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5-FAM多克隆抗体制备及间接ELISA方法建立
1
作者 熊千波 沙洲 +2 位作者 魏荣 尼博 杨凌宸 《中国动物检疫》 2025年第4期62-67,共6页
为制备荧光标记分子5-FAM多克隆抗体并建立针对5-FAM分子的间接ELISA检测方法,采用活泼酯法将5-FAM分子偶联至血蓝蛋白(KLH),随后免疫SPF级小鼠获得针对5-FAM分子的多克隆抗体,并在此基础上建立了一种高效的间接ELISA检测方法。结果显示... 为制备荧光标记分子5-FAM多克隆抗体并建立针对5-FAM分子的间接ELISA检测方法,采用活泼酯法将5-FAM分子偶联至血蓝蛋白(KLH),随后免疫SPF级小鼠获得针对5-FAM分子的多克隆抗体,并在此基础上建立了一种高效的间接ELISA检测方法。结果显示:5-FAM分子包被质量浓度为0.50μg/mL,用PBS 37℃包被2 h后4℃过夜包被,5%脱脂奶粉37℃封闭1 h,多克隆抗体1:1000稀释后37℃孵育0.5 h,二抗1:5000稀释后37℃孵育1 h为最优反应条件;经验证,本方法与CY5、HEX、VIC和ROX等常见小分子无交叉反应,能够检测出12800倍稀释的阳性血清,批内及批间变异系数均小于7%。结果说明:本方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于5-FAM相关分子的血清学检测及分析。 展开更多
关键词 5-fam 偶联抗原 多克隆抗体 间接ELISA
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卵巢癌特异性结合肽OSTP的鉴定 被引量：2
2
作者 杨陈 何晓娟 +2 位作者 卢雪琳 梁晓秋 周建斌 《中南医学科学杂志》 CAS 2013年第2期109-112,共4页
目的验证卵巢癌特异性结合肽(OSTP)对卵巢癌A2780细胞的特异性结合作用。方法合成OSTP并标记荧光素5-FAM。将培养的卵巢癌A2780细胞及对照组胃癌SGC7901细胞、骨肉瘤MG63细胞分别加5-FAM-OSTP孵育,荧光显微镜下观察拍照。构建卵巢癌A278... 目的验证卵巢癌特异性结合肽(OSTP)对卵巢癌A2780细胞的特异性结合作用。方法合成OSTP并标记荧光素5-FAM。将培养的卵巢癌A2780细胞及对照组胃癌SGC7901细胞、骨肉瘤MG63细胞分别加5-FAM-OSTP孵育,荧光显微镜下观察拍照。构建卵巢癌A2780细胞荷瘤小鼠模型,尾静脉注入5-FAM-OSTP,循环1 h后进行左心室灌注,取肿瘤组织及各脏器组织,行冰冻切片,荧光显微镜下观察拍照。结果成功合成和标记5-FAM-OSTP。荧光显微镜观察显示:5-FAM-OSTP孵育后的卵巢癌A2780细胞产生明亮的黄绿色荧光,而对照组SGC7901、MG63细胞不产生荧光。裸鼠体内实验结果显示:肿瘤组织可见强荧光信号,平均荧光强度为17.656±1.980;肝组织平均荧光强度4.277±0.291;肾组织平均荧光强度4.422±0.767;其他脏器均无可见荧光信号。肿瘤组织与肝、肾组织的荧光强度间差异有显著性(P<0.05)。结论通过体内外实验证实了5-FAM-OSTP对卵巢癌A2780细胞具有特异结合作用,有望成为卵巢癌靶向化疗药物的导向肽。 展开更多
关键词 5-fam—OSTP导向肽 卵巢癌A2780细胞 靶向作用
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大剂量醛氢叶酸合并氟脲嘧啶为主联合方案与FAM方案治疗晚期胃癌近期疗效分析 被引量：4
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作者 吴晖 黄雪珍 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期174-175,共2页
用大剂量醛氢叶酸合并氟脲嘧咬为主联合方案与FAM方案分别治疗晚期胃癌30例，有效率分别为39．28％和43．33％，完全缓解率分别为10．71％和3．33％，P均＞0．05，两组消化道反应和骨髓抑制相似，FAM有2伊1出现心电图异常，而大剂量醛... 用大剂量醛氢叶酸合并氟脲嘧咬为主联合方案与FAM方案分别治疗晚期胃癌30例，有效率分别为39．28％和43．33％，完全缓解率分别为10．71％和3．33％，P均＞0．05，两组消化道反应和骨髓抑制相似，FAM有2伊1出现心电图异常，而大剂量醛氢叶酸组无心电图异常，心脏毒性低于FAM组，我们认为大剂量醛氢叶酸合并氟脲嘧啶是治疗晚期胃癌的有效方案，尤其适用于有心脏病患者。 展开更多
关键词 醛氢叶酸 氟脲嘧啶 毒性 心脏毒性 胃肿瘤
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一种FAM荧光标准溶液的制备及荧光校准应用
4
作者 杨雪 陶晴 +2 位作者 王乐乐 闻艳丽 刘刚 《化学试剂》 CAS 2024年第10期85-90,共6页
针对目前多种生物类分析仪器羧基荧光素(FAM)通道荧光校准缺乏合适的荧光标准溶液的问题,制备了5种浓度的FAM荧光标准溶液,并对其制备方法、荧光性能、稳定性、均匀性等方面进行了考察。结果表明,该荧光标准溶液荧光性能优于常规FAM溶液... 针对目前多种生物类分析仪器羧基荧光素(FAM)通道荧光校准缺乏合适的荧光标准溶液的问题,制备了5种浓度的FAM荧光标准溶液,并对其制备方法、荧光性能、稳定性、均匀性等方面进行了考察。结果表明,该荧光标准溶液荧光性能优于常规FAM溶液,均匀性良好,在25、4、-20℃3个温度下均可稳定保存7个月。通过对恒温扩增核酸分析仪、数字PCR仪、多功能酶标仪等多种仪器进行校准,证明其具有良好的适用性,为FAM通道的荧光校准提供了可靠的参考依据。 展开更多
关键词 荧光校准 荧光标准溶液 5-fam SE 生物分析仪器 荧光线性
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