目的:探讨cAMP反应元件结合蛋白5(cAMP response element-binding protein family 5,CREB5)对卵巢癌耐药细胞增殖及顺铂(DDP)敏感性的影响及机制。方法:免疫组织化学法观察DDP敏感和耐药卵巢癌组织中CREB5的表达情况。采用Western blot...目的:探讨cAMP反应元件结合蛋白5(cAMP response element-binding protein family 5,CREB5)对卵巢癌耐药细胞增殖及顺铂(DDP)敏感性的影响及机制。方法:免疫组织化学法观察DDP敏感和耐药卵巢癌组织中CREB5的表达情况。采用Western blot法比较DDP耐药卵巢癌细胞及其亲本细胞中CREB5的表达水平差异。敲减CREB5后,CCK-8法和EDU染色法评估DDP耐药卵巢癌细胞增殖活力,流式细胞术法检测顺铂诱导的细胞凋亡,Western blot法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal regulated kinases,p-ERK)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及劈开的半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)表达。肿瘤异体移植瘤模型检测敲减CREB5对耐药卵巢癌细胞体内生长和顺铂敏感性的影响。结果:CREB5在DDP耐药卵巢癌组织和DDP耐药卵巢癌细胞中的表达增高(P<0.05)。敲减CREB5后,DDP耐药卵巢癌细胞的增殖降低(P<0.05),顺铂诱导的细胞凋亡率增加(P<0.05),细胞中p-ERK和VEGF表达降低(P<0.05),Cleaved caspase-3表达增加(P<0.05)。敲减CREB5的DDP耐药细胞瘤在体内生长受阻且其对顺铂的敏感性增强,瘤体组织中p-ERK表达降低,Cleaved caspase-3表达增加。结论:敲减CREB5可抑制DDP耐药卵巢癌细胞增殖,并增强对顺铂敏感性,其机制可能与抑制p-ERK和VEGF表达并上调Cleaved caspase-3表达有关。展开更多
目的按照《空气污染对人群健康影响监测工作手册》采集环境空气细颗粒物(PM2.5)样品,建立电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测定PM2.5中12种金属成分的方法。方法样品经5%硝酸水浴超声浸提...目的按照《空气污染对人群健康影响监测工作手册》采集环境空气细颗粒物(PM2.5)样品,建立电感耦合等离子体质谱法(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测定PM2.5中12种金属成分的方法。方法样品经5%硝酸水浴超声浸提后,用0.45μm滤头过滤后用ICP-MS测定,以钪(Sc)、锗(Ge)、铑(Rh)、铟(In)、铋(Bi)作为内标物质,确定最佳的实验条件,结果 12种金属元素的检出限在0.20~6.00μg/L之间,精密度在0.26%~1.30%之间,回收率在90.00%~107.00%之间。结论本方法适用于空气污染人群健康影响监测项目中环境PM2.5样品采集及质量浓度的测定。展开更多
