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APOE4调控LRP1对Aβ_(25-35)诱导的星形胶质细胞氧化应激和炎症反应的作用
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作者 李妍平 Fariha Tasnim Efty +1 位作者 陆志星 朱灵英 《昆明医科大学学报》 2025年第11期18-25,共8页
目的探讨载脂蛋白E4(apolipoprotein E4,APOE4)调控脂蛋白受体相关蛋白1(lipoprotein receptorrelated protein-1,LRP1)对β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)_(25-35)诱导的星形胶质细胞氧化应激和炎症反应的作用。方法在细胞中转染s... 目的探讨载脂蛋白E4(apolipoprotein E4,APOE4)调控脂蛋白受体相关蛋白1(lipoprotein receptorrelated protein-1,LRP1)对β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)_(25-35)诱导的星形胶质细胞氧化应激和炎症反应的作用。方法在细胞中转染sh-NC、sh-APOE4、sh-LRP1、pcDNA-NC和pcDNA-LRP1,利用10μM Aβ_(25-35)诱导人星形胶质细胞24 h构建阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)细胞模型,经Western blot、DCFH-DA荧光探针和MDA、SOD和GSH检测试剂盒、TNF-α、IL-6和IL-1β酶联免疫吸附试剂盒探讨APOE4和LRP1对Aβ_(25-35)诱导的星形胶质细胞氧化应激和炎症反应的作用。通过免疫共沉淀和Western blot实验检测APOE4与LRP1的蛋白-蛋白相互作用。结果Aβ_(25-35)诱导上调APOE4表达(P<0.01),促进星形胶质细胞中ROS(P<0.001)、MDA(P<0.001)和炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平(P<0.001),抑制SOD、GSH和LRP1表达(P<0.001)。敲降APOE4或过表达LRP1可抑制Aβ_(25-35)诱导的细胞中ROS、氧化应激和炎性细胞因子(P<0.05)。APOE4通过蛋白-蛋白相互作用负调控LRP1蛋白表达。同时敲降APOE4和LRP1组细胞中ROS、MDA和炎性细胞因子浓度高于仅敲降APOE4组(P<0.05),抑制SOD和GSH浓度(P<0.001)。结论敲降APOE4通过上调LRP1抑制Aβ_(25-35)诱导的星形胶质细胞的氧化应激和炎症反应。 展开更多
关键词 阿尔兹海默病 星形胶质细胞 氧化应激 炎症反应
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参芎黄连解毒汤对阿尔茨海默病模型小鼠神经元损伤和Aβ清除的影响 被引量:2
2
作者 刘晶 陈康 +3 位作者 周渝顺 张哲祚 于顾然 李浩 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第7期43-52,共10页
目的:研究参芎黄连解毒汤对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠β淀粉样蛋白(Aβ)清除能力和神经元损伤的影响。方法:选取36只2月龄SPF级C57BL/6J小鼠为实验对象,利用双侧海马区注射Aβ寡聚体的方式构建阿尔茨海默病模型小鼠,设置空白组、假手术... 目的:研究参芎黄连解毒汤对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠β淀粉样蛋白(Aβ)清除能力和神经元损伤的影响。方法:选取36只2月龄SPF级C57BL/6J小鼠为实验对象,利用双侧海马区注射Aβ寡聚体的方式构建阿尔茨海默病模型小鼠,设置空白组、假手术组、参芎黄连解毒汤(中药)低、高剂量组(3.27、6.54 g·kg^(-1))和多奈哌齐组(0.65 mg·kg^(-1))。采用水迷宫和旷场实验评价小鼠的学习记忆能力和活动功能,苏木素-伊红(HE)和尼氏染色法观察脑组织病理,活体成像评估荧光Aβ经脑脊液的代谢情况,离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)染色观察小胶质细胞活化情况,免疫荧光和酶联免疫吸附测定法检测脑组织和血清中神经营养因子-3(NT-3)和脑源性神经营养因子(BDNF)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织中炎症和通路蛋白的表达。结果:与空白组、假手术组比较,模型组小鼠逃避潜伏期延长,平台停留时间缩短,海马组织出现神经元固缩,尼氏体溶解、小胶质细胞活化等病理表现,荧光Aβ经脑脊液代谢速度减慢,海马组织BDNF、NT-3、白细胞介素-10(IL-10)表达水平显著降低(P<0.01);海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和磷酸化核转录因子-κB(p-NF-κB p65)表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,中药低、高剂量组和多奈哌齐组小鼠逃避潜伏期缩短,平台停留时间延长;海马组织神经元核固缩、尼氏体溶解、小胶质细胞活化等情况好转,荧光Aβ经脑脊液代谢增快,海马组织中BDNF、NT-3表达增多(P<0.01),TLR4、MyD88、p-NF-κB p65表达显著降低(P<0.05,P<0.01);中药高剂量组海马组织TNF-α明显降低(P<0.05),IL-10表达明显升高(P<0.05);多奈哌齐组海马组织TNF-α、IL-6、IL-1β的表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:参芎黄连解毒能改善AD小鼠神经元损伤,增强脑脊液流动,从而促进Aβ的清除,改善小鼠的学习记忆功能,其机制可能与抑制小胶质细胞活化、抗炎和调控TLR4/MyD88/NF-κB通路相关。 展开更多
关键词 参芎黄连解毒汤 阿尔茨海默病 神经元损伤 β淀粉样蛋白()清除
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蒙花苷对APP/PS1小鼠Aβ沉积和神经炎症的作用
3
作者 毛佩芝 严荧燕 +3 位作者 严增泽 戚建华 王龙虎 陈琦君 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第4期661-667,共7页
目的考察蒙花苷改善阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)动物模型小鼠认知行为能力,探究其治疗Aβ沉积和神经炎症两个核心病理特征的效果以及关联性。方法APP/PS1小鼠随机分为模型组、蒙花苷高、中、低剂量组、阳性对照组,C57BL/6J... 目的考察蒙花苷改善阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)动物模型小鼠认知行为能力,探究其治疗Aβ沉积和神经炎症两个核心病理特征的效果以及关联性。方法APP/PS1小鼠随机分为模型组、蒙花苷高、中、低剂量组、阳性对照组,C57BL/6J小鼠为正常组。Morris水迷宫检测学习记忆能力,TUNEL法检测小鼠CA1区组织神经元凋亡,IHC检测小鼠脑组织Aβ42、GFAP的蛋白表达水平,Western blot检测小鼠脑组织BACE1和PS-1蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组小鼠NCP较少、目标象限行程较短、目标象限停留时间百分比较低(P均<0.01),海马CA1区组织细胞凋亡率较高(P<0.01),Aβ42、GFAP的蛋白表达明显较高(P均<0.01),BACE1和PS-1蛋白表达水平也明显较高(P均<0.01);与模型组相比,蒙花苷中高剂量组及阳性对照组小鼠NCP较多、目标象限的行程较长、目标象限停留时间百分比较高(P均<0.05),海马CA1区组织细胞凋亡率较低(P<0.01),Aβ42、GFAP的蛋白表达明显较低(P均<0.01),BACE1和PS-1蛋白表达明显较低(P均<0.01)。结论蒙花苷能抑制Aβ形成的两个关键酶从而减少APP裂解与Aβ42的生成,抑制星形胶质细胞的活化,缓解神经炎症,改善AD核心病理特征,从而改善APP/PS1小鼠学习记忆能力。 展开更多
关键词 蒙花苷 阿尔茨海默病 APP/PS1 认知行为 沉积 神经炎症
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促进Aβ42形成不溶性聚集物的一种真菌化合物
4
作者 邹永东 梁泽秋 +3 位作者 董瑶 陈国栋 刘国宝 郑易之 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期25-32,共8页
β-类淀粉蛋白42(amyloid-β42,Aβ42)聚集形成的可溶性寡聚体具有神经细胞毒性,是引起阿尔茨海默症的主要原因之一.通过浊度法、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)和原子力显微... β-类淀粉蛋白42(amyloid-β42,Aβ42)聚集形成的可溶性寡聚体具有神经细胞毒性,是引起阿尔茨海默症的主要原因之一.通过浊度法、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)和原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)技术,分析在真菌化合物demethoxyviridin存在情况下,Aβ42聚集过程中荧光强度、浊度、寡聚体和聚集物的比例及颗粒表观形态等动态变化之间的对应关系.结果表明,化合物demethoxyviridin可明显促进Aβ42小分子寡聚体形成高分子量寡聚体后,形成不溶性大分子聚集物沉淀,减少可溶性Aβ42寡聚体比例.探讨了硫磺素T荧光法、浊度法、SDS-PAGE法和AFM法在研究Aβ42聚集及活性化合物影响Aβ42聚集中的互补性,认为综合应用4种方法有助于揭示活性化合物影响Aβ42寡聚体沉淀形成的分子机理. 展开更多
关键词 微生物药物学 阿尔茨海默症 β-类淀粉蛋白 42寡聚体 42聚集 42大分子聚集沉淀 真菌化合物
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洗心汤含药血清对Aβ_(25-35)诱导的BV-2小胶质细胞极化的调控作用
5
作者 杨朝凯 第五永长 +2 位作者 武阳洋 邢霞 王登坤 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第6期18-26,共9页
目的:通过体外研究,探索洗心汤(XXT)含药血清对β淀粉样蛋白(Aβ)25-35诱导的BV-2小胶质细胞极化的影响,以揭示该方在防治阿尔茨海默病中的潜在机制,为临床治疗提供科学依据。方法:将BV-2小胶质细胞传代培养后,使用细胞增殖和活性检测(C... 目的:通过体外研究,探索洗心汤(XXT)含药血清对β淀粉样蛋白(Aβ)25-35诱导的BV-2小胶质细胞极化的影响,以揭示该方在防治阿尔茨海默病中的潜在机制,为临床治疗提供科学依据。方法:将BV-2小胶质细胞传代培养后,使用细胞增殖和活性检测(CCK-8)法筛选出最适浓度的XXT含药血清和Aβ_(25-35)。实验设置空白组、模型组(浓度为40μmol·L^(-1)的Aβ_(25-35))、XXT含药血清组(浓度为40μmol·L^(-1)的Aβ_(25-35)+10%XXT含药血清)和空白血清组(浓度为40μmol·L^(-1)的Aβ_(25-35)+10%空白血清处理组)。各组细胞孵育24 h后,采用免疫荧光法检测离子化钙结合适配分子1(IBA1)、CD16/32及CD206的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CD206、CD163、诱导型一氧化氮合成(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA表达水平;通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NGF、iNOS、Arg-1的含量。采用硝酸还原酶法测定NO含量。结果:与空白组比较,模型组IBA1、CD16/32表达显著升高(P<0.01),CD206的表达明显降低(P<0.05),iNOS mRNA表达水平显著上调(P<0.01),含量明显增高(P<0.05),CD206、CD163、Arg-1的mRNA表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01),Arg-1、NGF含量明显降低(P<0.05),NO含量明显升高(P<0.05)。与模型组比较,XXT含药血清组IBA1,CD16/32表达明显降低(P<0.05,P<0.01),CD206的表达显著升高(P<0.01);iNOS含量和mRNA表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01),同时CD206、CD163、Arg-1的mRNA表达水平显著上调(P<0.01),Arg-1、NGF含量明显升高(P<0.05),NO含量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,空白血清组各指标差异无统计学意义。结论:XXT含药血清可通过抑制M1型小胶质细胞极化并促进M2型极化,发挥抗炎和神经营养作用。 展开更多
关键词 洗心汤 β淀粉样蛋白()25-35 BV-2小胶质细胞 细胞极化 神经炎症
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极低频磁场对阿尔兹海默症小鼠Aβ_(42)沉积及空间工作记忆相关神经振荡的影响
6
作者 耿读艳 刘澳格 +1 位作者 闫禹新 郑卫然 《电子与信息学报》 北大核心 2025年第11期4637-4647,共11页
极低频磁场(ELF-MF)已被证实可以对多种常见疾病产生积极影响,但其对阿尔茨海默病(AD)的影响仍然知之甚少。该文将免疫荧光检测、行为学和电生理学相结合,通过计算完成对象位置任务(OLT)的行为认知指数(CI),探究ELF-MF暴露对小鼠空间工... 极低频磁场(ELF-MF)已被证实可以对多种常见疾病产生积极影响,但其对阿尔茨海默病(AD)的影响仍然知之甚少。该文将免疫荧光检测、行为学和电生理学相结合,通过计算完成对象位置任务(OLT)的行为认知指数(CI),探究ELF-MF暴露对小鼠空间工作记忆(SWM)的影响;应用时频分布和相位-幅值耦合分析方法,探究小鼠进行OLT过程中海马CA1区局部场电位信号(LFPs)的theta频段和gamma频段神经振荡的变化规律;进一步通过免疫荧光技术定量分析了小鼠海马区域Aβ_(42)的沉积情况,探究ELF-MF暴露对AD病理标志物的影响。此外,还分析了CI与海马CA1区theta频段和gamma频段神经振荡的时频分布及相位-幅值耦合之间的相关性,旨在探究ELF-MF对认知功能和神经振荡模式的调控机制。结果表明,ELF-MF可以减少AD小鼠海马区Aβ_(42)含量,增强AD模型小鼠的SWM能力,且这种增强与小鼠SWM任务期间海马CA1区theta和gamma频段神经振荡的时频能量以及theta-gamma相位-幅值耦合增强有关。 展开更多
关键词 极低频磁场 阿尔兹海默病 空间工作记忆 神经振荡 淀粉样蛋白-β
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单体、寡聚体及纤维状Aβ毒性作用的比较研究 被引量:4
7
作者 孔繁军 陈强 +1 位作者 周亮 崔德华 《中国实验诊断学》 2012年第9期1569-1571,共3页
目的采用Alzheimer’s disease(AD)动物模型,阐明单体与寡聚体Aβ对神经细胞毒性作用。方法本实验孵育获得寡聚体及纤维状Aβ,采用核黄素标记光度法测定Aβ凝聚度。采用寡聚体Aβ损伤大鼠海马CA1区来制备AD大鼠模型,并采用流式细胞术法... 目的采用Alzheimer’s disease(AD)动物模型,阐明单体与寡聚体Aβ对神经细胞毒性作用。方法本实验孵育获得寡聚体及纤维状Aβ,采用核黄素标记光度法测定Aβ凝聚度。采用寡聚体Aβ损伤大鼠海马CA1区来制备AD大鼠模型,并采用流式细胞术法检测AD大海马细胞凋亡情况。结果寡聚体Aβ神经毒性比单体及纤维化Aβ组,海马含亚G1期细胞百分数明显增多;寡聚体Aβ组与单体及纤维化Aβ组相比较具有显著性差异。结论寡聚体Aβ神经毒性比单体及纤维状Aβ更加显著,寡聚体Aβ可导致神经细胞凋亡,神经细胞凋亡参与了AD的发病。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 凋亡 单体 寡聚体 纤维状
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Aβ寡聚体与阿尔采末病及其靶点药物研究进展 被引量:3
8
作者 刘明 辛现良 +2 位作者 周瑞宇 杜晓光 耿美玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1554-1557,共4页
Aβ在阿尔采末病(AD)中起着重要的作用,寡聚化的Aβ分子被认为是AD发病的原发性因子,能够通过不同的机制发挥神经毒性作用,引发记忆损伤和神经元丢失,以Aβ为作用靶点的药物开发和应用也已初露端倪。该文对Aβ寡聚体在AD中的毒性作用和... Aβ在阿尔采末病(AD)中起着重要的作用,寡聚化的Aβ分子被认为是AD发病的原发性因子,能够通过不同的机制发挥神经毒性作用,引发记忆损伤和神经元丢失,以Aβ为作用靶点的药物开发和应用也已初露端倪。该文对Aβ寡聚体在AD中的毒性作用和以Aβ为作用靶点的药物开发现状作一综述。 展开更多
关键词 寡聚体 阿尔采末病 作用靶点
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基于转基因细胞模型研究通络醒脑泡腾片对Aβ代谢的影响 被引量:2
9
作者 付文君 代渊 +4 位作者 魏江平 郑航 马涛 徐世军 王永炎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1571-1578,共8页
目的 采用转基因细胞模型,考察通络醒脑泡腾片对Aβ生成和降解关键靶点的影响,探索其抗阿尔茨海默病的作用机制。方法 体外培养SH-SY5Y-APP和SH-SY5Y-C99细胞,不同浓度的含药血清的培养液(含通络醒脑泡腾片血清0%-40%)干预48h,采用MT... 目的 采用转基因细胞模型,考察通络醒脑泡腾片对Aβ生成和降解关键靶点的影响,探索其抗阿尔茨海默病的作用机制。方法 体外培养SH-SY5Y-APP和SH-SY5Y-C99细胞,不同浓度的含药血清的培养液(含通络醒脑泡腾片血清0%-40%)干预48h,采用MTT法确定无毒浓度,LDH法检测细胞活性,ELISA法检测Aβ1-40和Aβ1-42分泌量;采用RT-PCR和Westernblot检测APP基因和蛋白表达,West-ernblot法检测APP剪切片段sAPPα和sAPPβ蛋白表达;qRT-PCR、Westernblot及荧光检测试剂盒分别测定BACE1基因、蛋白水平和酶活性;Westernblot检测Aβ降解酶IDE和NEP蛋白表达;体外培养SH-SY5Y,通络醒脑泡腾片不同浓度的含药血清培养液孵育48h,MTT法检测Aβ25-35诱导后细胞存活率。结果 通络醒脑泡腾片含药血清对SH-SY5Y-APP和SH-SY5Y-C99细胞均无明显毒性作用(P〉0.05);通络醒脑泡腾片含药血清可明显抑制SH-SY5Y-APP细胞Aβ的分泌(P〈0.05),对SH-SY5Y-C99细胞Aβ分泌量无影响;对SH-SY5Y-APP细胞APP基因及蛋白水平、sAPPα及Aβ降解酶NEP和IDE蛋白表达均无明显影响(P〉0.05),但对sAPPβ蛋白有明显抑制作用(P〈0.05),且呈剂量依赖关系,对BACE1基因、蛋白水平、活性均有明显抑制作用(P〈0.01)。此外,研究发现通络醒脑泡腾片含药血清对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用(P〈0.01)。结论 通络醒脑泡腾片对β-分泌酶具有明显的抑制作用,并能对抗Aβ神经细胞毒性作用,提示抑制β-分泌酶和拮抗Aβ神经细胞毒性是通络醒脑泡腾片发挥抗阿尔茨海默病的主要作用机制。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 通络醒脑泡腾片 SH-SY5Y-APP细胞 SH-SY5Y-C99细胞 生成 降解
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活血荣络方对Aβ25-35诱导的星形胶质细胞阿尔兹海默病损伤的抑制作用及其机制研究 被引量:3
10
作者 陈瑶 宋洋 +4 位作者 杨仁义 杨小钰 胡华 刘利娟 周德生 《中医药学报》 CAS 2020年第9期21-26,共6页
目的:本研究旨通过生物信息学和细胞实验研究,揭示活血荣络方治疗阿尔兹海默病的分子机制。方法:通过GeneCards、String、DAVID数据库预测AD疾病潜在靶点,并对潜在靶点进行"蛋白-蛋白"互作网络(PPI)、GO分析,绘制"靶点-G... 目的:本研究旨通过生物信息学和细胞实验研究,揭示活血荣络方治疗阿尔兹海默病的分子机制。方法:通过GeneCards、String、DAVID数据库预测AD疾病潜在靶点,并对潜在靶点进行"蛋白-蛋白"互作网络(PPI)、GO分析,绘制"靶点-GO"热图。同时采用体外Aβ25-35损伤星形胶质细胞诱导AD细胞模型,并随机分为6组,分别为空白组、多奈哌齐组、sFRP、0.5倍活血荣络方组、1倍活血荣络方组、2倍活血荣络方组组,加相应刺激分别处理12 h、24 h、48 h、72 h。采用MTT法检测细胞活性、免疫组化法检测APP、Aβ蛋白定位、定量表达,以初步验证生物信息学预测结果。结果:收集筛选出AD共35个靶点,其中APP、APOE、PSEN1、PSEN2、SNCA相互作用明显,且APP、APOE在GO中显著富集。MTT结果显示各组OD值随着时间的延长而增高,各药物组细胞活性均高于空白组,其中2倍组细胞活性最高;sFRP组低于空白组。免疫组化结果显示药物组Aβ及APP的表达均低于空白组,2倍活血荣络方组均低于其它给药组,并且各组Aβ及APP表达随时间延长有逐渐减少趋势,但2倍活血荣络方组减少最明显。结论:基于"阴虚血瘀-荣气虚滞"理论立方的活血荣络方可能通过多靶点、多成分、多通路发挥治疗AD疾病的作用,并进一步实验验证其治疗作用可能与抑制APP、Aβ蛋白的表达,降低AChE活性,从而改善神经突触炎症毒性有关。 展开更多
关键词 生物信息学 活血荣络方 阿尔兹海默病 25-35损伤星形胶质细胞 APP
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EPB41L4A-AS1影响神经胶质细胞清除Aβ的作用机制
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作者 牛丽欣 张绪非 +3 位作者 李天姿 李洺慧 尹瑞雪 王子强 《现代生物医学进展》 2025年第12期1942-1947,共6页
目的:探讨EPB41L4A-AS1影响的全转录组基因表达谱的变化,揭示其在AD进展中的可能作用机制。方法:利用shRNA技术构建稳定低表达EPB41L4A-AS1的人脑胶质瘤细胞U251。利用RNA-seqing技术进行转录组测序,筛选受EPB41L4A-AS1调控的转录本。通... 目的:探讨EPB41L4A-AS1影响的全转录组基因表达谱的变化,揭示其在AD进展中的可能作用机制。方法:利用shRNA技术构建稳定低表达EPB41L4A-AS1的人脑胶质瘤细胞U251。利用RNA-seqing技术进行转录组测序,筛选受EPB41L4A-AS1调控的转录本。通过KEGG Pathway和GO分析探讨EPB41L4A-AS1调控的信号通路和生物学过程。利用抗GFAP抗体进行免疫荧光实验,观察EPB41L4A-AS1对神经胶质细胞的活性水平的影响。结果:敲低U251细胞内EPB41L4A-AS1的表达水平可以显著影响多个转录本的表达水平,其中上调的有626个,下调的949个。进一步分析发现,下调的转录本与AD、胶质细胞的活化、增殖以及淀粉样纤维的形成有关,并参与了多个神经胶质细胞清除Aβ过程的信号通路。细胞实验证明EPB41L4A-AS1可以影响胶质细胞突触的长度及其活性。结论:EPB41L4A-AS1可能通过多种信号通路影响了神经胶质细胞对Aβ的清除过程。 展开更多
关键词 EPB41L4A-AS1 转录组测序 神经胶质细胞
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多肽修饰的转铁蛋白抑制Aβ蛋白聚集
12
作者 柯琪 王甦晓 《胶体与聚合物》 2025年第3期111-113,共3页
本文以具备Aβ蛋白靶向功能的多肽修饰转铁蛋白(Tf)捕捉Aβ蛋白并抑制其聚集。采用EDC-NHS生物偶联的方式在转铁蛋白表面偶联具有靶向Aβ蛋白功能的多肽。通过动态光散射(DLS)、SDS-PAGE以及ThT荧光检测分析多肽修饰的转铁蛋白抑制Aβ... 本文以具备Aβ蛋白靶向功能的多肽修饰转铁蛋白(Tf)捕捉Aβ蛋白并抑制其聚集。采用EDC-NHS生物偶联的方式在转铁蛋白表面偶联具有靶向Aβ蛋白功能的多肽。通过动态光散射(DLS)、SDS-PAGE以及ThT荧光检测分析多肽修饰的转铁蛋白抑制Aβ蛋白聚集情况。结果表明:多肽修饰的转铁蛋白能有效捕捉Aβ蛋白,并抑制Aβ蛋白聚集,这对于阿尔茨海默病的早期治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 蛋白聚集 转铁蛋白 抑制
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苯乙烯基吡啶类Aβ显像剂^(18)F-SPy5的制备与初步评价
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作者 李忠勇 高惠波 赵海龙 《同位素》 2025年第4期313-323,共11页
^(18)F-AV45是首个获得美国食品药品监督管理局上市许可的β淀粉样蛋白(Aβ)显像药物,也是全球首个诊断阿尔茨海默病(AD)的正电子发射断层显像药物,本研究对^(18)F-AV45异构体、苯乙烯基吡啶衍生物^(18)F-SPy5进行初步研究,首先通过亲... ^(18)F-AV45是首个获得美国食品药品监督管理局上市许可的β淀粉样蛋白(Aβ)显像药物,也是全球首个诊断阿尔茨海默病(AD)的正电子发射断层显像药物,本研究对^(18)F-AV45异构体、苯乙烯基吡啶衍生物^(18)F-SPy5进行初步研究,首先通过亲核取代反应合成^(18/19)F-SPy5和^(18/19)F-AV45,^(19)F-SPy5和^(19)F-AV45经HRMS、^(1)H NMR和^(13)C NMR确证结构,^(18)F-SPy5和^(18)F-AV45经HPLC确定放化纯度和摩尔活度,然后对^(18)F-SPy5进行初步评价,并与^(18)F-AV45比较。^(18)F-SPy5放化纯度>99%,摩尔活度3.90×10^(9) MBq/mol,具有适宜的亲脂性和良好的体外稳定性。^(19)F-SPy5在体外对Aβ聚集体具有较高亲和活性(Ki=25.9±7.9 nmol),^(18)F-SPy5能够特异性标记AD转基因小鼠脑切片上的Aβ斑块。^(18)F-SPy5在正常小鼠体内初始脑摄取较高、脑清除较快,有轻微脱氟,血液清除符合双室模型。与^(18/19)F-AV45相比,^(19)F-SPy5对Aβ聚集体亲和活性较高,^(18)F-SPy5初始正常脑摄取水平较高、正常脑清除较快,头骨摄取水平更低,但^(19)F-SPy5体外荧光染色、^(18)F-SPy5体外放射性自显影结果略差。结果表明,^(18)F-SPy5具备作为Aβ显像剂的潜力,但还需更深入评价,并可能需要进一步结构修饰以提升性能。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病(AD) 正电子发射断层显像(PET) β淀粉样蛋白() 苯乙烯基吡啶衍生物
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Aβ寡聚体与阿尔茨海默病的研究进展 被引量:4
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作者 孙婧霞 陈雪 蒋常文 《临床医学工程》 2012年第12期2274-2276,共3页
阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是老年性痴呆的主要类型,老年斑和神经原纤维缠结是AD的主要病理特征。随着近年来对AD研究的深入,越来越多的证据显示Aβ可能是AD发生的原发性病理因子,Aβ寡聚体比Aβ纤维具有更大的神经毒性。由于... 阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是老年性痴呆的主要类型,老年斑和神经原纤维缠结是AD的主要病理特征。随着近年来对AD研究的深入,越来越多的证据显示Aβ可能是AD发生的原发性病理因子,Aβ寡聚体比Aβ纤维具有更大的神经毒性。由于Aβ产生和清除之间的平衡逐渐改变,聚集态的Aβ累积引发连串的复杂反应,最终导致神经元死亡和认知功能障碍。结合近年来的研究成果,综述了Aβ寡聚体(Aβ-derived diffusible ligands,ADDLs)和阿尔茨海默病最新的研究进展。 展开更多
关键词 寡聚体 纤维 阿尔茨海默病 Β-淀粉样蛋白 NALP1
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Aβ聚集结构变化的研究进展 被引量:1
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作者 刘根 程婉雯 +3 位作者 刘宇 刘婷婷 崔理立 赵斌 《神经疾病与精神卫生》 2015年第2期196-199,共4页
β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein ,Aβ)在脑内的异常聚集在阿尔茨海默病(Alzheimer disease ,AD)的发生、发展中扮演着重要的角色。AD患者脑内Aβ代谢失衡,过量的Aβ蛋白会自发形成聚集体,引起神经细胞功能障碍、死亡,最... β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein ,Aβ)在脑内的异常聚集在阿尔茨海默病(Alzheimer disease ,AD)的发生、发展中扮演着重要的角色。AD患者脑内Aβ代谢失衡,过量的Aβ蛋白会自发形成聚集体,引起神经细胞功能障碍、死亡,最终导致痴呆。目前研究显示Aβ聚集体主要为寡聚体,原纤维及纤维3种聚集形式,这3种聚集形式的构象不尽相同,对神经细胞造成的损伤方式也有所不同。进一步了解Aβ聚集体的分子结构,有助于对Aβ致病分子机制的认识,为以Aβ为靶点的AD抑制剂开发提供理论基础,本文针对最近关于Aβ聚集体分子结构的研究的前沿进展作一综述。 展开更多
关键词 阿尔兹海默病 Β-淀粉样蛋白 寡聚体 纤维 抑制剂
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Aβ_(42)及其C端亚单位疫苗接种正常SD大鼠后产生高滴度的抗Aβ_(42)抗体 被引量:22
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作者 林贤 汪华侨 +1 位作者 徐杰 姚志彬 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期231-235,共5页
目的 探讨Aβ4 2 及其C端亚单位肽疫苗接种正常成年SD大鼠后能否产生高滴度的抗Aβ4 2 抗体。 方法 将Aβ36~ 4 2 与不同载体偶联制成的亚单位疫苗和Aβ4 2 全肽疫苗分别接种于SD大鼠。用Westernblotting方法和间接ELISA法检测其血... 目的 探讨Aβ4 2 及其C端亚单位肽疫苗接种正常成年SD大鼠后能否产生高滴度的抗Aβ4 2 抗体。 方法 将Aβ36~ 4 2 与不同载体偶联制成的亚单位疫苗和Aβ4 2 全肽疫苗分别接种于SD大鼠。用Westernblotting方法和间接ELISA法检测其血清和脑匀浆上清液中的抗体的特异性以及滴度 ,并用HE染色对大鼠的脑、肝、脾和肾进行形态学观察。 结果 第 2次接种后各实验组的血清均开始有抗Aβ4 2 抗体产生 ,且抗体滴度随接种次数的增多而增高 ,第 4次接种后各实验组血清的抗Aβ4 2 抗体滴度均达到 1∶10 0 0 0以上 ,同时脑匀浆上清液也检测到低滴度的抗Aβ4 2 抗体 ;实验鼠的大脑、肝、脾和肾均未发现病理性变化。 结论 Aβ4 2 及其亚单位疫苗 (Aβ36~ 4 2 )接种于正常SD大鼠后 ,均能产生高滴度的抗Aβ4 2 抗体 。 展开更多
关键词 42 C端 亚单位疫苗 预防接种 SD大鼠 高滴度抗体 老年性痴呆
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高脂血症与Aβ的协同作用促进引发阿尔茨海默症 被引量:13
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作者 侯江淇 张欣 +5 位作者 龙倩 楚世峰 郭蕾 贺文彬 张俊龙 陈乃宏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期498-506,共9页
目的探讨高脂血症与β样淀粉蛋白(amyloid-beta peptides,Aβ)在衰老大鼠发生阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)时的相互作用及病理变化。方法 70只♂SD大鼠按体重随机分为7组,除sham组及Aβ_(25-35)、HLD组外,其余大鼠均给予... 目的探讨高脂血症与β样淀粉蛋白(amyloid-beta peptides,Aβ)在衰老大鼠发生阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)时的相互作用及病理变化。方法 70只♂SD大鼠按体重随机分为7组,除sham组及Aβ_(25-35)、HLD组外,其余大鼠均给予皮下注射D-半乳糖(D-gal)6周,制备衰老模型;在此基础上给予高脂饲料,制备高脂血症模型,以及双侧海马CA1区定位注射凝聚态Aβ_(25-35)构建衰老期高脂血症伴发AD的复合模型。采用Morris水迷宫、尼氏染色、Western blot、免疫组织化学染色等方法,观察高脂血症对老年AD大鼠学习记忆、海马神经元凋亡以及tau蛋白过度磷酸化特异性位点改变的影响。结果在Morris水迷宫实验中,与sham组相比,Aβ_(25-35)组、D-gal+Aβ_(25-35)组以及D-gal+Aβ_(25-35)+HLD组大鼠在目标象限停留时间明显减少(P<0.01)、穿越平台的次数也减少(P<0.01),而D-gal组、HLD组、D-gal+HLD组与sham组相比差异无显著性。尼氏染色中,与sham组相比,Aβ_(25-35)组、D-gal+Aβ_(25-35)组以及D-gal+Aβ_(25-35)+HLD组海马神经元凋亡率明显增多(P<0.01);与Aβ_(25-35)组相比,D-gal+Aβ_(25-35)组神经元凋亡率无明显变化,但D-gal+Aβ_(25-35)+HLD组神经元凋亡率明显增加(P<0.01);与Dgal+Aβ_(25-35)组相比,D-gal+Aβ_(25-35)+HLD组神经元凋亡率明显增多(P<0.01)。Western blot中,与sham组、Aβ_(25-35)组、Dgal组、HLD组、D-gal+Aβ_(25-35)组以及D-gal+HLD组相比,Dgal+Aβ_(25-35)+HLD组大鼠tau蛋白Thr181位点的磷酸化明显增加(P<0.01)。结论高脂血症对老年大鼠的学习记忆能力以及抗氧化能力无明显影响;高脂血症可与Aβ协同作用,加重Aβ对神经元的损伤,并促进tau蛋白Thr181位点的过度磷酸化,是引发AD的危险因素。 展开更多
关键词 高脂血症 阿尔茨海默病 TAU 过度磷酸化 衰老
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Cu^2+-Aβ复合物与Aβ单体诱导神经元H2O2释放作用的比较研究 被引量:1
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作者 倪雯雯 谭小芳 +4 位作者 于丰祥 宫平 陈功 侯丽娜 李娟 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第8期1401-1406,共6页
目的:比较不同摩尔比Cu^(2+)-Aβ复合物与Aβ单体诱导神经元H_2O_2释放作用的差异。方法:制备不同摩尔比(0.1-5)的Cu^(2+)-Aβ复合物,通过检测硫磺素T(Thioflavin T,Th T)荧光强度考察Cu^(2+)对Aβ纤丝形成的影响。利用原代培养的大鼠... 目的:比较不同摩尔比Cu^(2+)-Aβ复合物与Aβ单体诱导神经元H_2O_2释放作用的差异。方法:制备不同摩尔比(0.1-5)的Cu^(2+)-Aβ复合物,通过检测硫磺素T(Thioflavin T,Th T)荧光强度考察Cu^(2+)对Aβ纤丝形成的影响。利用原代培养的大鼠海马神经元细胞,分别以不同摩尔比Cu^(2+)-Aβ复合物,不同浓度Cu^(2+)-Aβ复合物(摩尔比为1),以及Aβ单体和Cu^(2+)处理细胞,检测培养上清中的H_2O_2含量;分离线粒体,分别检测不同浓度Cu^(2+)-Aβ复合物(摩尔比为1),以及Aβ单体和Cu^(2+)处理后H_2O_2的释放;观察不同摩尔比Cu^(2+)-Aβ复合物,不同浓度Cu^(2+)-Aβ复合物(摩尔比为1),以及Aβ单体和Cu^(2+)对神经元细胞活力的影响。结果:(1)Th T荧光试验结果表明,Cu^(2+)与Aβ(10μM)摩尔比为1~5范围内可明显抑制Aβ纤丝形成。(2)Cu^(2+)-Aβ复合物(摩尔比为1~5;Aβ浓度为10μM)以及摩尔比为1的Cu^(2+)-Aβ复合物(Aβ浓度分别为5,10μM)可显著诱导神经元释放H_2O_2;另外,摩尔比为1时,Cu^(2+)-Aβ复合物还可诱导神经元线粒体内H_2O_2释放;上述作用均强于Aβ单体或Cu^(2+)。(3)Cu^(2+)-Aβ复合物(摩尔比为1~5)可显著降低神经元细胞活力,该作用强于Aβ单体或Cu^(2+)。结论:与Aβ单体相比,Cu^(2+)-Aβ复合物诱发神经元细胞及其线粒体释放H_2O_2作用更强,并诱发更为明显的神经元毒性。提示Cu^(2+)与Aβ之间的配位结合可能增强其引发活性氧释放以及神经元毒性反应;Cu^(2+)-Aβ复合物引发的活性氧可能主要来自线粒体。 展开更多
关键词 Cu^2+-复合物 神经元 活性氧 阿尔茨海默病
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葛根素对Aβ(25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响 被引量:12
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作者 张海英 胡海涛 +3 位作者 刘亦恒 王洪权 冯改丰 陈国敏 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期543-546,共4页
目的:应用Aβ25-35孵育PC12细胞株制作细胞损伤模型,以研究葛根素对模型细胞凋亡的影响。方法:用Aβ25-35和葛根素对PC12细胞进行处理,MTT法检测干预后不同时间点的细胞活性,电镜观察细胞形态的改变,异硫氰酸荧光素(FITC)标记的Annexin... 目的:应用Aβ25-35孵育PC12细胞株制作细胞损伤模型,以研究葛根素对模型细胞凋亡的影响。方法:用Aβ25-35和葛根素对PC12细胞进行处理,MTT法检测干预后不同时间点的细胞活性,电镜观察细胞形态的改变,异硫氰酸荧光素(FITC)标记的AnnexinⅤ及碘化丙锭(PI)双染流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率,以确认药物的保护作用。结果:PC12细胞经过Aβ25-35处理后,细胞生存率下降,且呈现时间依赖性。电镜观察显示Aβ25-35可导致PC12细胞凋亡,使用葛根素后,模型细胞凋亡情况明显改善。流式细胞技术显示Aβ25-35损伤模型组凋亡率明显升高,使用葛根素后,细胞凋亡率下降,具有显著性差异(P<0.05)。结论:葛根素可拮抗Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡,具有一定的神经细胞保护功能。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 (25-35) 葛根素 凋亡
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APP17肽对Aβ_(25-35)诱导神经细胞凋亡保护作用 被引量:19
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作者 蔡贞 姬志娟 +1 位作者 徐艳玲 盛树力 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期31-35,共5页
目的 通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ2 5 3 5诱发SH SY5Y细胞凋亡是否有保护作用 ,并对其保护作用机制作进一步的探讨。方法 选用细胞形态观察、半定量LM PCRDNAladderAssay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17... 目的 通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ2 5 3 5诱发SH SY5Y细胞凋亡是否有保护作用 ,并对其保护作用机制作进一步的探讨。方法 选用细胞形态观察、半定量LM PCRDNAladderAssay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17肽是否对Aβ2 5 3 5诱发SH SY5Y细胞凋亡有保护作用 ;通过测定细胞MTT代谢率 ,共聚焦显微镜观察Aβ2 5 3 5和APP17肽对细胞内过氧化物含量、线粒体膜电位的影响以及WesternBlotting观察细胞内凋亡诱导因子AIF及核转录因子NF κB的表达情况 ,探讨了APP17肽的保护作用机制。结果 APP17肽可以明显改善Aβ2 5 3 5造成的细胞形态损伤 ,显著降低细胞凋亡比率 ;与Aβ2 5 3 5损伤组相比 ,APP17肽预孵育能明显提高细胞MTT代谢率 ,稳定线粒体膜电位 ,减少AIF的表达 ;有效降低Aβ2 5 3 5引起的细胞内过氧化物含量增高 ;并且使具有神经保护作用的核转录因子NF κB表达增加。结论 APP17肽可以稳定线粒体功能、降低细胞内过氧化物含量 ,激活NF κB并使其持续表达 ,对Aβ2 5 3 5诱导的SH SY5Y细胞凋亡有比较明显的保护作用。 展开更多
关键词 25-35 APP17肽 SH-SY5Y细胞 线粒体 神经细胞 细胞凋亡 神经退行性疾病
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