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益气解毒方通过Wnt/β-catenin信号通路诱导鼻咽癌5-8F细胞凋亡 被引量:15
1
作者 范婧莹 刘洁 +4 位作者 蔺婷 史红健 周芳亮 何迎春 王贤文 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期876-881,共6页
目的基于Wnt/β-catenin信号通路探讨益气解毒方(黄芪、黄连、白花蛇舌草等)对鼻咽癌5-8F细胞凋亡的作用机制。方法(1)将5-8F细胞分为空白对照组、益气解毒方不同浓度组(0.25、0.5、1.0、2.0 mg·mL^(-1))及顺铂组(4μg·mL^(-1... 目的基于Wnt/β-catenin信号通路探讨益气解毒方(黄芪、黄连、白花蛇舌草等)对鼻咽癌5-8F细胞凋亡的作用机制。方法(1)将5-8F细胞分为空白对照组、益气解毒方不同浓度组(0.25、0.5、1.0、2.0 mg·mL^(-1))及顺铂组(4μg·mL^(-1)),采用实时无标记细胞功能分析仪(RTCA)监测细胞的增殖情况。(2)将5-8F细胞分为5组:空白对照组、益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组、HLY7810μmol·L^(-1)组、HLY7810μmol·L^(-1)+益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组、IWR-18μmol·L^(-1)组,采用RTCA监测细胞的增殖;药物干预36 h后,采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色法检测细胞凋亡率;JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位;Western Blot法检测细胞β-catenin、Wnt5a/b、Bcl2及Bax蛋白的表达水平。结果与空白对照组比较,益气解毒方不同浓度组(0.25、0.5、1.0、2.0 mg·mL^(-1))的5-8F细胞增殖曲线均明显降低;益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组、IWR-18μmol·mL^(-1)组的细胞凋亡率显著升高(P<0.01),线粒体膜电位明显降低,β-catenin、Wnt5a/b及Bcl2蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),Bax蛋白表达显著上调(P<0.01),Bax/Bcl2比值显著升高(P<0.01)。与益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组比较,HLY7810μmol·L^(-1)+益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组的5-8F细胞增殖曲线明显升高,细胞凋亡率显著下降(P<0.01),线粒体膜电位明显升高,β-catenin、Wnt5a/b及Bcl2蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01),Bax蛋白表达显著下调(P<0.01),Bax/Bcl2比值显著降低(P<0.01)。结论益气解毒方能够抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,并诱导细胞凋亡,其机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路相关。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 5-8f细胞 细胞增殖 细胞凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路
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鼻咽癌5-8F细胞膜蛋白质组初步分析 被引量:1
2
作者 张鹏飞 曾谷清 +3 位作者 易红 梁宋平 陈主初 肖志强 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期333-339,376,共8页
细胞膜蛋白是细胞的重要组成部分,作为细胞的"门铃"与"门户",参与细胞内外物质交换、信息转换、细胞生长发育、细胞迁移以及免疫应答等重要生理活动.为鉴定鼻咽癌转移相关膜蛋白,运用差速离心联合双水相方法分离纯... 细胞膜蛋白是细胞的重要组成部分,作为细胞的"门铃"与"门户",参与细胞内外物质交换、信息转换、细胞生长发育、细胞迁移以及免疫应答等重要生理活动.为鉴定鼻咽癌转移相关膜蛋白,运用差速离心联合双水相方法分离纯化鼻咽癌高转移细胞5-8F的细胞膜,SDS-PAGE分离膜蛋白,液相色谱/电喷雾串联质谱分析(LC-MS/MS)结合生物信息学分析鉴定出316种非冗余蛋白质,其中152种(48.5%)被注释为膜蛋白或膜相关蛋白.通过肿瘤差异蛋白质组数据库(dbDEPD)搜索,发现在114个膜蛋白中有49种膜蛋白与其它肿瘤的发生发展密切相关,其中21个膜蛋白与肿瘤转移相关.进一步分析发现膜蛋白CD104、VDAC2、CD298和SLC25A3与同属头颈部肿瘤的口腔癌转移相关,提示这4个膜蛋白也可能是鼻咽癌潜在的转移相关蛋白.研究结果提供了一个鼻咽癌细胞5-8F包含中高丰度膜蛋白的数据库,为进一步研究头颈部肿瘤鼻咽癌癌变分子机理积累了有价值的资料. 展开更多
关键词 鼻咽癌 膜蛋白质组 5-8f 双水相
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自制鼻咽解毒胶囊含药血清对鼻咽癌细胞系5-8F存活、凋亡的影响及其机制 被引量:2
3
作者 韩蜜 龙远雄 《山东医药》 CAS 2023年第36期31-36,共6页
目的观察自制鼻咽解毒胶囊含药血清对鼻咽癌细胞系5-8F存活、凋亡的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期5-8F细胞分为8组,5%、10%、15%、20%、25%、30%鼻咽解毒胶囊含药血清组分别加入5%、10%、15%、20%、25%、30%鼻咽解毒胶囊含药血清... 目的观察自制鼻咽解毒胶囊含药血清对鼻咽癌细胞系5-8F存活、凋亡的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期5-8F细胞分为8组,5%、10%、15%、20%、25%、30%鼻咽解毒胶囊含药血清组分别加入5%、10%、15%、20%、25%、30%鼻咽解毒胶囊含药血清,20%空白血清组加入20%不含药血清,对照组细胞正常培养,培养24、48 h,CCK-8法检测各组细胞存活率。将对数生长期5-8F细胞分为4组,低剂量组加入5%鼻咽解毒胶囊含药血清,中剂量组加入20%鼻咽解毒胶囊含药血清,高剂量组加入30%鼻咽解毒胶囊含药血清,阴性组细胞正常培养,培养24 h,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-qPCR法检测细胞中K-RAS、RAF mRNA相对表达量,Western blot法检测细胞中K-RAS、RAF、p-ERK1/2蛋白相对表达量。结果与对照组比较,20%含药血清组、25%含药血清组、30%含药血清组培养24 h及48 h的细胞存活率降低(P均<0.05);与20%空白血清组比较,25%含药血清组培养48 h和30%含药血清组培养24、48 h的细胞存活率降低(P均<0.05);与同组24 h比较,30%含药血清组培养48 h的细胞存活率降低(P<0.05)。与阴性组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率升高(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组细胞凋亡率升高(P均<0.05);与中剂量组比较,高剂量组细胞凋亡率升高(P<0.05)。与阴性组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组的K-RAS、RAF mRNA相对表达量降低(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组K-RAS、RAF mRNA相对表达量降低(P均<0.05);与中剂量组比较,高剂量组K-RAS、RAF mRNA相对表达量降低(P均<0.05)。与阴性组比较,高剂量组K-RAS蛋白、RAF蛋白、p-ERK1/2蛋白相对表达量降低,中剂量组的K-RAS、RAF蛋白相对表达量降低,低剂量组RAF蛋白相对表达量降低(P均<0.05);与低剂量组比较,高剂量组K-RAS、RAF、p-ERK1/2蛋白相对表达量及中剂量组K-RAS、p-ERK1/2蛋白相对表达量降低(P均<0.05);与中剂量组比较,高剂量组K-RAS蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论自制鼻咽解毒胶囊含药血清能抑制5-8F细胞存活,并促进细胞凋亡,且呈剂量依赖性,尤以30%鼻咽解毒胶囊含药血清剂量为最佳,作用机制可能与其可抑制MAPK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 鼻咽解毒胶囊 鼻咽癌 5-8f细胞 细胞凋亡 MAPK/ERK信号通路
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青蒿对鼻咽癌细胞CNE-2、5-8F生长的影响
4
作者 吴冬梅 刘冠军 崔英 《当代医学》 2012年第24期22-23,共2页
目的研究青蒿含药血清对鼻咽癌细胞系CNE-2、5-8F的生长的影响。方法⑴采用血清药理学的方法提取中草药青蒿的含药血清;⑵采用MTT法检测青蒿含药血清对鼻咽癌CNE-2、5-8F细胞生长的影响。结果 MTT法显示青蒿含药血清对鼻咽癌CNE-2、5-8... 目的研究青蒿含药血清对鼻咽癌细胞系CNE-2、5-8F的生长的影响。方法⑴采用血清药理学的方法提取中草药青蒿的含药血清;⑵采用MTT法检测青蒿含药血清对鼻咽癌CNE-2、5-8F细胞生长的影响。结果 MTT法显示青蒿含药血清对鼻咽癌CNE-2、5-8F细胞生长有抑制,但无剂量-效应关系和时间效应关系。结论青蒿含药血清对CNE-2、5-8F细胞的生长有抑制作用,但不成时间-效应关系。 展开更多
关键词 青蒿 鼻咽癌细胞 CNE-2 5-8f
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circHIPK3促进鼻咽癌细胞5-8F迁移和侵袭的机制 被引量:2
5
作者 邵文婷 吕磊 高劲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第8期1346-1353,共8页
目的探讨环状RNA HIPK3(circHIPK3)在鼻咽癌(NPC)细胞迁移和侵袭中的作用及其分子机制。方法检索公共数据库,运用高通量基因表达数据库(GEO)分析NPC组织及非癌组织中circHIPK3表达水平;合成circHIPK3-siRNA转染NPC 5-8F细胞;采用RT-qPCR... 目的探讨环状RNA HIPK3(circHIPK3)在鼻咽癌(NPC)细胞迁移和侵袭中的作用及其分子机制。方法检索公共数据库,运用高通量基因表达数据库(GEO)分析NPC组织及非癌组织中circHIPK3表达水平;合成circHIPK3-siRNA转染NPC 5-8F细胞;采用RT-qPCR、Western blot、细胞划痕、CCK-8和Transwell等实验方法,研究确定circHIPK3-siRNA干扰效果后,检测它对细胞增殖、迁移和侵袭及潜在下游基因CDH1、CDH2、MMP2、MMP9、IL-6/STAT3表达的影响。运用转录组测序技术分析5-8F细胞circHIPK3-siRNA干扰后显著差异表达的基因,以期找到介导circHIPK3促癌作用的关键基因。结果与非癌组织相比,NPC组织中circHIPK3表达明显增加(P<0.05)。使用siRNA特异性敲低5-8F细胞中circHIPK3的表达后,与对照组相比,si-circHIPK3组细胞增殖速率降低(P<0.05),si-circHIPK3组细胞划痕闭合率降低(P<0.01),同时si-circHIPK3组细胞迁移和侵袭的细胞数目减少(P<0.05)。此外,与对照组相比,si-circHIPK3组下游基因CDH1 mRNA和蛋白的表达量升高(P<0.001),CDH2、MMP2、MMP9、IL-6/STAT3 mRNA和蛋白的表达量减少(P<0.05)。进一步测序分析显示,circHIPK3-siRNA转染的5-8F细胞中AL645922.1、SCO_(2)、AL136295.1和ISY1-RAB43表达上调(P<0.05),BIVM-ERCC5、FAM47E-STBD1、INO80B-WBP1、NAIP、C15orf38-AP3S2、BCL2L2-PABPN1和SMIM11B表达下调(P<0.05)。结论NPC组织中circHIPK3表达显著升高。circHIPK3通过调节E-Cadherin、N-Cadherin、MMP2、MMP9和IL-6/STAT3的表达,促进NPC细胞5-8F的增殖、迁移和侵袭。AL645922.1和BIVM-ERCC5等基因可能在circHIPK3介导的促进NPC 5-8F细胞迁移和侵袭中发挥关键作用。 展开更多
关键词 circHIPK3 5-8f细胞 鼻咽癌 迁移和侵袭 转录组测序
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慢病毒转染对鼻咽癌细胞5-8F增殖迁移的影响
6
作者 钟昌桃 吴媛 +6 位作者 周训钊 颜魁 姚孟薇 宁思思 朱玉平 韦正波 谢莹 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第5期825-828,838,共5页
目的:探讨慢病毒转染对鼻咽癌细胞株5-8F增殖、迁移的影响,以验证慢病毒转染是否能有效的应用于鼻咽癌细胞的增值及迁移相关研究。方法:以红色荧光标记的慢病毒为转染载体,选定不同的MOI值转染鼻咽癌5-8F细胞株,扩大培养后筛选纯化,流... 目的:探讨慢病毒转染对鼻咽癌细胞株5-8F增殖、迁移的影响,以验证慢病毒转染是否能有效的应用于鼻咽癌细胞的增值及迁移相关研究。方法:以红色荧光标记的慢病毒为转染载体,选定不同的MOI值转染鼻咽癌5-8F细胞株,扩大培养后筛选纯化,流式细胞仪检测转染效率。以最佳MOI值转染后的5-8F(RFP-5-8F)细胞为实验组,未转染的亲代5-8F为空白对照组,取对数生长期未转染的亲代5-8F和红色荧光标记的慢病毒转染的5-8F(RFP-5-8F)细胞进行MTT、划痕实验,观察细胞镜下形态,了解细胞转染前后生长曲线,细胞迁移能力的变化。结果:流式细胞仪检测5-8F细胞慢病毒转染效率大于95%,转染最佳MOI值为30,镜下荧光强度适中。实验组与对照组比较,转染前后5-8F细胞光镜形态相似,生长曲线一致,差异无统计学意义(P=0.997),划痕实验显示5-8F与RFP-5-8F细胞迁移能力一致,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒转染后鼻咽癌细胞能真实有效的的反应原细胞的增值及迁移能力,可以很好的应用于鼻咽癌增殖及其转移机制的相关研究。 展开更多
关键词 鼻咽癌 5-8f细胞 慢病毒 转染
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小干扰RNA抑制内源性原癌基因c-myc表达对鼻咽癌细胞5-8F的影响 被引量:1
7
作者 牛朝霞 李宜培 +2 位作者 陈洁 杨红梅 王黎 《新乡医学院学报》 CAS 2015年第7期614-618,共5页
目的通过RNA干扰抑制鼻咽癌5-8F细胞内源性原癌基因c-myc的过表达,观察c-myc过表达受到抑制后对5-8F细胞生物学特性的影响。方法构建针对c-myc的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,利用LipofectamineTM2000脂质体转染5-8F细胞,建立稳定转染... 目的通过RNA干扰抑制鼻咽癌5-8F细胞内源性原癌基因c-myc的过表达,观察c-myc过表达受到抑制后对5-8F细胞生物学特性的影响。方法构建针对c-myc的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体,利用LipofectamineTM2000脂质体转染5-8F细胞,建立稳定转染干扰组细胞5-8F/si-c-myc;同法建立阴性对照组细胞5-8F/si-control,并以5-8F为空白对照组细胞;通过半定量反转录聚合酶链反应和Western blot分别检测c-myc mRNA和蛋白水平表达,鉴别干扰效果;通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测干扰前后对5-8F细胞生长的影响;通过流式细胞仪分析干扰前后对5-8F细胞周期的影响;通过透射电镜扫描观察干扰前后对5-8F细胞超微结构的影响。结果与空白对照组和阴性对照组细胞相比,干扰细胞组c-myc mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P<0.05),细胞生长活力显著降低(P<0.05),细胞周期G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05),S期细胞比例显著降低(P<0.05),细胞超微结构发生明显改变。结论干扰内源性c-myc的siRNA能显著抑制5-8F的细胞生长和细胞分裂增殖,c-myc基因有可能成为鼻咽癌基因治疗新靶点。 展开更多
关键词 RNA干扰 原癌基因C-MYC 细胞生长 5-8f细胞 鼻咽癌
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Inhibitory Effect of Flavonoid Glycosides from Chlorophytum comosum on Nasopharyngeal Carcinoma 5-8F Cells and Its Mechanism
8
作者 Chenliang CHU Xinchen WANG +2 位作者 Kuan LU Liang QIN Lu JIN 《Medicinal Plant》 2024年第1期66-70,共5页
[Objectives]To study the inhibitory activity of two flavonoid glycosides isolated from Chlorophytum comosum Laxum R.Br on human nasopharyngeal carcinoma(NPC)cell line 5-8F in vitro and its mechanism.[Methods]The flavo... [Objectives]To study the inhibitory activity of two flavonoid glycosides isolated from Chlorophytum comosum Laxum R.Br on human nasopharyngeal carcinoma(NPC)cell line 5-8F in vitro and its mechanism.[Methods]The flavonoid glycosides were isolated and purified from the ethanol alcoholic extract of the roots of Liliaceae plant Chlorophytum comosum by silica gel column chromatography,macroporous resin column chromatography,Sephadex LH-20,and reverse column chromatography(ODS).The inhibitory activity of flavonoid glycosides on human nasopharyngeal carcinoma cells was analyzed by CCK-8 method,and the potential mechanism was preliminarily analyzed by molecular docking.[Results]Two flavonoid glycosides were identified as isovitexin 2″-0-rhamnoside and 7-2″-di-O-β-glucopyranosylisovitexin.Two flavonoid glycosides showed promising inhibitory effect on human nasopharyngeal carcinoma cell line 5-8F,with IC_(50) values of 24.8 and 27.5μmol/L,respectively.Molecular docking results showed that the potential targets of two flavonoid glycosides include CyclinD1,Bcl-2β-Catenin,ILK,TGF-β,in addition,two glycosides showed higher predicted binding affinity towards CyclinD1,which verifies the cytotoxicity of the two compounds on human nasopharyngeal carcinoma cell line 5-8F in vitro.[Conclusions]Two flavonoid glycosides are the active molecules in Chlorophytum comosum that can inhibit the proliferation of human nasopharyngeal carcinoma cells,and have the potential to be used in the research and development of anti nasopharyngeal carcinoma drugs. 展开更多
关键词 Chlorophytum comosum Laxum R.Br. flavonoid glycosides 5-8f cells Antitumor mechanism
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益气解毒方下调miR-21抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖、迁移与侵袭
9
作者 刘流 王晋 +3 位作者 宁双成 刘桂兰 李晓科 范婧莹 《中南医学科学杂志》 2026年第2期211-215,共5页
目的探讨益气解毒方(YQ)对鼻咽癌5-8F细胞增殖、迁移与侵袭的作用机制。方法使用慢病毒构建微小RNA-21(miR-21)短发夹(sh)与过表达(oe)细胞株。细胞实验分为过表达阴性对照(oe-NC)组、oe-NC+YQ组、oe-miR-21组、oe-miR-21+YQ组、sh-RNA... 目的探讨益气解毒方(YQ)对鼻咽癌5-8F细胞增殖、迁移与侵袭的作用机制。方法使用慢病毒构建微小RNA-21(miR-21)短发夹(sh)与过表达(oe)细胞株。细胞实验分为过表达阴性对照(oe-NC)组、oe-NC+YQ组、oe-miR-21组、oe-miR-21+YQ组、sh-RNA阴性对照(sh-NC)组、sh-NC+YQ组、sh-miR-21组和sh-miR-21+YQ组。采用RTCA、创伤愈合实验、Matrigel侵袭法分别检测各组细胞增殖、迁移及侵袭能力,qRT-PCR检测miR-21表达水平,Western blotting法检测波形蛋白(vimentin)与膜联蛋白A1(ANXA1)表达水平。结果YQ处理鼻咽癌5-8F细胞后,鼻咽癌5-8F细胞中的miR-21表达水平下降(P<0.05),细胞增殖、迁移、侵袭能力以及vimentin、ANXA1相对表达水平均降低(P<0.05)。结论YQ可能通过下调miR-21抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖、迁移与侵袭。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 miR-21 5-8f细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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转移抑素抑制人鼻咽癌高转移能力细胞株SUNE-1-5-8F转移侵袭能力的研究 被引量:1
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作者 景齐骏 江浩 +1 位作者 项平 刘浩 《中华全科医学》 2017年第10期1655-1658,1721,共5页
目的研究并探讨转移抑素(metastin)对人鼻咽癌高转移能力细胞株SUNE-1-5-8F转移侵袭能力的影响。方法 (1)采用Transwell体外侵袭趋化实验技术,在不同浓度(10~2nM、10~3nM、10~4nM)转移抑素干预前后计数转移及侵袭细胞数,探究其对SUNE-1-... 目的研究并探讨转移抑素(metastin)对人鼻咽癌高转移能力细胞株SUNE-1-5-8F转移侵袭能力的影响。方法 (1)采用Transwell体外侵袭趋化实验技术,在不同浓度(10~2nM、10~3nM、10~4nM)转移抑素干预前后计数转移及侵袭细胞数,探究其对SUNE-1-5-8F细胞转移能力和侵袭能力的影响。(2)采用BALB/c-nu裸鼠肺转移模型,40只裸鼠随机平均分为转移抑素组及对照组,2组均右侧腋窝下注射2×10~6/ml SUNE-1-5-8F细胞悬液,其中转移抑素组于第2天按1.17 mg/kg腹腔注射转移抑素,研究其对裸鼠移植瘤的抑瘤率、转移抑制率和生命延长率的影响;采用免疫组化法研究肺转移灶kisspeptin指标表达情况。结果 (1)Transwell实验中转移抑素对于SUNE-1-5-8F细胞的转移能力及侵袭能力均具有抑制作用(P<0.05),且其抑制能力与转移抑素浓度呈正相关(P<0.05)。(2)裸鼠实验中转移抑素对抑瘤率无明显影响(P>0.05),但可以降低肺转移数,提升转移抑制率(P<0.05),且进一步提高了小鼠的生命延长率(P<0.05)。免疫组化示转移抑素组kisspeptin较对照组高表达。结论 (1)Transwel实验中转移抑素能够抑制人鼻咽癌高转移能力细胞株SUNE-1-5-8F的转移侵袭能力,且转移抑素浓度与其抑制能力呈正相关。(2)裸鼠实验中转移抑素能够降低肺转移率,延长裸鼠生命,但与腋下移植瘤的增殖无显著相关性。 展开更多
关键词 转移抑素 KISS-1 SUNE-1-5-8f 鼻咽癌
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阿司匹林对鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞增殖、迁移与侵袭作用机制研究
11
作者 马雪百合 陈山林 +2 位作者 王洪凯 唐浩 张在平 《现代药物与临床》 CAS 2022年第12期2673-2679,共7页
目的 探讨阿司匹林对人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞增殖、迁移与侵袭的影响和机制。方法 将人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞株分为对照组和阿司匹林(0.00、1.25、2.50、5.00、10.00 mmol/L)处理组。噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度阿司匹林作用24、48、7... 目的 探讨阿司匹林对人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞增殖、迁移与侵袭的影响和机制。方法 将人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞株分为对照组和阿司匹林(0.00、1.25、2.50、5.00、10.00 mmol/L)处理组。噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度阿司匹林作用24、48、72 h后对CNE-1、5-8F细胞的增殖能力,以半数抑制浓度(IC50)作为后续实验药物处理浓度。集落形成实验检测CNE-1和5-8F细胞增殖能力,Transwell实验检测CNE-1和5-8F细胞迁移及侵袭能力的变化,Western blotting法检测CNE-1和5-8F细胞中蛋白激酶B(Akt)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Snail蛋白相对表达水平。结果 人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞分别经1.25、2.50、5.00、10.00 mmol/L阿司匹林处理后,细胞增殖均受到不同程度抑制,且呈时间及浓度相关性,IC50分别为3.3、2.7 mmol/L。与对照组相比,经阿司匹林处理后,鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞的细胞增殖和集落形成能力明显下降(P<0.01)。与对照组相比,经阿司匹林处理后,划痕愈合率显著降低(P<0.05)。Trasnwell迁移实验结果表明,与对照组相比,阿司匹林处理组鼻咽癌细胞CNE-1和5-8F 48 h穿过小室的数目显著减少(P<0.05、0.001)。与对照组相比,阿司匹林处理组CNE-1、5-8F细胞的E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05),PI3K、Akt、Vimentin、Snail蛋白表达显著下降(P<0.05、0.01)。结论 阿司匹林可通过上调E-cadherin蛋白的表达、抑制上皮间质转化进程从而抑制人鼻咽癌CNE-1、5-8F细胞迁移侵袭,同时下调PI3K、Akt、Vimentin、Snail蛋白的表达进而抑制CNE-1、5-8F细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 阿司匹林 鼻咽癌 CNE-1细胞 5-8f细胞 增殖 迁移 蛋白激酶B 磷脂酰肌醇3-激酶
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益气解毒方通过TGF-β1/SMAD3信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:7
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作者 郭利培 张文青 +4 位作者 刘洁 史红健 何迎春 王贤文 范婧莹 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期935-943,共9页
目的研究益气解毒方对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并从转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD3信号通路探讨其对增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法(1)将鼻咽癌细胞分为4组:溶剂对照组、益气解毒方0.5 mg·mL^(-1)组、益气解毒方1.0 ... 目的研究益气解毒方对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并从转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD3信号通路探讨其对增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法(1)将鼻咽癌细胞分为4组:溶剂对照组、益气解毒方0.5 mg·mL^(-1)组、益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组、5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)2μg·mL^(-1)组,采用实时无标记细胞功能分析仪(real time cellular analysis technology,RTCA)监测细胞增殖;创伤愈合实验检测细胞迁移;药物干预24 h后,侵袭小室法检测细胞侵袭;Western Blot法检测细胞β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、TGF-β1、SMAD3蛋白的表达水平。(2)将鼻咽癌细胞分为5组:溶剂对照组、TGF-β110 ng·mL^(-1)组、TGF-β110 ng·mL^(-1)+益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组、益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组、LY320088210μmol·L-1组,采用实时无标记细胞功能分析仪监测细胞增殖;创伤愈合实验检测细胞迁移;药物干预24 h后,侵袭小室法检测细胞侵袭;Western Blot法检测细胞β-catenin、E-cadherin、N-cadherin、TGF-β1、SMAD3蛋白的表达水平。(3)随机将裸鼠分为模型组、益气解毒方组和5-Fu组。皮下部位注射细胞悬液制备鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,基本成瘤后,5-Fu组每2 d腹腔注射1次,其余组每天灌胃给药1次,连续3周。每隔3 d测量瘤体体积1次;Western Blot法检测各组组织中β-catenin、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平。结果与溶剂对照组比较,益气解毒方(0.5、1.0 mg·mL^(-1))组的细胞增殖曲线均下降,细胞迁移和侵袭能力均降低(P<0.05,P<0.01),且E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.01),β-catenin、N-cadherin、TGF-β1、SMAD3蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,益气解毒方组的鼻咽癌移植瘤体积明显减小(P<0.05),且益气解毒方组移植瘤组织中的β-catenin和N-cadherin蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),E-cadherin蛋白表达明显上调(P<0.01)。加入TGF-β1信号通路激活剂和抑制剂后,与益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组比较,TGF-β110 ng·mL^(-1)+益气解毒方1.0 mg·mL^(-1)组的TGF-β1、SMAD3、β-catenin和N-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),且细胞增殖、迁移和侵袭的能力明显增强(P<0.01)。结论益气解毒方能够通过调控TGF-β1/SMAD3信号通路抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 益气解毒方 鼻咽癌 TGf-β1/SMAD3信号通路 增殖 迁移 侵袭 BALB/c-nu裸鼠 人高转移鼻咽癌5-8f细胞
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MiR-143通过负调控GLI3基因来抑制鼻咽癌细胞的迁移 被引量:6
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作者 钟文 何本夫 +3 位作者 朱成全 肖烈钢 周思朗 彭心昭 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1057-1061,共5页
目的探讨miR-143在鼻咽癌细胞迁移中的生物学功能及可能的分子机制。方法应用生物信息软件预测miR-143靶基因,分别将预测靶基因GLI3的3'UTR及其突变体构建到荧光素酶载体psiCHECK-2骨架中。通过荧光素酶报告基因检测分析miR-143对... 目的探讨miR-143在鼻咽癌细胞迁移中的生物学功能及可能的分子机制。方法应用生物信息软件预测miR-143靶基因,分别将预测靶基因GLI3的3'UTR及其突变体构建到荧光素酶载体psiCHECK-2骨架中。通过荧光素酶报告基因检测分析miR-143对靶基因GLI3的调控作用,并检测转染miR-143 mimics、inhibitor和siGLI3后鼻咽癌5-8F细胞miR-143和GLI3的表达水平及迁移能力的变化。结果生物信息学预测Hh信号通路转录基因GLI3可能是miR-143的靶基因;双荧光素酶报告基因分析表明miR-143能够作用于GLI3的3'UTR;Western Blot和qRT-PCR结果进一步证明5-8F细胞中miR-143与GLI3的表达呈负相关,并影响5-8F细胞的迁移能力。结论 MiR-143可通过负调控靶基因GLI3抑制鼻咽癌细胞的迁移,为进一步研究miR-143及Hh信号通路在鼻咽癌中的作用机制提供参考价值。 展开更多
关键词 MIR-143 GLI3 双荧光素酶报告基因 5-8f 迁移
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富马酸二甲酯对鼻咽癌细胞辐射敏感性的影响及作用机制
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作者 王凯 韩琳 王岳衡 《中国药业》 2025年第7期36-44,共9页
目的探讨富马酸二甲酯(DMF)对人鼻咽癌细胞5-8F(简称5-8F细胞)辐射敏感性的影响及作用机制。方法选取北京市和平里医院耳鼻咽喉科2020年1月至2022年12月收治的62例鼻咽癌患者(之前未接受任何鼻咽癌相关治疗)的组织标本和核磁共振图像,... 目的探讨富马酸二甲酯(DMF)对人鼻咽癌细胞5-8F(简称5-8F细胞)辐射敏感性的影响及作用机制。方法选取北京市和平里医院耳鼻咽喉科2020年1月至2022年12月收治的62例鼻咽癌患者(之前未接受任何鼻咽癌相关治疗)的组织标本和核磁共振图像,按辐射敏感性的不同分为辐射敏感组(40例)和辐射抵抗组(22例)。通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、流式细胞术评价DMF对5-8F细胞的活性、增殖、细胞周期和细胞凋亡的作用;采用免疫荧光染色法和免疫印迹(Western blot)法检测细胞核和细胞质中核因子-κB亚基p65(NF-κB p65)及上皮间质转换(EMT)标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。将18只小鼠随机分为Control组(不予IR和DMF处理)、电离辐射(IR)组、IR+DMF组,各6只。所有小鼠均复制鼻咽癌皮下移植瘤模型,考察DMF在小鼠体内对鼻咽癌辐射敏感性的影响。结果放疗2个月后,辐射敏感组患者的肿瘤消退明显,且组织中NF-kB p65和p-NF-kB p65均呈低表达;辐射抵抗组患者的肿瘤消退缓慢,NF-kB p65和p-NF-kB p65均呈高表达。DMF以浓度和时间依赖方式抑制5-8F细胞的活性,当DMF浓度为50.0μmol/L时,处理24 h对细胞活性的抑制率小于10%,而处理48,72 h时的细胞活性显著降低(74.21%,54.81%,P<0.05),故选取50.0μmol/L DMF处理24 h用于后续实验。与IR组比较,IR+DMF组5-8F细胞的克隆形成数量及存活分数均显著降低(P<0.05),磷酸化组蛋白(γ-H2AX)灶点数均显著增加(P<0.05),G2/M期细胞分布百分比和细胞凋亡率均显著升高(P<0.05),细胞核和细胞质中NF-κB p65及N-cadherin,Vimentin的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),E-cadherin的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。在鼻咽癌皮下移植瘤模型小鼠中,与IR组比较,IR+DMF组小鼠给药第1,2,3周后的肿瘤体积和肿瘤质量均显著减少(P<0.05),细胞核和细胞质中NF-κB p65及N-cadherin,Vimentin的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),E-cadherin的蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论DMF通过抑制NF-κB信号通路和EMT而延缓DNA双链断裂,诱导G2/M期鼻咽癌细胞停滞和凋亡,从而增强鼻咽癌细胞的辐射敏感性。 展开更多
关键词 富马酸二甲酯 人鼻咽癌细胞5-8f 辐射敏感性 细胞周期 细胞凋亡 核因子-ΚB 上皮间质转换 作用机制
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MTA1沉默抑制鼻咽癌转移能力的体外研究 被引量:5
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作者 涂英华 练祖平 谢有科 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第4期309-311,I0002,共4页
目的探究MTA1基因敲除后对鼻咽癌细胞株5-8F细胞转移能力的影响。方法设计并构建针对MTA1基因的RNAi片段,脂质体(LipofectamineTM2000)介导Si-MTA1-01(Si-MTA1-01组)和Si-MTA1-02(Si-MTA1-02组)感染5-8F细胞,同时设无义序列转染组(Si-ct... 目的探究MTA1基因敲除后对鼻咽癌细胞株5-8F细胞转移能力的影响。方法设计并构建针对MTA1基因的RNAi片段,脂质体(LipofectamineTM2000)介导Si-MTA1-01(Si-MTA1-01组)和Si-MTA1-02(Si-MTA1-02组)感染5-8F细胞,同时设无义序列转染组(Si-ctr组)为对照。应用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测转染后各组细胞的MTAl mRNA和蛋白表达;细胞划痕实验、基底膜侵袭实验和细胞黏附实验检测转染后5-8F细胞迁移和侵袭能力的变化,并进行比较分析。结果与Si-ctr组相比,Si-MTA1-01和Si-MTA1-02组MTA1 mRNA及蛋白表达水平下降,穿膜细胞数减少,细胞黏附率增加(均P<0.05),划痕实验显示细胞阻滞效果明显。结论沉默MTA1能明显减弱鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力,MTA1有望成为治疗鼻咽癌的有效靶点。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 RNA干扰 细胞迁移分析 细胞黏附 细胞系 肿瘤 印迹法 蛋白质 逆转录聚合酶链反 MTA1 鼻咽癌 5-8f细胞
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siRNA沉默LOX基因对鼻咽癌细胞侵袭及迁移能力的影响
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作者 梁毅 费新雄 +2 位作者 夏林 柯珂 张梦静 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第13期2006-2011,共6页
目的:探讨RNAi干扰赖氨酰氧化酶基因(LOX)后对鼻咽癌细胞5-8F侵袭及迁移能力的影响。方法:设计并构建针对LOX基因的RNAi片段,脂质体介导siRNA-LOX-01(siRNA-LOX-01组)和siRNALOX-02(siRNA-LOX-02组)转染5-8F细胞,同时设非特异性干扰片... 目的:探讨RNAi干扰赖氨酰氧化酶基因(LOX)后对鼻咽癌细胞5-8F侵袭及迁移能力的影响。方法:设计并构建针对LOX基因的RNAi片段,脂质体介导siRNA-LOX-01(siRNA-LOX-01组)和siRNALOX-02(siRNA-LOX-02组)转染5-8F细胞,同时设非特异性干扰片段为对照组。应用实时荧光定量PCR、免疫印迹试验检测转染后各组LOX的mRNA和蛋白表达及上皮间质转化(EMT)相关指标E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug、MMP9等的表达变化;细胞黏附实验、基底膜侵袭实验和细胞划痕实验分别研究LOX基因沉默后对5-8F细胞侵袭及迁移能力的影响。结果:与对照组相比,siRNA-LOX-01组和siRNA-LOX-02组LOX表达在mRNA及蛋白水平下降,细胞的迁移速率变慢,穿膜细胞数减少,细胞黏附率增加(均P<0.05),E-cadherin的表达增加,N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug及MMP9的表达减少。结论:干扰LOX能明显抑制鼻咽癌细胞的侵袭及迁移能力,作用机制可能与N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug及MMP9蛋白表达下调有关,LOX有望成为治疗鼻咽癌的有效靶点。 展开更多
关键词 LOX基因 鼻咽癌 RNA干扰 5-8f细胞 侵袭 迁移
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SLUG基因可调控性干扰载体的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达
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作者 刘芳 柳玉红 +2 位作者 李晓鸣 邹桂华 周来勇 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2019年第3期33-37,共5页
目的 探讨鼻咽癌细胞中基因表达,构建可调控性相关基因干扰载体,并验证其干扰作用。方法 将高转移人鼻咽癌细胞株5-8F、5-8F-H3细胞进行培养,实时荧光定量RT-PCR检测5-8F及5-8F-H3细胞中SLUG、CBX3、MAD2L1、PLAU、HMGA1基因的表达水平... 目的 探讨鼻咽癌细胞中基因表达,构建可调控性相关基因干扰载体,并验证其干扰作用。方法 将高转移人鼻咽癌细胞株5-8F、5-8F-H3细胞进行培养,实时荧光定量RT-PCR检测5-8F及5-8F-H3细胞中SLUG、CBX3、MAD2L1、PLAU、HMGA1基因的表达水平。应用酶切、连接技术构建pSUPERIOR-SLUG干扰载体,采用脂质体转染方法转染5-8F-H3细胞,经嘌呤霉素筛选获得阳性克隆,实时荧光定量RT-PCR检测干扰效果。结果 5-8F及 5-8F-H3细胞中SLUG基因表达水平均明显高于CBX3、MAD2L1、PLAU、HMGA1基因(均P<0.05),相对倍数分别为(11.23±1.78)倍、(1.23±0.17)倍、(1.57±0.27)倍、(6.36±0.38)倍、(3.66±1.14)倍,以SLUG基因倍数最高。所构建的pSUPERIOR-SLUG重组质粒,经酶切鉴定及序列分析证实为所需的目标序列,并成功转染鼻咽癌5-8F-H3细胞。阳性克隆S2-18基因表达水平高于阳性克隆S1-7、S1-9、S2-22基因(P<0.05),干扰率分别为67.42%、72.45%、84.20%、75.61%。结论 SLUG基因在鼻咽癌5-8F-H3中高表达。成功构建了重组质粒——pSUPERIOR-SLUG,并成功转染鼻咽癌5-8F-H3细胞,为后续进一步研究SLUG在鼻咽癌的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 高转移人鼻咽癌细胞株5-8f5-8f-H3细胞 SLUG基因 可调控性干扰载体
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siRNA抑制LOX基因对鼻咽癌细胞增殖能力的影响
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作者 梁毅 夏林 +2 位作者 费新雄 董克臣 柯素颖 《海南医学》 CAS 2018年第9期1191-1195,共5页
目的探讨si RNA扰赖氨酰氧化酶基因(LOX)后对鼻咽癌细胞5-8F的体外增殖的影响。方法设计并构建针对LOX基因的si RNA段,脂质体介导Si RNA-LOX-01(Si RNA-LOX-01组)和Si RNA-LOX-02(Si RNALOX-02组)转染5-8F细胞,同时设非特异性干扰片段... 目的探讨si RNA扰赖氨酰氧化酶基因(LOX)后对鼻咽癌细胞5-8F的体外增殖的影响。方法设计并构建针对LOX基因的si RNA段,脂质体介导Si RNA-LOX-01(Si RNA-LOX-01组)和Si RNA-LOX-02(Si RNALOX-02组)转染5-8F细胞,同时设非特异性干扰片段为对照组。应用实时荧光定量PCR、免疫印迹试验检测转染后各组LOX m RNA和蛋白表达及Ki-67、PCNA、CDK4、P21、CCND1表达变化;MTT实验、平板克隆形成实验及流式细胞周期实验分别研究LOX基因沉默后对5-8F细胞增殖能力的影响。结果与对照组比较,Si RNA-LOX-01组和Si RNA-LOX-02组LOX表达在m RNA及蛋白水平上均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,si RNA-LOX细胞的增殖速度变慢,单克隆形成数量减少,细胞周期中G0/G1期细胞的比例显著升高,差异有显著统计学意义(P<0.01);与对照组相比,Si RNA-LOX-01组和Si RNA-LOX-02组细胞中抗原Ki-67、增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达均降低,P21表达量升高,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。结论干扰LOX能明显抑制鼻咽癌细胞的增殖能力,其作用机制可能与Ki-67、PCNA、CDK4及CCND1蛋白表达下调,P21蛋白表达上调有关,LOX有望成为治疗鼻咽癌的有效靶点。 展开更多
关键词 LOX基因 鼻咽癌 RNA干扰 5-8f细胞 细胞增殖
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UBE2T基因表达对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响 被引量:5
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作者 郑志刚 华清泉 陈锋 《实用癌症杂志》 2019年第10期1579-1582,共4页
目的探讨泛素结合酶E2T(UBE2T)基因表达对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法选取鼻咽癌细胞系5-8F细胞,随机分为对照组、空白转染组和si-UBE2T组,其中空白转染组细胞转染空白载体,si-UBE2T组细胞转染UBE2T特异性siRNA载体,采... 目的探讨泛素结合酶E2T(UBE2T)基因表达对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法选取鼻咽癌细胞系5-8F细胞,随机分为对照组、空白转染组和si-UBE2T组,其中空白转染组细胞转染空白载体,si-UBE2T组细胞转染UBE2T特异性siRNA载体,采用MTT法检测各组细胞增殖情况,采用Transwell迁移侵袭试验检测各组细胞迁移和侵袭,Western blotting法检测各组细胞UBE2T蛋白表达。结果 si-UBE2T组UBE2T蛋白相对表达量为(0. 354±0. 051),明显低于对照组和空白转染组(P <0. 05);si-UBE2T组培养第1 d、3 d和6 d吸光度值均低于对照组和空白转染组(P <0. 05);对照组和空白转染组培养第1d、3d和6d吸光度值比较差异无统计学意义(P> 0. 05);si-UBE2T组细胞迁移率和穿膜细胞数分别为(0. 322±0. 040)%和(85. 12±12. 06)个,明显低于对照组和空白转染组(P <0. 05);对照组和空白转染组UBE2T蛋白相对表达量、细胞迁移率和穿膜细胞数比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 UBE2T基因表达可促进鼻咽癌5-8F细胞增殖、侵袭及转移,有望成为鼻咽癌分支靶向治疗的靶标。 展开更多
关键词 泛素结合酶E2T 鼻咽癌 5-8f细胞 增殖 迁移 侵袭
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姜黄素通过调控Tiam1蛋白表达影响鼻咽癌增殖与侵袭的研究 被引量:4
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作者 陈娟 贺秋冬 艾小红 《中南医学科学杂志》 CAS 2019年第5期483-487,507,共6页
通过观察Tiam1蛋白在鼻咽癌组织中表达情况,探究姜黄素对鼻咽癌5-8F细胞增殖及侵袭的影响。通过免疫组化法检测发现鼻咽癌组织中Tiam1表达高于鼻咽黏膜慢性炎症组织;CCK-8实验、划痕实验及Transwell实验结果说明,姜黄素可体外抑制5-8F... 通过观察Tiam1蛋白在鼻咽癌组织中表达情况,探究姜黄素对鼻咽癌5-8F细胞增殖及侵袭的影响。通过免疫组化法检测发现鼻咽癌组织中Tiam1表达高于鼻咽黏膜慢性炎症组织;CCK-8实验、划痕实验及Transwell实验结果说明,姜黄素可体外抑制5-8F细胞的增殖及迁移能力;Western blot检测不同浓度处理5-8F细胞后Tiam1蛋白表达情况。本研究证实Tiam1在鼻咽癌组织中高表达;姜黄素可能通过抑制Tiam1蛋白表达,降低5-8F细胞增殖与侵袭能力。 展开更多
关键词 鼻咽癌 5-8f细胞 姜黄素 TIAM1 细胞增殖 侵袭
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