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超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值
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作者 代妮娜 张文君 张华 《检验医学与临床》 2026年第1期1-6,共6页
目的探讨超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。方法选取2021年12月至2023年12月在湖北省十堰市太和医院住院进行手术治疗的93例女性乳腺癌患者作为乳腺癌组,同期收治的93例女性乳腺良性病变患者作为良性组,另选... 目的探讨超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。方法选取2021年12月至2023年12月在湖北省十堰市太和医院住院进行手术治疗的93例女性乳腺癌患者作为乳腺癌组,同期收治的93例女性乳腺良性病变患者作为良性组,另选取同期在湖北省十堰市太和医院体检的93例女性健康体检者作为对照组。所有研究对象均进行超声检查,并记录相关参数[最大血流速度(V_(max))、血流阻力指数(RI)、搏动指数(PI)];采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测所有研究对象血清miR-129-5p、miR-654-5p水平;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析V_(max)、RI、PI及血清miR-129-5p、miR-654-5p对乳腺癌的诊断价值。结果良性组、乳腺癌组血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均明显低于对照组,且乳腺癌组血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均低于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。良性组、乳腺癌组V_(max)、RI、PI均明显高于对照组,且乳腺癌组V_(max)、RI、PI均高于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、中低分化程度的乳腺癌患者血清miR-129-5p、miR-654-5p低表达比例均高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、高分化程度的乳腺癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,V_(max)、RI、PI、miR-129-5p、miR-654-5p联合诊断乳腺癌的曲线下面积(AUC)为0.892,大于5项单独诊断的AUC(0.712、0.783、0.720、0.648、0.718),差异均有统计学意义(Z=4.013、4.215、3.889、6.223、3.887,P<0.05)。结论乳腺癌患者血清miR-129-5p、miR-654-5p水平均降低,超声参数(V_(max)、RI、PI)均升高,超声参数联合血清miR-129-5p、miR-654-5p诊断乳腺癌的价值较高。 展开更多
关键词 超声参数 miR-129-5p miR-654-5p 乳腺癌 诊断价值 微小RNA
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miR-188-5p在激素性股骨头坏死中的表达
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作者 李从达 袁峰 +5 位作者 林祥波 周洪杰 王国宗 李国鹏 韦标方 秦明 《中国矫形外科杂志》 北大核心 2026年第1期75-80,共6页
[目的]探究miR-188-5p在激素性股骨头坏死(glucocorticoid-induced osteonecrosis of the femoral head, GIONFH)中的表达及其作用机制。[方法]采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase ... [目的]探究miR-188-5p在激素性股骨头坏死(glucocorticoid-induced osteonecrosis of the femoral head, GIONFH)中的表达及其作用机制。[方法]采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction, qRT-PCR)和免疫蛋白印迹(Western blot, WB)检测5例GIONFH患者和5例股骨颈骨折患者髋关节置换术后的股骨头组织中miR-188-5p和HDAC9的表达情况。在体外将人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stromal cells, BMSCs)分别转染miR-188-5p mimics(过表达组)、miR-188-5p inhibitor(抑制组)、miR-NC(对照组)、miR-188-5p mimics及HDAC9质粒的过表达HDAC9组(HDAC9组)。行相应标志物q RT-PCR和WB检测。[结果]与股骨颈骨折患者相比,GIONFH患者骨样本中miR-188-5p表达显著上调[(0.6±0.3) vs(2.8±0.5), P<0.001],而HDAC9表达显著下降[(3.0±1.2) vs(0.8±0.3), P<0.001]。体外试验方面,与对照组相比,miR-188-5p过表达时BMSCs中Runx2、Osterix和HDAC9 mRNA和蛋白的表达水平显著下调(P<0.05),而HDAC9过表达则逆转了这一结果(P<0.05)。生物信息学分析及双荧光素酶报告基因实验验证了HDAC9是miR-188-5p的靶基因。[结论]在GIONFH患者骨组织中miR-188-5p表达增加,HDAC9表达减少。miR-188-5p可抑制BMSC成骨细胞分化,作用机制可能与靶向作用HDAC9有关。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 骨髓间充质干细胞 成骨分化 miR-188-5p HDAC9
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血清miR-140-5p和miR-188-3p水平对妊娠期高血压患者不良妊娠结局的预测价值
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作者 李丹玲 李峥嵘 刘欣雨 《国际检验医学杂志》 2026年第2期151-155,共5页
目的探讨血清微小RNA-140-5p(miR-140-5p)、微小RNA-188-3p(miR-188-3p)水平对妊娠期高血压(HDCP)患者不良妊娠结局的预测价值。方法选取2022年8月至2024年4月该院收治的HDCP患者120例作为研究组,同时选取124例同期在该院进行常规产检... 目的探讨血清微小RNA-140-5p(miR-140-5p)、微小RNA-188-3p(miR-188-3p)水平对妊娠期高血压(HDCP)患者不良妊娠结局的预测价值。方法选取2022年8月至2024年4月该院收治的HDCP患者120例作为研究组,同时选取124例同期在该院进行常规产检的健康孕妇作为对照组。根据HDCP患者不良妊娠结局评估结果,将研究组患者分为良好组(67例)和不良组(53例)。采用实时荧光定量PCR检测患者血清miR-140-5p、miR-188-3p水平;采用多因素Logistic回归分析HDCP患者不良妊娠结局的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-140-5p、miR-188-3p水平对HDCP患者不良妊娠结局的预测价值。结果与对照组比较,研究组收缩压及舒张压均显著提高(P<0.05);与对照组相比,研究组miR-140-5p水平明显升高(P<0.05),而miR-188-3p水平明显下降(P<0.05);相较于良好组,不良组收缩压、舒张压、血清miR-140-5p水平明显升高(P<0.05),而miR-188-3p水平则明显降低(P<0.05)。血清miR-140-5p水平升高是HDCP患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05),而血清miR-182-3p水平升高是HDCP患者发生不良妊娠结局的保护因素(P<0.05);血清miR-140-5p、miR-188-3p水平联合预测HDCP患者不良妊娠结局的曲线下面积为0.960,联合预测优于单独预测(Z=3.166、2.047,均P<0.05)。结论HDCP患者血清miR-140-5p水平显著升高,miR-188-3p水平显著降低,与患者不良妊娠结局有关,二者联合对HDCP患者不良妊娠结局具有较高的预测价值。miR-140-5p、miR-188-3p可以作为HDCP患者不良妊娠结局的预测指标。 展开更多
关键词 妊娠期高血压 微小RNA-140-5p 微小RNA-188-53p 不良妊娠结局
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血清miR-140-5p和miR-182-5p表达对肺癌诊断及预后的临床价值
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作者 罗红兰 刘凯 +3 位作者 童凯 杨国栋 周冬 陈畇尚 《国际检验医学杂志》 2026年第1期1-6,13,共7页
目的探讨微小RNA-140-5p(miR-140-5p)、miR-182-5p在肺癌患者血清中的表达水平及其对患者诊断及预后的临床价值。方法选取2020年5月至2021年6月在长江大学附属黄冈市中心医院确诊的98例肺癌患者作为研究组,根据3年预后将患者分为生存组... 目的探讨微小RNA-140-5p(miR-140-5p)、miR-182-5p在肺癌患者血清中的表达水平及其对患者诊断及预后的临床价值。方法选取2020年5月至2021年6月在长江大学附属黄冈市中心医院确诊的98例肺癌患者作为研究组,根据3年预后将患者分为生存组(60例)和死亡组(38例),并选取同期体检健康者100例作为对照组,获取所有受试者的血清,采用实时荧光定量PCR检测血清中miR-140-5p、miR-182-5p相对表达水平;通过多因素Cox回归分析肺癌患者死亡的风险因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-140-5p、miR-182-5p相对表达水平对肺癌患者死亡的诊断价值。结果相比于对照组,研究组miR-140-5p水平明显下降(P<0.05),miR-182-5p水平明显增高(P<0.05)。血清miR-140-5p和miR-182-5p相对表达水平与肿瘤最大径、远处转移、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。生存组与死亡组TNM分期、miR-140-5p、miR-182-5p、胃泌素释放肽前体(ProGRP)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分Ⅲ+Ⅳ期、血清miR-182-5p相对表达水平升高是肺癌患者死亡的独立危险因素(P<0.05),血清miR-140-5p相对表达水平升高是肺癌患者死亡的保护因素(P<0.05)。血清miR-140-5p、miR-182-5p联合诊断肺癌患者死亡的曲线下面积(AUC)为0.939(95%CI:0.892~0.986),联合诊断的AUC大于单独诊断(P<0.05)。结论miR-140-5p、miR-182-5p表达与肺癌疾病进展及患者预后密切相关,有望成为预后标志物。 展开更多
关键词 肺癌 微小RNA-140-5p 微小RNA-182-5p 预后
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miR-17-5p在口腔鳞癌热疗中调控机制的研究
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作者 许春炜 周昊 +2 位作者 廖楚航 叶美智 白云 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2026年第1期38-42,共5页
目的:研究热疗对口腔鳞状细胞癌(OSCC)动物模型中miR-17-92基因簇表达的影响。方法:将口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞接种于裸鼠,使用水浴加热法构建荷瘤裸鼠肿瘤加热模型,使用RT-PCR与Westernblot筛选目标基因簇。使用生理盐水、miR-17-5p... 目的:研究热疗对口腔鳞状细胞癌(OSCC)动物模型中miR-17-92基因簇表达的影响。方法:将口腔鳞状细胞癌Tca8113细胞接种于裸鼠,使用水浴加热法构建荷瘤裸鼠肿瘤加热模型,使用RT-PCR与Westernblot筛选目标基因簇。使用生理盐水、miR-17-5p模拟物与阴性模拟物(n=10),分别注射于裸鼠瘤体内,用RT-PCR与Western blot检测裸鼠体内基因变化,并进行凋亡实验验证。结果:肿瘤加热时,miR-17-5p表达明显降低,注射了miR-17-5p模拟物的移植瘤模型中肿瘤生长趋势加快,肿瘤大体生长迅速,HIF-1α和VEGF的表达水平升高,凋亡减少。结论:miR-17-5p可能作为口腔鳞状细胞癌新的诊断生物标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 miR-17-5p 口腔鳞状细胞癌 热疗 miRNA模拟物 SMAD7
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脂肪干细胞源性外泌体中miR-196b-5p对大鼠烧伤创面愈合的影响 被引量:1
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作者 左娜 唐琪 +1 位作者 于猛 陶凯 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第1期43-49,共7页
背景:目前发现miR-196b-5p在细胞增殖、迁移及抑制瘢痕增生中发挥作用,但在创面愈合过程中是否发挥作用缺乏相关研究。目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体中miR-196b-5p对烧伤创面愈合的影响。方法:构建SD大鼠皮肤深Ⅱ度烧伤模型,随机分为4... 背景:目前发现miR-196b-5p在细胞增殖、迁移及抑制瘢痕增生中发挥作用,但在创面愈合过程中是否发挥作用缺乏相关研究。目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体中miR-196b-5p对烧伤创面愈合的影响。方法:构建SD大鼠皮肤深Ⅱ度烧伤模型,随机分为4组:空白对照组、外泌体组、agomiR-196b-5p组和外泌体+antagomiR-196b-5p组,每组10只,根据不同分组于创周注射PBS、脂肪干细胞源性外泌体、miR-196b-5p激动剂和miR-196b-5p抑制剂,伤后即刻和伤后7,14,21 d观察创面愈合情况,伤后7 d苏木精-伊红染色观察创面炎症表达,伤后14 d Masson染色观察创面胶原表达及免疫组化染色观察创面CD31表达,伤后7 d Western blot检测创面中α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达。结果与结论:①agomiR-196b-5p组创面愈合较快,空白对照组和外泌体+antagomiR-196b-5p组愈合较慢;②与空白对照组和外泌体+antagomiR-196b-5p组相比,外泌体组和agomiR-196b-5p组创面炎性细胞浸润较少,CD31表达明显增加(P<0.01);③与空白对照组和外泌体+antagomiR-196b-5p组相比,外泌体组和agomiR-196b-5p组中α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05)。结果表明,脂肪干细胞源性外泌体中miR-196b-5p能促进大鼠烧伤创面愈合。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 外泌体 miR-196b-5p 烧伤 创面愈合 炎症反应 血管新生 工程化外泌体
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miR-100-5p对急性髓系白血病细胞增殖及凋亡的影响及其分子机制
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作者 樊小如 杨莹 +1 位作者 孙寅 杜聪梅 《中国当代儿科杂志》 北大核心 2026年第1期99-106,共8页
目的 探讨微小RNA(miRNA, miR)-100-5p靶向Tribbles同源蛋白1(Tribbles pseudokinase 1,TRIB1)对急性髓系白血病细胞增殖及凋亡活性的影响。方法 收集16例健康体检儿童(对照组)和16例AML患儿(AML组)外周血。将HL-60细胞分为空白组、mimi... 目的 探讨微小RNA(miRNA, miR)-100-5p靶向Tribbles同源蛋白1(Tribbles pseudokinase 1,TRIB1)对急性髓系白血病细胞增殖及凋亡活性的影响。方法 收集16例健康体检儿童(对照组)和16例AML患儿(AML组)外周血。将HL-60细胞分为空白组、mimic NC组、miR-100-5p mimic组、si-NC组、si-TRIB1组、miR-100-5p mimic+TRIB1过表达质粒阴性对照(OE-NC)组、miR-100-5p mimic+TRIB1过表达质粒(OE-TRIB1)组。采用实时荧光定量PCR检测外周血和HL-60细胞中miR-100-5p、TRIB1 mRNA表达;5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine, EdU)染色、CCK-8法检测HL-60细胞增殖;流式细胞术检测HL-60细胞凋亡;Western blot法检测HL-60细胞中TRIB1、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、p53、程序性死亡受体-1(programmed cell death protein 1, PD-1)、程序性死亡受体-配体1(programmed death-ligand 1, PD-L1)蛋白表达;双萤光素酶报告基因实验验证miR-100-5p与TRIB1靶向关系。结果 与对照组比较,AML组外周血中miR-100-5p表达降低,TRIB1 mRNA表达升高(P<0.05)。与空白组、mimic NC组比较,miR-100-5p mimic组miR-100-5p表达、细胞凋亡率、p53蛋白表达升高,TRIB1 mRNA表达、EdU阳性率、光密度(optical density,OD)450值及TRIB1、PCNA、PD-1、PD-L1蛋白表达降低(P<0.05);与空白组、si-NC组比较,si-TRIB1组TRIB1mRNA表达、EdU阳性率、OD450值及TRIB1、PCNA、PD-1、PD-L1蛋白表达降低,细胞凋亡率、p53蛋白表达升高(P<0.05);与miR-100-5p mimic组、miR-100-5p mimic+OE-NC组比较,miR-100-5p mimic+OE-TRIB1组TRIB1mRNA表达、EdU阳性率、OD450值及TRIB1、PCNA、PD-1、PD-L1蛋白表达升高,细胞凋亡率、p53蛋白表达降低(P<0.05);TRIB1-WT+miR-100-5p mimic组萤光素酶活性低于TRIB1-WT+mimic NC组(P<0.05)。结论 过表达miR-100-5p可通过下调TRIB1抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA-100-5p Tribbles同源蛋白1 急性髓系白血病 增殖 凋亡 HL-60细胞
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miR-30a-5p通过调控CTHRC1抑制甲状腺未分化癌进展
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作者 陈晶晶 俞建华 +2 位作者 张凤霞 孙成林 康永生 《沈阳医学院学报》 2026年第1期30-37,共8页
目的:探讨三螺旋重复胶原蛋白1(collagen triple helix repeat containing-1,CTHRC1)在甲状腺癌中的表达与患者预后和免疫细胞浸润的关系,并进一步探讨CTHRC1对甲状腺癌未分化癌(anaplastic thyroid cancer,ATC)细胞体外增殖、迁移、侵... 目的:探讨三螺旋重复胶原蛋白1(collagen triple helix repeat containing-1,CTHRC1)在甲状腺癌中的表达与患者预后和免疫细胞浸润的关系,并进一步探讨CTHRC1对甲状腺癌未分化癌(anaplastic thyroid cancer,ATC)细胞体外增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,及miR-30a-5p在其中发挥的作用。方法:基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)分析CTHRC1在甲状腺癌组织中的表达及其与患者生存、临床病理特征和免疫细胞浸润的关系。通过RT-qPCR和Western blot检测CTHRC1 mRNA和蛋白表达。通过CCK8、Transwell和流式细胞术检测ATC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。通过ENCORI数据库筛选CTHRC1的上游调控因子miR-30a-5p,并分析二者在甲状腺癌中的表达相关性。通过RT-qPCR检测过表达miR-30a-5p对ATC细胞CTHRC1mRNA表达的影响,双荧光素酶报告基因实验验证二者结合。结果:TCGA数据库分析显示CTHRC1 mRNA在甲状腺癌组织中表达上调,且与患者不良预后有关。免疫浸润分析提示,CTHRC1的表达在甲状腺癌中与多种免疫细胞群有关,包括T细胞、B细胞、细胞毒性细胞、NK细胞和树突状细胞等。GEO数据库分析显示CTHRC1在ATC组织中表达上调,RT-qPCR提示CTHRC1 mRNA在多株ATC细胞中表达上调。敲减CTHRC1可以抑制ATC细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。CTHRC1与miR-30a-5p结合,过表达miR-30a-5p可以降低ATC细胞中CTHRC1 mRNA表达,miR-30a-5p和CTHRC1的表达在甲状腺癌中呈显著负相关。抑制miR-30a-5p逆转了敲减CTHRC1对ATC细胞体外增殖、迁移和侵袭的抑制,以及凋亡的促进。结论:CTHRC1可能是ATC重要的预后生物标志物,miR-30a-5p通过调控CTHRC1表达抑制ATC细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 甲状腺未分化癌 CTHRC1 miR-30a-5p 细胞迁移和侵袭 细胞凋亡
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miR-145-5p在猪卵巢颗粒细胞凋亡中的作用
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作者 秦鑫鑫 李文洁 +3 位作者 程晓龙 陈芳 王昱皓 潘增祥 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第1期14-21,共8页
旨在分析猪miR-145-5p的序列特征及其生物学功能,验证其在猪卵巢颗粒细胞(GCs)凋亡中的作用。利用生物信息学方法获取猪miR-145-5p前体序列并分析其序列信息、结构和生物学功能;设计合成miR-145-5p反义寡核苷酸抑制剂,转染至体外培养的... 旨在分析猪miR-145-5p的序列特征及其生物学功能,验证其在猪卵巢颗粒细胞(GCs)凋亡中的作用。利用生物信息学方法获取猪miR-145-5p前体序列并分析其序列信息、结构和生物学功能;设计合成miR-145-5p反义寡核苷酸抑制剂,转染至体外培养的猪卵巢GCs中,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-145-5p抑制效率;通过流式细胞术检测GCs凋亡率。结果:猪miR-145-5p前体序列长度为86 bp,其核苷酸序列在哺乳动物中保守性较高;功能富集分析发现miR-145-5p靶基因主要富集在与细胞增殖、存活、代谢和凋亡调控作用相关的磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶(PI3K-Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、叉头框O蛋白(FoxO)、转化生长因子β(TGF-β)等信号通路;转染miR-145-5p抑制剂,流式细胞术分析发现抑制miR-145-5p的表达,能显著降低GCs的凋亡率(P<0.05)。研究表明,miR-145-5p具有促进猪卵巢GCs凋亡的生物学作用。 展开更多
关键词 卵巢颗粒细胞 细胞凋亡 miR-145-5p
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miR-339-5p对胃癌细胞恶性生物学行为的影响机制研究
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作者 赵鸿鹰 江荣科 +4 位作者 李艳芳 朱梅 张桂华 王宇 曹生亚 《局解手术学杂志》 2026年第1期12-17,共6页
目的 探究miR-339-5p调控Akt/MDM2/p53信号通路对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 收集2023年10月至2024年9月在我院手术切除的48例胃癌患者的癌组织及癌旁组织样本。利用qRT-PCR检测miR-339-5p在胃癌组织及细胞中的表达。将胃癌细... 目的 探究miR-339-5p调控Akt/MDM2/p53信号通路对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 收集2023年10月至2024年9月在我院手术切除的48例胃癌患者的癌组织及癌旁组织样本。利用qRT-PCR检测miR-339-5p在胃癌组织及细胞中的表达。将胃癌细胞NCI-N87分为control组(未进行转染)、miR-NC组(转染miR-339-5p mimics阴性对照质粒)、miR-339-5p mimics组(转染miR-339-5p mimics)、miR-339-5p mimics+SC-79组(转染miR-339-5p mimic后加入Akt激活剂SC-79)、miR-339-5p mimics+pcDNA组(共转染miR-339-5p mimics和空载质粒pcDNA)、miR-339-5p mimics+pc-MDM2组(共转染miR-339-5p mimics与MDM2过表达质粒pc-MDM2)。采用平板克隆形成实验和细胞划痕实验检测胃癌细胞增殖能力,Transwell实验检测胃癌细胞迁移和侵袭能力;通过双荧光素酶基因实验验证MDM2和miR-339-5p之间的靶向关系;Western blot检测Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白的表达水平。结果 胃癌组织及细胞中miR-339-5p表达显著降低。与control组和miR-NC组比较,miR-339-5p mimics组细胞克隆形成数、划痕愈合率、细胞迁移数和侵袭数显著减少/下降,pAkt/Akt和pMDM2/MDM2水平降低,p53蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。激活Akt和过表达MDM2均可逆转miR-339-5p mimics对NCI-N87细胞上述指标的影响。双荧光素酶基因实验证实,miR-339-5p与MDM2存在靶向关系。结论 miR-339-5p可能通过抑制Akt/MDM2/p53信号通路,影响胃癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 miR-339-5p 胃癌 Akt/MDM2/p53信号通路 恶性生物学行为
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LncRNA KCNQ1OT1调节miR-218-5p/KLF8轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
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作者 易宣洪 黄晓智 +2 位作者 李志梁 熊伟 王静 《临床肺科杂志》 2026年第2期250-256,共7页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)KCNQ1OT1调节微小RNA(miR)-218-5p/Krüppel样因子8(KLF8)轴对人肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法将A549细胞分为对照(Control)、si-NC、si-KC1、si-KC1+miR-In-NC、si-KC1+miR-218-5p-I... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)KCNQ1OT1调节微小RNA(miR)-218-5p/Krüppel样因子8(KLF8)轴对人肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响。方法将A549细胞分为对照(Control)、si-NC、si-KC1、si-KC1+miR-In-NC、si-KC1+miR-218-5p-In组。qRT-PCR实验检测细胞中LncRNA KCNQ1OT1、miR-218-5p和KLF8 mRNA水平;CCK-8法检测细胞增殖;Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡;划痕愈合和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western Blot检测细胞中KLF8、E-cadherin、N-cadherin和Bax水平;双荧光素酶实验测定miR-218-5p与LncRNA KCNQ1OT1间的靶向关系。结果与si-NC组相比,si-KC1组细胞存活率、划痕愈合率、细胞侵袭数、LncRNA KCNQ1OT1、KLF8 mRNA以及KLF8、N-cadherin蛋白水平下降,凋亡率、miR-218-5p、Bax和E-cadherin表达上升(P<0.05);与si-KC1+miR-In-NC组相比,si-KC1+miR-218-5p-In组细胞存活率、划痕愈合率、细胞侵袭数、KLF8 mRNA以及KLF8、N-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),凋亡率、miR-218-5p、E-cadherin和Bax水平显著降低(P<0.05),LncRNA KCNQ1OT1差异无统计学意义(P>0.05);与miR-NC组相比,共转染KC1-WT和miR-218-5p mimic降低细胞中荧光酶活性(P<0.05)。结论敲低LncRNA KCNQ1OT1可能经由miR-218-5p/KLF8轴,诱导人肺癌细胞凋亡,并抑制上皮间质转化和增殖。 展开更多
关键词 长链非编码RNA KCNQ1OT1 微小RNA-218-5p/Krüppel样因子8轴 人肺癌细胞
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五虎汤调控miR-182-5p表达靶向NOX4/NLRP3/IL-1β信号通路缓解哮喘小鼠气道炎症的作用机制研究
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作者 郭超凡 李娇艳 +5 位作者 田娅玲 舒文俊 戴孟庭 周娅微 邓婷 董晓斐 《湖南中医药大学学报》 2026年第1期14-22,共9页
目的探讨五虎汤通过调控miR-182-5p表达靶向烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路缓解哮喘小鼠气道炎症的作用机制。方法将42只Balb/c小鼠随机分为空白组(A组,... 目的探讨五虎汤通过调控miR-182-5p表达靶向烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路缓解哮喘小鼠气道炎症的作用机制。方法将42只Balb/c小鼠随机分为空白组(A组,6只)和造模组(36只)。通过腹腔注射屋尘螨诱导小鼠致敏,并予聚肌胞苷酸模拟病毒感染诱发哮喘急性发作模型。将造模成功的36只小鼠随机分为6组[模型组(B组)、miR-182-5p agomir组(C组)、MicroRNA Agomir negative control组(D组)、五虎汤+miR-182-5p agomir组(E组)、五虎汤+MicroRNA Agomir negative control组(F组)、五虎汤组(G组)],每组6只。C、D组给予纯水灌胃并分别予miR-182-5p agomir、MicroRNA Agomir negative control滴鼻,E、F、G组予以五虎汤灌胃并分别予miR-182-5p agomir、MicroRNA Agomir negative control、DEPC水滴鼻,A、B组予等体积纯水灌胃和DEPC水滴鼻,以上处理均1次/d,连续处理7 d后处死小鼠取材。观察小鼠一般行为学表现;HE、Masson染色法观察小鼠肺组织气道炎症细胞浸润、气道胶原纤维沉积情况;Western blot法检测小鼠肺组织中NOX4、NLRP3、IL-1β的蛋白表达水平;qPCR检测miR-182-5p含量。结果与A组相比,B组小鼠可见不同程度的频繁抓鼻、呼吸加快、腹肌抽动,甚至口唇青紫,行为改变显著。与B组相比,C、F、G组行为改变好转,偶有挠鼻、呼吸频率减慢,无喘息、缺氧表现;E组呼吸频率明显减慢,呼吸平稳;D组行为学无明显改善,呼吸频率快。与A组相比,B组可见大量炎症细胞浸润,支气管间隙水肿;气道及血管下胶原纤维明显沉积。与B组相比,C、F、G组病理表现缓解,炎症细胞浸润减少,间质水肿不同程度吸收,胶原纤维沉积减少;E组改变更加明显,仅有少量炎症细胞浸润,无明显间质水肿,支气管下方胶原纤维沉积明显减少;D组HE染色仍见较多炎症细胞,胶原纤维沉积改善不明显。与A组相比,B组miR-182-5p含量下降(P<0.05),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。与B组相比,C、E、F、G组小鼠miR-182-5p含量上升(P<0.05,P<0.001),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达下降(P<0.05,P<0.001)。与C组相比,D组miR-182-5p含量下降(P<0.05),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。与E组相比,F、G组miR-182-5p含量下降(P<0.05),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。结论五虎汤可以改善哮喘小鼠哮喘表现,减轻气道炎症,可能与促进miR-182-5p高表达、抑制NOX4/NLRP3/IL-1β通路激活有关。 展开更多
关键词 支气管哮喘 五虎汤 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 miR-182-5p NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 白细胞介素-1Β
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胃癌患者组织中miR-204-5p、KMT2D表达与疾病分期、预后的关系
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作者 郭云云 张晓峰 +1 位作者 张鹏 赵薇 《国际检验医学杂志》 2026年第1期119-123,共5页
目的探究胃癌患者组织中微小RNA-204-5p(miR-204-5p)和组蛋白赖氨酸甲基转移酶2D(KMT2D)表达与疾病分期和预后的关系。方法收集2021年1月至2023年1月在该院手术治疗的90例胃癌患者术中切除的胃癌及癌旁组织样本,整理患者TNM分期和预后情... 目的探究胃癌患者组织中微小RNA-204-5p(miR-204-5p)和组蛋白赖氨酸甲基转移酶2D(KMT2D)表达与疾病分期和预后的关系。方法收集2021年1月至2023年1月在该院手术治疗的90例胃癌患者术中切除的胃癌及癌旁组织样本,整理患者TNM分期和预后情况,同时收集患者肿瘤最大径、分化程度等临床病理资料。采用实时荧光定量PCR检测患者胃癌组织及癌旁组织miR-204-5p的相对表达水平;采用免疫组织化学法检测KMT2D的阳性表达;比较胃癌组织与癌旁组织、不同TNM分期患者及不同预后患者miR-204-5p和KMT2D表达的差异;采用多因素Logistic回归分析胃癌患者预后的影响因素;采用Spearman法分析miR-204-5p与KMT2D的相关性。结果与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-204-5p相对表达水平明显降低(P<0.05),KMT2D阳性率明显升高(P<0.05)。随着患者疾病分期的进展,胃癌组织中miR-204-5p相对表达水平逐渐降低(P<0.05),KMT2D阳性率逐渐升高(P<0.05)。患者胃癌组织中miR-204-5p的相对表达水平及KMT2D阳性率与肿瘤分化程度、淋巴结转移及浸润深度有关(P<0.05),二者均与患者性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤部位无关(P>0.05)。预后不良患者miR-204-5p相对表达水平明显低于预后良好患者(P<0.05),KMT2D阳性率明显高于预后良好患者(P<0.05)。淋巴结转移、TNM分期及KMT2D阳性是胃癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05),miR-204-5p是胃癌患者预后不良的独立保护因素(P<0.05)。Spearman法分析显示,miR-204-5p与KMT2D呈负相关(P<0.05)。结论胃癌患者组织中miR-204-5p、KMT2D表达与其疾病分期和预后密切相关。 展开更多
关键词 胃癌 微小RNA-204-5p 组蛋白赖氨酸甲基转移酶2D 疾病分期
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炙甘草汤调控miR-26b-5p/SMAD4通路对心房颤动大鼠模型心房重构的影响
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作者 刘魁智 宣学习 +2 位作者 周芃 袁孝伟 朱自强 《天津医药》 2026年第1期14-22,共9页
目的探讨炙甘草汤对心房颤动(AF)大鼠模型心房重构及微小RNA(miR)-26b-5p/母亲DPP同源物(SMAD)4通路的影响。方法构建AF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为AF组、维拉帕米组、炙甘草汤低剂量(炙甘草汤-L)组、炙甘草汤高剂量(炙甘草汤-H... 目的探讨炙甘草汤对心房颤动(AF)大鼠模型心房重构及微小RNA(miR)-26b-5p/母亲DPP同源物(SMAD)4通路的影响。方法构建AF大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为AF组、维拉帕米组、炙甘草汤低剂量(炙甘草汤-L)组、炙甘草汤高剂量(炙甘草汤-H)组、炙甘草汤-H+anti-NC组、炙甘草汤-H+miR-26b-5p抑制剂(anti-miR-26b-5p)组,每组18只;另取18只健康大鼠作为对照组。检测各组大鼠心功能、体外AF诱发率;苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察心房组织病理变化;原位末端标记(TUNEL)染色检测心房组织心肌细胞凋亡情况;免疫组化检测心房组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;qRT-PCR检测miR-26b-5p相对表达水平;Western blot检测SMAD4、BCL-2相关X蛋白(BAX)、活化的胱天蛋白酶-3(C-caspase3)的表达;双萤光素酶实验验证miR-26b-5p与SMAD4的靶向关系。结果与对照组相比,AF组心房组织出现严重病理损伤,心肌细胞结构异常、肿胀稀疏排列紊乱、蓝色胶原沉积明显;左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)升高,左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)降低;AF诱发率、胶原面积百分数、细胞凋亡率增加;BAX、C-caspase3、ColⅠ、α-SMA、SMAD4蛋白表达水平升高,miR-26b-5p水平降低(P<0.05)。与AF组相比,维拉帕米组、炙甘草汤-L组、炙甘草汤-H组治疗可逆转上述指标的变化趋势,减轻心房组织病理损伤,减少蓝色胶原沉积。炙甘草汤-H+anti-miR-26b-5p组可逆转炙甘草汤-H对AF大鼠模型心房重构的改善作用。Starbase网站及双萤光素酶基因报告结果显示,miR-26b-5p与SMAD4之间存在靶向关系。结论炙甘草汤可能通过上调miR-26b-5p进而抑制SMAD4表达,改善AF大鼠心房重构。 展开更多
关键词 心房颤动 心房重构 炙甘草汤 miR-26b-5p SMAD4
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桔皮素通过rno-miR-9a-5p/Notch通路促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复
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作者 武林娟 靳雅惠 高枫 《中南医学科学杂志》 2026年第1期7-13,共7页
目的探究桔皮素(TAN)对脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能恢复的机制。方法将60只SD大鼠随机均分为假手术(Sham)组、SCI组、SCI+TAN组、阴性对照拮抗剂(NC-antagomir)组和大鼠miR-9a-5p拮抗剂(rno-miR-9a-5p-antagomir)组。各组大鼠均干预21天... 目的探究桔皮素(TAN)对脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能恢复的机制。方法将60只SD大鼠随机均分为假手术(Sham)组、SCI组、SCI+TAN组、阴性对照拮抗剂(NC-antagomir)组和大鼠miR-9a-5p拮抗剂(rno-miR-9a-5p-antagomir)组。各组大鼠均干预21天。采用Basso、Beattie和Bresnahan(BBB)评分评价各组大鼠运动功能;HE、Nissl和TUNEL染色观察各组大鼠脊髓组织损伤、存活神经元数量和细胞凋亡情况;采用试剂盒检测脊髓组织炎症因子及氧化应激指标水平。采用qRTPCR检测脊髓组织中rno-miR-9a-5p以及发状分裂相关增强子1(Hes1)和Notch2mRNA水平;采用Westernblotting检测脊髓组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Nestin、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、Hes1、Notch2蛋白表达水平;采用免疫组化法检测脊髓组织溴脱氧尿苷(BrdU)、Nestin、NSE蛋白表达水平。结果TAN干预后,SCI大鼠的脊髓形态明显改善,脊髓神经元数量增多,BBB评分升高,脊髓组织中TUNEL阳性细胞比例降低,炎症和氧化应激被抑制,Bax、Hes1和Notch2水平降低,Bcl-2、BrdU、Nestin、NSE和rno-miR-9a-5p水平升高。rno-miR-9a-5p-antagomir干预显著削弱了TAN的神经保护作用。结论桔皮素通过调控rno-miR-9a-5p/Notch通路介导的炎症、氧化应激、内源性神经干细胞增殖和神经元定向分化,从而缓解大鼠SCI并促进神经功能恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 桔皮素 rno-miR-9a-5p NOTCH通路 神经功能恢复
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lncRNA XIST调控miR-17-5p/FOSL1轴对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 陈李康 姚磊 彭莹莹 《肝胆胰外科杂志》 2026年第2期115-123,共9页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异性转录本(XIST)调控微小RNA-17-5p(miR-17-5p)/FOS样抗原1(FOSL1)轴对胆囊癌(GBC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR法检测GBC组织和细胞株中mRNA表达;双荧光素酶报告基因实验验证l... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异性转录本(XIST)调控微小RNA-17-5p(miR-17-5p)/FOS样抗原1(FOSL1)轴对胆囊癌(GBC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR法检测GBC组织和细胞株中mRNA表达;双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA XIST与miR-17-5p,miR-17-5p与FOSL1的互作;将EH-GB1细胞分为Ctrl组、sh-NC组、sh-XIST组、sh-XIST+inhibitor-NC组、sh-XIST+inhibitor-miR-17-5p组、mimic-NC组、mimic-miR-17-5p组、mimic-miR-17-5p+OE-NC组、mimic-miR-17-5p+OE-FOSL1组。台盼蓝染色和平板克隆实验检测EH-GB1细胞增殖;划痕试验检测EH-GB1细胞迁移;Transwell实验检测EH-GB1细胞侵袭;Western blotting检测EH-GB1细胞中Ki67、Cyclin D1、MMP-2、CD44、FOSL1蛋白的表达。裸鼠移植瘤实验检测敲低lncRNA XIST对GBC肿瘤生长的影响。结果GBC组织和细胞中miR-17-5p呈低表达,lncRNA XIST、FOSL1呈高表达。sh-XIST组细胞存活率、增殖数、划痕愈合率、侵袭数,Ki67、Cyclin D1、MMP-2、CD44表达水平低于sh-NC组、Ctrl组(P<0.05);sh-XIST+inhibitor-miR-17-5p组细胞存活率、增殖数、划痕愈合率、侵袭数及Ki67、Cyclin D1、MMP-2、CD44表达水平高于sh-XIST组、sh-XIST+inhibitor-NC组(P<0.05)。mimic-miR-17-5p组细胞存活率、增殖数、划痕愈合率、侵袭数及Ki67、Cyclin D1、MMP-2、CD44、FOSL1表达水平低于mimic-NC组、Ctrl组(P<0.05);mimic-miR-17-5p+OE-FOSL1组细胞存活率、增殖数、划痕愈合率、侵袭数及Ki67、Cyclin D1、MMP-2、CD44、FOSL1表达水平高于mimic-miR-17-5p组、mimic-miR-17-5p+OE-NC组(P<0.05)。lncRNA XIST可以靶向负调控miR-17-5p,而miR-17-5p可以靶向负调控FOSL1(P<0.05)。XIST敲低组裸鼠移植瘤体积、体质量,肿瘤FOSL1蛋白、lncRNA XIST表达水平低于阴性对照组,miR-17-5p表达水平高于阴性对照组(P<0.05)。结论lncRNA XIST通过调控miR-17-5p/FOSL1轴促进GBC细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNA X染色体失活特异性转录本 微小RNA-17-5p FOS样抗原1 胆囊癌 增殖 迁移 侵袭
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人乳头瘤病毒、薄层液基细胞学联合血清miR-182-3p、miR-885-5p对宫颈癌的价值
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作者 解成霞 张元芳 赵延辉 《成都医学院学报》 2026年第1期65-68,共4页
目的探究人乳头瘤病毒(HPV)、薄层液基细胞学检查(TCT)联合血清miR-182-3p、miR-885-5p对宫颈癌筛查诊断的临床价值。方法选择2022年1月至2023年1月青海红十字医院收治的216例疑似宫颈癌患者为研究对象,根据手术及病理诊断结果(是否为... 目的探究人乳头瘤病毒(HPV)、薄层液基细胞学检查(TCT)联合血清miR-182-3p、miR-885-5p对宫颈癌筛查诊断的临床价值。方法选择2022年1月至2023年1月青海红十字医院收治的216例疑似宫颈癌患者为研究对象,根据手术及病理诊断结果(是否为宫颈癌),将其分为宫颈癌组(104例)和非宫颈癌组(112例)。采用qRT-PCR法测定两组血清miR-182-3p、miR-885-5p相对表达水平;绘制ROC曲线,评价HPV、TCT联合血清miR-182-3p、miR-885-5p水平对宫颈癌的诊断价值。结果经HPV检查诊断显示,诊断宫颈癌的灵敏度为75.00%、特异度为85.71%。经TCT检查诊断显示,诊断宫颈癌的灵敏度为78.85%、特异度为85.71%。与非宫颈癌组相比,宫颈癌组血清miR-182-3p表达水平升高(P<0.05),miR-885-5p表达水平降低(P<0.05)。HPV、TCT、miR-182-3p、miR-885-5p四者联合诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)最高,优于各指标诊断(P<0.05)。结论宫颈癌患者血清miR-182-3p水平升高,miR-885-5p水平降低,HPV、TCT联合血清miR-182-3p、miR-885-5p检测可提高宫颈癌的诊断效能。 展开更多
关键词 miR-182-3p miR-885-5p 人乳头瘤病毒 薄层液基细胞学检查 宫颈癌 筛查
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芍药甘草汤调控血浆外泌体miR-216a-5p干预脊髓损伤后肌痉挛的研究
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作者 段小波 郭珂珂 +3 位作者 郭云鹏 谢艳 周英杰 岳宗进 《中医药信息》 2026年第2期31-38,共8页
目的探讨芍药甘草汤(SGD)干预脊髓损伤(SCI)大鼠肌痉挛的作用机制。方法(1)将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、药物组和阳性组,每组各10只。除正常组外,其余组大鼠通过T9-10脊髓半横切制备SCI模型。术后第3天,正常组和模型组给予去... 目的探讨芍药甘草汤(SGD)干预脊髓损伤(SCI)大鼠肌痉挛的作用机制。方法(1)将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、药物组和阳性组,每组各10只。除正常组外,其余组大鼠通过T9-10脊髓半横切制备SCI模型。术后第3天,正常组和模型组给予去离子水灌胃,药物组给予SGD(3.3 g/kg)灌胃,阳性组给予巴氯芬溶液(1.35 mg/kg)灌胃,治疗持续2周。通过BBB评分评估药物疗效,并检测脊髓组织中HMGB1水平及miR-216a-5p的表达,通过双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-216a-5p与HMGB1之间的调控关系;(2)体外培养脊髓神经元,观察SGD及miR-216a-5p模拟物/抑制剂对HMGB1表达的影响;(3)50只SD大鼠随机分为模型组、药物组、miR-216a-5p mimics组、miR-216a-5p inhibitor组和外泌体组,每组10只,观察各组HMGB1的表达情况。结果(1)治疗1周和2周后,药物组的BBB评分显著高于模型组(P<0.01),其疗效与阳性组相当。SCI后HMGB1水平升高,但经治疗后脊髓组织中HMGB1水平降低,而血浆外泌体中miR-216a-5p表达上调,双荧光素酶报告基因实验证实HMGB1是miR-216a-5p的靶基因;(2)体外培养的模型组脊髓神经细胞中HMGB1表达高于正常组,而经SGD和miR-216a-5p mimics处理后HMGB1表达降低,miR-216a-5p inhibitor则促进HMGB1表达;(3)进一步动物实验表明,药物组大鼠血浆外泌体中的miR-216a-5p可抑制脊髓组织中HMGB1的表达。结论SGD通过调节血浆外泌体中的miR-216a-5p抑制脊髓组织中HMGB1的表达,对SCI大鼠的神经修复具有积极作用。 展开更多
关键词 芍药甘草汤 脊髓损伤 肌痉挛 miR-216a-5p 高迁移率族蛋白B1
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LncRNA NONRATT021203.2通过调控miRNA-138-5p表达促进骨癌痛进展
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作者 俞晨阳 朱涵希 +5 位作者 朱正华 宋梦雪 顾卓 李星润 陈家宏 魏金荣 《江苏大学学报(医学版)》 2026年第1期51-57,64,共8页
目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)NONRATT021203.2在骨癌痛进展中的作用及其可能的分子机制。方法:采用胫骨内注射乳腺癌Walker 256细胞构建SD大鼠骨癌痛模型;取16只180~200 g成年SD雌鼠,随机分为对照组和骨癌痛组,每组8只,分别胫骨注射1... 目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)NONRATT021203.2在骨癌痛进展中的作用及其可能的分子机制。方法:采用胫骨内注射乳腺癌Walker 256细胞构建SD大鼠骨癌痛模型;取16只180~200 g成年SD雌鼠,随机分为对照组和骨癌痛组,每组8只,分别胫骨注射10μL生理盐水和10μL乳腺癌Walker 256细胞悬液(1×10~8个细胞/mL),通过行为学检测大鼠造模侧下肢爪退缩阈值(paw withdrawal threshold,PWT)和爪退缩潜伏期(paw withdrawal latency,PWL),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中lncRNA NONRATT021203.2和miRNA-138-5p相对表达,荧光原位杂交分析miRNA-138-5p在DRG组织中定位。取造模后7 d骨癌痛大鼠10只,分为骨癌痛+siRNA组(n=5)和骨癌痛+siNC组(n=5),分别鞘内注射lncRNA NONRATT021203.2-siRNA及siNC,qRT-PCR检测两组lncRNA NONRATT021203.2和miRNA-138-5p相对表达量。取造模后7 d骨癌痛大鼠16只,分为骨癌痛+mimics组(n=8)和骨癌痛+NC组(n=8),分别鞘内注射miRNA-138-5p mimics和阴性对照寡核苷酸(NC),行为学检测两组PWT和PWL。利用miRand、miRwalk3.0软件分析lncRNA NONRATT021203.2和miRNA-138-5p结合位点。结果:与对照组相比,骨癌痛组造模侧下肢PWT和PWL明显降低(P<0.05),lncRNA NONRATT021203.2相对表达量明显升高(P<0.01),miRNA-138-5p相对表达量明显降低(P<0.001);荧光原位杂交结果显示,miRNA-138-5p定位于神经元胞质中。与骨癌痛+siNC组相比,骨癌痛+lncRNA NONRATT021203.2-siRNA组lncRNA NONRATT021203.2相对表达量明显降低(P<0.05),而miRNA-138-5p相对表达量明显升高(P<0.05)。与骨癌痛+NC组相比,骨癌痛+miRNA-138-5p mimics组PWT明显升高(P<0.01)。生物信息学分析结果显示,lncRNA NONRATT021203.2与miRNA-138-5p存在结合位点。结论:LncRNA NONRATT021203.2可通过竞争性结合miRNA-138-5p,降低胞内游离miRNA-138-5p水平,从而促进骨癌痛的发生与发展。 展开更多
关键词 骨癌痛 背根神经节 lncRNA NONRATT021203.2 miRNA-138-5p
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高/低表达miR-122-5p稳转PC12细胞株的构建和鉴定
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作者 陶代菊 苏海玉 +2 位作者 王宇琪 沈志强 何波 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1790-1799,共10页
背景:MicroRNA-122-5p(miR-122-5p)作为微小RNA(miRNA)家族中的关键成员,在调控基因表达及多种疾病的发生发展中扮演着重要的角色,然而其确切的作用机制尚未完全阐明。构建稳定的miR-122-5p高/低表达PC12细胞模型,可为深入研究miR-122-5... 背景:MicroRNA-122-5p(miR-122-5p)作为微小RNA(miRNA)家族中的关键成员,在调控基因表达及多种疾病的发生发展中扮演着重要的角色,然而其确切的作用机制尚未完全阐明。构建稳定的miR-122-5p高/低表达PC12细胞模型,可为深入研究miR-122-5p在神经系统疾病中的确切作用机制以及发现潜在治疗靶点提供有力的实验工具。目的:旨在构建高/低表达大鼠miR-122-5p慢病毒载体,并以此建立稳定高/低表达miR-122-5p的PC12细胞株,为进一步研究miR-122-5p在神经系统疾病中的作用奠定基础。方法:根据miR-122-5p基因序列设计合成引物,通过PCR扩增该基因片段。将目的基因定向接入经AgeI/NheI酶切的载体质粒GV369中,构建重组慢病毒质粒。筛选阳性克隆,并进行测序比对结果。将质粒载体与目的质粒载体同293T细胞共培养转染,获得慢病毒原液进行包装和滴度测定。通过体外培养PC12细胞,确定嘌呤霉素工作浓度。慢病毒分别与PC12细胞共培养,确定转染效率,用嘌呤霉素挑选出稳定转染细胞,RT-qPCR法检测稳定转染细胞株的miR-122-5p表达量。结果与结论:①测序序列与目的序列一致提示重组慢病毒载体构建成功,高表达慢病毒滴度为4×10^(8)TU/mL,miR-122-5p低表达慢病毒滴度为1×10^(9)TU/mL;②PC12细胞嘌呤霉素工作浓度为3.5μg/mL;③高表达miR-122-5p慢病毒转染PC12细胞的最佳条件为HiTransG P转染增强液,且感染复数值=10;感染复数值=50时低表达miR-122-5p效率最高;④RT-qPCR结果显示,高表达稳转细胞株中miR-122-5p的表达量有明显升高,而低表达稳转细胞株中miR-122-5p表达量显著降低;⑤此次研究成功构建了高/低表达miR-122-5p慢病毒载体,并获得稳转PC12细胞株,为miR-122-5p在神经系统疾病中的进一步研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 PC12细胞 微小RNA 慢病毒载体 质粒 miR-122-5p 稳转细胞株 神经系统疾病 缺血性脑卒中
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