5-aza-CdR增强吉非替尼对人非小细胞肺癌细胞株H1650敏感性机制的研究 被引量：2

1

作者 李小优 吴建中 +2 位作者 曹海霞 吴剑秋 冯继锋 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期423-427,共5页

目的:探讨EGFR基因启动子甲基化水平与人非小细胞肺癌细胞株H1650对吉非替尼敏感性之间的关系。方法:5-aza-CdR和吉非替尼单独或联合用药作用于H1650细胞株后,应用甲基化特异性PCR法检测EGFR基因启动子区甲基化状态;CCK-8法检测细胞增殖... 目的:探讨EGFR基因启动子甲基化水平与人非小细胞肺癌细胞株H1650对吉非替尼敏感性之间的关系。方法:5-aza-CdR和吉非替尼单独或联合用药作用于H1650细胞株后,应用甲基化特异性PCR法检测EGFR基因启动子区甲基化状态;CCK-8法检测细胞增殖率;流式细胞仪技术检测细胞凋亡率变化;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测EGFR蛋白和mRNA的表达情况。结果:5-aza-CdR可去除H1650细胞EGFR基因启动子区甲基化;CCK-8法检测结果显示,H1650对吉非替尼的敏感性较差,5-aza-CdR去甲基化后联合运用吉非替尼处理72h,联合用药组IC50为(2.93±0.95)μmol/L,与吉非替尼组(14.53±1.13)μmol/L、5-aza-CdR组(4.91±1.42)μmol/L比较显著降低,P<0.05;流式细胞仪技术结果显示,联合用药组细胞凋亡率为(83.62±4.3)%,与吉非替尼组(20.29±2.9)%、5-aza-CdR组(25.73±7.5)%比较,差异有统计学意义,P<0.05;蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法结果显示,吉非替尼与5-aza-CdR联合用药干预72h后细胞EGFR蛋白和mRNA表达显著下降,与单药组相比,具有统计学意义,P<0.05。结论:EGFR基因启动子区甲基化可能是非小细胞肺癌细胞株H1650对吉非替尼获得性耐药的机制之一。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 表皮生长因子受体 DNA甲基化 吉非替尼 5-aza—CdR H1650细胞

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5-Aza对奶牛乳腺上皮细胞中mTOR蛋白和β-酪蛋白表达的影响 被引量：2

2

作者 王春梅 夏安婷 +3 位作者 郑宜文 李庆章 高学军 张莉 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期13-15,42,共4页

本实验以健康的泌乳期中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞为实验模型,通过使用DNA去甲基化药物5-氮杂-脱氧胞苷(5-Aza)对奶牛的乳腺上皮细胞进行处理,采用CASY细胞分析仪测定细胞活力,最后采用western blotting检测mTOR蛋白和β-酪蛋白的表... 本实验以健康的泌乳期中国荷斯坦奶牛的乳腺上皮细胞为实验模型,通过使用DNA去甲基化药物5-氮杂-脱氧胞苷(5-Aza)对奶牛的乳腺上皮细胞进行处理,采用CASY细胞分析仪测定细胞活力,最后采用western blotting检测mTOR蛋白和β-酪蛋白的表达量。实验结果显示,0.1μmol/L 5-Aza处理后的奶牛乳腺上皮细胞中的mTOR蛋白及β-酪蛋白的表达量显著增加,说明一定浓度的5-Aza可以提高乳腺泌乳信号通路中关键蛋白mTOR的表达水平,最后提高β-酪蛋白的表达水平,表明DNA甲基化也参与了奶牛泌乳调控。本实验试图从DNA甲基化方面揭示影响奶牛乳品质差异的原因,进一步完善奶牛泌乳的分子机制。 展开更多

关键词 奶牛乳腺 5-aza MTOR DNA甲基化

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丁酸钠和5-aza诱导间充质干细胞向心肌细胞分化的研究 被引量：2

3

作者 董亮 连锋 +2 位作者 杨文钢 汪永义 薛松 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2012年第1期18-22,共5页

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(sodium butyrate)和DNA甲基化抑制剂5-aza对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法常规培养大鼠BMSCs,细胞分为4组:依次加入丁酸钠0mM,0.5mM,1.0mM,2.0mM。MTT和流式细胞仪检测不同... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(sodium butyrate)和DNA甲基化抑制剂5-aza对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法常规培养大鼠BMSCs,细胞分为4组:依次加入丁酸钠0mM,0.5mM,1.0mM,2.0mM。MTT和流式细胞仪检测不同浓度丁酸钠对细胞增殖和凋亡的影响。4周后利用western blot和免疫荧光检测4组细胞的心肌细胞特异性蛋白的表达。从上述4组中选出诱导能力最强的丁酸钠组与5-aza组成4个实验组:阴性对照组,5-aza组,丁酸钠组,5-aza+丁酸钠组。作用4周后检测心肌细胞特异性蛋白的表达。结果丁酸钠抑制细胞增殖,具有浓度依赖性,而对细胞凋亡没有明显影响。检测发现丁酸钠和5-aza均能有效诱导BMSCs分化为心肌细胞,丁酸钠诱导分化最适浓度为1.0mM。同时1.0mM丁酸钠诱导分化效率高于5-aza。除此,5-aza和丁酸钠共同作用于BMSCs,其诱导分化能力明显高于其它组。结论丁酸钠能够有效诱导BMSCs向心肌细胞分化,丁酸钠浓度为1.0mM时诱导能力最强,同时诱导分化率高于5-aza。5-aza和丁酸钠一起作用诱导BMSCs向心肌细胞分化的能力明显高于其它组,间接证明DNA去甲基化和组蛋白乙酰化具有协同作用。丁酸钠在有效作用浓度范围内,虽然抑制BMSCs增殖,但是不影响细胞凋亡,表明丁酸钠具有低毒的特性,为以后丁酸钠应用于临床打下实验基础。 展开更多

关键词 丁酸钠 5-aza 骨髓间充质干细胞 心肌细胞

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启动子甲基化对抑癌基因转录的影响及其5-Aza-CdR干预作用的研究 被引量：1

4

作者 杨振华 蔡映云 +4 位作者 于坚 孙丽华 乔岩 揭志军 朱景德 《临床内科杂志》 CAS 2006年第3期207-209,共3页

目的在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株水平观察基因启动子CpG岛甲基化与mRNA转录之间的关系,探讨5AzaCdR(5azaeoxycytidine)的干预作用。方法应用甲基化特异性的多聚酶链反应(MSP)和RTPCR分别检测甲基化的发生和mRNA的转录水平。结果细胞株A... 目的在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株水平观察基因启动子CpG岛甲基化与mRNA转录之间的关系,探讨5AzaCdR(5azaeoxycytidine)的干预作用。方法应用甲基化特异性的多聚酶链反应(MSP)和RTPCR分别检测甲基化的发生和mRNA的转录水平。结果细胞株A549甲基化的基因为MGMT、RASSF1a,SH77甲基化的基因为MGMT、RASSF1a和RARβ,NCl甲基化的基因包括APC和RARβ。4个抑癌基因发生甲基化的细胞株mRNA均不转录,而经5AzaCdR处理后均恢复转录。结论NSCLC细胞株中抑癌基因启动子甲基化导致mRNA转录失活,5AzaCdR具有潜在的去甲基化作用使基因恢复转录。 展开更多

关键词 NSCLC细胞株 抑癌基因 MRNA转录 5-aza—CdR

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5-Aza2-cdR诱导Raji细胞p15基因再表达及细胞生长抑制遗传性的实验研究 被引量：1

5

作者 周涛 陆红 +3 位作者 范洪涛 郭秀枝 葛永斌 陈星宇 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第1期14-18,共5页

目的 :探索 5 - Aza2 - cd R(甲基转移酶抑制剂 )对甲基化细胞系 Raji细胞的生长抑制效应、去甲基化 p1 5基因的再表达 ,及 p1 5基因的再表达遗传性。方法 :对 5 - Aza2 - cd R体外处理高甲基化致 p1 5基因失活的淋巴肉瘤白血病细胞株 R... 目的 :探索 5 - Aza2 - cd R(甲基转移酶抑制剂 )对甲基化细胞系 Raji细胞的生长抑制效应、去甲基化 p1 5基因的再表达 ,及 p1 5基因的再表达遗传性。方法 :对 5 - Aza2 - cd R体外处理高甲基化致 p1 5基因失活的淋巴肉瘤白血病细胞株 Raji细胞 ,细胞生物学特征观察细胞的生长抑制效应。用去甲基化因子 5 - Aza2 - cd R诱导 p1 5基因甲基化的淋巴瘤细胞株Raji细胞 ,RT- PCR方法测定 p1 5基因的表达。结果 :在 1 0 - 7～ 1 0 - 6 M浓度的范围内 ,随着药物浓度的升高 ,Raji细胞生长受到抑制 ,并表现出剂量时间依赖关系 ,细胞生长抑制。在 1 0 - 7和 5× 1 0 - 7M诱导 Raji细胞时 ,p1 5基因去甲基化再表达和生长抑制分别为 6代和 7代。结论 :甲基转移酶抑制剂治疗抗 DNA甲基化的白血病是可行的 ,值得进一步探索。 展开更多

关键词 5-aza2-cdR RAJI细胞 p15 基因表达 细胞生长抑制 甲基转移酶抑制剂 白血病

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蛋白质组学技术分析5-aza-2dC处理白血病细胞HL-60前后的差异表达蛋白质 被引量：3

6

作者 谭潭 梁婷 +6 位作者 汤参娥 肖艳华 易红 张鹏飞 彭芳 陈主初 肖志强 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2009年第2期93-99,共7页

目的:研究甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine,5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞HL-60细胞蛋白质表达谱的影响,探讨5-aza-2dC抗急性髓系白血病作用的机制。方法:采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离5-aza-2-d... 目的:研究甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-2’-deoxycitydine,5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞HL-60细胞蛋白质表达谱的影响,探讨5-aza-2dC抗急性髓系白血病作用的机制。方法:采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离5-aza-2-dC处理与未处理HL-60细胞的总蛋白质,PDquest图像分析软件识别差异蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点。然后采用Western印迹检测差异蛋白质半乳糖凝集素1(Galectin-1)在药物处理与未处理HL-60细胞中的表达水平。结果:建立了5-aza-2dC处理与未处理HL-60细胞蛋白质的2-DE图谱,识别了35个差异表达的蛋白质点,鉴定了27个差异表达的蛋白质,其中包括Galectin-1在内的21个蛋白质在5-aza-2dC处理后的HL-60细胞中表达上调,6个蛋白质表达下调或缺失。Western印迹结果证实Galectin-1在5-aza-2dC处理HL-60细胞中表达上调。结论:21个表达上调蛋白质的编码基因可能是HL-60细胞的甲基化失活基因,它们可能与急性髓系白血病发病以及5-aza-2-dC抗人急性髓系白血病细胞作用有关。 展开更多

关键词 蛋白质组学 二维凝胶电泳 5-杂氮-2’-脱氧胞苷 白血病

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p53基因在5-aza诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞分化中表达的研究

7

作者 刘端阳 董钦 +2 位作者 李凤兰 马宁 李晖 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期304-307,311,共5页

目的检测p53基因及其蛋白在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的变化,进而探讨p53基因及其蛋白在胚胎早期心肌分化过程中发挥作用的条件。方法以10μmol/L的5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化,分别选取诱导后1周、2周、3周4... 目的检测p53基因及其蛋白在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的变化,进而探讨p53基因及其蛋白在胚胎早期心肌分化过程中发挥作用的条件。方法以10μmol/L的5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化,分别选取诱导后1周、2周、3周4、周这4个时间点进行样品收集。Tr-izol法提取诱导后细胞的总RNA,应用RT-PCR方法检测p53基因、肌钙蛋白Ⅰ的表达情况;应用免疫细胞化学方法检测P53蛋白和心肌肌球蛋白重链的表达情况。结果在mRNA水平,p53在诱导后1周和诱导后3周表达量较诱导后2周4、周要高;在蛋白水平,随着诱导时间的延长,蛋白表达量没有降低,而是维持在一定的水平甚至有所增加。结论在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中,P53蛋白维持一定水平的表达是5-aza发挥其作用的先决条件。 展开更多

关键词 p53 5-aza 细胞分化 干细胞 心肌诱导分化

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5-aza-dC联合TSA对不同供体细胞来源牛核移植胚胎体外发育的影响

8

作者 丁向彬 王轶敏 +3 位作者 葛秀国 刘新峰 李吉霞 郭宏 《天津农学院学报》 CAS 2012年第2期19-23,共5页

为研究5-aza-dC和TSA提高核移植胚胎体外发育能力的作用是否有供体细胞特异性,实验选择皮肤成纤维细胞、胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞作为核供体细胞进行核移植,联合使用20 nM(72 h)5-aza-dC和50 nM(12 h)TSA处理供体细胞和重构胚,比较... 为研究5-aza-dC和TSA提高核移植胚胎体外发育能力的作用是否有供体细胞特异性,实验选择皮肤成纤维细胞、胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞作为核供体细胞进行核移植,联合使用20 nM(72 h)5-aza-dC和50 nM(12 h)TSA处理供体细胞和重构胚,比较5-aza-dC+TSA对不同供体细胞来源核移植胚胎体外发育的影响。实验结果表明,经5-aza-dC+TSA处理后,极显著提高了3种供体细胞来源核移植胚胎的体外囊胚发育率(P<0.01)。虽然胎儿成纤维细胞和卵丘颗粒细胞得到的发育率稍高于皮肤成纤维细胞组,但各对照组之间以及各处理组之间的体外发育率没有明显差异,5-aza-dC和TSA对核移植胚胎体外发育的影响没有供体细胞特异性。 展开更多

关键词 牛 5-aza—dC TSA 核移植 供体细胞

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5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌细胞株中3-OST-2甲基化和基因表达的影响 被引量：2

9

作者 姚树哲 陈海燕 +3 位作者 张晓莹 盛燕 周庚寅 张翠娟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期356-360,共5页

目的探讨5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中3-OST-2甲基化水平、基因表达以及对核转录因子UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,也称为ICBP90/NP95)表达的影响。方法采用甲基化特异性P... 目的探讨5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中3-OST-2甲基化水平、基因表达以及对核转录因子UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,也称为ICBP90/NP95)表达的影响。方法采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测药物作用前后HCC细胞株中3-OST-2甲基化的状态改变;采用实时荧光定量RT-PCR法检测3-OST-2和UHRF1 mRNA的表达变化;采用细胞爬片免疫组化法检测UHRF1蛋白表达。结果 3-OST-2在HCC细胞株中呈完全甲基化状态,5-Aza-dC或TSA均能部分逆转3-OST-2甲基化,其mRNA表达分别增加2.7倍和4.9倍,两种药物联合处理后,3-OST-2甲基化被完全逆转,其mRNA表达增加9.1倍。5-Aza-dC或TSA均能降低UHRF1 mRNA和蛋白的表达,TSA比5-Aza-dC疗效更好(P<0.01),两种药物联用具有协同作用(P<0.01)。结论启动子甲基化和组蛋白修饰共同导致3-OST-2基因表达降低。5-Aza-dC和TSA单独作用均能部分逆转3-OST-2甲基化,增加其mRNA表达,抑制核蛋白UHRF1表达可能是其中机制之一。 展开更多

关键词 肝细胞肿瘤 5-aza—dC TSA 甲基化 抑癌基因

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5-Aza-CdR对胃癌BGC-823细胞及MAL基因表达的影响 被引量：1

10

作者 王源 刘庆彤 +1 位作者 高羽 师水生 《中国药物与临床》 CAS 2013年第7期882-883,共2页

胃癌是严重危害人类健康的常见的恶性肿瘤．根治性手术目前仍然是胃癌的主要治疗方式。但多数患者发现时已是中晚期，直接影响预后。因此深入研究胃癌发生、发展分子机制，为胃癌早期诊断提供依据，也为治疗提供有效的靶点，具有重要意义。

关键词 BGC-823细胞 胃癌发生 5-aza 基因表达 MAL 治疗方式 根治性手术 恶性肿瘤

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5-Aza-CdR对绒毛膜癌JEG-3细胞生长及Dnmt3a表达的影响

11

作者 王元虎 丁裕斌 +3 位作者 陈雪梅 刘学庆 王应雄 何俊琳 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2010年第1期73-78,共6页

用不同浓度(1、4、8、16、32μmol/L)的DNA甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理绒毛膜癌JEG-3细胞,显微镜下观察细胞形态的变化,MTT法检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞凋亡的影响,Transwell小室检测... 用不同浓度(1、4、8、16、32μmol/L)的DNA甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理绒毛膜癌JEG-3细胞,显微镜下观察细胞形态的变化,MTT法检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测5-Aza-CdR对JEG-3细胞凋亡的影响,Transwell小室检测JEG-3细胞侵袭能力的改变,进一步应用Real Time PCR及Western印迹检测5-Aza-CdR处理细胞后DNA甲基化转移酶3a(DNA methyltransferase 3a,Dnmt3a)基因及其蛋白的表达变化。研究结果显示,5-Aza-CdR能致细胞皱缩、细胞核聚集成块,可明显抑制细胞增殖,促进其凋亡,降低细胞侵袭力。5-Aza-CdR同时还可抑制Dnmt3a mRNA和其蛋白的表达。 展开更多

关键词 5-aza—CdR 绒毛膜癌 DNA甲基化转移酶3a 细胞凋亡

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AG490及5-Aza对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及分子机制

12

作者 罗杰 廖剑雄 +2 位作者 刘维佳 余倩 刘琳 《西部医学》 2021年第9期1320-1325,共6页

目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490及DNA甲基化抑制剂5-Aza对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及意义。方法采用CCK8检测不同浓度AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导PASMCs增殖的影响;将细胞分为... 目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490及DNA甲基化抑制剂5-Aza对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及意义。方法采用CCK8检测不同浓度AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导PASMCs增殖的影响;将细胞分为对照组(正常的PASMCs)、0μM组(予30μg/L PDGF-BB孵育48h)和25μM/1μM组、50μM/3μM组、100μM/5μM组(25μM/1μM组、50μM/3μM组、100μM/5μM组分别给予25/1、50/3、100/5μmol/L AG490/5-Aza共同孵育细胞)。采用RT-qPCR检测IL-6、GATA6、JAK2及STAT3 mRNA表达水平;Western blot检测GATA6、p-JAK2及p-STAT3蛋白的表达。结果与对照组比较,0μM AG490组IL-6、JAK2、STAT3mRNA表达均增加,GATA6mRNA及蛋白水平降低,p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达升高(P<0.05)。与0μM AG490组比较,25、50、100μM AG490组细胞增殖减少,IL-6、JAK2和STAT3mRNA的表达均降低,GATA6mRNA及蛋白表达升高,p-JAK2/JAK2水平降低(均P<0.05),50和100μM组中p-STAT3/STAT3水平降低(均P<0.05);与0μM 5-Aza组相比,1μM、3μM、5μM 5-Aza组细胞增殖减少,IL-6mRNA表达降低,GATA6蛋白、p-STAT3/STAT3表达增高,p-JAK2/JAK2水平降低(均P<0.05),JAK2、STAT3mRNA水平无显著差异(P>0.05);3μM和5μM 5-Aza组中GATA6mRNA表达增高(P<0.05)。结论AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导的PASMCs增殖具有抑制作用,该作用可能与阻断JAK2/STAT3信号通路,抑制IL-6调节GATA6启动子甲基化有关。 展开更多

关键词 肌细胞 平滑肌 血小板源性生长因子 AG490 5-aza IL-6 GATA6

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5-Aza对结直肠癌细胞增殖抑制及诱导凋亡作用研究

13

作者 王新成 孙春辉 邓宇斌 《热带医学杂志》 CAS 2021年第10期1237-1241,共5页

目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza)对结直肠癌细胞株HT29、HCT116的增殖抑制及诱导凋亡作用机制。方法应用细胞增殖检测法(MTT)检测不同浓度(0~100μmol/L)5-Aza作用HT29、HCT116细胞24、48、72 h的细胞增殖变化;采用Annexin V-FITC/P... 目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza)对结直肠癌细胞株HT29、HCT116的增殖抑制及诱导凋亡作用机制。方法应用细胞增殖检测法(MTT)检测不同浓度(0~100μmol/L)5-Aza作用HT29、HCT116细胞24、48、72 h的细胞增殖变化;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测不同浓度5-Aza处理HT29、HCT116细胞株24 h的细胞凋亡情况;利用Western blot检测磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路蛋白、甲基化CpG结合蛋白-3(MBD3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、cleaved caspase-3、裂解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)的蛋白表达变化。结果与空白对照组比较,5-Aza药物处理组(10、15、20、25、50、100μmol/L)HT29、HCT116细胞增殖抑制率均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。与空白对照组比较,5-Aza药物处理组(25、35、50μmol/L)HT29、HCT116细胞凋亡率均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性。与空白对照组比较,5-Aza药物处理组(10、30μmol/L)HT29、HCT116细胞MBD3、p-PI3K、p-Akt、caspase-3蛋白表达显著降低,cleaved caspase-3和cleaved PARP蛋白表达显著升高,且呈剂量依赖性。结论 5-Aza可抑制结直肠癌HT29、HCT116细胞增殖并促进细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路活化,并抑制MBD3蛋白表达有关。 展开更多

关键词 结直肠癌 5-aza MBD3 细胞增殖 细胞凋亡

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5-氮杂-2-脱氧胞苷调控巨噬细胞泡沫化的作用和机制研究

14

作者 郭文通 杨潇潇 +2 位作者 彭颖 刘志刚 韦玲玲 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第10期1371-1377,共7页

靶向特定基因的DNA甲基化修饰已经成为改善动脉粥样硬化发展的潜在策略,但关于甲基化酶与巨噬细胞泡沫化的关系尚不清晰。文章使用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza)处理小鼠腹腔原代巨噬细胞,分析巨噬细胞泡沫化水平和炎症因... 靶向特定基因的DNA甲基化修饰已经成为改善动脉粥样硬化发展的潜在策略,但关于甲基化酶与巨噬细胞泡沫化的关系尚不清晰。文章使用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza)处理小鼠腹腔原代巨噬细胞,分析巨噬细胞泡沫化水平和炎症因子的表达情况;采用siRNA干扰巨噬细胞系J774、RAW264.7细胞的CD36表达,提取巨噬细胞特异性敲除PPARγ小鼠腹腔巨噬细胞研究5-Aza调控巨噬细胞泡沫化的作用和机制。结果发现,5-Aza通过上调巨噬细胞CD36的表达、膜定位及mRNA发挥促进巨噬细胞泡沫化的作用,但5-Aza在PPARγ敲除的巨噬细胞中对CD36的表达无诱导作用。研究结果表明,5-Aza通过诱导CD36的表达加速巨噬细胞泡沫化,该过程依赖于PPARγ。该研究阐述了5-Aza的新功能,为动脉粥样硬化的防治提供新思路。 展开更多

关键词 5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-aza) CD36 巨噬细胞泡沫化 PPARΓ 炎症因子

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5-脱氧杂氮胞苷抑制小鼠附植前的胚胎发育(英文) 被引量：3

15

作者 于建宁 李少华 +3 位作者 王丹秋 王蒙 林飞 刘红林 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期228-237,共10页

DNA甲基化在哺乳动物发育过程中有关键作用.在小鼠附植前胚胎发育过程中,DNA甲基化一直处于动态变化过程中.通过将体外受精胚在5-AZA-CdR中持续培养,研究5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎发育的影响,为附植前胚胎发育机理的研究及5-AZA-CdR的... DNA甲基化在哺乳动物发育过程中有关键作用.在小鼠附植前胚胎发育过程中,DNA甲基化一直处于动态变化过程中.通过将体外受精胚在5-AZA-CdR中持续培养,研究5-AZA-CdR对小鼠附植前胚胎发育的影响,为附植前胚胎发育机理的研究及5-AZA-CdR的毒副作用研究提供试验基础.从原核期加入不同浓度的5-AZA-CdR时,胚胎不能发育到桑椹胚(0.2和1.0μmol/L)和4-细胞胚(5.0μmol/L);从2-细胞期加入时,胚胎阻滞于未致密化的8-细胞(0.2和1.0μmol/L)和3/4-细胞期(5.0μmol/L);而当从4-细胞加入时,虽然胚胎能够发育到早期桑椹胚,但发育比例同对照相比显著降低(P<0.05).进一步检测凋亡、基因组DNA甲基化和整体转录活性,结果显示,高浓度的5-AZA-CdR导致8-细胞和早期桑椹胚发生早期凋亡,而低浓度的5-AZA-CdR引起8-细胞和早期桑椹胚基因组DNA甲基化的降低和转录活性的降低,并且这种降低呈浓度依赖性.所以加入低浓度的5-AZA-CdR时,胚胎的DNA甲基化降低,引起转录活性的降低,进而导致胚胎发育的停滞. 展开更多

关键词 5-aza—CdR 凋亡 发育 DNA甲基化 转录活性

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5-杂氮-2′-脱氧胞苷对宫颈癌细胞生长及其甲基化转移酶和甲基结合蛋白DNA转录的影响 被引量：3

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作者 刘特 邵叶波 +4 位作者 赖东梅 程蔚蔚 邹刚 黄勤 刘志学 《中国临床医学》 北大核心 2008年第4期524-527,共4页

目的:检测5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的宫颈癌HeLa细胞中DNA甲基化转移酶(DNMT)及甲基CpG结合蛋白(MeCP)的DNA转录水平的影响,探索其对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:5-Aza-CdR(终浓度为5.0μmol.L-1)与肿瘤细胞共培养72... 目的:检测5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的宫颈癌HeLa细胞中DNA甲基化转移酶(DNMT)及甲基CpG结合蛋白(MeCP)的DNA转录水平的影响,探索其对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法:5-Aza-CdR(终浓度为5.0μmol.L-1)与肿瘤细胞共培养72h后,用PI染色及流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞的细胞周期;利用qRT-PCR鉴定药物组与空白组细胞DNMT及MeCP的mRNA浓度。吖啶橙(AO)细胞荧光染色法鉴定药物组与空白组细胞形态学上的差异及凋亡的程度。结果:FCM检测结果显示两组肿瘤细胞的细胞周期呈现明显差异,并且药物组细胞表现为G0/G1期阻滞,sub-G1峰明显。AO染色表明药物组细胞有明显凋亡迹象且伴随少量的细胞坏死现象。qRT-PCR结果显示,空白对照组和药物组中均有一定量DNMT及MeCP的mRNA产物,但其mRNA表达量无显著差异(P>0.05)。结论:5-Aza-CdR能够诱导体外培养的HeLa肿瘤细胞凋亡,而对于肿瘤细胞中甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白的DNA转录无显著的影响。 展开更多

关键词 子宫颈癌 5-杂氮-2’-脱氧胞苷 甲基化转移酶 甲基CpG结合蛋白 凋亡

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二甲基亚砜和5-氮胞苷诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率

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作者 金鹏 申星花 李学奇 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期975-977,共3页

目的分析二甲基亚砜(DMSO)和5-氮胞苷(5-Aza)诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率,比较两者的区别。方法将研究对象分为3组。一组使用常规方法对P19细胞进行培养,为阴性对照组;一组使用DMSO 1.0%进行诱导;一组使用5-Aza 10μmol/L进行诱导... 目的分析二甲基亚砜(DMSO)和5-氮胞苷(5-Aza)诱导P19细胞转化为心肌细胞的效率,比较两者的区别。方法将研究对象分为3组。一组使用常规方法对P19细胞进行培养,为阴性对照组;一组使用DMSO 1.0%进行诱导;一组使用5-Aza 10μmol/L进行诱导。对所有研究对象使用RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量。结果 DMSO和5-Aza组诱导4 d后,细胞均以克隆集落方式增殖,梭形细胞明显增多。8 d出现自发性节律收缩的心肌样细胞。诱导后2 w,5-Aza组分化细胞明显多于DMSO组。RT-PCR法检测GATA-4基因相对表达量,除阴性对照组外,其他两组均表达心肌早期分化基因。每组15 d后表达量与本组7 d表达量相比较均明显增加。此外,5-Aza组诱导28 d基因表达量明显高于DMSO组28 d。结论 DMSO 1.0%和5-Aza 10μmol/L均可诱导P19细胞转化为心肌细胞,5-Aza 10μmol/L的诱导效率高于DMSO 1.0%。 展开更多

关键词 P19细胞 DMSO诱导 5-aza诱导 RT-PCR效率

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5-氮杂胞苷增强人非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性及其机制 被引量：2

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作者 徐姝 吴建中 +3 位作者 曹海霞 张琰 刘宇飞 冯继锋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期26-29,共4页

目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)在增强人非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)细胞对吉非替尼敏感性中的作用及其机制。方法:选取EGFR突变型NSCLC细胞株H1650及EGFR野生型NSCLC细胞... 目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)在增强人非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)细胞对吉非替尼敏感性中的作用及其机制。方法:选取EGFR突变型NSCLC细胞株H1650及EGFR野生型NSCLC细胞株H1299,5-Aza-CdR处理后,CCK-8法检测H1650及H1299细胞对吉非替尼敏感性的变化,real-time PCR检测细胞中miR-200c及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)mRNA的表达水平。结果:EGFR突变型及野生型NSCLC细胞株H1650、H1299对吉非替尼有一定程度的耐药性,5-Aza-CdR处理后H1650及H1299细胞对吉非替尼的敏感性显著增强,表现为吉非替尼对细胞的IC50明显降低[(1.04±0.35)vs(159.37±17.48)μmol/L,(6.28±1.02)vs(223.76±23.63)μmol/L;均P<0.01]。Real-time PCR检测结果显示,5-Aza-CdR处理后EGFR突变型或野生型H1650、H1299细胞中miR-200c[(0.009±0.003)vs(0.002±0.001),(0.004±0.001)vs 0;均P<0.01]和EGFR mRNA[(0.286±0.037)vs(0.015±0.012),(0.057±0.014)vs(0.01±0.01);均P<0.01]的表达水平均显著增高。结论:DNA甲基化抑制剂5-Aza-CdR可上调NSCLC细胞中miR-200c及EGFR mRNA的表达,增强其对吉非替尼的敏感性。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 吉非替尼 敏感性 5-氮杂胞苷(5-aza—CdR) MIR-200C 表皮生长因子受体(EGFR)

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5-氮杂胞苷通过p53／Gadd45α信号途径影响小鼠神经干细胞的增殖 被引量：2

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作者 刘娜 王虹 包金风 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期592-598,共7页

目的:通过研究DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)对小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的影响,进一步阐明DNA甲基化模式的变化对神经发生的影响及机制。方法:采用无血清悬浮培养方法分离培养新生小鼠脑NSCs,通过MTT... 目的:通过研究DNA甲基化抑制剂5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)对小鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的影响,进一步阐明DNA甲基化模式的变化对神经发生的影响及机制。方法:采用无血清悬浮培养方法分离培养新生小鼠脑NSCs,通过MTT法检测5-Aza对NSCs增殖的影响;应用流式细胞仪检测5-Aza对NSCs细胞周期和凋亡的影响;并用RT-PCR、Western Blot法检测给予5-Aza对NSCs细胞p53和Gadd45αmRNA水平和蛋白表达的影响。结果:MTT法测定结果显示:与对照组相比,5-Aza能够明显抑制NSCs的增殖;流式细胞仪测定结果显示,5-Aza组NSCs在G0/G1期细胞数量较对照组明显减少(P<0.01),而S期、G2/M期细胞数量则明显增多(P<0.01),表明5-Aza可引起细胞周期在G2/M期停滞;且5-Aza组NSCs的凋亡率与对照组相比明显增加(P<0.01)。RT-PCR结果显示:5-Aza组NSCs中p53和Gadd45αmRNA水平较对照组明显增高(P<0.05);Western Blot结果也显示:与对照组相比,5-Aza组NSCs中p53和Gadd45α蛋白表达量明显增加(P<0.05)。结论:5-Aza可能通过影响NSCs细胞周期和诱导凋亡抑制小鼠NSCs增殖;5-Aza阻滞NSCs细胞周期的作用机制可能与p53/Gadd45α信号途径相关。 展开更多

关键词 5-aza 神经干细胞 增殖 p53/Gadd45α信号途径 细胞培养 小鼠

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曲古抑菌素A和5-氮杂-2'-脱氧胞苷对猪孤雌胚胎发育的影响

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作者 康雅雅 马红 +4 位作者 任亮 赵诚悦 齐贵龙 柳樱子 刘娣 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期34-36,174,共4页

为了研究曲古抑菌素A(TSA)和5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对猪孤雌胚胎发育及胚胎质量的影响,试验采用猪卵母细胞孤雌激活的方法,孤雌激活后在胚胎培养液中分别添加不同浓度TSA和5-Aza-CdR,比较其对猪孤雌胚胎发育的影响。结果表... 为了研究曲古抑菌素A(TSA)和5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对猪孤雌胚胎发育及胚胎质量的影响,试验采用猪卵母细胞孤雌激活的方法,孤雌激活后在胚胎培养液中分别添加不同浓度TSA和5-Aza-CdR,比较其对猪孤雌胚胎发育的影响。结果表明:40 nmol/L TSA处理24 h能显著提高孤雌胚胎的囊胚率及囊胚细胞个数(P<0.05),卵裂率无明显变化(P>0.05);30 nmol/L5-Aza-CdR处理48 h能显著提高孤雌胚胎的囊胚率(P<0.05),卵裂率与囊胚细胞个数均无明显变化(P>0.05)。说明在一定浓度条件下,TSA和5-Aza-CdR对猪孤雌胚胎发育的囊胚率有显著促进作用,5-Aza-CdR处理对卵裂率、囊胚细胞个数的影响不大,但TSA处理可以明显提高囊胚细胞个数,从而提高胚胎质量。 展开更多

关键词 猪 孤雌胚胎 表观遗传 曲古抑菌素A(TSA) 5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza—CdR)

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