妊娠期糖尿病孕妇75 g口服葡萄糖耐量试验不同时间点血糖值异常与早产的关系 被引量：1

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作者 宋艳宁 郑莉霞 +2 位作者 赵岗 石国素 逯彩虹 《临床误诊误治》 2025年第15期72-76,共5页

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)不同时间点血糖值异常与早产的关系。方法回顾性分析2022年12月至2024年9月收治的定期产检并分娩的GDM孕妇400例作为研究对象。所有孕妇在孕24~28周直接行75 g OGTT,根据血... 目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT)不同时间点血糖值异常与早产的关系。方法回顾性分析2022年12月至2024年9月收治的定期产检并分娩的GDM孕妇400例作为研究对象。所有孕妇在孕24~28周直接行75 g OGTT,根据血糖值异常情况分为单纯空腹血糖异常、单纯服糖1 h血糖异常、单纯服糖2 h血糖异常、空腹血糖异常及服糖1 h或2 h血糖异常。根据孕妇是否早产分为早产组(n=97)和非早产组(n=303),收集所有孕妇的临床资料,比较两组孕妇75 g OGTT不同时间点血糖值异常情况,采用多因素logistic回归分析GDM孕妇发生早产的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各因素对GDM孕妇发生早产的预测价值。结果早产组孕妇孕前体质量指数(BMI)、糖尿病家族史占比均高于非早产组(P<0.01)。早产组孕妇中,空腹血糖异常及服糖1 h或2 h血糖异常发生率显著高于其他时间点血糖值异常,且早产组空腹血糖异常及服糖1 h或2 h血糖异常占比高于非早产组(P<0.05,P<0.01)。多因素logistic回归分析结果显示,孕前BMI、糖尿病家族史、空腹血糖异常及服糖1 h或2 h血糖异常均为GDM孕妇早产的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析发现,孕前BMI、糖尿病家族史、空腹血糖异常及服糖1 h或2 h血糖异常均对GDM孕妇发生早产有一定的预测价值(P<0.01)。结论孕前BMI、糖尿病家族史、空腹血糖异常及服糖1 h或2 h血糖异常是GDM孕妇早产的危险因素,能显著增加早产发生风险,且孕前BMI、糖尿病家族史、空腹血糖异常及服糖1 h或2 h血糖异常对孕妇早产具有预测价值。 展开更多

关键词 妊娠期糖尿病 75g口服葡萄糖耐量试验 血糖值异常 早产 空腹血糖 受试者工作特征 预测

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肝内胆管癌组织胆汁酸G蛋白偶联受体5和热休克蛋白75表达及与预后的关系

2

作者 赵帅华 张先舟 +1 位作者 蒙博 曹胜利 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2022年第2期218-225,共8页

目的检测肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)患者癌组织中胆汁酸G蛋白偶联受体5(takeda G protein-coupled receptor 5,TGR5)和热休克蛋白75的表达情况,探讨二者与患者预后的关系。方法选取2015年3月至2018年3月期间濮阳... 目的检测肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)患者癌组织中胆汁酸G蛋白偶联受体5(takeda G protein-coupled receptor 5,TGR5)和热休克蛋白75的表达情况,探讨二者与患者预后的关系。方法选取2015年3月至2018年3月期间濮阳市安阳地区医院收治住院并行手术治疗的ICC患者94例作为研究对象,采用免疫组织化学法及Western blot(WB)法检测ICC癌组织及其癌旁组织中TGR5蛋白和热休克蛋白75的表达情况,分析ICC癌组织中TGR5蛋白及热休克蛋白75表达情况与ICC临床病理特征及预后的关系;并采用多因素Cox比例风险回归分析ICC患者预后不良的危险因素,采用ROC曲线分析TGR5蛋白和热休克蛋白75表达水平对ICC患者预后不良的诊断价值。结果免疫组织化学结果显示,ICC癌组织中TGR5蛋白和热休克蛋白75表达阳性率均高于癌旁组织(P<0.05)。WB结果显示,ICC癌组织中TGR5蛋白和热休克蛋白75相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。ICC患者癌组织中TGR5蛋白的表达与患者性别、肿瘤直径、分化程度、TNM分期、卫星灶和肝硬变相关(P<0.05);热休克蛋白75的表达与肿瘤直径、TNM分期、神经受累、卫星灶和肝硬变相关(P<0.05)。预后不良组和预后良好组患者在性别、肿瘤直径、TNM分期、微血管侵犯、卫星灶、肝硬变以及TGR5蛋白和热休克蛋白75表达情况方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TGR5蛋白表达阳性患者的累积3年总生存率(32.00%)低于TGR5蛋白表达阴性患者(63.16%),χ^(2)=6.228,P=0.013;热休克蛋白75表达阳性患者的累积3年总生存率(32.91%)低于热休克蛋白75表达阴性患者(66.67%),χ^(2)=6.079,P=0.014。多因素Cox比例风险回归分析结果显示,TGR5蛋白和热休克蛋白75表达阳性、TNMⅢ+Ⅳ期以及有卫星灶和肝硬变为ICC患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC结果显示,以TGR5蛋白表达水平0.932为截断值,诊断ICC患者预后不良的AUC为0.783,敏感度为72.4%,特异度为72.2%;以热休克蛋白75表达水平0.756为截断值,诊断ICC患者预后不良的AUC为0.805,敏感度为84.4%,特异度为63.9%;二者联合诊断ICC患者预后不良的AUC为0.884,敏感度为79.3%,特异度为83.3%。结论ICC患者癌组织中TGR5蛋白和热休克蛋白75高表达均与患者预后不良有关,是患者预后不良的危险因素,二者联合检测对预测预后不良具有一定价值,可作为潜在的生物学指标。 展开更多

关键词 肝内胆管癌 胆汁酸G蛋白偶联受体5 热休克蛋白75 预后

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用葡聚糖凝胶G-75层析柱制备高纯度细胞色素C 被引量：3

3

作者 武龙 林淑萍 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第1期24-26,共3页

选择２ｍｏｌ／Ｌ硫酸在ｐＨ为４．０、温度为２５℃的条件下进行抽提，提取液经人造沸石吸附，２５％硫酸铵洗脱，然后加入固体硫酸铵盐析除去杂蛋白，最后加入２０％三氯乙酸沉淀，获得粗品，再采用２２６型弱酸性阳离子树脂和葡聚糖... 选择２ｍｏｌ／Ｌ硫酸在ｐＨ为４．０、温度为２５℃的条件下进行抽提，提取液经人造沸石吸附，２５％硫酸铵洗脱，然后加入固体硫酸铵盐析除去杂蛋白，最后加入２０％三氯乙酸沉淀，获得粗品，再采用２２６型弱酸性阳离子树脂和葡聚糖凝胶Ｇ－７５层析柱组合的新方法，制得了Ａ５５０ｒｅｄ／Ａ２８０为１．２８的高纯度细胞色素Ｃ。 展开更多

关键词 细胞色素C 层析柱 葡聚糖凝胶

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敲减G蛋白偶联受体75表达抑制20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡 被引量：4

4

作者 毛凌 陆光金 +4 位作者 唐清清 李小红 任啟旭 韩勇 陈远寿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期421-426,共6页

目的:探讨G蛋白偶联受体75(GPR75)对20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响及机制。方法:慢病毒转染敲减H9c2心肌细胞GPR75基因表达;TUNEL法检测细胞凋亡率;RT-qPCR法检测GPR75以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的mRNA表达;J... 目的:探讨G蛋白偶联受体75(GPR75)对20-羟二十烷四烯酸(20-HETE)诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响及机制。方法:慢病毒转染敲减H9c2心肌细胞GPR75基因表达;TUNEL法检测细胞凋亡率;RT-qPCR法检测GPR75以及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的mRNA表达;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位水平;Western blot法检测GPR75、Bcl-2、Bax及细胞色素C(CytC)蛋白表达;发色底物法检测caspase-3的活性。结果:H9c2心肌细胞在mRNA及蛋白水平均表达GPR75,敲减GPR75抑制了20-HETE诱导的细胞凋亡(P<0.05);同时,敲减GPR75阻断了20-HETE诱导的Bax和CytC表达上调以及caspase-3活性增高作用(P<0.05),逆转了20-HETE诱导的Bcl-2表达下调和线粒体膜电位下降(P<0.05)。结论:20-HETE通过GPR75介导引起线粒体功能紊乱,诱导H9c2心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 20-羟二十烷四烯酸 G蛋白偶联受体75 细胞凋亡 线粒体功能紊乱 心肌细胞

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G蛋白偶联受体75信号通路在20-羟二十烷四烯酸诱导乳鼠心肌细胞凋亡中的作用 被引量：2

5

作者 刘娇莉 吉雨恬 +2 位作者 毛凌 郭立荣 韩勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期65-73,共9页

目的:探讨G蛋白偶联受体75(G-protein-coupled receptor 75,GPR75)介导的PLC/PKC信号通路在20-羟二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:采用慢病毒转染敲减乳鼠心肌细胞GPR75基... 目的:探讨G蛋白偶联受体75(G-protein-coupled receptor 75,GPR75)介导的PLC/PKC信号通路在20-羟二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:采用慢病毒转染敲减乳鼠心肌细胞GPR75基因表达;RT-q PCR和Western blot检测GPR75 m RNA及细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)和caspase-3蛋白表达;ELISA法检测三磷酸肌醇(inositol triphosphate,IP_(3))含量以及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和NADPH氧化酶活性;Fluo-3/AM探针法检测细胞内Ca^(2+)浓度;二氢乙啶(dihydroethidine,DHE)荧光探针检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的含量;TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:在培养的乳鼠心肌细胞中,GPR75在m RNA及蛋白水平均有表达,且20-HETE具有促进细胞内GPR75表达的作用(P<0.05);经20-HETE处理后,细胞内IP_(3)含量升高,而敲减GPR75或应用磷脂酶C(phospholipase C,PLC)抑制剂U73122可显著阻断20-HETE的如上效应,细胞内IP;含量降低(P<0.05);敲减GPR75表达、应用PLC抑制剂以及IP_(3)受体阻断剂2-氨基乙氧基二苯基硼酸酯(2-aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)预处理,可抑制20-HETE诱导的细胞内Ca^(2+)浓度升高(P<0.05);敲减GPR75表达、应用PKC抑制剂GF109203X或NADPH氧化酶抑制剂apocynin处理后,20-HETE诱导的细胞内ROS生成被抑制(P<0.05);同时,敲减GPR75表达可降低20-HETE作用的细胞中PKC、NADPH氧化酶的活性(P<0.05);最后,敲减GPR75表达、应用U73122或GF109203X,均可减少20-HETE诱导的心肌细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Cyt C和caspase-3的表达(P<0.05)。结论:GPR75介导的PLC/PKC信号通路通过引起心肌细胞钙超载、ROS生成增多,参与了20-HETE诱导的乳鼠心肌细胞凋亡进程。 展开更多

关键词 20-羟二十烷四烯酸 G蛋白偶联受体75 钙超载 活性氧簇 心肌细胞 细胞凋亡

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G蛋白偶联受体75去孤儿化研究及在疾病中的作用 被引量：1

6

作者 吉雨恬 刘恋恋 +5 位作者 刘娇莉 张淳 李开远 郭立荣 曾俊伟 韩勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期2278-2284,共7页

G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)是已知人类基因组中最大的一类膜蛋白受体家族,包括A类视紫红质样受体、B类分泌素受体、C类代谢型谷氨酸受体、D类真菌交配信息素受体、E类环腺苷酸受体及F类卷曲受体(Frizzled/Smooth... G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)是已知人类基因组中最大的一类膜蛋白受体家族,包括A类视紫红质样受体、B类分泌素受体、C类代谢型谷氨酸受体、D类真菌交配信息素受体、E类环腺苷酸受体及F类卷曲受体(Frizzled/Smoothened家族)[1-2]。其中A类视紫红质样受体包含了GPCRs中大部分种类,共含有19个子类(A1~A19)719种. 展开更多

关键词 G蛋白偶联受体75 去孤儿化 20-羟二十烷四烯酸 C-C基序趋化因子配体5

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CBP/P300介导的PTIP乙酰化可能促进下游肿瘤相关基因CCDC121和GPR75的转录 被引量：2

7

作者 钟燕燕 王嘉东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期205-211,共7页

PTIP (Pax transactivation domain-interacting protein,PAXIP1)蛋白参与MLL3 (lysine methyltransferase 2C,KMT2C)/MLL4(lysine methyltransferase 2B,KMT2B)组蛋白H3K4甲基转移酶复合体,促进基因的转录激活。但关于PTIP蛋白的乙酰... PTIP (Pax transactivation domain-interacting protein,PAXIP1)蛋白参与MLL3 (lysine methyltransferase 2C,KMT2C)/MLL4(lysine methyltransferase 2B,KMT2B)组蛋白H3K4甲基转移酶复合体,促进基因的转录激活。但关于PTIP蛋白的乙酰化修饰及人宫颈癌细胞中PTIP转录激活靶基因的研究尚无报道。本研究以稳定表达SFB-PTIP蛋白的293T细胞株为对象,通过免疫沉淀和Western印迹法发现,PTIP蛋白能够发生乙酰化修饰,乙酰转移酶CBP/P300介导PTIP蛋白的乙酰化过程,CBP是主要乙酰转移酶。去乙酰化酶HDAC1/2/3介导PTIP蛋白的去乙酰化过程。选择性HDAC1-3抑制剂MS-275促进PTIP蛋白乙酰化水平上升,且呈剂量和时间依赖性。以人宫颈癌HeLa细胞为研究对象,RNA-seq和RT-qPCR证明,CCDC121 (coiled-coil domain containing121)和G蛋白偶联受体75 (G protein-coupled receptor 75,GPR75)是PTIP的转录激活靶基因(P<0. 01)。和对照相比,MS-275介导的蛋白质乙酰化水平上升,促进基因CCDC121和GPR75的mRNA转录呈现不同程度的剂量依赖性上升(P<0. 01,P<0. 05)。由此推测,MS-275有可能是通过促进PTIP蛋白的乙酰化水平,促进CCDC121和GPR75的转录。但其详细机制有待进一步研究。本研究对今后深入探讨PTIP乙酰化修饰对下游肿瘤相关基因转录的调节和功能,如肿瘤发生、进展等方面的调控机制提供了基础。 展开更多

关键词 PTIP蛋白 乙酰化 转录激活 CCDC121 G蛋白偶联受体75

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20-HETE通过GPR75受体偶联G_(αq)信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡的作用

8

作者 刘恋恋 吉雨恬 +4 位作者 刘娇莉 韩婧怡 李开远 张淳 韩勇 《合肥医科大学学报》 2024年第4期361-370,共10页

目的 探讨GPR75受体偶联G_(αq)信号通路在20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡中的作用与机制。方法 H9c2心肌细胞采用慢病毒载体干扰GPR75表达,敲减效率通过RT-qPCR和Western blot法检测;ELISA法检测IP_(3)及cAMP含量;TUNEL法评估细胞凋亡... 目的 探讨GPR75受体偶联G_(αq)信号通路在20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡中的作用与机制。方法 H9c2心肌细胞采用慢病毒载体干扰GPR75表达,敲减效率通过RT-qPCR和Western blot法检测;ELISA法检测IP_(3)及cAMP含量;TUNEL法评估细胞凋亡率;分别使用Fluo-4/AM、DHE和JC-1荧光探针检测细胞内Ca^(2+)浓度、ROS含量以及线粒体膜电位(ΔΨm)水平;Western blot检测EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β、Bax、Bcl-2、Cyt C、Caspase-3蛋白表达。结果 慢病毒载体shGPR75转染后,H9c2心肌细胞GPR75受体mRNA和蛋白表达分别降低67.16%和63.99%(P<0.05)。敲减GPR75表达或应用AAA阻断其作用,显著抑制20-HETE诱导的H9c2心肌细胞凋亡(P<0.05),并可逆转ΔΨm下降及凋亡相关蛋白Bax、Cyt C、Caspase-3蛋白表达增高(P<0.05)。20-HETE处理后细胞内IP_(3)含量明显增加(P<0.05),但对cAMP生成无显著影响(P>0.05),而敲减GPR75表达、应用AAA或者PLC信号通路阻断剂U73122预处理后,可显著阻断细胞内IP_(3)生成(P<0.05)。敲减GPR75表达、应用AAA或者U73122预处理后,明显抑制20-HETE诱导的Ca^(2+)浓度升高和ROS生成效应(P<0.05)。20-HETE处理后,GPR75受体下游调控关键蛋白EGFR、ERK1/2、AKT、GSK3β磷酸化水平明显升高(P<0.05),敲减GPR75表达或应用AAA可有效阻断20-HETE上述效应(P<0.05)。最后,阻断PLC或PI3K信号通路,显著抑制20-HETE诱导的心肌细胞凋亡(P<0.05)。结论 20-HETE通过GPR75受体偶联的G_(αq)蛋白及其介导的PLC、EGFR/ERK1/2/AKT/GSK3β信号通路诱导H9c2心肌细胞凋亡。 展开更多

关键词 20-羟二十烷四烯酸 G蛋白偶联受体75 G_(αq)蛋白 心肌细胞凋亡

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社区人群检测餐后2小时血糖筛查糖尿病的效果评价 被引量：4

9

作者 李雪峰 黄科生 +5 位作者 陈红艳 戴亚丽 蓝薇 卢东晖 彭卫群 张帆 《中国全科医学》 CAS CSCD 2005年第7期565-566,共2页

目的　探讨在体检人群中进行餐后2h指血血糖检测筛查糖尿病的临床意义。方法　对2 081例体检人群行100g标准粉馒头餐餐后2h指血血糖( 2hPBG) 检查, 2hPBG≥6. 5mmol/L者, 进一步行75g口服葡萄糖耐量(OGTT) 检查。结果　经100g馒头餐后2... 目的　探讨在体检人群中进行餐后2h指血血糖检测筛查糖尿病的临床意义。方法　对2 081例体检人群行100g标准粉馒头餐餐后2h指血血糖( 2hPBG) 检查, 2hPBG≥6. 5mmol/L者, 进一步行75g口服葡萄糖耐量(OGTT) 检查。结果　经100g馒头餐后2hPBG筛查, 2hPBG≥6 5mmol/L者609例, 其中68例进行了75gOGTT检查, 确诊糖尿病16例, 葡萄糖调节受损者36例。结论　在健康体检中加测2hPBG有助于早期筛查出糖尿病, 减少漏诊。 展开更多

关键词 糖尿病 餐后 血糖筛查 社区人群 口服葡萄糖耐量 mol/L 体检人群 糖调节受损 临床意义 血糖检测 OGTT 早期筛查 健康体检 检查 馒头餐 指血

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桔梗多糖的分离纯化与含量测定 被引量：13

10

作者 贾林 陆金健 +3 位作者 卢德赵 施佳杰 周文雅 沃兴德 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第17期83-86,共4页

利用离子交换凝胶柱层析法分离纯化桔梗多糖,并对纯化组分进行纯度鉴定和糖含量及蛋白质含量测定。桔梗饮片经热水浸提、乙醇分步沉淀得桔梗粗多糖PPS80,Sevage法脱蛋白后,通过DEAE-Sepharose FF离子交换和Sephadex G-75凝胶柱层析进行... 利用离子交换凝胶柱层析法分离纯化桔梗多糖,并对纯化组分进行纯度鉴定和糖含量及蛋白质含量测定。桔梗饮片经热水浸提、乙醇分步沉淀得桔梗粗多糖PPS80,Sevage法脱蛋白后,通过DEAE-Sepharose FF离子交换和Sephadex G-75凝胶柱层析进行纯化鉴定。分别采用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝染色法测定纯化后各组分的糖和蛋白质含量。试验结果表明,从桔梗粗多糖PPS80中分离得到2个均一性组分PPS80-I和PPS80-Ⅱ,糖含量分别为90.32%和86.75%,蛋白质含量分别为0.48%和1.96%。该试验首次采用DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析结合Sephadex G-75凝胶柱层析有效分离纯化出桔梗多糖均一性组分,为桔梗多糖的进一步研究提供基础。 展开更多

关键词 多糖 离子交换柱层析 凝胶层析 DEAE-Sepharose FF SEPHADEX G-75

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空肠弯曲菌28KD^31KD外膜蛋白的初步提取及鉴定 被引量：14

11

作者 冯胜军 孙万邦 +1 位作者 姚新生 肖政 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第2期129-131,共3页

目的:探讨空肠弯曲菌28KD^31KD外膜蛋白的提取方法及其鉴定。方法:采用改良布氏肉汤培养基培养空ν淝?Campylobacterjejuni,CJ),用0 2mol/L、pH2 2甘氨酸-HCl缓冲液提取CJ外膜蛋白,SephadexG-75分子筛层析法纯化28KD^31KD分子,SDS-PAG... 目的:探讨空肠弯曲菌28KD^31KD外膜蛋白的提取方法及其鉴定。方法:采用改良布氏肉汤培养基培养空ν淝?Campylobacterjejuni,CJ),用0 2mol/L、pH2 2甘氨酸-HCl缓冲液提取CJ外膜蛋白,SephadexG-75分子筛层析法纯化28KD^31KD分子,SDS-PAGE分子量鉴定,Westernblotting印迹法鉴定CJ甘氨酸提取物中外膜蛋白及纯化的28KD^31KD分子抗原性。结果:以甘氨酸提取CJ的外膜蛋白,SephadexG-75层析纯化能够提取出CJ28KD^31KD外膜蛋白,该蛋白分子能够与CJ兔抗血清发生特异性反应。结论:采用甘氨酸提取、SephadexG-75纯化CJ28KD^31KD外膜蛋白系一种稳定可靠的分离层析方法,提取的CJ28KD^31KD外膜蛋白具有良好的抗原性,为特异性的CJ28KD^31KD外膜蛋白的多克隆抗体制备、CJ感染的血清学特异性诊断、CJ亚单位疫苗的研制打下基础。 展开更多

关键词 KD 外膜蛋白 CJ 空肠弯曲菌 甘氨酸 纯化 鉴定 分离层 肉汤 提取方法

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质谱技术在筛选肺癌血清差异多肽与蛋白质的应用 被引量：1

12

作者 陈东仕 金宏伟 +2 位作者 黄慧英 翁鹭娜 黄河清 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B05期47-49,53,共4页

采用凝胶排阻层析(SEC)与MALD I-TOF质谱非在线联用技术研究男性血清中多肽与蛋白质的组成与分布.实验结果表明,分离介质Sephadex G-75比Sephadex G-50和Sephadex G-100更加适合血清多肽与蛋白质的预分离.男性血清经Sephadex G-75层析... 采用凝胶排阻层析(SEC)与MALD I-TOF质谱非在线联用技术研究男性血清中多肽与蛋白质的组成与分布.实验结果表明,分离介质Sephadex G-75比Sephadex G-50和Sephadex G-100更加适合血清多肽与蛋白质的预分离.男性血清经Sephadex G-75层析柱预分离和MALD I-TOF质谱分析后,可获得56个多肽与蛋白质的分子离子峰.差异比对实验表明,在正常人与患有肺癌疾病的男性血清中,正常男性血清存在着7种不同质荷比(m/z)的差异多肽与蛋白质,其m/z的比值分别为4 808,6 867,6 912,7 036,27 990,28 120,50 687;反之,在肺癌患者血清中发现差异的m/z值为6 139,6 544,8 417,8 480,11 109.这些差异多肽与蛋白质为临床诊断正常人和患有肺癌疾病患者的标记物提供一条途径. 展开更多

关键词 SEPHADEX G-75 MALDI-TOF质谱 血清 肺癌 临床诊断 差异多肽

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备用根大鼠脊髓后角提取液中神经营养活性组分的分离及生物活性测定 被引量：2

13

作者 曾园山 章尧 +1 位作者 郭畹华 罗超权 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期46-50,共5页

制作备用根大鼠脊髓后角提取液，取其分子量大于10kD的组分进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，发现手术侧和非手术侧的电泳区带数目大致相同，但手术侧样品的第四条蛋白质区带扫描的吸收峰面积百分比大于非手术侧样品的第四条区带，两者... 制作备用根大鼠脊髓后角提取液，取其分子量大于10kD的组分进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，发现手术侧和非手术侧的电泳区带数目大致相同，但手术侧样品的第四条蛋白质区带扫描的吸收峰面积百分比大于非手术侧样品的第四条区带，两者在量上可能有差别。将手术侧样品经交联葡聚精G-75凝胶层析，得到两个洗脱峰．第一峰洗脱液有促进体外培养的背根节神经元存活及其突起生长的作用，其电泳分析显示4条主带，分子量在40～80kD之间．实验结果提示部分去传入纤维支配的脊髓后角组织含有神经营养活性物质，该物质的分子量约在40～78kD之间． 展开更多

关键词 脊髓后角 备用根模型 细胞培养 神经营养组分

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秦岭蝮和六盘山蝮分类地位的初步探究 被引量：13

14

作者 王湘君 赵尔宓 《四川动物》 CSCD 北大核心 2006年第2期210-213,共4页

秦岭蝮(Gloydius qinlingensis)和六盘山蝮(G.liupanensis)的鼻间鳞形状和斑纹与高原蝮(G.strauchii)相似,鳞片变化范围也有很大重合,但它们的分类地位尚有争议。作者对六盘山蝮和秦岭蝮的鳞片(背鳞、腹鳞和尾下鳞)数据做了统计学分析,... 秦岭蝮(Gloydius qinlingensis)和六盘山蝮(G.liupanensis)的鼻间鳞形状和斑纹与高原蝮(G.strauchii)相似,鳞片变化范围也有很大重合,但它们的分类地位尚有争议。作者对六盘山蝮和秦岭蝮的鳞片(背鳞、腹鳞和尾下鳞)数据做了统计学分析,并和高原蝮的数据比较。运用75%法则,秦岭蝮和高原蝮之间背鳞和尾下鳞多数数据的差异系数大于1·28,而六盘山蝮和高原蝮之间小于1·28。作者初步认为秦岭蝮应该是高原蝮的一个亚种,而六盘山蝮是高原蝮的一个北方居群。 展开更多

关键词 六盘山蝮 秦岭蝮 高原蝮 亚种 居群 75%法则

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纹状体源性神经营养因子的分离纯化和生物鉴定 被引量：2

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作者 庆宏 郭畹华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期362-368,T001,2,共9页

纹状体是中脑黑质多巴胺神经元的主要靶组织，我们先前的研究曾指出：纹状体提取液能增强体外培养的中脑黑质神经元的存活和发育。本研究是在此基础上进一步应用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶层析、高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、反相高效... 纹状体是中脑黑质多巴胺神经元的主要靶组织，我们先前的研究曾指出：纹状体提取液能增强体外培养的中脑黑质神经元的存活和发育。本研究是在此基础上进一步应用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶层析、高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、反相高效液相色谱（Ｒ－ＨＰＬＣ）、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等的分析，结合生物鉴定，从纹状体提取液中分离出纯化的活性因子——纹状体源性神经营养因子。该因子的分子量为１１．５ｋＤ，等电点为９．３９，它能促进体外培养的１４ｄ龄大鼠胚胎中脑黑质神经元的存活和神经突起的生长，以及对外源性多巴胺的摄取，其作用具有量依赖性关系。 展开更多

关键词 纹状体源性 神经营养因子 中脑黑质 神经元

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库拉索芦荟凝集素的分离与纯化 被引量：1

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作者 张聪敏 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期149-151,共3页

目的:对库拉索芦荟凝集素进行分离、纯化与初步鉴定。方法:库拉索芦荟经捣碎匀浆、盐析、透析后得到库拉索芦荟凝集素的粗提液;兔血凝集反应测试初步检测粗提液成分;将粗提液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖G-75凝胶柱层析,对分离... 目的:对库拉索芦荟凝集素进行分离、纯化与初步鉴定。方法:库拉索芦荟经捣碎匀浆、盐析、透析后得到库拉索芦荟凝集素的粗提液;兔血凝集反应测试初步检测粗提液成分;将粗提液进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖G-75凝胶柱层析,对分离组分进行分析;将洗脱液浓缩,再用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和葡聚糖G-200凝胶柱层析对组分进行分析。结果:发现库拉索芦荟粗提液可以凝集兔血,证明在粗提液中具有芦荟凝集素成分。对粗提液检测、分离,获得三种蛋白质组分;经凝血活性检测,只有第一个蛋白峰具有凝集活性且凝集效果较粗提液进一步提高。再次分离纯化洗脱液,可知其由两个组分组成。结论:库拉索芦荟凝集素由两种组分组成。 展开更多

关键词 库拉索芦荟 凝集素 G-75凝胶 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 G-200凝胶

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凝胶过滤及离子交换层析法纯化玉米CuZn-SOD的研究 被引量：10

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作者 文才艺 张艳红 《襄樊学院学报》 2001年第2期88-92,共5页

用葡聚糖（Sephadex G-75）凝胶过滤及纤维素（DEAE-32）离子交换层析法分离纯化玉米CuZn- SOD，并对其部分理化性质进行了测定．结果表明，玉米CuZn-SOD具有与其它来源的CuZn-SOD相似的性质，即最大吸收峰为260nm，分子量为33,600道尔... 用葡聚糖（Sephadex G-75）凝胶过滤及纤维素（DEAE-32）离子交换层析法分离纯化玉米CuZn- SOD，并对其部分理化性质进行了测定．结果表明，玉米CuZn-SOD具有与其它来源的CuZn-SOD相似的性质，即最大吸收峰为260nm，分子量为33,600道尔顿，分子中含有17种289个氨基酸残基，不含色氨酸，N-末端氨基酸为丙氨酸，1分子酶中含2个铜原子和2个锌原子；电泳分析显示，蛋白质谱带和酶活性谱带数目相同，均为两条． 展开更多

关键词 玉米超氧化物歧化酶 葡聚糖凝胶过滤 纤维素主子交换层析 分离 纯化 氨基教 蛋白质 酶活性

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微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)的分离纯化

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作者 何冬兰 秦三敏 +1 位作者 彭宝玉 李华丽 《中南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2009年第1期35-37,共3页

利用产谷氨酰胺转胺酶的H-197菌株发酵产生MTG,发酵液通过高速离心、冷冻浓缩、乙醇沉淀、冷冻干燥,制得粗酶粉,粗酶粉溶解后经过Sephadex G-75柱得到较纯酶样.结果表明:经冷冻浓缩、乙醇沉淀后其活力回收率为44.6%,酶的比活为0.83 U/mg... 利用产谷氨酰胺转胺酶的H-197菌株发酵产生MTG,发酵液通过高速离心、冷冻浓缩、乙醇沉淀、冷冻干燥,制得粗酶粉,粗酶粉溶解后经过Sephadex G-75柱得到较纯酶样.结果表明:经冷冻浓缩、乙醇沉淀后其活力回收率为44.6%,酶的比活为0.83 U/mg,较浓缩前增加了2.43倍;粗酶经Sephadex G-75凝胶过滤层析后得到较纯的酶,酶的比活力为1.44 U/mg,最终纯化倍数达7.08. 展开更多

关键词 谷氨酰胺转胺酶 分离 纯化 SEPHADEX G-75凝胶

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不同培养基条件来源空肠弯曲菌外膜蛋白纯化及其表达差异

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作者 冯胜军 孙万邦 +3 位作者 肖政 姚新生 米娜 刘仿 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期615-619,共5页

目的探讨不同培养基培养条件下空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)Mr28000～31000外膜蛋白的纯化方案及表达差异。方法分别采用改良布氏血琼脂培养基(以下简称Bull’s)、改良卵黄培养基(以下简称Yolk)培养CJ,比较两者的生长特征。制... 目的探讨不同培养基培养条件下空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)Mr28000～31000外膜蛋白的纯化方案及表达差异。方法分别采用改良布氏血琼脂培养基(以下简称Bull’s)、改良卵黄培养基(以下简称Yolk)培养CJ,比较两者的生长特征。制备CJ全菌抗血清。0.2mol/L、pH2.2甘氨酸-HCl缓冲液抽取CJ外膜蛋白,Sephadex G-75层析法纯化其中的Mr28000～31000蛋白。SDS-PAGE技术检测Mr28000～31000外膜蛋白表达情况和含量差异,Western-blotting检测该类蛋白的抗原性。结果卵黄培养基培养的细菌生长更典型,SephadexG-75层析能够稳定可靠地纯化CJ细菌Mr28000～31000外膜蛋白,卵黄培养基培养来源的CJ的Mr28000～31000表达量占酸提取物的70%,大于改良布氏血琼脂培养基培养来源的表达量48%,两种培养基来源的CJ的Mr28000～31000蛋白成分均与CJ全菌兔抗血清发生免疫反应。结论不同培养基来源CJ的Mr28000～31000外膜蛋白均能被SphadexG-75分子筛纯化,该类蛋白能够在改良卵黄培养基上更高效表达,不同培养基来源的该类蛋白均具有良好的抗原性,该培养基的使用和该类蛋白有效提取为CJ感染的血清学特异性诊断及疫苗的研制奠定基础。 展开更多

关键词 空肠弯曲菌 培养基 外膜蛋白 SephadexG-75 纯化

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心室成纤维细胞分泌心肌营养活性蛋白的分离提纯及其作用

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作者 龚素珍 顾熊飞 +2 位作者 何光耀 刘培庆 潘敬运 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期49-53,共5页

收集FCGM,用0.2μm微孔滤膜除去细胞碎片,再经Diaflo-YM-10滤膜超滤浓缩,截留分子量大于10 KD的FCGM,行Sephadex-G75凝胶层析,得到Ⅰ、Ⅱ两个洗脱峰。经生物学鉴定,证明Ⅰ峰洗脱液具有明显的心肌营养活性。将凝胶层析Ⅰ峰洗脱液透析、浓... 收集FCGM,用0.2μm微孔滤膜除去细胞碎片,再经Diaflo-YM-10滤膜超滤浓缩,截留分子量大于10 KD的FCGM,行Sephadex-G75凝胶层析,得到Ⅰ、Ⅱ两个洗脱峰。经生物学鉴定,证明Ⅰ峰洗脱液具有明显的心肌营养活性。将凝胶层析Ⅰ峰洗脱液透析、浓缩,行PAK200SW高效液相色谱分析,结果得到五个不同的洗脱峰。经生物学鉴定,第Ⅰ峰具有生物活性。将已行半制备高效液相色谱分析Ⅰ峰洗脱液透析、浓缩,再行高效液相色谱分析,结果获单一峰。用该单一峰物质行SDS-PAGE电泳,以标准蛋白质作对照,可知该单一峰中含有数种物质,分子量在25-35 KD。 展开更多

关键词 心室成纤维细胞 心肌营养活性蛋白 分离 提纯 作用

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