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利用免疫信息学方法设计猪产肠毒素大肠杆菌987P-F18蛋白的多表位疫苗
1
作者 徐佳微 李铁山 +6 位作者 李昕 刘意 赵格 曲志娜 宋时萍 张喜悦 王君玮 《华北农学报》 北大核心 2025年第S1期323-328,共6页
利用免疫信息学方法设计一种预防猪大肠杆菌感染的多表位疫苗,阻断产肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌株与仔猪肠道上皮细胞的黏附和定植以预防仔猪腹泻。通过免疫信息学工具对ETEC的黏附素987P和F18的B细胞抗原表位、Th细胞表位、CTL细胞表位进... 利用免疫信息学方法设计一种预防猪大肠杆菌感染的多表位疫苗,阻断产肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌株与仔猪肠道上皮细胞的黏附和定植以预防仔猪腹泻。通过免疫信息学工具对ETEC的黏附素987P和F18的B细胞抗原表位、Th细胞表位、CTL细胞表位进行预测,筛选出优势表位。将优势表位按照3种不同表位排列顺序通过Linker连接成多表位疫苗,并对其抗原性、致敏性以及三级结构进行预测。结果显示,共筛选出7个优势表位。抗原性试验显示,融合多肽Ⅰ的抗原性为1.0692;融合多肽Ⅱ的抗原性为1.0892;融合多肽Ⅲ的抗原性为1.0507,都具有良好的抗原性。过敏性试验结果显示,融合多肽Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都无过敏性。三级结构结果显示,3种融合多肽结构表位的暴露性都较好,容易和抗体结合,并且在蛋白分子的构象中都符合要求。此外,还根据不同的规则,排列了3种氨基酸序列,并按照乳酸菌密码子嗜好性,反向翻译为核苷酸序列,插入至pET28a质粒中,分别获得了pET28a-9F1、pET28a-9F2和pET28a-9F3质粒。 展开更多
关键词 大肠杆菌 多表位疫苗 免疫信息学 987P F18
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冬小麦轮选987航天辐射二代农艺性状变异观察及分析 被引量：3
2
作者 李慧敏 赵凤梧 +4 位作者 杨建忠 李爱国 李明哲 郝永波 彭海成 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第B08期68-71,共4页
通过对我国首颗航天育种专用卫星“实践八号（2006）”搭载冬小麦轮选987SP2分离世代及地面对照农艺性状进行观察发现：航天辐射诱导冬小麦轮选987发生变异，sP2群体变异株率为4．06％。在入选的变异后代中，株高、穗长、株穗数、主茎... 通过对我国首颗航天育种专用卫星“实践八号（2006）”搭载冬小麦轮选987SP2分离世代及地面对照农艺性状进行观察发现：航天辐射诱导冬小麦轮选987发生变异，sP2群体变异株率为4．06％。在入选的变异后代中，株高、穗长、株穗数、主茎小穗数、主茎穗粒数、主茎小穗密度、单株平均穗粒数、千粒重诸性状变异幅度不一，分别为-40．39％～29．40％、-30．23％～40．70％、-70．37％～107．41％、-47．78％～14．88％、-22．22％-78．78％、-69．07％。44．33％、-55．57％-21．63％、-59．66％．29．99％和-81．12％．84．80％。变异是双向的，上述性状间正向变异株率为0．74％。2．75％，负向变异株率为1．27％．2．90％。就单一性状而言，上述各性状单株变异率分别为4．05％，3．87％，3．44％，2．50％，3．39％，2．45％，4．05％和4．02％。 展开更多
关键词 小麦 轮选987 航天辐射 SP2 诱变率 性状变异
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小麦新品种轮选987的选育及性状表现 被引量：13
3
作者 杨丽 王山荭 刘秉华 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期53-53,共1页
矮败小麦是具有矮秆基因标记的显性核不育材料,是理想的群体改良工具.我们利用矮败小麦开展轮回选择育种,已经探索出一套方便实用的轮回选择技术,并使矮败小麦群体得到了显著改良,选育出一批优良的品种(系),其中轮选987就是代表品种之一... 矮败小麦是具有矮秆基因标记的显性核不育材料,是理想的群体改良工具.我们利用矮败小麦开展轮回选择育种,已经探索出一套方便实用的轮回选择技术,并使矮败小麦群体得到了显著改良,选育出一批优良的品种(系),其中轮选987就是代表品种之一.轮选987高产、稳产,且品质优良,2001年和2002年参加国家小麦品种区域试验北方冬麦区区试、生产试验,其产量均为第一,于2003年通过了国家农作物品种审定委员会的审定,推广应用前景广阔. 展开更多
关键词 小麦 轮选987品种 选育 性状表现 特征特性 适应地区 栽培技术 产量表现
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冬小麦轮选987的生育特性及节水高产栽培技术研究 被引量：4
4
作者 王志伟 谢晓美 +2 位作者 马文勋 杨太新 陈瑞修 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第23期12394-12396,共3页
[目的]明确冬小麦轮选987的高产潜力。[方法]在河北省定兴县大田限水条件下,对冬小麦轮选987群体生长发育动态及节水高产栽培技术进行了研究。[结果]轮选987在有机质18.3g/kg,碱解氮105.0mg/kg,速效磷26.0mg/kg,速效钾104.0mg/kg的试验... [目的]明确冬小麦轮选987的高产潜力。[方法]在河北省定兴县大田限水条件下,对冬小麦轮选987群体生长发育动态及节水高产栽培技术进行了研究。[结果]轮选987在有机质18.3g/kg,碱解氮105.0mg/kg,速效磷26.0mg/kg,速效钾104.0mg/kg的试验地上种植,全生育期只灌3水,实现了8352.7kg/hm2的产量水平,产量构成因素为:总穗数792.8万/hm2,穗粒数26.4粒,千粒重45.7g。主要群体指标为:孕穗期叶面积指数达最高值,平均为6.90,开花后叶面积指数缓慢下降;生物产量为19172.7kg/hm2,经济系数为0.436。[结论]轮选987品种适应性强,增产潜力大,适宜在河北省定兴县及保定市北部冬麦区进行推广种植。 展开更多
关键词 冬小麦 轮选987 生育特性 节水 高产
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产肠毒素性大肠杆菌F41与987P菌毛蛋白的串联表达 被引量：5
5
作者 逄媛 沈志强 +4 位作者 崔言顺 聂小想 王金良 郭广君 李建亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期271-274,共4页
根据GenBank中发表的E.coli F41、987P基因序列,分别设计合成一对引物。利用PCR技术,分别以大肠杆菌C83707的基因组和C83710的质粒为模板扩增F41、987P基因。通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切、连接和转化,构建了含F41-987P串联表... 根据GenBank中发表的E.coli F41、987P基因序列,分别设计合成一对引物。利用PCR技术,分别以大肠杆菌C83707的基因组和C83710的质粒为模板扩增F41、987P基因。通过分离、纯化、限制性核酸内切酶酶切、连接和转化,构建了含F41-987P串联表达载体的重组菌株BL21(DE3)/pETF41-987P。经酶切、PCR鉴定和DNA序列分析,证实了构建的重组质粒pETF41-987P中含有F41-987P融合基因,且基因序列和阅读框架均正确。经过SDS-PAGE分析,串联表达蛋白含量在30%左右,经Western blot检测,该串联表达蛋白能被大肠杆菌F41、987P阳性血清识别。反向间接血凝试验结果,F41效价为26～28,987P效价为28～210。说明F41-987P融合蛋白具有良好的抗原性。表明构建的重组菌株可以作为预防新生仔猪大肠杆菌性腹泻基因工程疫苗的候选菌株。 展开更多
关键词 大肠杆菌 987P F41 串联表达
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仔猪黄痢K88-K99-987p-F41多价菌毛混合油乳剂灭活疫苗的制备及小鼠免疫保护试验 被引量：5
6
作者 戴鼎震 李鹏 +3 位作者 周长锋 汪银才 王晓丽 夏兴霞 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第1期55-57,共3页
根据我国仔猪大肠杆菌性腹泻流行的实际情况 ,用产菌毛粘附因子的野生分离菌株HN2 0 0 1(K88ab)、HN2 0 0 2 (K88ac)、HN2 0 0 3(K88ad)、HN2 0 0 4 (K99)、C83915 (987p)及C836 2 1(F4 1)提取菌毛制成 5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗 ,5... 根据我国仔猪大肠杆菌性腹泻流行的实际情况 ,用产菌毛粘附因子的野生分离菌株HN2 0 0 1(K88ab)、HN2 0 0 2 (K88ac)、HN2 0 0 3(K88ad)、HN2 0 0 4 (K99)、C83915 (987p)及C836 2 1(F4 1)提取菌毛制成 5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗 ,5批多价灭活疫苗对小鼠的平均保护率达 95 0 % (38 4 0 )。 展开更多
关键词 灭活疫苗 制备 小鼠 免疫保护试验 仔猪 黄痢 K88-K99-987p-F41多价菌毛混合油乳剂
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K_(88)-K_(99)-^(987)P-F_(41)菌毛疫苗预防仔猪黄痢的效果 被引量：3
7
作者 李鹏 王家乡 +1 位作者 殷裕斌 龚大春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第5期10-11,共2页
关键词 仔猪 黄痢 K88-K99-^987P-F41菌毛疫苗 大肠杆菌性腹泻 预防接种 免疫保护力
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冬小麦品种轮选987的特征特性和良种良法配套栽培技术 被引量：2
8
作者 朱光 刘秉华 +7 位作者 杨丽 刘宏伟 周阳 孟凡华 王山荭 杨建平 崔淑兰 洪立中 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期85-86,共2页
关键词 冬小麦品种 轮选987 配套栽培技术 农作物品种审定委员会 良种良法 中国农业科学院 特性 特征
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仔猪黄痢K88-K99-987p-F41多价菌毛疫苗的制备及小鼠免疫试验 被引量：4
9
作者 李鹏 王家乡 程碧军 《动物医学进展》 CSCD 2006年第9期55-58,96,共5页
为了更好地预防仔猪黄痢,选取野生分离菌株HN2001(K88ab)、HN2002(K88ac)、HN2003(K 88ad)、HN2004(K 99)、HN2005(987p)和HN2006(F41)培养后用低温磁力搅拌法提取菌毛,制成5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗。试验结果表明,5批多价灭活疫苗... 为了更好地预防仔猪黄痢,选取野生分离菌株HN2001(K88ab)、HN2002(K88ac)、HN2003(K 88ad)、HN2004(K 99)、HN2005(987p)和HN2006(F41)培养后用低温磁力搅拌法提取菌毛,制成5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗。试验结果表明,5批多价灭活疫苗对小鼠的平均保护率达95.0%,为进一步进行本体动物试验提供了有价值的参考资料。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 K88-K99—987p—F41多价菌毛疫苗 研制
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K_(88)、K_(99)、987P基因工程三价苗的免疫效力试验 被引量：2
10
作者 徐泉兴 周智爱 +11 位作者 尤永进 赵洪兴 庄乐平 乌正芳 饶忠 王健 王其泉 朱宝仙 吕永济 奚丽棣 周金鑫 何军 《上海畜牧兽医通讯》 北大核心 1995年第2期12-13,共2页
对六个批次的K_(88)、K_(99)、987P基因工程三价苗作免疫效力测定。第一次试验,对用三个批次基因工程三价苗被动免疫(通过初乳)的仔猪,以三种强毒菌进行攻击,死亡率上均获得100%保护,黄痢腹泻发病率上获得98%保护;而对照仔猪,对三种强... 对六个批次的K_(88)、K_(99)、987P基因工程三价苗作免疫效力测定。第一次试验,对用三个批次基因工程三价苗被动免疫(通过初乳)的仔猪,以三种强毒菌进行攻击,死亡率上均获得100%保护,黄痢腹泻发病率上获得98%保护;而对照仔猪,对三种强毒菌的攻击,发病率均达100%,死亡率分别是K_(88)为96%、K_(99)为72.7%、987P为80%,平均83.3%。第二试验的另外三个批次的基因工程三价苗的被动免疫(通过初乳)仔猪,虽然三种强毒菌的攻击剂量各增加三分之一,但保护率仍达到与第一次试验一致的结果;而对照仔猪,黄痢腹泻发病率均达100%,死亡率分别为K_(88)100%、K_(99)95%、987P91%,平均95%。 展开更多
关键词 K88 K99 987P 基因工程 被动免疫 保护率 疫苗
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K88、K99、987P基因工程三价苗野外应用效果的初步观察 被引量：1
11
作者 徐泉兴 周智爱 +9 位作者 尤永进 赵洪兴 庄乐平 乌正芳 饶忠 王健 王其泉 何军 范宏彬 张龙 《上海畜牧兽医通讯》 北大核心 1995年第2期8-9,共2页
对K_(88)、K_(99)、987P基因工程三价苗野外应用效果观察是通过对几个猪场的纵向比较,邻圈间、棚舍间、猪场间横向平行比较和被动免疫仔猪的接触感染三种方式进行的。通过8个猪场的纵向比较,结果发病率减少11～46.4个百分点,平均减少25.... 对K_(88)、K_(99)、987P基因工程三价苗野外应用效果观察是通过对几个猪场的纵向比较,邻圈间、棚舍间、猪场间横向平行比较和被动免疫仔猪的接触感染三种方式进行的。通过8个猪场的纵向比较,结果发病率减少11～46.4个百分点,平均减少25.4个百分点;死亡率减少7.6～29.1个百分点,平均减少21.4个百分点。应用基因工程三价苗后,这些场发病率控制在5％左右,死亡率控制在1％左右。横向平行比较结果,邻圈间、棚舍间免疫组发病率减少约40个百分点,死亡率减少约25个百分点。免疫场与对照场间比较,发病率分别减少54个和36个百分点,死亡率分别减少54个和28个百分点。接触感染结果,被动免疫仔猪无一头发病,也无死亡,而寄奶母猪亲生仔猪则发病率100％,死亡率98％。 展开更多
关键词 基因工程 疫苗 免疫 K88 K99 987P
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北方冬麦区高产小麦新品种轮选987 被引量：1
12
作者 杨丽 刘秉华 +2 位作者 王山荭 刘宏伟 朱光 《中国种业》 北大核心 2004年第12期51-51,共1页
关键词 轮选987 新品种 高产小麦 北方 可育株 麦区 矮败小麦 冬麦 国家 作物科学
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高产稳产小麦新品种——轮选987 被引量：1
13
作者 杨丽 王山荭 刘秉华 《农业科技通讯》 北大核心 2003年第5期40-40,共1页
轮选987是中国农业科学院作物所利用我国特有的矮败小麦进行轮回选择,经系谱法选育而成的小麦新品种.连续两年的国家小麦北部冬麦区区试和生产试验,产量都名列第一位.2002年12月通过国家品种审定.该品种表现高产、稳产,具有广阔的推广... 轮选987是中国农业科学院作物所利用我国特有的矮败小麦进行轮回选择,经系谱法选育而成的小麦新品种.连续两年的国家小麦北部冬麦区区试和生产试验,产量都名列第一位.2002年12月通过国家品种审定.该品种表现高产、稳产,具有广阔的推广应用前景. 展开更多
关键词 小麦 新品种 轮选987品种 特征特性 产量表现 栽培技术
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冬小麦新品种轮选987高产稳产栽培技术规程 被引量：5
14
作者 朱光 刘秉华 +2 位作者 杨丽 王山荭 刘宏伟 《农业科技通讯》 2006年第3期16-17,共2页
关键词 轮选987 小麦新品种 高产稳产 栽培技术规程 科学研究所 中国农科院 矮败小麦 技术培育 轮回选择 研究员
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猪产肠毒素大肠杆菌987P蛋白受体的鉴定
15
作者 朱国强 王建业 朱晓芳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期363-367,共5页
产肠毒素大肠杆菌(ETEC)定植于仔猪肠道的第一步是通过987P菌毛与小肠上皮细胞表面刷状缘大分子(BBV)结合。对分离的BBV进行SDS-PAGE和Ligand blot分析表明,在32～35KDa区域内有一条带能被987P菌毛探针所识别和结合,所结合的条带经胰蛋... 产肠毒素大肠杆菌(ETEC)定植于仔猪肠道的第一步是通过987P菌毛与小肠上皮细胞表面刷状缘大分子(BBV)结合。对分离的BBV进行SDS-PAGE和Ligand blot分析表明,在32～35KDa区域内有一条带能被987P菌毛探针所识别和结合,所结合的条带经胰蛋白酶消化后,通过微内径反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离出多条主要峰带蛋白峰带,采用衬质辅助激光解吸与电离质谱法(MALDI-MS)对主要峰带进行分析,结合多肽氨基酸测序和Blast同源性比较,得到3个氨基酸基序(AETAP、ALAAAGYDVEK和LGLK),其序列与人和鼠源的组蛋白H1高度同源;来源于仔猪小肠上皮细胞BBV的H1蛋白与BBV一样都能特异性结合纯化的987P菌毛蛋白。上述结果表明,仔猪小肠上皮细胞BBV的组蛋白H1是987P菌毛蛋白的受体。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 987P BBV 组蛋白H1 受体
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产肠毒素大肠埃希菌K99-987P-F41融合蛋白在小鼠体内免疫效果的评价
16
作者 王欣 郎秀艳 +1 位作者 张洋龙 倪宏波 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第9期897-902,共6页
目的评价产肠毒素大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K99-987P-F41融合蛋白在小鼠体内的免疫效果。方法制备ETEC融合蛋白K99-987P-F41亚单位疫苗、ETEC全菌体灭活疫苗、ETEC天然菌毛K99-987P-F41混合蛋白亚单位疫苗及E... 目的评价产肠毒素大肠埃希菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K99-987P-F41融合蛋白在小鼠体内的免疫效果。方法制备ETEC融合蛋白K99-987P-F41亚单位疫苗、ETEC全菌体灭活疫苗、ETEC天然菌毛K99-987P-F41混合蛋白亚单位疫苗及ETEC重组菌毛K99-987P-F41混合蛋白亚单位疫苗,分别免疫小鼠,同时以免疫PBS的小鼠作为对照。ELISA法检测小鼠血清中IgG、IL-4和IFNγ的水平及小鼠粪便和小肠冲洗液中分泌型免疫球蛋白A(secreted immunogobulin A,sIgA)的含量;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况,并进行攻毒试验。结果 ETEC融合蛋白K99-987P-F41重组亚单位疫苗组小鼠血清中的抗ETEC的特异性IgG抗体、IL-4、IFNγ、粪便和小肠冲洗液中的sIgA、小鼠脾脏B和T淋巴细胞增殖能力均显著高于PBS对照组(P<0.05);ETEC融合蛋白K99-987PF41重组亚单位疫苗对小鼠的保护率为80%,与其他3种疫苗的小鼠保护率相近,而PBS对照组为0。结论 ETEC融合蛋白K99-987P-F41可有效诱导小鼠产生较高滴度的特异性抗体,可作为ETEC重组亚单位疫苗候选蛋白。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠埃希菌 融合蛋白K99-987P-F41 免疫效果 亚单位疫苗
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冀东地区轮选987小麦高产栽培技术 被引量：2
17
作者 李维顺 《现代农业科技》 2011年第4期79-79,84,共2页
总结了冀东地区轮选987小麦的特征特性,介绍其高产栽培技术,包括播前准备、播种、田间管理、收获等方面内容,以为冀东地区农民种植轮选987小麦提供参考。
关键词 轮选987 栽培技术 高产 冀东地区
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轮选987冬小麦滴灌高产栽培技术 被引量：1
18
作者 张茂兰 《中国种业》 2011年第1期58-59,共2页
轮选987是由中国农科院作物科学研究所选育的高产小麦品种,2009-2010年,新疆生产建设兵团农四师六十七团试验示范种植轮选987冬小麦13.3hm2。经过1年的种植对比,该品种株型紧凑,穗层整齐,茎秆坚硬,抗寒性好,抗倒伏能力强,抗白粉病和条锈... 轮选987是由中国农科院作物科学研究所选育的高产小麦品种,2009-2010年,新疆生产建设兵团农四师六十七团试验示范种植轮选987冬小麦13.3hm2。经过1年的种植对比,该品种株型紧凑,穗层整齐,茎秆坚硬,抗寒性好,抗倒伏能力强,抗白粉病和条锈病;株型结构合理，叶片较小且挺直，适宜密植；成熟早，为复播提供了基础条件。 展开更多
关键词 轮选987 高产栽培技术 冬小麦 新疆生产建设兵团 滴灌 小麦品种 示范种植 株型结构
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冬小麦品种“轮选987”的特征特性及栽培技术
19
作者 刘秉华 杨丽 +2 位作者 王山荭 刘宏伟 朱光 《农业科技通讯》 2005年第7期7-7,共1页
关键词 轮选987 冬小麦品种 栽培技术 特征特性 农业科技跨越计划 中国农业科学院 品种审定委员会 科学研究所 小麦新品种 2003年 2004年 育种技术 矮败小麦 广适应性 研究员 系谱法 农业部 作物 育成 稳产 多抗
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猪产肠毒素大肠杆菌_(987)P菌毛卵黄抗体的研究 被引量：2
20
作者 谢志恒 赛金 +2 位作者 张开宇 张卉 王士长 《南方农业学报》 CAS CSCD 2011年第10期1284-1287,共4页
【目的】探索产肠毒素大肠杆菌(ETEC)987P菌株培养的最佳条件及987P菌毛诱发蛋鸡制备卵黄抗体(IgY)的最佳免疫程序,为IgY的工业化、规模化生产提供参考。【方法】扩大培养987P菌株,抽提层析纯化987P菌毛蛋白,然后以其为抗原免疫20周龄... 【目的】探索产肠毒素大肠杆菌(ETEC)987P菌株培养的最佳条件及987P菌毛诱发蛋鸡制备卵黄抗体(IgY)的最佳免疫程序,为IgY的工业化、规模化生产提供参考。【方法】扩大培养987P菌株,抽提层析纯化987P菌毛蛋白,然后以其为抗原免疫20周龄开产海兰蛋鸡,采用间接ELISA检测987P菌毛蛋白免疫IgY效价。【结果】987P菌株的最佳培养条件为37℃下Slanctz固体培养基培养24h;以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫20周龄开产蛋鸡,发现987P菌毛蛋白二免、三免IgY效价总体趋势基本一致,均在第3周达到峰值并维持1周,二免抗体峰值为213,三免抗体峰值是二免峰值的2倍(214),但第4周过后三免IgY效价仍保持在213,且持续时间长,一般维持2～3周。【结论】以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫蛋鸡,能获得较高效价的IgY,且适当增加免疫次数能有效提高抗体水平和延长持续时间。 展开更多
关键词 猪 产肠毒素大肠杆菌(ETEC) 987P菌株 菌毛蛋白 卵黄抗体(IgY)
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