-8,共8页
目的通过单细胞测序筛选柯萨奇A组16型病毒(Coxsackievirus A16,CVA16)中和性单克隆抗体,并对其功能进行验证。方法以CVA16衣壳蛋白VP1作为抗原蛋白,流式细胞术分选VP1特异识别小鼠B细胞,对其进行B细胞抗原受体(B-cell receptor,BCR)组... 目的通过单细胞测序筛选柯萨奇A组16型病毒(Coxsackievirus A16,CVA16)中和性单克隆抗体,并对其功能进行验证。方法以CVA16衣壳蛋白VP1作为抗原蛋白,流式细胞术分选VP1特异识别小鼠B细胞,对其进行B细胞抗原受体(B-cell receptor,BCR)组库单细胞测序;基于测序数据分析IgG抗体轻重链序列,根据丰度排序筛选CVA16候选单克隆抗体并进行表达;利用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)、微量中和实验等方法,对CVA16单克隆抗体进行体内外功能验证。结果成功表达CVA16-VP1-His重组蛋白,共免疫14只ICR小鼠,经流式分选出约50000个存活VP1特异B细胞,单细胞测序构建BCR库,筛选并表达19株CVA16候选单克隆抗体。经验证单抗7-2、7-4、7-8、8-8及8-9具有中和作用,半数抑制率(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为9.09、12.00、5.56、9.68、9.67μg/mL。单抗7-8在体外细胞水平上具有较强的中和作用,在体内乳鼠攻毒保护实验中也表现出良好的中和效果。广谱性中和实验表明,单抗7-1具有针对EVA71病毒的中和能力,单抗7-5显示出针对CVA6病毒的中和能力。结论本研究成功建立了1种基于单细胞测序技术筛选CVA16单克隆抗体的方法,验证抗体7-8为1株具备较强中和活性的单克隆抗体。 展开更多
关键词 柯萨奇A组16型病毒 单克隆抗体 真核表达 B细胞抗原受体测序 酶联免疫吸附实验 微量中和实验
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S100A16启动子区DNA甲基化在小细胞肺癌细胞增殖及化疗耐药中的调控作用 被引量:1
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作者 叶瑞芳 黄彩玲 +7 位作者 林潍轩 方曼霖 甘思远 李汝佳 冯娜 郭琳琅 熊英环 孙艳芹 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第5期528-533,共6页
目的探讨S100钙结合蛋白A16(S100 calcium binding protein A16,S100A16)对小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响,并揭示S100A16启动子区低甲基化在小细胞肺癌恶性表型中的潜在作用。方法结合生物信息学分析,采用RNA干扰技术降低... 目的探讨S100钙结合蛋白A16(S100 calcium binding protein A16,S100A16)对小细胞肺癌细胞增殖、凋亡和化疗耐药性的影响,并揭示S100A16启动子区低甲基化在小细胞肺癌恶性表型中的潜在作用。方法结合生物信息学分析,采用RNA干扰技术降低H69AR细胞中S100A16的表达,使用RT-qPCR、Western blot、CCK-8实验、流式细胞术及免疫组化法分析S100A16在小细胞肺癌各种恶性表型中的调控作用。结果生物信息学在线数据分析发现,小细胞肺癌细胞易对化疗药物顺铂产生抵抗性,其持久耐药(Drug tolerant persister,DTP)细胞株中S100A16启动子区甲基化水平相对较低,与其mRNA表达水平呈负相关(P<0.05)。基于上述生信分析结果,我们进一步经实验验证发现,与小细胞肺癌化疗敏感细胞相比,S100A16在小细胞肺癌化疗耐药株中的表达较高(P<0.05);采用siRNA技术沉默化疗耐药细胞H69AR中S100A16的表达后,CCK-8实验分析发现细胞贴壁生长60 h后增殖能力明显下降(P<0.05),流式细胞术分析发现细胞早期凋亡率及晚期凋亡率均呈升高趋势(P<0.05)。为了探究S100A16表达改变与小细胞肺癌恶性表型间的分子机制,采用MassARRAY平台系统进行基因甲基化位点检测发现,癌组织中S100A16基因启动子区CpG-8甲基化水平显著较低(P<0.01),进一步采用去甲基化药物5-阿扎胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-CdR)处理H69细胞后发现,DNA甲基转移酶DNMT3A明显下降(P<0.05)而S100A16的表达相对显著升高(P<0.01)。结论启动子区DNA低甲基化会导致S100A16在小细胞肺癌中高表达,能够进一步促进肿瘤发生发展,并且在化疗耐药中发挥一定作用。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 S100a16 化疗耐药 DNA甲基化
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干扰素α-2b雾化对EV71/CoxA16阳性手足口病患儿的疗效及粪便病毒转阴时间影响 被引量:5
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作者 钱雪莹 叶萍 +3 位作者 张琴 范文静 庾玉婷 杨政 《实用预防医学》 CAS 2024年第1期77-80,共4页
目的探讨干扰素α-2b雾化对肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)/柯萨奇病毒A16型(coxsachievirus A16,CoxA16)阳性手足口病患儿疗效及粪便排毒时间的影响。方法选取2020年2月—2022年2月江苏盛泽医院儿科EV71/CoxA16阳性手足口病患儿148... 目的探讨干扰素α-2b雾化对肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)/柯萨奇病毒A16型(coxsachievirus A16,CoxA16)阳性手足口病患儿疗效及粪便排毒时间的影响。方法选取2020年2月—2022年2月江苏盛泽医院儿科EV71/CoxA16阳性手足口病患儿148例,随机分为对照组(n=74)和试验组(n=74)。对照组采用常规对症治疗,试验组采用干扰素α-2b雾化+常规对症治疗。比较两组治疗7 d后疗效、粪便排毒转阴时间、治疗前和治疗7 d后血清炎性因子水平[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、超敏C反应蛋白(hypersensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]及免疫功能(免疫球蛋白IgM、IgA、IgG)等。结果治疗7 d后,试验组总有效率(95.95%)高于对照组(86.49%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.132,P<0.05);试验组粪便排毒CoxA16转阴时间(38.21±2.15)d、EV71转阴时间(53.47±4.29)d短于对照组(41.68±2.37)d、(61.25±5.21)d,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗7 d后试验组血清IL-6(28.56±4.26)pg/ml、hs-CRP(0.95±0.21)mg/L、TNF-α(75.26±7.26)ng/ml水平低于对照组(42.15±6.35)pg/ml、(2.47±0.35)mg/L、(102.36±10.23)ng/ml,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组IgM(1.95±0.32)mg/L、IgA(1.23±0.26)mg/L、IgG(13.87±2.10)mg/L高于对照组(1.61±0.24)mg/L、(0.95±0.22)mg/L、(9.95±1.87)mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组不良反应发生率为9.46%,对照组不良反应发生率为13.51%,两组不良反应比较无统计学差异(χ^(2)=0.598,P>0.05)。结论在常规对症治疗基础上应用干扰素α-2b雾化治疗EV71/CoxA16阳性手足口病患儿疗效显著,能缩短粪便排毒时间,减轻炎症反应,提高免疫功能,安全性高。 展开更多
关键词 干扰素Α-2B 雾化治疗 肠道病毒71型 柯萨奇病毒a16 手足口病 粪便排毒时间
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探讨S100A16在子宫内膜腺癌组织及细胞中的作用
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作者 曹影 张晶波 +3 位作者 张魏然 李妍雨 王蒙 张蓓 《医学研究杂志》 2024年第11期83-89,共7页
目的 探讨S100A16在子宫内膜腺癌中的表达及其对子宫内膜腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 应用免疫组化法检测S100A16在子宫内膜腺癌组和正常对照组中的表达差异。根据表达情况不同,将所有子宫内膜腺癌患者分为S100A16高表达... 目的 探讨S100A16在子宫内膜腺癌中的表达及其对子宫内膜腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 应用免疫组化法检测S100A16在子宫内膜腺癌组和正常对照组中的表达差异。根据表达情况不同,将所有子宫内膜腺癌患者分为S100A16高表达组和低表达组,然后分析两组间临床病理特征的差异。将S100A16慢病毒转染至人子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞,CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测S100A16-shNC组和S100A16-shRNA组间增殖、迁移及侵袭能力的不同,Western blot法检测上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路相关蛋白的表达。结果S100A16在子宫内膜腺癌组中的表达显著高于正常对照组(P<0.01)。S100A16的高表达与子宫内膜腺癌患者病理分级更差有关(P<0.05),与年龄、国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics, FIGO)分期和淋巴结转移方面无关(P>0.05)。CCK-8实验检测结果显示,敲低S100A16蛋白使子宫内膜腺癌细胞增殖能力减低(P<0.01)。划痕实验和Transwell实验显示,S100A16-shNC组的子宫内膜腺癌细胞迁移及侵袭能力高于S100A16-shRNA组(P<0.05)。Western blot法检测结果显示,与S100A16-shNC组比较,S100A16-shRNA组的子宫内膜腺癌细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达上调,N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达下调(P<0.05)。结论 S100A16在子宫内膜腺癌组织中高表达,并通过诱导EMT促进子宫内膜腺癌细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 S100a16 增殖 迁移 侵袭
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基于STC12C5A16AD单片机的酒精测试仪
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作者 石玉刚 《模具制造》 2024年第7期159-161,共3页
酒精测试仪以STC12C5A16AD单片机作为核心,以MQ-3乙醇气体传感器作为酒精检测模块。当MQ-3酒精传感器对空气的酒精的浓度检测把酒精浓度的信号传输给STC12C5A16AD单片机,STC12C5A16AD单片机对MQ-3乙醇气体传感器送来的信号进行处理,与... 酒精测试仪以STC12C5A16AD单片机作为核心,以MQ-3乙醇气体传感器作为酒精检测模块。当MQ-3酒精传感器对空气的酒精的浓度检测把酒精浓度的信号传输给STC12C5A16AD单片机,STC12C5A16AD单片机对MQ-3乙醇气体传感器送来的信号进行处理,与设定的醉酒阈值进行比较,并由LCD液晶屏显示读数。如果酒精的浓度超过了所设计的醉酒阈值,那么红灯就亮,蜂鸣器就会进行报警。 展开更多
关键词 酒精测试仪 STC12C5a16AD单片机 MQ-3酒精传感器
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云南省昆明地区2022年柯萨奇病毒A16型的VP1区分子特征 被引量:1
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作者 张磊 沈茹 +2 位作者 楚昭阳 马绍辉 李丽 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第7期73-78,共6页
目的对昆明市某医院2022年从手足口病患儿分离的柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)的全VP1基因区分子特征分析。方法对昆明市某医院2022年从手足口病(hand foot mouth disease,HFMD)患儿200份临床样品粪便标本进行处理,分别... 目的对昆明市某医院2022年从手足口病患儿分离的柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)的全VP1基因区分子特征分析。方法对昆明市某医院2022年从手足口病(hand foot mouth disease,HFMD)患儿200份临床样品粪便标本进行处理,分别通过RD细胞和Vero细胞分离,对经3次培养后仍产生细胞效应(cytopathogenic effect,CPE)的细胞培养液提取病毒核酸,然后用通用引物222/224经RT-PCR扩增并测序,序列经BLAST比对确定其血清型,对鉴定为柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)的再用特异引物CA16VP1F/CA16VP1R扩增其全VP1区并测序和拼接。下载CVA16病毒标准序列,采用Geneious 5.4.1和MEGA 6.05等软件对本研究CVA16的全VP1区的核苷酸和氨基酸序列分析。结果经鉴定后共检出22株从Vero细胞分离CVA16和6株RD细胞分离的CVA16毒株,进一步通过特异引物扩增获得21株可用的CVA16VP1全长序列,基于全VP1基因系统进化分析,这21株CVA16全属于B1a基因型。21株CVA16全长VP1基因之间的核苷酸和氨基酸序列同源性均较高,分别为91.9%~99.6%和89.2%~99.3%;与中国CVA16 B1a基因型的其他株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89.7%~96.3%和89.2%~97.0%。与CVA16 B1b其他参考株对比,其核苷酸和氨基酸序列同源性分别在84.3%~87.2%和89.2%~97.0%。与其它CVA16的B1a基因亚型相比较发现21个氨基酸位点出现变异。结论2022年中国云南省昆明某医院引起HFMD的CVA16毒株属于B1a基因型,应继续监测以明确其流行特征。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16型 全VP1基因 序列分析
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内标多重荧光RT-PCR同时检测肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型 被引量:20
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作者 肖性龙 何雅青 +8 位作者 余以刚 杨洪 李惠芳 杨晓泉 张经纬 陈谷 刘冬梅 李小凤 吴晖 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期98-104,共7页
[目的]为对当前爆发的手足口病进行快速准确的检测。[方法]本研究建立了含内标的同时检测EV71和CA16的多重荧光RT-PCR方法,对该方法的特异性、灵敏度等进行评估,并对400多份临床样品进行了检测。[结果]实验结果表明,该检测方法特异... [目的]为对当前爆发的手足口病进行快速准确的检测。[方法]本研究建立了含内标的同时检测EV71和CA16的多重荧光RT-PCR方法,对该方法的特异性、灵敏度等进行评估,并对400多份临床样品进行了检测。[结果]实验结果表明,该检测方法特异性强,对10株EV71病毒、8株CA16病毒和25株其他人类病毒进行了检测,特异性为100%;该检测方法对EV71和CA16的检测灵敏度分别达到0.1 TCID50和1 TCID50;将0.1-104TCID50/mL EV71和CA16样本进行重复性实验,其变异系数分别为0.9%-2.0%和0.9%-2.3%。对400多份临床样品分别进行荧光RT-PCR检测和传统方法检测,结果显示,荧光RT-PCR对EV71和CA16的阳性检出率平均为46.1%和14.2%,比传统方法(34.5%和12.8%)的阳性检测率高。另外,实验数据显示,在粪便、直肠拭子、咽喉拭子样本中,PCR抑制物存在的比例为1.8%-3.4%,表明内标对监控PCR抑制物的存在具有重要作用。[结论]本方法能同时对EV71和CA16进行快速检测,并且灵敏度高,特异性好,由于加入了内标,能有效地监控假阴性的出现,适合于手足口病的临床检测。 展开更多
关键词 内标 多重荧光RT-PCR EV71 柯萨奇病毒a16 检测
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热毒宁注射液组分抗CoxA16和EV71病毒活性研究 被引量:10
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作者 曹泽彧 谢雪 +6 位作者 牛莹 倪付勇 曹亮 赵祎武 王振中 马世平 萧伟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期106-110,共5页
目的:明确热毒宁注射液组分抗柯萨奇病毒A16(coxsackievirus A16,Cox A16)和肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)病毒的活性。方法:考察热毒宁注射液1~19号组分(RND1~19)对非洲绿猴肾细胞(Vero)的毒性,明确半数中毒浓度(TC50)... 目的:明确热毒宁注射液组分抗柯萨奇病毒A16(coxsackievirus A16,Cox A16)和肠道病毒71(enterovirus 71,EV71)病毒的活性。方法:考察热毒宁注射液1~19号组分(RND1~19)对非洲绿猴肾细胞(Vero)的毒性,明确半数中毒浓度(TC50);进一步利用病毒感染的Vero细胞模型研究各组分的抗病毒活性及量效关系。采用50倍半数组织培养感染量(TCID50)Cox A16和EV71病毒分别感染Vero细胞(1万个/孔),热毒宁注射液组分(15.625~500 mg·L-1)给药3 d后,考察抗Cox A16和EV71病毒活性(n=3)。活性组分(最佳浓度)给药8 h后,检测病毒载量。结果:热毒宁注射液各组分的Vero细胞毒性,TC50从〉1 000 mg·L-1到221 mg·L-1不等;抗病毒活性及量效关系研究表明,RDN7和RDN18具有较好的抗Cox A16活性,半数有效浓度(EC50)分别为460,92 mg·L-1,治疗指数(TI)分别为1.44,2.40;RDN6和RDN17具有较好的抗EV71活性,EC50分别为395,378 mg·L-1,TI分别为2.22,1.10;病毒载量研究表明,RDN7极显著降低Vero细胞中Cox A16病毒载量(P〈0.01),RDN6,RDN17极显著地降低Vero细胞中EV71病毒载量(P〈0.01),而RDN18则没有上述活性。结论:明确了热毒宁注射液组分的抗Cox A16和EV71病毒活性。 展开更多
关键词 热毒宁注射液 组分 柯萨奇病毒a16 肠道病毒71 非洲绿猴肾细胞
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肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型分离株的VP1基因特征分析 被引量:13
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作者 张建华 江炳福 +2 位作者 程险峰 游贤惠 孟继鸿 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2013年第2期173-179,共7页
目的:探讨苏皖地区手足口病(HFMD)患者肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)分离株的VP1基因特征。方法:采集南京市、马鞍山市2009至2010年HFMD患者临床标本进行病毒分离和RT-PCR鉴定;扩增并测定VP1基因序列;从GenBank中选取EV71... 目的:探讨苏皖地区手足口病(HFMD)患者肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)分离株的VP1基因特征。方法:采集南京市、马鞍山市2009至2010年HFMD患者临床标本进行病毒分离和RT-PCR鉴定;扩增并测定VP1基因序列;从GenBank中选取EV71和CA16不同基因型参考毒株,利用生物信息学软件进行同源性比对和系统进化树分析。结果:共分离到9株EV71和4株CA16,EV71分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为96.5%~99.8%和99%~100%;CA16分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性为96.2%~98.5%和99.3%~100%;系统进化树分析显示,9株EV71全部属于C4a基因亚型,而4株CA16则全部属于B1b基因亚型。结论:2009至2010年苏皖地区分离到的EV71和CA16毒株分别属于C4a和B1b基因亚型,与国内其他地区HFMD病原学及分子进化研究结果一致,有望成为疫苗候选株作进一步研究。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒71型 柯萨奇病毒a16 VP1 基因特征
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Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型的建立及免疫、病理特征 被引量:6
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作者 任庆杰 李敏 +5 位作者 杨晓岚 管晨 张广州 王希良 王玉光 赵忠鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1685-1690,共6页
为建立Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。将临床分离的Cox.A16病毒株经蚀斑纯化,乳鼠驯化,最终获得1株能致死11日龄乳鼠的Cox.A16毒株,命名为TS10/08(GenBank Accession NO.JX068829,Cox.A16-TS)。Cox.A16-TS感... 为建立Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型并进行免疫、致病特性研究。将临床分离的Cox.A16病毒株经蚀斑纯化,乳鼠驯化,最终获得1株能致死11日龄乳鼠的Cox.A16毒株,命名为TS10/08(GenBank Accession NO.JX068829,Cox.A16-TS)。Cox.A16-TS感染11日龄C57BL/6J乳鼠后,观测临床疾病得分、体质量变化、死亡率并测定病毒载量、免疫分子、组织病理损伤等病毒、免疫、病理指标。结果表明,Cox.A16-TS毒株感染11日龄C57BL/6J乳鼠,其病毒毒力为50LD50/mL,感染后不同时期肌肉病毒载量均高于其他组织中,至4d达到高峰,后不断下降。至感染后6d发病达高峰时做病理检测,相对于脑组织,肌肉中有更严重的淋巴细胞浸润,引起更严重的炎性分子升高。血清中MCP-1,MIP-1alpha,MIP-1beta和CSF3动态变化,并在不同时间形成峰值。本试验初步建立了Cox.A16型手足口病乳鼠动物模型,为药物筛选、疫苗研发和免疫机理研究奠定了基础。 展开更多
关键词 COX a16 乳鼠 免疫 病理
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苏州地区柯萨奇病毒A16手足口病流行病学、临床特征及OAS1基因多态性研究 被引量:9
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作者 骆亚丽 蔡艳艳 +4 位作者 季伟 丁莹 储矗 周卫芳 尤海章 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期434-438,共5页
目的了解2010—2014年苏州地区柯萨奇病毒A16(CA16)感染手足口病(HFMD)的流行特点、临床特征,以及寡腺苷酸合成酶1(OAS1)基因多态性与CA16感染HFMD的关系。方法收集2010—2014年确诊CA16感染HFMD患儿临床资料,分析其流行病学特点;选取其... 目的了解2010—2014年苏州地区柯萨奇病毒A16(CA16)感染手足口病(HFMD)的流行特点、临床特征,以及寡腺苷酸合成酶1(OAS1)基因多态性与CA16感染HFMD的关系。方法收集2010—2014年确诊CA16感染HFMD患儿临床资料,分析其流行病学特点;选取其中167例患儿与同期166例EV71感染HFMD患儿进行临床特征比较;应用Taq Man探针技术检测167例CA16感染、166例EV71感染HFMD患儿及163例健康儿童的OAS1 rs10774671位点,分析该基因位点多态性与CA16感染HFMD的相关性。结果共收治HFMD患儿9 016例,CA16核酸检测阳性762例,检出率8.45%;CA16感染HFMD夏季最多,<5岁儿童占94.62%。CA16感染与EV71感染患儿比较,发热时间短,口腔疱疹、溃疡及手足臀皮疹明显,神经系统受累较少;血乳酸脱氢酶、C反应蛋白增高,IgM、IgG升高病例较少,淋巴细胞亚群中CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+的细胞比例改变明显,差异有统计学意义(P<0.05)。CA16感染HFMD患儿OAS1rs10774671基因位点上GG基因型频率明显高于健康对照组(P=0.038);CA16感染HFMD患儿OAS1 rs10774671位点基因型分布与EV71感染患儿比较差异无统计学意义(P>0.05);普通组与重型组CA16感染HFMD患儿OAS1 rs10774671位点基因型分布差异无统计学意义(P=0.475)。结论苏州地区CA16感染HFMD疫情的发生与年龄、季节有关;CA16感染HFMD患儿有不同的临床和实验室特征;OAS1 rs10774671位点GG基因型儿童更易感染CA16。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒a16 手足口病 流行病学 基因多态性
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3起Cox A16引起的幼儿园手足口病暴发疫情的流行病学调查 被引量:9
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作者 施文平 申惠国 +5 位作者 倪政 崔劲松 张颖华 谈逸云 范烨 王君燕 《疾病监测》 CAS 2010年第1期22-24,共3页
对2009年5-7月发生在上海市闵行区3所幼儿园的3起手足口病暴发疫情进行流行病学调查分析。3起疫情总共发病例数46例,罹患率为5.51%。男女性别比为2.07∶1,男性患儿罹患率显著高于女性;3岁幼儿手足口病罹患率较高。疫情平均流行时间为11.... 对2009年5-7月发生在上海市闵行区3所幼儿园的3起手足口病暴发疫情进行流行病学调查分析。3起疫情总共发病例数46例,罹患率为5.51%。男女性别比为2.07∶1,男性患儿罹患率显著高于女性;3岁幼儿手足口病罹患率较高。疫情平均流行时间为11.5 d,有明显的发病高峰,在发病第5天达到第一个最高峰。疫情发病均分布于2~3个班级,首发病例所在班级病例较为集中,疫情未出现大范围扩散。实验室检测发现3起手足口病暴发疫情均是由肠道病毒Cox A16引起。因此,在疾病流行期间应加强托幼机构疾病监测报告,做到早发现、早报告、早隔离、早治疗。 展开更多
关键词 手足口病 暴发 流行特征 肠道病毒Cox a16
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2011~2012年武汉地区柯萨奇病毒A16型VP1基因的遗传进化分析 被引量:8
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作者 伍仕敏 项杰 +4 位作者 周虹 吴志强 李虹泽 刘为勇 吴建国 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期272-276,共5页
目的了解武汉地区手足口病(HFMD)患儿柯萨奇病毒A16型(CA16)的基因型及重组特点。方法收集2011年4月至2012年3月武汉地区1 844例HFMD患儿的咽拭子标本,用实时荧光定量PCR检测CA16核酸,阳性标本进行病毒分离,对分离株进行VP1基因序列测序... 目的了解武汉地区手足口病(HFMD)患儿柯萨奇病毒A16型(CA16)的基因型及重组特点。方法收集2011年4月至2012年3月武汉地区1 844例HFMD患儿的咽拭子标本,用实时荧光定量PCR检测CA16核酸,阳性标本进行病毒分离,对分离株进行VP1基因序列测序,选择2株来自重症和1株来自轻症患儿的CA16病毒株构建VP1序列系统进化树并分析其全基因组序列的重组特点。结果 1 844例HFMD患儿的咽拭子标本中分离出42株CA16,VP1序列系统进化分析显示,所有分离株均属于B1亚型,其中13株属于B1a亚群,29株属于B1b亚群。重组分析表明,3株CA16分离株均为亲本株CA16 A型毒株FY18/AH/CHN/2008和EV71 A型毒株Hubei-09/HB/CHN/2009型间重组所产生,重组交叉位点为基因组P2区2A和2B基因交界处。结论武汉地区的CA16分离株均为B1亚型,其中B1b亚群占明显优势,且CA16分离株存在亲本株CA16A型和EV71 A型毒株的型间重组。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒a16 手足口病 重组 系统进化分析
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柯萨奇病毒A16型VP1-VP4基因克隆及其表达产物的抗原相关性分析 被引量:4
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作者 宋远斌 何思杰 +4 位作者 余楠 陈欣欣 王斌 车小燕 曾其毅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1713-1717,共5页
目的克隆并表达柯萨奇病毒A16型VP1-VP4蛋白基因,初步分析其抗原相关性。方法抽提病毒RNA,经RT-PCR方法分别扩增出VP1-VP4蛋白基因片段,经克隆后,在QIA表达系统中表达,表达产物经8 mol/L尿素洗涤及镍柱亲和层析纯化后,用柯萨奇病毒A16... 目的克隆并表达柯萨奇病毒A16型VP1-VP4蛋白基因,初步分析其抗原相关性。方法抽提病毒RNA,经RT-PCR方法分别扩增出VP1-VP4蛋白基因片段,经克隆后,在QIA表达系统中表达,表达产物经8 mol/L尿素洗涤及镍柱亲和层析纯化后,用柯萨奇病毒A16型病毒免疫兔血清及肠道病毒71型病毒免疫兔血清对重组蛋白进行Western blotting及ELISA分析其抗原相关性及交叉反应性。结果成功构建的重组质粒pQE30a/VP1-VP4并经IPTG诱导,重组蛋白VP1-VP4高效表达并纯化成功,经Western blotting及ELISA证实重组蛋白VP1-VP4可以被CVA16免疫兔血清特异识别,部分与肠道病毒71型免疫血清存在交叉反应。结论在大肠杆菌M15中高效表达出柯萨奇病毒A16型VP1-VP4蛋白,经纯化产物具有较强的抗原反应性。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒a16 VP1蛋白 VP2蛋白 VP3蛋白 VP4蛋白 克隆 原核表达 抗原反应性
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