目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓...目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓度和反应条件,评估特异性IgE微阵列化学发光免疫检测Blo t 5、Blo t 21sIgE的各项性能指标。检测受试者血清Blo t 5、Blo t 21水平,以德国敏筛检测系统测定结果为对照进行一致性比较。结果抗原最佳浓度为50.0μg/mL。使用2%牛血清白蛋白封闭12 h的信噪比最高。酶标二抗最佳稀释梯度为2.5μg/mL。血清与芯片反应20 min结合酶标二抗反应20 min为最佳反应时间组合。微阵列化学发光免疫检测方法的最低检出限<0.01 IU/mL,线性范围0.20~100.00 IU/mL,批内、批间精密度分别小于8%、10%,Blo t 5和Blo t 21的交叉污染率分别为0.20%和0.31%。与德国敏筛过敏原检测系统测定结果相比,特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法的Blo t 5组分受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.880,灵敏度为76.5%(52/68),特异性为90.0%(27/30);Blo t 21组分ROC曲线下面积为0.797,灵敏度为63.2%(43/68),特异性为90.0%(27/30),一致性均较好(P<0.001)。结论本研究成功建立了热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法,该方法各项性能指标评估良好,与德国敏筛过敏原检测系统有较好的一致性。展开更多
文摘目的采用微阵列化学发光免疫检测方法建立热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE的检测方法并评估其性能。方法筛选2022年3月-2023年3月海南省妇女儿童医学中心就诊的68例疑似热带无爪螨过敏患者及30名健康体检者,通过优化试剂浓度和反应条件,评估特异性IgE微阵列化学发光免疫检测Blo t 5、Blo t 21sIgE的各项性能指标。检测受试者血清Blo t 5、Blo t 21水平,以德国敏筛检测系统测定结果为对照进行一致性比较。结果抗原最佳浓度为50.0μg/mL。使用2%牛血清白蛋白封闭12 h的信噪比最高。酶标二抗最佳稀释梯度为2.5μg/mL。血清与芯片反应20 min结合酶标二抗反应20 min为最佳反应时间组合。微阵列化学发光免疫检测方法的最低检出限<0.01 IU/mL,线性范围0.20~100.00 IU/mL,批内、批间精密度分别小于8%、10%,Blo t 5和Blo t 21的交叉污染率分别为0.20%和0.31%。与德国敏筛过敏原检测系统测定结果相比,特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法的Blo t 5组分受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.880,灵敏度为76.5%(52/68),特异性为90.0%(27/30);Blo t 21组分ROC曲线下面积为0.797,灵敏度为63.2%(43/68),特异性为90.0%(27/30),一致性均较好(P<0.001)。结论本研究成功建立了热带无爪螨过敏原Blo t 5、Blo t 21特异性IgE微阵列化学发光免疫检测方法,该方法各项性能指标评估良好,与德国敏筛过敏原检测系统有较好的一致性。
