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六味地黄丸通过调节髓源性抑制细胞对4T1细胞EMT及CSC特性表达的影响
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作者 郑里翔 黄玲 +2 位作者 郭慧文 龚碧瑶 任小英 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第12期1-10,共10页
目的:探究六味地黄丸含药血清(Liuwei Dihuangwan drug-containing serum,LDP)通过调节髓源性抑制细胞(MDSCs)对三阴性乳腺癌4T1细胞上皮间充质转化(EMT)及癌症干细胞(CSC)特性表达的影响。方法:SPF级雌性SD大鼠随机分为3组,分别予以0.3... 目的:探究六味地黄丸含药血清(Liuwei Dihuangwan drug-containing serum,LDP)通过调节髓源性抑制细胞(MDSCs)对三阴性乳腺癌4T1细胞上皮间充质转化(EMT)及癌症干细胞(CSC)特性表达的影响。方法:SPF级雌性SD大鼠随机分为3组,分别予以0.39、1.94、3.89 g·kg^(-1)·d^(-1)的六味地黄丸混悬液灌胃7 d后制备低、中、高LDP。将4T1细胞接种于SPF级雌性Balb/c小鼠乳腺皮下构建移植瘤小鼠模型,提取胫骨和股骨中骨髓细胞,在体外诱导成MDSCs。4T1与MDSCs细胞活力测定采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法;流式细胞术(FC)检测MDSCs数量及4T1细胞CSC表面标记物CD44、CD24的表达;细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、平板克隆形成实验分别检测4T1细胞的迁移、侵袭和增殖能力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测转化生长因子-β(TGF-β)、核转录因子-κB(NF-κB)、趋化因子配体2(CXCL2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达;免疫荧光(IF)检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin的表达。结果:与正常组比较,LDP对4T1细胞的细胞活力无明显的抑制作用,可明显降低MDSCs活力、数量及TGF-β蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。4T1细胞与MDSCs共培养后,4T1细胞迁移、侵袭和增殖能力均增加(P<0.05,P<0.01);NF-κB、CXCL2、N-cadherin表达及CSC(CD44^(+)CD24^(-))占比升高(P<0.05,P<0.01),E-cadherin表达降低(P<0.05)。LDP干预MDSCs后,再与4T1共培养,4T1细胞迁移、侵袭和增殖能力显著降低(P<0.01),NF-κB、CXCL2、N-cadherin表达均有所降低(P<0.05,P<0.01),E-cadherin表达明显升高(P<0.05,P<0.01),而对CSC(CD44^(+)CD24^(-))在4T1细胞中的占比差异无统计学意义,但LDP干预4T1细胞与MDSCs的共培养体系,CSC(CD44^(+)CD24^(-))占比下降(P<0.05,P<0.01)。结论:LDP可降低MDSCs活力、数量及TGF-β、NF-κB及CXCL2的表达,逆转EMT及降低CSC特性表达,抑制4T1细胞的迁移、侵袭和增殖。 展开更多
关键词 六味地黄丸含药血清 4t1细胞 髓源性抑制细胞 上皮间充质转化 干细胞特性
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尺寸效应对EA4T车轴钢疲劳性能的影响
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作者 徐犇 杨冰 +3 位作者 王栓程 肖守讷 阳光武 朱涛 《机械工程学报》 北大核心 2025年第16期137-145,共9页
为研究载荷类型和试样尺寸对EA4T车轴钢疲劳性能的影响,首先采用旋转弯曲和轴向拉压两种加载方式,对最小截面直径分别为3 mm、6 mm和10 mm的EA4T车轴钢试样进行了疲劳试验;然后,利用高应力体积和威布尔分布理论分析载荷类型和试样尺寸... 为研究载荷类型和试样尺寸对EA4T车轴钢疲劳性能的影响,首先采用旋转弯曲和轴向拉压两种加载方式,对最小截面直径分别为3 mm、6 mm和10 mm的EA4T车轴钢试样进行了疲劳试验;然后,利用高应力体积和威布尔分布理论分析载荷类型和试样尺寸对疲劳性能的影响;最后,基于应力梯度理论对材料的疲劳极限进行预测。结果表明:在试样最小截面直径相同的情况下,旋转弯曲加载条件下得到的疲劳强度总是大于轴向拉压加载条件下的结果;旋转弯曲加载条件下,疲劳强度随试样最小截面直径增大而减小,但在轴向拉压加载条件下并无该趋势,试样疲劳强度与最小截面直径无明显关联性;尺寸变化引起的应力梯度差异是EA4T车轴钢试样表现出尺寸效应的主要原因;量化了两种载荷类型疲劳极限之间的关系,提出的疲劳极限预测方法对试验数据有良好的拟合效果,可为EA4T车轴钢的疲劳极限预测提供参考。 展开更多
关键词 尺寸效应 EA4t车轴钢 疲劳强度 高应力体积 应力梯度
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EA4T车轴机器人磨抛工艺优化与轨迹规划研究
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作者 张峰 冯中立 +4 位作者 徐锋 张德明 曾祥瑞 马建伟 张石磊 《金刚石与磨料磨具工程》 北大核心 2025年第2期266-273,共8页
为突破动车组EA4T车轴人工磨抛时作业强度大、加工质量不稳定等困境,采用工业机器人智能磨抛系统研究EA4T钢试件的磨抛工艺,并提出EA4T车轴机器人磨抛轨迹离线编程方法。首先对EA4T钢试件进行机器人磨抛正交试验;然后采用熵值法对试验... 为突破动车组EA4T车轴人工磨抛时作业强度大、加工质量不稳定等困境,采用工业机器人智能磨抛系统研究EA4T钢试件的磨抛工艺,并提出EA4T车轴机器人磨抛轨迹离线编程方法。首先对EA4T钢试件进行机器人磨抛正交试验;然后采用熵值法对试验结果进行多目标工艺优化,得出最优磨抛工艺参数组合;最后采用离线编程方法规划EA4T车轴轴肩部位的磨抛轨迹,并将生成的加工程序导入机器人示教器进行磨抛轨迹试验验证。研究表明,优化后的磨抛工艺参数组合为磨头目数400#(筛网孔径为0.038 mm)、磨抛力15 N、进给速度50 mm/s、主轴转速750 r/min。采用该参数组合磨抛后,EA4T钢试件的表面粗糙度Ra为0.338μm、材料去除深度h为1.67μm,均符合指标要求。采用最优磨抛工艺参数配合机器人磨抛轨迹规划方法,能够快速精准完成EA4T车轴轴肩部位的磨抛作业,具有一定的工程应用价值。 展开更多
关键词 EA4t车轴 机器人磨抛 工艺优化 磨抛轨迹 离线编程
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α-常春藤皂苷通过调控PI3K/Akt信号通路对乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和凋亡的影响
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作者 王倩 马春宇 《中成药》 北大核心 2025年第5期1502-1508,共7页
目的 探讨α-常春藤皂苷对乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30、40、50、60μmol/L)处理4T1细胞,MTT法检测α-常春藤皂苷对4T1细胞增殖的影响。用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30... 目的 探讨α-常春藤皂苷对乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30、40、50、60μmol/L)处理4T1细胞,MTT法检测α-常春藤皂苷对4T1细胞增殖的影响。用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30、40μmol/L)处理4T1细胞,观察细胞形态;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;细胞划痕实验观察细胞迁移能力;Western blot法检测细胞PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bax、Bcl-2、cleaved Caspase3、cleaved PARP、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。结果 10~60μmol/L α-常春藤皂苷呈浓度依赖性地抑制4T1细胞增殖(P<0.01),其作用24 h的IC_(50)值约为29.8μmol/L。与对照组(0μmol/L)比较,α-常春藤皂苷30、40μmol/L组4T1细胞形态改变;细胞克隆形成能力下降(P<0.01);凋亡细胞数量增加(P<0.01);细胞凋亡率升高(P,<0.01);细胞迁移能力降低(P<0.01);p-PI3K、p-Akt、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.01),Bax、cleaved Caspase3、cleaved PARP、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01)。结论 常春藤皂苷可能通过抑制PI3K/Akt信号通路激活抑制乳腺癌4T1细胞增殖、迁移,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 α-常春藤皂苷 乳腺癌4t1细胞 PI3K/AKT信号通路 增殖 迁移 凋亡
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Hot deformation behavior and microstructure evolution mechanisms of EA4T axle steel for high-speed train application
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作者 Yan Zhang Guang-jie Huang +1 位作者 Jie He Min-zhang Wang 《Journal of Iron and Steel Research International》 2025年第9期2847-2863,共17页
As high-speed railway transportation advances toward increased velocities,it is imperative to enhance the mechanical performance of EA4T axle steel,especially through microstructures regulation by thermal–mechanical ... As high-speed railway transportation advances toward increased velocities,it is imperative to enhance the mechanical performance of EA4T axle steel,especially through microstructures regulation by thermal–mechanical processing.However,little research has been conducted on the phase transformation and microstructure evolution mechanism of EA4T steel under thermal–mechanical load,resulting in a lack of theoretical guidance.The hot deformation behavior and phase transformation mechanism of EA4T steel were investigated under different conditions of strain rates(0.01–10 s^(−1))and temperatures(850–1200℃).A relation of deformation stresses with Zener–Hollomon parameter was established to characterize the mechanical response and dynamic softening effect of EA4T steel during hot compression.The evolution of grain boundaries with different misorientations has been analyzed to evaluate the influence of strain rates and temperatures on the dynamic recrystallization.It was found that the grain refinement mechanisms of EA4T steel by dynamic recrystallization including twin-assisted boundary bulging,sub-grain rotation,and sub-grain growth.Transmission electron microscopy observations confirmed that dynamic recrystallization nuclei and small recrystallized grains impeded martensite phase nucleation during hot deformation,while the ongoing dynamic recrystallization consumed deformation stored energy and reduced dislocation density,which mitigated the stress concentration in the parent phase of martensite,thereby facilitating the uniform growth of martensite lath with a mixing structure of nanotwins and dislocations during quenching. 展开更多
关键词 EA4t steel Hot deformation behavior Dynamic recrystallization Phase transformation Grain refinement
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基于“3N4T”真情境项目化学习发现者课堂教学策略探讨——以“苏教版八年级上册6.2一次函数”教学为例
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作者 魏士龙 《数理天地(初中版)》 2025年第6期20-21,共2页
《义务教育数学课程标准(2022年版)》提到数学课程内容不仅包括数学的结果,也包括数学结果的形成过程和蕴含的数学思想方法.“3N”指新课标、新课程、新理念这三新背景下的素养导向,“4T”指真实问题、真实情境、真实探究、真实生成的... 《义务教育数学课程标准(2022年版)》提到数学课程内容不仅包括数学的结果,也包括数学结果的形成过程和蕴含的数学思想方法.“3N”指新课标、新课程、新理念这三新背景下的素养导向,“4T”指真实问题、真实情境、真实探究、真实生成的真情境项目化课堂,是由学生发现问题、方法、思维,创新的发现者课堂. 展开更多
关键词 一次函数 3N4t 八年级上册 发现者课堂
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运用慢病毒系统构建稳定表达CD19-FLUC-GFP的4T1细胞系
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作者 郭雨洁 程奕宁 +1 位作者 汪洋 刘滨磊 《湖北工业大学学报》 2025年第2期68-72,共5页
为构建稳定表达CD19、萤火虫荧光素酶(FLUC)和绿色荧光蛋白(GFP)的乳腺癌4T1细胞系,以用作CD19嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)的靶细胞模型,通过提取质粒、慢病毒包装及浓缩,感染4T1细胞后,经嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得单克隆稳转细胞株4T... 为构建稳定表达CD19、萤火虫荧光素酶(FLUC)和绿色荧光蛋白(GFP)的乳腺癌4T1细胞系,以用作CD19嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)的靶细胞模型,通过提取质粒、慢病毒包装及浓缩,感染4T1细胞后,经嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得单克隆稳转细胞株4T1-CD19-FLUC-GFP。实时定量PCR和流式细胞术检测显示,4T1-CD19-FLUC-GFP细胞中CD19的mRNA和膜蛋白表达水平显著高于对照组4T1细胞。体内实验中,腋下植瘤4T1-CD19-FLUC-GFP细胞一周后,活体成像仪可检测到腋下部位的荧光信号。结果表明,成功构建了稳定表达CD19-FLUC-GFP的4T1细胞株,为CAR-T细胞抗肿瘤疗效机制研究提供了可靠的靶细胞模型和研究基础。 展开更多
关键词 4t1细胞 慢病毒 CD19 绿色荧光蛋白 萤火虫荧光素酶
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基于PI3K/Akt信号通路探讨连翘归尾煎对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤抑制作用及机制
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作者 陈瑾 雒慧娟 +2 位作者 翟康欣 遆安航 张淑蓉 《山西中医药大学学报》 2025年第6期610-615,共6页
目的:基于PI3K/Akt信号通路研究连翘归尾煎对4T1乳腺癌荷瘤小鼠的影响,探讨连翘归尾煎抗乳腺癌的作用及机制。方法:将小鼠4T1乳腺癌细胞接种于18只BALB/c小鼠建立乳腺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组(生理盐水,灌胃给药)、CTX组(环磷酰胺... 目的:基于PI3K/Akt信号通路研究连翘归尾煎对4T1乳腺癌荷瘤小鼠的影响,探讨连翘归尾煎抗乳腺癌的作用及机制。方法:将小鼠4T1乳腺癌细胞接种于18只BALB/c小鼠建立乳腺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组(生理盐水,灌胃给药)、CTX组(环磷酰胺,20 mg/kg·d,腹腔注射给药)、连翘归尾煎组(8.6 g/kg·d,灌胃给药),每组6只,连续给药14 d,观察小鼠体质量、肿瘤重量、体积的变化,计算肿瘤抑制率;HE染色观察肿瘤组织形态学变化;TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡;Western blot法检测肿瘤组织中PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt表达水平,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9表达水平。结果:与模型组比较,连翘归尾煎组乳腺癌小鼠的肿瘤质量明显降低,肿瘤抑制率为26.67%(P<0.05);HE染色结果显示连翘归尾煎可加重肿瘤组织坏死程度;TUNEL染色结果显示连翘归尾煎可诱导小鼠乳腺癌肿瘤组织细胞凋亡,凋亡率明显增加(P<0.05);Western blot实验结果显示连翘归尾煎可降低p-PI3K、p-Akt蛋白以及凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达量,同时升高Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达量,Bax/Bcl-2显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:连翘归尾煎能有效抑制4T1乳腺癌小鼠移植瘤生长,其作用机制可能是通过PI3K/Akt信号通路,调控相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9的表达水平。 展开更多
关键词 连翘归尾煎 乳腺癌 4t1乳腺癌细胞 PI3K/AKT信号通路 作用机制
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EA4T钢的高温动态软化模型及晶粒演化研究 被引量:4
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作者 张艳 黄光杰 +3 位作者 何杰 王艳阳 汪开忠 王民章 《钢铁研究学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期650-659,共10页
为优化后续热加工工艺,研究EA4T钢的热变形行为及微观组织演变规律。利用热模拟机对EA4T钢进行了单道次等温恒应变速率热压缩实验,变形温度为850~1200℃,应变速率为0.01~10s^(-1),真应变为0.9。结果表明:EA4T钢在低应变速率下(850~1200... 为优化后续热加工工艺,研究EA4T钢的热变形行为及微观组织演变规律。利用热模拟机对EA4T钢进行了单道次等温恒应变速率热压缩实验,变形温度为850~1200℃,应变速率为0.01~10s^(-1),真应变为0.9。结果表明:EA4T钢在低应变速率下(850~1200℃,0.01、0.1s^(-1))和高应变速率(950~1200℃,1s^(-1))、(1050~1200℃,10s^(-1))条件下变形后发生了动态再结晶。动态再结晶可以通过改变微观组织从而决定钢的力学性能。将参数Z与微观组织演变结合,构建了EA4T钢的高温动态软化模型,可调控EA4T钢在热变形过程中发生动态回复、不完全动态再结晶、动态再结晶和晶粒长大的行为。采用电子背散射技术(EBSD)、透射电子显微测试等材料表征技术,分析了EA4T钢在不同变形条件下的动态再结晶晶粒、马氏体束的宽度和板条宽度的多尺度组织特征,建立了马氏体束宽与动态再结晶晶粒和变形参数Z的关系模型。研究结果可为EA4T钢热加工工艺提供理论指导。 展开更多
关键词 EA4t车轴钢 动态软化模型 微观组织 动态再结晶
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丹参酮对乳腺癌4T1细胞增殖、CXCL1表达的影响及对Treg的调节作用
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作者 刘才香 袁银胶 +4 位作者 胡夏荣 罗锐娟 叶永康 黄林旋 郑锐年 《检验医学与临床》 2025年第4期522-525,530,共5页
目的探讨丹参酮对乳腺癌4T1细胞增殖、趋化因子配体1(CXCL1)表达的影响及对调节性T细胞(Treg)的调节作用。方法培养4T1细胞,设置对照组、5μg/mL丹参酮组和10μg/mL丹参酮组,对照组不进行处理,其余组加入相应浓度的药物处理24 h。采用... 目的探讨丹参酮对乳腺癌4T1细胞增殖、趋化因子配体1(CXCL1)表达的影响及对调节性T细胞(Treg)的调节作用。方法培养4T1细胞,设置对照组、5μg/mL丹参酮组和10μg/mL丹参酮组,对照组不进行处理,其余组加入相应浓度的药物处理24 h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测4T1细胞吸光度;采用定量聚合酶链反应及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测4T1细胞中CXCL1 mRNA、蛋白的表达;采用流式细胞术检测原始CD4^(+)T细胞分化为Treg的情况。将10μg/mL丹参酮干预过的Treg,与CD8^(+)T细胞、4T1细胞按照1∶10∶2的比例共培养。采用ELISA试剂盒检测4T1细胞分泌的颗粒酶B、穿孔素水平。结果与对照组相比,5、10μg/mL丹参酮组吸光度,以及CXCL1 mRNA、蛋白表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,5μg/mL和10μg/mL丹参酮组原始CD4+T细胞分化为Treg的比例明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,5μg/mL丹参酮组和10μg/mL丹参酮组CD8^(+)T细胞分泌的颗粒酶B和穿孔素水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丹参酮可抑制乳腺癌4T1细胞的增殖和降低CXCL1 mRNA和蛋白的表达水平,抑制原始CD4^(+)T细胞分化为Treg。此外,丹参酮也可以抑制共培养体系中Treg对CD8^(+)T细胞的免疫抑制功能。 展开更多
关键词 丹参酮 乳腺癌 趋化因子配体 CD4^(+)T细胞 调节性T细胞
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超声滚压EA4T车轴钢疲劳性能及寿命预测 被引量:1
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作者 张继旺 张浩楠 +2 位作者 杨冰 苏凯新 李行 《西南交通大学学报》 EI CSCD 北大核心 2024年第6期1305-1313,共9页
为研究表面超声滚压(SURP)处理对EA4T车轴钢疲劳性能的影响,首先,采用SURP技术对EA4T车轴钢试样进行表面处理,并对处理后的试样进行表面性能测试,分析表面三维形貌、粗糙度、硬度、残余应力、半高宽(FWHM)和晶粒尺寸的变化;然后,采用旋... 为研究表面超声滚压(SURP)处理对EA4T车轴钢疲劳性能的影响,首先,采用SURP技术对EA4T车轴钢试样进行表面处理,并对处理后的试样进行表面性能测试,分析表面三维形貌、粗糙度、硬度、残余应力、半高宽(FWHM)和晶粒尺寸的变化;然后,采用旋转弯曲疲劳试验机对EA4T车轴钢试样进行疲劳试验,获得应力-疲劳寿命(S-N)曲线,并分析裂纹扩展规律,研究SURP处理对EA4T车轴钢疲劳性能和裂纹扩展行为的影响;最后,采用BP(back propagation)神经网络建立了以加载应力幅值、表面粗糙度、表面半高宽、表面硬度、硬化层深度、表面残余应力和残余应力层深度为输入的超声滚压EA4T车轴钢疲劳寿命预测模型,并对超声滚压EA4T车轴钢试样进行寿命预测.研究结果表明:SURP处理可以使试样表面粗糙度降低为0.17μm,并去除表面梨沟形貌;试样表面硬度提升至420 HV,试样表面引入约−500 MPa的残余应力以及约550μm深的残余应力层;研磨试样和研磨抛光试样以及SURP处理试样均具有传统疲劳极限,研磨试样和研磨抛光试样的疲劳性能基本一致,且疲劳极限均为355 MPa,SURP处理试样疲劳性能显著提升,其疲劳极限为455 MPa,相比研磨试样提升了28%;疲劳断口观察表明,所有试样的疲劳裂纹均萌生自表面,SURP处理没有改变试样的疲劳破坏机制;SURP处理使试样的裂纹扩展门槛值从6.29 MPa·m^(1/2)增加到11.21 MPa·m^(1/2),同时减缓了裂纹萌生以及短裂纹扩展,从而显著提高了EA4T车轴钢疲劳性能;超声滚压EA4T车轴钢疲劳寿命预测模型预测精度为88.5%. 展开更多
关键词 EA4t车轴钢 超声滚压 疲劳性能 裂纹扩展门槛值 BP神经网络
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高铁车轴用EA4T钢的高周疲劳破坏行为 被引量:1
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作者 胡芳忠 汪开忠 +3 位作者 惠卫军 张永健 陈世杰 于文坛 《安徽冶金科技职业学院学报》 2024年第4期8-11,19,共5页
采用旋转弯曲疲劳实验和疲劳裂纹扩展实验研究了不同回火温度和取样部位对高铁车轴用EA4T钢疲劳破坏行为的影响。研究结果表明,由于实验钢的淬透性及车轴尺寸的影响,EA4T实验钢制车轴表面的组织为高温回火马氏体加少量贝氏体,而1/2半径... 采用旋转弯曲疲劳实验和疲劳裂纹扩展实验研究了不同回火温度和取样部位对高铁车轴用EA4T钢疲劳破坏行为的影响。研究结果表明,由于实验钢的淬透性及车轴尺寸的影响,EA4T实验钢制车轴表面的组织为高温回火马氏体加少量贝氏体,而1/2半径处的组织则为贝氏体加少量高温回火马氏体。这种组织上的差异导致了拉伸性能和疲劳性能的差异,具体表现为车轴表面附近的强度略高于1/2半径处,且表面附近的疲劳性能优于1/2半径处。此外,降低实验钢的回火温度可以显著提高其强度和疲劳强度,并在一定程度上降低了应力强度因子范围ΔK较低时的裂纹扩展速率。 展开更多
关键词 车轴钢 EA4t 高周疲劳 疲劳裂纹扩展速率 热处理工艺
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氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系对乳腺癌4T1细胞的影响和生物安全性初步评价
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作者 谢黎崖 卓素联 +2 位作者 张真 侯振清 田海娜 《药物生物技术》 CAS 2024年第5期479-483,共5页
文章主要研究氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系(GO-Arg-SL)对乳腺癌4T1细胞的影响,并对其进行生物安全性的初步评价。选择乳腺癌4T1细胞为研究对象,采用激光共聚焦荧光显微镜和流式细胞术观察GO-Arg-SL对4T1细胞产生NO的影响;采用MTT法和活... 文章主要研究氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系(GO-Arg-SL)对乳腺癌4T1细胞的影响,并对其进行生物安全性的初步评价。选择乳腺癌4T1细胞为研究对象,采用激光共聚焦荧光显微镜和流式细胞术观察GO-Arg-SL对4T1细胞产生NO的影响;采用MTT法和活/死细胞染色法,观察4T1细胞的抑制和杀伤情况,评价GO-Arg-SL对4T1细胞的毒性;采用BALB/c小鼠进行生物安全性实验,观察溶血情况,检测血生化和血常规。结果表明,GO-Arg-SL能使4T1细胞内产生大量的NO;GO-Arg-SL能抑制4T1细胞的生长,加激光照射组的抑制和杀伤能力更强;溶血结果符合规定,血生化和血常规维持在正常范围内。说明GO-Arg-SL光热协同NO气体具有优异的细胞杀伤能力,并且具有良好的生物安全性。 展开更多
关键词 氧化石墨烯负载精氨酸纳米体系 4t1细胞 BALB/C小鼠 细胞毒性 活/死细胞染色法 生物安全性
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共载β-榄香烯和纳米氧化石墨烯的可注射型脂质体水凝胶治疗4T1乳腺癌的作用 被引量:1
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作者 王子昂 李一菁 +4 位作者 陈家琦 朱艳慧 王白燕 贾永艳 祝侠丽 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第19期2608-2616,共9页
目的结合808 nm激光照射,探讨共载β-榄香烯(β-elemene,ELE)和甘草次酸修饰纳米氧化石墨烯(glycyrrhetinic acid modified nano graphene oxide,GA/NGO)的可注射型脂质体水凝胶(injectable liposome hydrogels,Lip-gel)用于4T1乳腺癌光... 目的结合808 nm激光照射,探讨共载β-榄香烯(β-elemene,ELE)和甘草次酸修饰纳米氧化石墨烯(glycyrrhetinic acid modified nano graphene oxide,GA/NGO)的可注射型脂质体水凝胶(injectable liposome hydrogels,Lip-gel)用于4T1乳腺癌光热-化协同靶向治疗。方法以4T1乳腺癌细胞为模型,采用MTT、激光共聚焦等技术进行细胞抑制和摄取试验;以4T1雌性BALB/c小鼠为模型,采用红外热成像、活体成像、ELISA等方法评价ELE-GA/NGO-Lip-gel的体内分布和抗肿瘤活性。结果与ELE溶液相比,ELE-GA/NGO-Lip-gel能够显著抑制4T1细胞的增殖(P<0.001),并具有浓度和时间依赖性。经瘤内注射给药后,ELE-GA/NGO-Lip-gel在荷瘤小鼠体内具有良好的光热转换效应,且在肿瘤组织的滞留时间较长。药效学试验中ELE-GA/NGO-Lip-gel组小鼠体质量无明显变化、相对肿瘤体积变化较小,HE和TUNEL病理切片结果显示ELE-GA/NGO-Lip-gel可引起荷瘤小鼠的肿瘤细胞出现大面积凋亡。ELE-GA/NGO-Lip-gel可显著降低荷瘤小鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-6的含量(P<0.001)。结论ELE-GA/NGO-Lip-gel结合近红外光照射后对4T1乳腺癌的体内外抗肿瘤活性增强。 展开更多
关键词 Β-榄香烯 纳米氧化石墨烯 脂质体水凝胶 光热-化治疗 4t1乳腺癌
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基于PiggyBac转座系统构建稳定表达UL19基因的小鼠乳腺癌细胞系4T1 被引量:1
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作者 赵晓彤 王欣雅 +2 位作者 刘滨磊 胡翰 汪洋 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4138-4148,共11页
为研究溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simplex virus type 2,oHSV2)主要衣壳蛋白VP5蛋白(由UL19基因编码)调控免疫细胞抗肿瘤的机制,本研究通过PiggyBac转座系统构建了稳定表达VP5蛋白、近红外荧光蛋白(near-infrared fluoresc... 为研究溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒(oncolytic herpes simplex virus type 2,oHSV2)主要衣壳蛋白VP5蛋白(由UL19基因编码)调控免疫细胞抗肿瘤的机制,本研究通过PiggyBac转座系统构建了稳定表达VP5蛋白、近红外荧光蛋白(near-infrared fluorescent protein,iRFP)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的小鼠乳腺癌细胞4T1-iRFP-VP5-GFP细胞系。通过流式细胞术及免疫印迹法筛选GFP及VP5高表达的单克隆细胞系,检测所构建细胞系中UL19基因表达稳定性。经SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR、免疫印迹法检测,连续传代至15代的4T1-iRFP-VP5-GFP细胞中的UL19基因拷贝数及VP5蛋白表达量均显著高于瞬转UL19基因的4T1细胞,证明UL19基因稳定插入至4T1细胞基因组中。实时无标记动态细胞分析技术(real time cellanalysis,RTCA)监测4T1-iRFP-VP5-GFP细胞显示具有与其亲代细胞4T1相似的生长活性。进一步研究证实,NK92细胞对4T1-iRFP-VP5-GFP细胞的杀伤能力显著高于4T1细胞。本研究为阐述VP5蛋白在4T1细胞中通过HLA-E分子调控包括T细胞、NK细胞在内的免疫细胞发挥抗肿瘤功能奠定了基础。 展开更多
关键词 溶瘤Ⅱ型单纯疱疹病毒 VP5蛋白 PiggyBac转座系统 4t1细胞
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水疱性口炎病毒对小鼠乳腺癌4T1细胞荷瘤小鼠抗肿瘤免疫、移植瘤生长与肺转移的影响
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作者 李玉迁 徐庆胜 +4 位作者 魏洪 王皞 王硕石 蒋立娜 袁心怡 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期452-461,共10页
目的:探究野生型水疱性口炎病毒印第安纳株(VSV-IN)对小鼠三阴性乳腺癌4T1细胞移植模型小鼠的免疫调节及肿瘤转移的影响。方法:VSV以MOI=1、MOI=10、MOI=100感染4T1细胞12、24、48 h后,CCK-8法检测4T1细胞死亡率,划痕愈合实验检测细胞... 目的:探究野生型水疱性口炎病毒印第安纳株(VSV-IN)对小鼠三阴性乳腺癌4T1细胞移植模型小鼠的免疫调节及肿瘤转移的影响。方法:VSV以MOI=1、MOI=10、MOI=100感染4T1细胞12、24、48 h后,CCK-8法检测4T1细胞死亡率,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,qPCR检测细胞中E-cadherin、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达。于雌性BALB/c小鼠脂肪垫接种1×10^(6)个/mL的4T1细胞0.1 mL,构建4T1细胞荷瘤小鼠模型,待小鼠肿瘤体积达200 mm3,分别向移植瘤内注射PBS、紫杉醇(TAX)(15 mg/kg)、VSV-IN(1×10^(6)pfu/只),每周1次。给药4次后,处死小鼠、剥离完整移植瘤组织,测量肿瘤体积及质量,肺组织病理切片经H-E染色后观察肿瘤肺部转移结节,流式细胞术检测脾组织中T细胞亚群比例,ELISA法检测小鼠血清IL-6及TNF-α水平,利用GEPIA在线分析乳腺肿中迁移相关蛋白mRNA的表达,免疫组化法检测肿瘤中MMP-2、MMP-9与E-cadherin的表达,利用蛋白-蛋白对接技术预测VSV-IN的G蛋白、M蛋白与ERK2、E-cadherin的亲和力。结果:经MOI=10、100的VSV-IN处理48 h后,4T1细胞死亡率显著高于对照组(均P<0.01);与对照组相比,VSV-IN组(MOI=10)细胞迁移率明显降低(P<0.01),MMP-9 mRNA的相对表达量明显降低(P<0.05);与对照组小鼠相比,VSV-IN组移植瘤生长较对照组减缓且终点体积显著减小(P<0.05),VSV-IN组小鼠肺转移结节数量显著减少[(12.86±1.86)vs(24±3.67)个,P<0.01],脾内CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞比例显著升高(均P<0.05),血清TNF-α、IL-6含量显著升高(均P<0.01);GEPIA分析发现在乳腺癌中E-cadherin、MMP-9表达水平均高于癌旁组织(P<0.05);VSV-IN组小鼠肿瘤细胞内MMP-9表达明显低于对照组(P<0.05);VSV-IN的G、M蛋白与ERK2的结合自由能分别为–11.7 kcal/mol、–6.4 kcal/mol。结论:野生型VSV-IN可抑制4T1细胞荷瘤小鼠的移植瘤生长及转移,这可能与其促进抗肿瘤免疫及调控迁移相关蛋白表达有关。 展开更多
关键词 野生型水疱性口炎病毒 三阴性乳腺癌 4t1细胞 迁移 蛋白-蛋白对接
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国产EA4T钢车轴调质热处理工艺的制定
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作者 靳炜 朱小超 梁博 《机械工程材料》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期44-49,共6页
选择规格ϕ280 mm的国产EA4T钢大尺寸毛坯作为等效车轴,对其进行900℃×5 h水淬以及不同温度(595,610,650℃)保温6 h水冷回火的调质热处理预试验,对车轴表层、1/2半径处和心部的显微组织和力学性能进行分析,获得合适的调质热处理工艺... 选择规格ϕ280 mm的国产EA4T钢大尺寸毛坯作为等效车轴,对其进行900℃×5 h水淬以及不同温度(595,610,650℃)保温6 h水冷回火的调质热处理预试验,对车轴表层、1/2半径处和心部的显微组织和力学性能进行分析,获得合适的调质热处理工艺,并应用于国产ϕ256 mm EA4T钢车轴的现场验证。结果表明:595℃水冷回火后等效车轴不同位置以及610℃水冷回火后表层的抗拉强度均略高于EN 13261:2009标准要求,650℃水冷回火后的强度、断后伸长率、断面收缩率以及纵向与横向冲击韧性均符合EN 13261:2009标准要求,组织也基本为回火马氏体/贝氏体。确定EA4T车轴钢的调质热处理工艺为900℃×5 h水淬和650℃×6 h水冷回火。采用上述工艺对ϕ256 mm EA4T钢车轴进行热处理后,其表层、1/2半径处和心部的力学性能和显微组织均符合EN 13261:2009标准要求,不同位置取样拉伸后均发生韧性断裂,断口均由纤维区和剪切唇组成,纤维区呈韧窝形貌。 展开更多
关键词 EA4t钢车轴 调质热处理 显微组织 力学性能
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基于mRNA高通量测序初探雷帕霉素联合鞭毛蛋白体外抑制4T1乳腺癌细胞的机制
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作者 方云 陈曦 +4 位作者 张景 罗力 陈瑶 谭聪研 袁军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1629-1634,共6页
目的:利用mRNA高通量测序初步探讨雷帕霉素(Rapa)联合鞭毛蛋白(FliC)体外抑制4T1乳腺癌细胞的机制。方法:将4T1乳腺癌细胞分为对照(control)组、Rapa组、FliC组、Rapa+FliC组等4组,CCK-8法与流式细胞术检测细胞活力、凋亡的变化情况。同... 目的:利用mRNA高通量测序初步探讨雷帕霉素(Rapa)联合鞭毛蛋白(FliC)体外抑制4T1乳腺癌细胞的机制。方法:将4T1乳腺癌细胞分为对照(control)组、Rapa组、FliC组、Rapa+FliC组等4组,CCK-8法与流式细胞术检测细胞活力、凋亡的变化情况。同时,通过mRNA高通量测序,对差异表达基因(DEGs)进行KEGG通路分析;此外,通过STRING分析Rapa+FliC组与Rapa组两组间的DEGs,构建DEGs的蛋白相互作用(PPI)网络、筛选Hub基因。结果:CCK-8和流式细胞术检测结果显示,Rapa+FliC对4T1乳腺癌细胞的活力抑制率和凋亡率都显著高于Rapa和FliC(P<0.05)。转录组测序结果显示,Rapa组和control组之间共有579个DEGs,主要富集于PI3K/Akt等信号通路;FliC组和control组之间的DEGs主要富集于Nod样受体等信号通路;Rapa+FliC组与Rapa组之间共有150个DEGs,主要富集于mTOR等信号通路。从PPI网络中,成功筛选出Atm、Itga2等10个Hub基因。结论:Rapa+FliC可能通过PI3K/Akt/mTOR信号通路,在体外抑制4T1乳腺癌细胞活力,促进细胞凋亡;Atm和Itga2基因可能是两者联合作用的关键基因。 展开更多
关键词 mRNA高通量测序 4t1乳腺癌细胞 雷帕霉素 鞭毛蛋白
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