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C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化
1
作者 买热艳木·肉孜 汪红平 +5 位作者 张翠平 夏娟 申甜 雷涛 鲁郡 高洁 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第19期4867-4872,共6页
背景:脂肪细胞分化是一个复杂的生物学过程,涉及前脂肪细胞向成熟脂肪细胞的转化,这一过程在肥胖和相关代谢性疾病的发生发展中发挥关键作用。近年来,C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白家族作为脂肪因子新成员,已成为代谢调控领域的研究热点。目... 背景:脂肪细胞分化是一个复杂的生物学过程,涉及前脂肪细胞向成熟脂肪细胞的转化,这一过程在肥胖和相关代谢性疾病的发生发展中发挥关键作用。近年来,C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白家族作为脂肪因子新成员,已成为代谢调控领域的研究热点。目的:探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用及机制。方法:采用CCK-8法测定不同质量浓度C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4对3T3-L1前脂肪细胞活性的影响,选择安全浓度进行干预。将3T3-L1前脂肪细胞分为对照组、诱导剂组、 C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4组,首先将3T3-L1前脂肪细胞进行接触抑制2 d,随后加入成脂诱导剂和C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4处理。分化第10天,采用油红O染色观察脂滴形成程度,采用RT-qPCR和Western blot检测CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4基因的mRNA和蛋白表达水平,采用甘油三酯和总胆固醇检测试剂盒测定细胞内甘油三酯和总胆固醇水平。结果与结论:C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4对3T3-L1前脂肪细胞无毒性作用的最高安全质量浓度为1 000 ng/mL。与对照组相比,诱导剂组细胞内脂滴形成增加,甘油三酯和总胆固醇水平升高(P<0.05),CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。与诱导剂组相比,C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4组细胞内脂滴形成减少,甘油三酯和总胆固醇水平降低(P<0.05);CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4的mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结果表明,C1q肿瘤坏死因子相关蛋白4能抑制前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,作用机制可能与下调CCAAT/增强子结合蛋白α、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、脂肪酸结合蛋白4的表达有关。 展开更多
关键词 CTRP4 脂肪分化 3t3-L1前脂肪细胞 肥胖 脂肪生成 代谢紊乱 脂质积累 代谢失衡
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NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系的稳定建立及其在体外培养B细胞中的应用
2
作者 韩玉洁 梁思辛 +8 位作者 郑瑞 董昊 赵晓娟 王鹏举 李琰龙 杨建勋 杨安钢 阎博 左百乐 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期180-185,共6页
目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表... 目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表达,ELISA检测IL-2、IL-4、IL-21分泌水平,并对其作为饲养细胞与B细胞在体外共培养16 d,显微镜观察B细胞增殖情况,ELISA检测IgG分泌水平。结果:成功构建了NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系,该细胞系能够稳定表达CD40L、BAFF,分泌高水平的IL-2、IL-4、IL-21,与B细胞体外共培养16 d能够支持低密度B细胞高效扩增,并诱导B细胞分化为浆细胞,且其抗体分泌量高达517 ng/mL。结论:本研究成功构建了能够支持B细胞体外增殖与活化的饲养细胞系,为单克隆抗体制备奠定了良好基础。 展开更多
关键词 饲养细胞 CD40L BAFF NIH3t3细胞 体外培养
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灯盏花乙素通过调控cAMP/PKA/CREB信号通路促进3T3-L1细胞脂肪分解的作用研究
3
作者 陈延绅 方晨曦 +1 位作者 田冲冲 张琦 《海南医科大学学报》 北大核心 2026年第3期199-206,共8页
目的:从体外探究灯盏花乙素(scutellarin,SCU)对3T3‑L1细胞脂解的作用及可能的分子机制,为代谢综合征的治疗提供借鉴。方法:将3T3‑L1细胞诱导为成熟脂肪细胞,分别采用CCK‑8法检测SCU对3T3‑L1细胞活力的影响;分析细胞的脂质积累水平并检... 目的:从体外探究灯盏花乙素(scutellarin,SCU)对3T3‑L1细胞脂解的作用及可能的分子机制,为代谢综合征的治疗提供借鉴。方法:将3T3‑L1细胞诱导为成熟脂肪细胞,分别采用CCK‑8法检测SCU对3T3‑L1细胞活力的影响;分析细胞的脂质积累水平并检测细胞中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)的含量;ELISA法检测细胞上清中炎症因子(TNF‑α、IL‑1β、IL‑4和IL‑6)含量;实时荧光定量PCR检测UCP-1、Dio2和Pgc-1αmRNA的表达;Western blot法检测CREB、HSL与ATGL蛋白的表达。结果:SCU对脂肪细胞活力无明显影响,但可明显抑制3T3‑L1细胞中脂质积累,降低细胞中TC与TG含量及上清液中TNF‑α、IL‑1β含量,升高上清液中IL‑4和IL‑6的含量,升高细胞中UCP-1、Dio2、Pgc-1αmRNA的表达,上调细胞中p‑HSL、ATGL、p‑CERB和p‑PKA蛋白的表达(P<0.05)。结论:SCU可减轻脂肪炎症反应、促进3T3‑L1脂肪细胞的脂质分解,抑制TG合成和脂质积累,其作用机制与激活cAMP/PKA/CERB信号通路有关,从而为SCU抗代谢综合征作用的开发提供了必要的借鉴。 展开更多
关键词 灯盏花乙素 3t3‑L1细胞 脂解 cAMP/PKA/CERB通路
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3T理论视域下中美大学生创新创业培养的比较及启示
4
作者 李辉 周雅如 《河南师范大学学报(哲学社会科学版)》 北大核心 2025年第3期142-148,F0002,共8页
高校承载着建立创新型国家、培育符合国家战略人才需求的重要使命。3T理论表明,技术、人才和包容是检视创新创业水平的重要维度。作为中美两国在大学生创新创业培养方面的典型代表,清华大学和加州大学伯克利分校皆取得了独特成就。技术... 高校承载着建立创新型国家、培育符合国家战略人才需求的重要使命。3T理论表明,技术、人才和包容是检视创新创业水平的重要维度。作为中美两国在大学生创新创业培养方面的典型代表,清华大学和加州大学伯克利分校皆取得了独特成就。技术维度上,美国更侧重技术市场转化与商业价值的实现,而中国着力于前沿技术研发与基础积累;人才维度上,美国形成了学界-产业界-校友三维联动的导师网络,中国主要依托校企协同育人的服务机制,打造师资团队;包容维度上,美国凭借成熟风险投资体系提供资金保障,中国则通过政府引导与政策支持构建创业生态系统。对于中国而言,应结合创新创业人才培养的现状,持续落实培养目标。利用现有资源不断丰富师资教学力量,紧扣创业步骤稳步推进课程体系实践,针对创业环节全面优化服务机制,基于“四元”文化涵养创业立体生态。 展开更多
关键词 大学生 创新创业 3t理论 人才培养
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骨疏康对MC3T3-E1细胞成骨分化及大鼠磨牙压低牙根吸收作用影响的研究
5
作者 万哲 杜军 肖朋 《新疆医科大学学报》 2025年第9期1292-1298,共7页
目的探讨骨疏康对MC3T3-E1细胞分化及大鼠磨牙压低牙根吸收的调控作用及内在机制。方法取6只大鼠分别于早晚灌胃骨疏康(0.26 g/kg),持续7 d,末次灌胃结束2 h内腹主动脉取血制备含药血清。采用细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK8... 目的探讨骨疏康对MC3T3-E1细胞分化及大鼠磨牙压低牙根吸收的调控作用及内在机制。方法取6只大鼠分别于早晚灌胃骨疏康(0.26 g/kg),持续7 d,末次灌胃结束2 h内腹主动脉取血制备含药血清。采用细胞计数试剂盒-8(Cell counting kit-8,CCK8)法检测骨疏康含药血清对小鼠颅顶前骨细胞(MC3T3-E1细胞)的增殖活性。将细胞分为对照组、骨疏康含药血清组(10%骨疏康含药血清培养24 h)和骨疏康含药血清+MSAB组(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂,10%骨疏康含药血清和5μmol/L MSAB培养24 h),采用碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红S(Alizarin red S,ARS)染色观察细胞成骨分化能力;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、无翅型MMTV整合位点家族成员3A(Wnt family member 3A,Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白表达。取12只大鼠建立磨牙压低模型,将建模成功大鼠随机分为模型组和骨疏康组(骨疏康,2.1 g/kg,每天1次,连续4 w),每组6只,另取6只未建模大鼠为正常组;采用Western blot法检测磨牙组织Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平。结果CCK8结果显示,与对照组相比,骨疏康含药血清组的细胞增殖活性升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,骨疏康含药血清组ALP活性、ALP和ARS染色强度升高,Runx2、BMP2、Wnt3a和β-catenin的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与骨疏康含药血清组相比,骨疏康含药血清+MSAB组ALP活性、ALP染色强度降低,Runx2和BMP2的蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。动物实验结果显示,与正常组相比,模型组磨牙组织中Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,骨疏康组磨牙组织中Runx2、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨疏康通过介导Wnt/β-catenin通路促进MC3T3-E1细胞及大鼠磨牙组织的成骨分化。 展开更多
关键词 骨疏康 成骨分化 MC3t3-E1细胞 信号通路
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红景天苷促进MC3T3-E1细胞成骨分化能力的体外实验 被引量：4
6
作者 刘朝辉 韩晓谦 +2 位作者 段昕 郭鹏达 张云涛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期231-237,共7页
背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因... 背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因和蛋白表达的影响。方法:采用CCK-8实验和碱性磷酸酶实验筛选红景天苷(0.5,1,5,10,50μmol/L)促进MC3T3-E1细胞增殖和分化的最佳浓度。实验分为4组:对照组、红景天苷组、红景天苷+LY294002组、LY294002组,分别用成骨诱导液、含10μmol/L红景天苷、10μmol/L红景天苷+10μmol/L LY294002、10μmol/L LY294002的成骨诱导液进行培养,观察红景天苷及PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对成骨相关基因和蛋白表达的影响。结果与结论:①CCK-8实验和碱性磷酸酶实验显示:红景天苷促进MC3T3-E1细胞增殖的作用在10μmol/L时最显著;②与对照组相比,红景天苷可以促进矿化、促进细胞黏附、减少细胞死亡,提高Runx-2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达(P<0.01),提高Runx-2和p-Akt蛋白表达(P<0.01);而添加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002则可逆转以上结果;③结果表明,红景天苷能促进MC3T3-E1细胞矿化,并能促进成骨相关基因、蛋白的表达,这可能与PI3K/Akt信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 红景天苷 MC3t3-E1细胞 细胞分化 成骨 矿化 LY294002 PI3K/AKT信号通路
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黄芪甲苷可缓解MC3T3-E1细胞氧化应激损伤并促进成骨 被引量：7
7
作者 张加豪 李嘉程 +3 位作者 温明韬 郭艳波 骆帝 李刚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第17期3529-3536,共8页
背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的... 背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的作用。方法:将MC3T3-E1细胞分4组培养:对照组加入完全培养基,模型组加入含过氧化氢的完全培养基干预24 h后更换为完全培养基,黄芪甲苷组加入含过氧化氢、黄芪甲苷的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷的完全培养基,抑制剂组加入含过氧化氢、黄芪甲苷、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)抑制剂的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷、ERK抑制剂的完全培养基。过氧化氢干预48 h后,通过丙二醛含量检测黄芪甲苷对MC3T3-E1细胞氧化应激的缓解作用;过氧化氢干预48 h后进行成骨诱导培养,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色验证MC3T3-E1细胞成骨及矿化能力,通过RT-qPCR检测成骨相关基因的表达,Western blot检测成骨相关蛋白及ERK/腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路蛋白的表达。结果与结论:(1)模型组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均少于对照组(P<0.05),黄芪甲苷组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均多于模型组(P<0.05)。(2)与对照组比较,模型组细胞内丙二醛含量增加(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05),AMPK mRNA与p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,黄芪甲苷组细胞内丙二醛含量减少(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05),ERK1/2、AMPK mRNA表达升高(P<0.05),p-AMPK、p-ERK1/2蛋白表达均升高(P<0.05);ERK抑制剂可部分抑制黄芪甲苷的上述作用。(3)结果表明,黄芪甲苷可通过激活ERK/AMPK信号通路促进氧化应激条件下MC3T3-E1细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 骨质疏松症 MC3t3-E1细胞 氧化应激 ERK/AMPK信号通路 成骨 工程化骨材料
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环状RNA mmu_circ_0000818在地塞米松导致的MC3T3-E1细胞凋亡中的作用及机制 被引量：1
8
作者 杨慧霞 丁宁 +5 位作者 马润秋 李桂忠 郝银菊 马胜超 姜怡邓 白志刚 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第4期478-489,共12页
目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dex... 目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dexamethasone(DEX)组;(2)采用Western blot检测各组细胞BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达,TUNEL染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;(3)提取正常和DEX处理的MC3T3-E1细胞RNA,进行RNA测序,筛选出差异表达的circRNAs,并通过GO和KEGG分析其功能;(4)筛选出差异表达的mmu_circ_0000818并进行细胞水平验证以及UCSC Genome Browser Gateway和circbase网站分析mmu_circ_0000818在染色体的位置和保守性;(5)构建mmu_circ_0000818过表达质粒及小干扰RNA(siRNA)并转染细胞,流式细胞术检测各组MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果(1)与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞凋亡升高(P<0.01);(2)根据log2foldchange(≥2)和P值(P<0.05)筛选差异表达的circRNAs,与Control组相比,DEX组中共有234个表达差异的circRNAs,其中上调的138个,下调的96个。差异表达circRNAs的靶基因利用GO和KEGG进行富集分析,Apoptosis(凋亡)和PI3K-Akt signaling pathway(磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路)差异最显著。(3)qRT-PCR结果显示,与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞中mmu_circ_0000818表达明显升高(P<0.01),UCSC Genome Browser Gateway和circbase分析发现mmu_circ_0000818主要位于17:78712463-78715086,由Crim1基因第6~7外显子环化形成并且在不同物种间具有高的保守性。(4)流式细胞术结果提示抑制mmu_circ_0000818可改善DEX引起的MC3T3-E1细胞凋亡,过表达则促进其凋亡。结论mmu_circ_0000818在DEX处理的MC3T3-E1细胞中显著增高,降低其可抑制DEX引起的细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA mmu_circ_0000818 地塞米松 MC3t3-E1细胞 RNA测序 凋亡
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川续断皂苷Ⅵ促进低氧环境下MC3T3-E1细胞的成骨分化 被引量：2
9
作者 李蕴喆 牛泽蕃 +3 位作者 王紫瑈 艾崇毅 陈刚 王新兴 《中国组织工程研究》 北大核心 2025年第35期7481-7489,共9页
背景:川续断皂苷Ⅵ具有良好的促成骨作用,但其在低氧环境下促进细胞成骨的作用尚不明确。目的:探讨川续断皂苷Ⅵ在低氧环境下对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响及作用机制。方法:将MC3T3-E1细胞分为3组,对照组细胞在常氧条件下(体积分数21%O... 背景:川续断皂苷Ⅵ具有良好的促成骨作用,但其在低氧环境下促进细胞成骨的作用尚不明确。目的:探讨川续断皂苷Ⅵ在低氧环境下对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响及作用机制。方法:将MC3T3-E1细胞分为3组,对照组细胞在常氧条件下(体积分数21%O_(2))用完全培养基培养,低氧组细胞在低氧条件下(体积分数0.5%O_(2))用完全培养基培养,川续断皂苷Ⅵ组细胞在低氧条件下(体积分数0.5%O_(2))用含有川续断皂苷Ⅵ的完全培养基培养。24 h后,采用CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖活性,TUNEL染色法和Western blot实验检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞内活性氧水平和细胞周期分布。另外,各组细胞在低氧条件下分别用含1×10^(-5),1×10^(-6),1×10^(-7)mol/L川续断皂苷Ⅵ的成骨诱导液培养7 d,通过光学显微镜观察和碱性磷酸酶染色筛选川续断皂苷Ⅵ最适浓度,采用Western blot方法检测骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、PI3K/AKT信号轴相关蛋白表达。结果与结论:①与对照组相比,低氧条件下MC3T3-E1细胞增殖能力下降,1×10^(-6)mol/L川续断皂苷Ⅵ可以显著提高低氧状态下细胞增殖能力,并且减少细胞凋亡;②与低氧组相比,川续断皂苷Ⅵ组细胞内活性氧减少,进入S期细胞比例明显增多;③与低氧组相比,1×10^(-6)mol/L川续断皂苷Ⅵ组细胞形态舒展,较多突起,碱性磷酸酶染色较深;④与低氧组相比,川续断皂苷Ⅵ组骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白表达增加,p-PI3K、p-AKT蛋白表达降低。结果表明,低氧环境下川续断皂苷Ⅵ可能通过调节PI3K/AKT通路促进MC3T3-E1细胞成骨分化。 展开更多
关键词 MC3t3-E1细胞 低氧 川续断皂苷Ⅵ PI3K AKT 通路 细胞分化 成骨
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淫羊藿苷调控LAP自噬促进酒精抑制的MC3T3-E1细胞成骨分化 被引量：2
10
作者 曾麒 陈跃平 +2 位作者 宋世雷 赖渝 吴华华 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第3期590-599,共10页
研究细胞自噬在MC3T3-E1细胞成骨诱导(生理)、酒精(alcohol,AL)干预(病理)分化过程中的影响机制,以及淫羊藿苷(icariin,ICA)对AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞成骨分化的作用机制。成骨矿化结节染色鉴定该细胞可分化为成骨细胞。CCK-8实... 研究细胞自噬在MC3T3-E1细胞成骨诱导(生理)、酒精(alcohol,AL)干预(病理)分化过程中的影响机制,以及淫羊藿苷(icariin,ICA)对AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞成骨分化的作用机制。成骨矿化结节染色鉴定该细胞可分化为成骨细胞。CCK-8实验筛选合适的AL和ICA浓度后,实验分为7组:完全培养基(complete medium,CM)组,成骨诱导培养基(osteogenic induction medium,OIM)组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-8)mol·L^(-1)ICA组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-7)mol·L^(-1)ICA组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-6)mol·L^(-1)ICA组,OIM+0.25 mol·L^(-1)AL+1×10^(-5)mol·L^(-1)ICA组,培养7 d。碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP相对面积,Western blot、RT-qPCR检测成骨、自噬相关蛋白及mRNA表达情况,活性氧(reactive oxygen species,ROS)染色检测ROS水平,细胞凋亡线粒体膜电位实验检测细胞凋亡情况。结果显示,ICA可上调AL干预后下调的ALP相对面积;AL下调成骨相关蛋白Wnt家族成员1(Wnt family member 1 gene,Wnt1)及成骨相关基因Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)、核心结合因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、ALP的表达水平,抑制细胞成骨分化,ICA可上调AL抑制的成骨相关蛋白及mRNA的表达水平,促进细胞成骨分化;AL抑制典型自噬,ICA调控Rubicon抑制LC3相关吞噬作用(LC3-associated phagocytosis,LAP)促进典型自噬;ICA下调AL诱导后上升的ROS水平;ICA下调AL干预后导致的成骨细胞凋亡。综上,ICA可调控Rubicon抑制LAP促进典型自噬,清除ROS减少细胞凋亡,最终通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进AL干预病理状态下MC3T3-E1细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 酒精 成骨细胞 MC3t3-E1细胞 Wnt1/β-catenin通路 成骨分化 骨代谢失衡 自噬 LAP
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EPA/DHA干预的C2C12肌管细胞对3T3-L1脂肪细胞脂质代谢的作用 被引量：1
11
作者 杨娴 曾欢婷 +1 位作者 毛联智 毛丽梅 《营养学报》 北大核心 2025年第1期60-67,共8页
目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预... 目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预结束后,撤掉干预液,将干预后的肌管细胞在transwell小室中与成熟的脂肪细胞共培养24h。用油红O定量脂肪细胞内的脂质蓄积情况,用PCR法测定脂肪细胞的脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,Atgl)、激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,Hsl)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ的共激活物1α(PPARG coactivator 1 alpha,Pgc-1α)、解偶联蛋白-1(uncoupling protein-1,Ucp-1)和固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,Srebp-1c)基因mRNA表达水平,用Western blot检测脂肪细胞腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine5’-monophosphate(AMP)-activatedproteinkinase,AMPK)与信号转导和转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路的蛋白表达。结果经100、200、400μmol/L EPA干预的肌管细胞可以显著降低脂肪细胞的脂质蓄积(P<0.05或P<0.001),而DHA干预后的肌管细胞则没有显著的改善脂质蓄积的作用;经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著上调脂肪细胞脂肪分解基因Atgl和Hsl的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂质氧化基因Ucp-1和Pgc-1α的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提升脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.05或P<0.01),而一定浓度DHA干预的肌管细胞则是可以显著降低脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.01);经所有浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-STAT3/STAT3的比值(P<0.01),对p-AMPK/AMPK比值变化的影响则没有显著性;经200、400μmol/L DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-AMPK/AMPK的比值(P<0.01),但是p-STAT3/STAT3比值的变化没有显著性意义。结论EPA和DHA在适宜浓度均可以促进肌管细胞提高脂肪细胞的脂质分解和脂质氧化,EPA干预的肌管细胞还可以一定程度提高脂质合成,DHA干预的肌管细胞可以一定程度降低脂质合成;EPA干预后的肌管细胞可能通过STAT3通路改善脂质代谢,DHA干预后的肌管细胞可能通过AMPK通路改善脂质代谢。 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸 C2C12肌管细胞 3t3-L1脂肪细胞 脂质代谢 STAT3/AMPK信号通路 细胞共培养
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白叶1号发酵茶复配养生茶调节3T3-L1细胞脂质代谢的作用 被引量：1
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作者 朱天乐 盛思杰 +4 位作者 徐铃琳 吴媛媛 刘仲华 王凯茜 屠幼英 《中国茶叶》 2025年第1期50-57,共8页
随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L... 随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L1细胞诱导为成熟脂肪细胞后,通过测定油红O染色面积、脂肪和甘油三酯(TG)含量来判断养生茶对脂质形成的抑制作用。结果显示,在200~500μg/mL范围内,随着养生茶质量浓度的升高,3T3-L1前脂肪细胞的油红O染色面积下降,表明养生茶具有降脂功效。当茶样质量浓度为300、400、500μg/mL时,与模型组相比,细胞脂肪含量分别降低了22.64、23.17、30.63个百分点,降脂效果优于阳性药物辛伐他丁。此外,养生茶可以显著减少细胞中的TG含量,具有剂量依赖效应。当养生茶质量浓度为500μg/mL时,细胞内TG含量最低,与模型组相比降低了89.33%。通过茶饮代谢物与3T3-L1细胞脂肪指标的相关性分析发现,该养生茶中多种成分与3T3-L1细胞的脂质代谢物呈强相关关系。本研究可为开发具有降脂功能的新式茶饮产品提供科学依据。 展开更多
关键词 发酵白化茶 枸杞 山楂 3t3-L1前脂肪细胞 调节脂肪代谢 功效成分
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717解毒合剂含药血清调控ECM重塑对蝮蛇毒诱导的NIH/3T3细胞损伤的修复作用
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作者 李玉梅 钱嘉铭 +3 位作者 易军 严张仁 王万春 董德刚 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第10期1679-1690,共12页
目的探讨717解毒合剂含药血清通过调控细胞外基质(ECM)重塑对蝮蛇毒诱导NIH/3T3细胞损伤的修复作用及其相关机制。方法将NIH/3T3细胞分为对照组及蝮蛇毒组及717解毒合剂含药血清低、高剂量组,显微镜下观察各组细胞的形态和黏附情况,分... 目的探讨717解毒合剂含药血清通过调控细胞外基质(ECM)重塑对蝮蛇毒诱导NIH/3T3细胞损伤的修复作用及其相关机制。方法将NIH/3T3细胞分为对照组及蝮蛇毒组及717解毒合剂含药血清低、高剂量组,显微镜下观察各组细胞的形态和黏附情况,分别采用CCK-8法、划痕实验、流式细胞术检测细胞的增殖、迁移和凋亡,ELISA法检测细胞上清中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1、TIMP-2、转化生长因子(TGF)-β1、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)等ECM相关酶和细胞因子的表达,RT-qPCR法检测细胞MMPs和TIMPs的mRNA表达,免疫荧光法检测Ⅰ型胶原(COL1)、Ⅳ型胶原(COL4)、纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)等ECM蛋白表达。结果与对照组比较,蝮蛇毒组细胞收缩、群落塌陷,增殖及迁移能力下降(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01),COL1、COL4、FN、LN等蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),MMP-2、MMP-9蛋白和mRNA表达上调(P<0.01),TIMP-2蛋白和mRNA表达下调(P<0.01),α-SMA蛋白和TIMP-1 mRNA表达上调(P<0.05,P<0.01),TIMP-1和TGF-β1蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05);与蝮蛇毒组比较,717解毒合剂含药血清组细胞形态恢复、聚集良好,增殖、迁移能力提高(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01),COL1、COL4、LN等蛋白表达升高(P<0.01),MMP-2、MMP-9的蛋白和mRNA及TIMP-1 mRNA表达下调(P<0.05,P<0.01),TIMP-2蛋白和mRNA表达上调(P<0.05,P<0.01),α-SMA和TGF-β1蛋白表达进一步上调(P<0.01)。结论717解毒合剂含药血清可修复蝮蛇毒诱导的NIH/3T3细胞损伤,促进ECM重塑,其机制可能与恢复MMPs/TIMPs表达平衡,促进α-SMA和TGF-β1表达有关。 展开更多
关键词 717解毒合剂 蝮蛇毒 NIH/3t3细胞 细胞外基质 基质金属蛋白酶 细胞损伤 细胞修复
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基于3T1R并联机构的酒盒底座清废机构设计及运动学分析 被引量：2
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作者 李嘉欣 李瑞琴 +2 位作者 宁峰平 李航 张磊 《机械设计与制造工程》 2025年第2期13-18,共6页
人机协同酒盒生产线中有多道人工作业工序,针对其中的酒盒底座清废工序,在分析人工执行动作的基础上提出了一种3-RRPaR/RSS三移一转并联机构,以实现该工位的自动化。基于螺旋理论分析得出该机构具有3T1R自由度;利用空间坐标变换法建立... 人机协同酒盒生产线中有多道人工作业工序,针对其中的酒盒底座清废工序,在分析人工执行动作的基础上提出了一种3-RRPaR/RSS三移一转并联机构,以实现该工位的自动化。基于螺旋理论分析得出该机构具有3T1R自由度;利用空间坐标变换法建立位置方程,求出位置逆解;采用边界数值搜索法求解出机构的工作空间,工作空间光滑连续且无空腔。应用结果表明,该并联机构可以满足酒盒底座清废作业需求,提高了酒盒生产线自动化水平。 展开更多
关键词 酒盒底座 清废 3t1R并联机构 运动学分析
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支链氨基酸通过Stat3通路双向调控3T3-L1前脂肪细胞分化
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作者 蔡兴华 高洁 +5 位作者 徐媛颖 张会会 买热艳木·肉孜 沙雯君 鲁郡 雷涛 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第3期494-501,共8页
目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油... 目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油红O染色观察各组脂肪细胞脂滴形成情况;酶法检测细胞内三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量;RT-qPCR和Western blot检测Stat3和脂肪细胞分化相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示,当BCAA浓度≤10 mmol/L时,3T3-L1细胞的存活率不受BCAA的影响。与DM组相比,低浓度BCAA组(0.5、1.0 mmol/L)细胞内脂滴明显增大、脂滴数目明显增加,且细胞内TC(0.88 vs 0.68 mmol/g;0.83 vs 0.68 mmol/g,P<0.01)和TG水平(0.77 vs 0.40 mmol/g;0.62 vs 0.40 mmol/g,P<0.01)明显上升;而高浓度BCAA组(5.0、10.0 mmol/l)细胞分化较DM组明显下降。RT-qPCR和Western blot检测显示低浓度BCAA组PPARγ、C/EBPα、Adiponectin、FABP4的mRNA和蛋白表达均明显上升,而高浓度BCAA组上述基因表达均明显下降(P<0.01)。此外,低浓度BCAA促进Stat3磷酸化水平,而高浓度BCAA抑制其磷酸化水平(P<0.01)。结论 BCAA通过Stat3双向调控前脂肪细胞脂肪分化,即低浓度BCAA可通过促进Stat3磷酸化水平诱导其向成熟脂肪细胞分化;而高浓度BCAA则抑制Stat3磷酸化及细胞分化。 展开更多
关键词 BCAA 3t3-L1 脂肪细胞分化 STAT3 脂肪生成 肥胖
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中药活性成分基于3T3-L1细胞系模型干预肥胖及相关脂质代谢疾病的分子机制研究进展 被引量：1
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作者 陆佳雯 朱国琴 高崎 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第4期1860-1867,共8页
黄酮类、萜类、生物碱类等中药活性成分具有干预肥胖的潜力,对体外3T3-L1细胞模型调节脂质代谢作用主要通过调控脂肪细胞自噬与凋亡、诱导脂肪细胞褐变、抑制成脂分化、抑制脂质积累、促进脂肪分解、参与胰岛素及其他细胞因子调节;并从c... 黄酮类、萜类、生物碱类等中药活性成分具有干预肥胖的潜力,对体外3T3-L1细胞模型调节脂质代谢作用主要通过调控脂肪细胞自噬与凋亡、诱导脂肪细胞褐变、抑制成脂分化、抑制脂质积累、促进脂肪分解、参与胰岛素及其他细胞因子调节;并从cAMP/PKA、AMPK、MAPK、Wnt/β-catenin、JAK/STAT3及PI3K/Akt信号转导通路探讨了中药活性成分基于3T3-L1细胞系模型干预肥胖及相关脂质代谢疾病的分子机制,以期为中药活性成分脂质调控的科学应用提供理论依据。 展开更多
关键词 3t3-L1细胞系 肥胖 中药活性成分 脂质代谢 分子机制
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藏红花素水凝胶对软骨细胞与MC3T3-E1细胞的影响 被引量：1
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作者 尹航 宋奎 《中国组织工程研究》 北大核心 2025年第34期7293-7300,共8页
背景:研究发现,藏红花素可抑制骨关节炎软骨细胞的凋亡、减轻骨关节炎大鼠炎症反应,促进骨质疏松大鼠骨形成并抑制骨丢失,在软骨与骨损伤中具有巨大的应用潜力。目的:观察藏红花素水凝胶对软骨细胞、MC3T3-E1细胞的影响。方法:将不同浓... 背景:研究发现,藏红花素可抑制骨关节炎软骨细胞的凋亡、减轻骨关节炎大鼠炎症反应,促进骨质疏松大鼠骨形成并抑制骨丢失,在软骨与骨损伤中具有巨大的应用潜力。目的:观察藏红花素水凝胶对软骨细胞、MC3T3-E1细胞的影响。方法:将不同浓度(0,15,20,25 mmol/L)的藏红花素溶液分别加入氧化透明质酸-氧化硫酸软骨素-Ⅱ型胶原混合溶液中,采用席夫碱交联方式制备藏红花素水凝胶,随后制备4种水凝胶浸提液。将4种藏红花素水凝胶浸提液分别与人软骨细胞共培养,检测细胞糖胺聚糖合成,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞迁移,RT-qPCR检测细胞SOX9、Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA表达。将4种藏红花素水凝胶浸提液分别与MC3T3-E1细胞共培养,CCK-8法检测细胞增殖,RT-qPCR检测成骨诱导分化后细胞RUNX2、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、骨钙素mRNA表达,成骨诱导分化后的碱性磷酸酶活性与矿化结节形成。结果与结论:①CCK-8检测结果显示,15,20 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液促进软骨细胞的增殖,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液抑制软骨细胞的增殖。15,20,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液均可促进软骨细胞的迁移,提升软骨细胞SOX9、Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA表达与糖胺聚糖合成,并且呈现剂量依赖性。②15,20,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液均可促进MC3T3-E1细胞的增殖,提高成骨诱导分化后细胞RUNX2、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、骨钙素mRNA表达,并且具有剂量依赖性。15,20,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液可提高成骨诱导分化后MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶活性与矿化结节形成,其中以20 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液的提高效果最显著。③结果表明,藏红花素水凝胶可促进软骨细胞的增殖、迁移及软骨细胞外基质的合成,促进MC3T3-E1细胞的增殖与成骨分化,其中20 mmol/L藏红花素水凝胶的综合效果较好。 展开更多
关键词 藏红花素 水凝胶 软骨细胞 MC3t3-E1细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞分化 工程化软骨材料
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基于有氧糖酵解探究补骨生髓方含药血清通过介导HIF-1α促进MC3T3-E1细胞成骨分化的作用
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作者 尹煜辉 李琰 +4 位作者 齐保玉 刘平 朱立国 刘宁 魏戌 《湖南中医药大学学报》 2025年第5期818-824,共7页
目的 探讨补骨生髓方(BGSSD)含药血清通过缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)介导MC3T3-E1细胞有氧糖酵解过程对成骨分化的影响。方法 选取18只SD大鼠随机分为含药血清组和空白血清组,各9只。含药血清组按生药量5.87 g/(kg·d)给予BGSSD药... 目的 探讨补骨生髓方(BGSSD)含药血清通过缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)介导MC3T3-E1细胞有氧糖酵解过程对成骨分化的影响。方法 选取18只SD大鼠随机分为含药血清组和空白血清组,各9只。含药血清组按生药量5.87 g/(kg·d)给予BGSSD药液灌胃,空白血清组给予20 mL/(kg·d)蒸馏水灌胃,连续灌胃9次后收集腹主动脉血液,获取BGSSD含药血清和空白血清。将MC3T3-E1细胞分为空白血清组、含药血清组和有氧糖酵解抑制剂组,并将HIF-1α慢病毒转染稳定的MC3T3-E1细胞作为SiRNA HIF-1α组。空白血清组加入含20%空白血清的α-MEM培养基,含药血清组和SiRNA HIF-1α组均加入含20%BGSSD含药血清的α-MEM培养基,有氧糖酵解抑制剂组加入含20%BGSSD含药血清和8 mmol/L抑制剂2-脱氧葡萄糖的α-MEM培养基。采用碱性磷酸酶(ALP)染色法观察4组培养7 d后的黑色沉淀物情况;ELISA检测培养48 h后细胞上清液中ALP和丙酮酸(PA)、乳酸(LA)的含量;qRT-PCR和Western blot检测培养48 h后细胞HIF-1α、Runt相关转录因子2(RUNX2)、丙酮酸脱氢酶激酶1(PDK1)mRNA相对表达水平和蛋白表达量。结果 与空白血清组比较,含药血清组的黑色沉淀物明显增加、颜色加深,ALP、LA、PA含量均升高(P<0.05),PDK1、RUNX2、HIF-1α mRNA相对表达水平和蛋白表达量均升高(P<0.05)。与含药血清组比较,SiRNA HIF-1α组和有氧糖酵解抑制剂组的黑色沉淀物减少、颜色变浅,ALP、LA及PA含量均降低(P<0.05),PDK1、RUNX2的mRNA相对表达水平和蛋白表达量均降低(P<0.05);SiRNA HIF-1α组HIF-1α的mRNA相对表达水平和蛋白表达量降低(P<0.05)。结论 BGSSD可能通过HIF-1α介导有氧糖酵解促进MC3T3-E1细胞成骨分化,其作用机制可能与调控HIF-1α/PDK1通路相关。 展开更多
关键词 骨质疏松症 补骨生髓方 有氧糖酵解 MC3t3-E1细胞 骨形成
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加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢及PI3K/Akt/FOXO1信号通路的影响
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作者 张凯茵 姚凤云 +6 位作者 韩瑶瑶 姜劼琳 王琳 李雯 杨红芳 张桓源 崔言坤 《中成药》 北大核心 2025年第10期3242-3248,共7页
目的探讨不同剂量加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞分化及PI3K/Akt/FOXO1糖脂代谢通路的影响。方法CCK-8法筛选加味温胆汤含药血清浓度。将从3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成的3T3-L1脂肪细胞分为空白组、模型组、罗格列酮组(10 mg/L)和加味温胆... 目的探讨不同剂量加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞分化及PI3K/Akt/FOXO1糖脂代谢通路的影响。方法CCK-8法筛选加味温胆汤含药血清浓度。将从3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成的3T3-L1脂肪细胞分为空白组、模型组、罗格列酮组(10 mg/L)和加味温胆汤低、中、高剂量组(5%、10%、20%),给予不同浓度血清干预48 h后收集样本。油红O染色检测脂质积累,葡萄糖氧化酶(GOD)法检测细胞葡萄糖消耗量,RT-qPCR法检测细胞IRS-1、PI3K、Akt、GLUT4、IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达,Western blot法检测细胞INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、FOXO1、GLUT4蛋白表达。结果不同浓度加味温胆汤含药血清干预3T3-L1前脂肪细胞24、48、72 h后,对细胞活性无显著影响(P>0.05)。3T3-L1前脂肪细胞可在14 d内诱导为成熟脂肪细胞。与模型组比较,加味温胆汤各剂量组脂肪细胞脂质积累减少,IRS-1、IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达降低(P<0.01);加味温胆汤低剂量组PI3K、GLUT4 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、GLUT4蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);加味温胆汤中剂量组GLUT4 mRNA表达升高(P<0.01),INSR、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05);加味温胆汤高剂量组干预24 h后,脂肪细胞葡萄糖消耗量增加(P<0.01),INSR、Akt、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论加味温胆汤可减少脂肪细胞脂质积累,激活PI3K/Akt/FOXO1信号通路,调节糖脂代谢,促进脂肪细胞代谢稳态。 展开更多
关键词 加味温胆汤 3t3-L1脂肪细胞 肥胖 糖脂代谢 PI3K/Akt/FOXO1信号通路
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基于UPLC-Q TOF-MS/MS探究泽泻醇G对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质代谢的影响
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作者 苏代丰 张鸿燕 +5 位作者 周洁 林亚娟 郭琳娟 曾雪锦 陈全成 张伟云 《药物分析杂志》 北大核心 2025年第8期1347-1359,共13页
目的:探讨泽泻醇G(alisol G,AC)对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质代谢的影响。方法:使用胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、地塞米松联合诱导的方法,建立3T3-L1前脂肪细胞分化为模型,加入AG介导后,采用油红O染色法对细胞脂质累积进行分析... 目的:探讨泽泻醇G(alisol G,AC)对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质代谢的影响。方法:使用胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、地塞米松联合诱导的方法,建立3T3-L1前脂肪细胞分化为模型,加入AG介导后,采用油红O染色法对细胞脂质累积进行分析,测定细胞内相对脂质、甘油三酯(TG)总胆固醇(TC)的含量,并采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q TOF-MS/MS)技术分析脂质组的变化及脂质代谢通路的影响。结果:5 mol·L^(-1)和10 mol·L^(-1) AG显著地降低了3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的TG、TC含量(P<0.01)。经细胞脂质组学分析后,筛选到的差异脂质代谢物主要为脂肪酸(FA)类和甘油磷脂(GP)类物质,KEGG富集分析发现AG主要通过不饱和脂肪酸的合成、糖基磷脂酰肌醇锚定生物合成、甘油磷脂代谢等代谢通路影响3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的脂质代谢。结论:AG在一定程度上抑制了3T3-L1前脂肪细胞分化,说明AG有改善脂质代谢紊乱的潜力。脂质组学结果表明,AG可以调节脂肪细胞FA、GP类代谢物的水平,从而改善脂肪分化过程中脂质代谢异常的状态。 展开更多
关键词 泽泻醇G 脂质代谢紊乱 3t3-L1前脂肪细胞分化 脂质组学 超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱
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