Dysregulation of microRNA(miRNA)expression following the development of obesity is closely linked to the onset of type 2 diabetes mellitus(T2DM).Identifying differentially expressed miRNAs and their roles in regulatin...Dysregulation of microRNA(miRNA)expression following the development of obesity is closely linked to the onset of type 2 diabetes mellitus(T2DM).Identifying differentially expressed miRNAs and their roles in regulating glucose metabolism will provide a theoretical foundation for the molecular mechanisms underlying obesity-induced T2DM.Here,we perform a genome-wide association study involving 5 glycolipid metabolism traits in 1783 Kazakh and 1198 Uyghur individuals to identify miRNAs associated with fasting plasma glucose(FPG)levels.A miR-548ab mimic and inhibitor are administered to hepatocytes and adipocytes,as well as obese and diabetic mice,to determine miR-548ab-related downstream signalling pathways.The effects of miR-548ab on glucose metabolism are validated using the glucose tolerance test and insulin tolerance test.Collectively,these results indicate that miR-548ab is significantly associated with FPG levels and obesity-related T2DM in both Kazakh and Uyghur populations.The miR-548ab-GULP1/SLC25A21-GLUT4 network exerts regulatory effects on glucose metabolism,obesity,and T2DM,positioning it as a candidate risk factor,potential diagnostic marker,and therapeutic target for obesity-induced T2DM.Additionally,through evolutionary analysis,the authentic variants or haplotypes of GULP1 and SLC25A21 are categorized according to their genetic susceptibility to T2DM.The miR-548ab inhibitor shows beneficial effects in obese and diabetic mice.展开更多
[目的]探讨微小RNA548(mir548)和三价砷甲基转移酶(AS3MT)m RNA表达及其与砷甲基化代谢产物的关系。[方法]2011年9月采用整群抽样的方法选择云南某2个砷冶炼厂78名工人作为接触组,选择该地非接触砷作业居民23人为对照组。使用带砷预处...[目的]探讨微小RNA548(mir548)和三价砷甲基转移酶(AS3MT)m RNA表达及其与砷甲基化代谢产物的关系。[方法]2011年9月采用整群抽样的方法选择云南某2个砷冶炼厂78名工人作为接触组,选择该地非接触砷作业居民23人为对照组。使用带砷预处理系统的原子吸收分光光度法检测两组人群尿中的无机砷(i As)、甲基砷酸(MMA)和二甲基砷酸(DMA)含量,并计算相应的百分含量和一、二级甲基化指数;通过基因分析软件分析影响AS3MT的主要m RNA。实时荧光定量PCR检测研究对象外周血mir548和AS3MT m RNA表达。采用Spearman方法对各项指标进行相关分析。[结果]接触组尿中i As、MMA、DMA、一级甲基化指数和MMA%的中位数为134.54、235.88、563.57μg/g肌酐、1.61及19.01%,对照组为2.00、1.35、14.28μg/g肌酐、1.04及6.45%,接触组均高于对照组(P<0.05)。二级甲基化指数和DMA%则为接触组低于对照组(P<0.05),分别为3.41、61.98%和12.31、78.01%。接触组外周血mir548表达低于对照组(5.08±1.11与6.49±1.68),AS3MT m RNA表达水平高于对照组(10.71±2.52与9.19±2.11),均P<0.01。相关分析发现:外周血淋巴细胞mir548与AS3MT m RNA表达及i As、MMA、DMA及MMA%呈负相关关系(P<0.01);外周血AS3MT m RNA表达与尿中i As、MMA、DMA、MMA%及外周血mir548表达与DMA%均呈正相关关系(P<0.01)。[结论]mir548与AS3MT m RNA表达有负相关,两者与砷不同甲基化代谢产物浓度和百分含量存在关联。展开更多
目的:探讨miR-548d对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:通过Real time PCR及Western blot检测miR-548d和KRAS在30例骨肉瘤组织以及293、MG63和U2OS细胞中的表达情况。对30例骨肉瘤组织中miR-548d和KRAS含量的相关性进行分析,随后通过...目的:探讨miR-548d对骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:通过Real time PCR及Western blot检测miR-548d和KRAS在30例骨肉瘤组织以及293、MG63和U2OS细胞中的表达情况。对30例骨肉瘤组织中miR-548d和KRAS含量的相关性进行分析,随后通过报告基因实验印证miR-548d对KRAS的靶向作用。MG63细胞中分别过表达或沉默miR-548d后,通过Western blot实验分析KRAS的变化情况,MTT实验观察miR-548d对细胞增殖的影响,Transwell实验观察miR-548d对其迁移能力的影响。结果:骨肉瘤组织及细胞中miR-548d表达较低,KRAS表达较高。在骨肉瘤组织中miR-548d与KRAS的表达呈负相关。报告基因实验证明miR-548d可以直接打靶KRAS。Western blot指出miR-548d可以抑制KRAS的表达。最后MTT和Transwell实验指出miR-548d可以抑制MG63细胞的增殖与迁移。结论:miR-548d可以通过打靶KRAS抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移。展开更多
[目的]探讨宫颈癌紫杉醇抗性形成的潜在机制。[方法]紫杉醇浓度从0.001μmol/L逐渐递增至0.1μmol/L处理Hela细胞超过12个月进行Hela紫杉醇抗性细胞(Hela/TR)的筛选。检测Hela与Hela/TR细胞的细胞活力、凋亡水平、细胞周期和肿瘤干细胞...[目的]探讨宫颈癌紫杉醇抗性形成的潜在机制。[方法]紫杉醇浓度从0.001μmol/L逐渐递增至0.1μmol/L处理Hela细胞超过12个月进行Hela紫杉醇抗性细胞(Hela/TR)的筛选。检测Hela与Hela/TR细胞的细胞活力、凋亡水平、细胞周期和肿瘤干细胞水平。紫杉醇处理后,检测Hela与Hela/TR细胞内紫杉醇浓度。[结果]紫杉醇处理可以显著抑制Hela细胞的增殖并且诱导细胞凋亡。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞中CD44^(+)细胞的比例显著增加,并且Hela/TR细胞中肿瘤干细胞标志物SOX2和ALDH1的表达水平高于Hela细胞。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞的细胞内紫杉醇浓度明显降低(0.0759±0.0130 vs 0.0031±0.0004,t=12.52,P<0.05)。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞中ABCC5的表达水平显著上升(0.15±0.04 vs 0.72±0.04,t=22.53,P<0.05)。敲低ABCC5后,Hela/TR细胞的细胞内紫杉醇浓度明显升高。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞中FOXM1的表达水平上升。敲低FOXM1后,Hela/TR细胞中ABCC5的表达水平下降(0.13±0.07 vs 0.64±0.03,t=14.97,P<0.05),细胞内紫杉醇浓度明显上升。过表达miR-548o-3p后,Hela/TR细胞中FOXM1和ABCC5的水平表达下降,细胞内紫杉醇浓度明显上升(0.003±0.000 vs 0.072±0.010,t=15.43,P<0.05)。miR-548o-3p靶向FOXM1 mRNA的3′端非翻译区。过表达miR-548o-3p后,Hela/TR细胞对紫杉醇的抵抗显著下降(0.51±0.05 vs 0.10±0.01,t=17.98,P<0.05)。[结论]宫颈癌紫杉醇抗性细胞中miR-548o-3p负反馈失调导致FOXM1/ABCC5轴过度激活,提升了紫杉醇从宫颈癌细胞内的排除效率,增强了宫颈癌细胞的活力。展开更多
基金supported by the Natural Science Foundation of China(82160156,82260162,and 32370669)the Strategic Priority Research Program of the Chinese Academy of Sciences(XDB38040200)+1 种基金the Tianshan Talent Project in Xinjiang Autonomous Region(2023TSYCCX0116 and 2023TSYCQNTJ0032)the Scientific and Technological Research Project of Xinjiang Production and Construction Corps(2022ZD001,2021AB028,2022AB022,2023AB057,and 2023ZD037).
文摘Dysregulation of microRNA(miRNA)expression following the development of obesity is closely linked to the onset of type 2 diabetes mellitus(T2DM).Identifying differentially expressed miRNAs and their roles in regulating glucose metabolism will provide a theoretical foundation for the molecular mechanisms underlying obesity-induced T2DM.Here,we perform a genome-wide association study involving 5 glycolipid metabolism traits in 1783 Kazakh and 1198 Uyghur individuals to identify miRNAs associated with fasting plasma glucose(FPG)levels.A miR-548ab mimic and inhibitor are administered to hepatocytes and adipocytes,as well as obese and diabetic mice,to determine miR-548ab-related downstream signalling pathways.The effects of miR-548ab on glucose metabolism are validated using the glucose tolerance test and insulin tolerance test.Collectively,these results indicate that miR-548ab is significantly associated with FPG levels and obesity-related T2DM in both Kazakh and Uyghur populations.The miR-548ab-GULP1/SLC25A21-GLUT4 network exerts regulatory effects on glucose metabolism,obesity,and T2DM,positioning it as a candidate risk factor,potential diagnostic marker,and therapeutic target for obesity-induced T2DM.Additionally,through evolutionary analysis,the authentic variants or haplotypes of GULP1 and SLC25A21 are categorized according to their genetic susceptibility to T2DM.The miR-548ab inhibitor shows beneficial effects in obese and diabetic mice.
文摘[目的]探讨微小RNA548(mir548)和三价砷甲基转移酶(AS3MT)m RNA表达及其与砷甲基化代谢产物的关系。[方法]2011年9月采用整群抽样的方法选择云南某2个砷冶炼厂78名工人作为接触组,选择该地非接触砷作业居民23人为对照组。使用带砷预处理系统的原子吸收分光光度法检测两组人群尿中的无机砷(i As)、甲基砷酸(MMA)和二甲基砷酸(DMA)含量,并计算相应的百分含量和一、二级甲基化指数;通过基因分析软件分析影响AS3MT的主要m RNA。实时荧光定量PCR检测研究对象外周血mir548和AS3MT m RNA表达。采用Spearman方法对各项指标进行相关分析。[结果]接触组尿中i As、MMA、DMA、一级甲基化指数和MMA%的中位数为134.54、235.88、563.57μg/g肌酐、1.61及19.01%,对照组为2.00、1.35、14.28μg/g肌酐、1.04及6.45%,接触组均高于对照组(P<0.05)。二级甲基化指数和DMA%则为接触组低于对照组(P<0.05),分别为3.41、61.98%和12.31、78.01%。接触组外周血mir548表达低于对照组(5.08±1.11与6.49±1.68),AS3MT m RNA表达水平高于对照组(10.71±2.52与9.19±2.11),均P<0.01。相关分析发现:外周血淋巴细胞mir548与AS3MT m RNA表达及i As、MMA、DMA及MMA%呈负相关关系(P<0.01);外周血AS3MT m RNA表达与尿中i As、MMA、DMA、MMA%及外周血mir548表达与DMA%均呈正相关关系(P<0.01)。[结论]mir548与AS3MT m RNA表达有负相关,两者与砷不同甲基化代谢产物浓度和百分含量存在关联。
文摘[目的]探讨宫颈癌紫杉醇抗性形成的潜在机制。[方法]紫杉醇浓度从0.001μmol/L逐渐递增至0.1μmol/L处理Hela细胞超过12个月进行Hela紫杉醇抗性细胞(Hela/TR)的筛选。检测Hela与Hela/TR细胞的细胞活力、凋亡水平、细胞周期和肿瘤干细胞水平。紫杉醇处理后,检测Hela与Hela/TR细胞内紫杉醇浓度。[结果]紫杉醇处理可以显著抑制Hela细胞的增殖并且诱导细胞凋亡。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞中CD44^(+)细胞的比例显著增加,并且Hela/TR细胞中肿瘤干细胞标志物SOX2和ALDH1的表达水平高于Hela细胞。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞的细胞内紫杉醇浓度明显降低(0.0759±0.0130 vs 0.0031±0.0004,t=12.52,P<0.05)。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞中ABCC5的表达水平显著上升(0.15±0.04 vs 0.72±0.04,t=22.53,P<0.05)。敲低ABCC5后,Hela/TR细胞的细胞内紫杉醇浓度明显升高。与Hela细胞相比,Hela/TR细胞中FOXM1的表达水平上升。敲低FOXM1后,Hela/TR细胞中ABCC5的表达水平下降(0.13±0.07 vs 0.64±0.03,t=14.97,P<0.05),细胞内紫杉醇浓度明显上升。过表达miR-548o-3p后,Hela/TR细胞中FOXM1和ABCC5的水平表达下降,细胞内紫杉醇浓度明显上升(0.003±0.000 vs 0.072±0.010,t=15.43,P<0.05)。miR-548o-3p靶向FOXM1 mRNA的3′端非翻译区。过表达miR-548o-3p后,Hela/TR细胞对紫杉醇的抵抗显著下降(0.51±0.05 vs 0.10±0.01,t=17.98,P<0.05)。[结论]宫颈癌紫杉醇抗性细胞中miR-548o-3p负反馈失调导致FOXM1/ABCC5轴过度激活,提升了紫杉醇从宫颈癌细胞内的排除效率,增强了宫颈癌细胞的活力。
文摘目的探讨微小RNA-548z(micro RNA-548z,mi R-548z)与CD147基因3'非翻译区单核苷酸多态性位点rs8259 T/A结合对急性心肌梗死(AMI)患者CD147表达的影响。方法以30例AMI患者及13例正常人作为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CD147基因rs8259位点的基因型。外周血单个核细胞(PBMC)中mi R-548z及CD147 m RNA的表达采用荧光定量聚合酶链反应(q PCR)法检测,CD147蛋白表达应用Western Blot法。双荧光素酶报告基因验证mi R-548z与rs8259 T/A的相互作用。结果 AMI患者AA型和TT型PBMCs中mi R-548z的表达水平无差异,并与正常对照组无统计学意义(P>0.05);AMI患者AA型和TT型PBMCs中CD147 m RNA的表达水平无差异(P>0.05);而AMI患者AA型组CD147蛋白的表达水平明显高于TT型组;双荧光素酶报告基因结果显示,mimic mi R-548z能够抑制携带CD147基因rs8259位点T等位基因载体的荧光素酶活性,呈剂量依赖性。结论 mi R-548z能与AMI患者CD147基因3'UTR rs8259的T等位基因结合,从而调控CD147蛋白的表达。
