目的通过分析原发性卵巢肿瘤及其对应网膜转移灶的基因表达谱,识别卵巢癌转移的驱动因素,探讨其生物学功能及潜在的调控机制。方法对基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)的卵巢癌与大网膜转移组织配对转录组数据集(GSE178...目的通过分析原发性卵巢肿瘤及其对应网膜转移灶的基因表达谱,识别卵巢癌转移的驱动因素,探讨其生物学功能及潜在的调控机制。方法对基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)的卵巢癌与大网膜转移组织配对转录组数据集(GSE178913和GSE222982)进行差异表达分析,以筛选共有差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),随后进行通路富集分析。候选基因的表达模式及预后价值进一步在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)队列中进行评估。免疫组化验证分化簇36蛋白(cluster of differentiation 36,CD36)在配对原发灶及转移灶中的表达。通过质粒转染或慢病毒感染技术,在A2780细胞中沉默CD36,并在OVCAR-3细胞中过表达该基因。划痕和Transwell实验评估细胞迁移与侵袭能力。共表达分析、蛋白互作网络及转录因子预测结果共同表明信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号与CD36表达可能存在关联。为证实这一关联,采用STAT3抑制剂Stattic与CD36重新表达技术,在体外实验及卵巢癌腹膜转移小鼠模型中确定是否能部分挽救转移相关表型。结果卵巢癌原位灶与匹配大网膜转移灶的共有DEGs主要富集于脂质代谢相关PPAR信号通路,关键分子CD36的表达升高(P<0.05)。CD36高表达为预后不良的独立危险因素(HR=2.066,95%CI:1.414~3.035,P<0.001)。敲低CD36可抑制A2780细胞侵袭与迁移(均P<0.01),过表达CD36可促进OVCAR-3细胞侵袭与迁移(均P<0.05)。STAT3可能是CD36的上游调控因子。A2780细胞经Stattic处理后,CD36表达下调且细胞迁移和侵袭能力降低(均P<0.01),而同时过表达CD36后可逆转部分表型(均P<0.01)。体内实验显示抑制STAT3可减少小鼠腹腔转移结节和腹腔积液(均P<0.05)。结论CD36是潜在的促进卵巢癌转移的重要因子,STAT3可能参与调控CD36表达并影响转移相关表型,STAT3/CD36相关通路可能成为潜在干预靶点。展开更多
文摘目的通过分析原发性卵巢肿瘤及其对应网膜转移灶的基因表达谱,识别卵巢癌转移的驱动因素,探讨其生物学功能及潜在的调控机制。方法对基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)的卵巢癌与大网膜转移组织配对转录组数据集(GSE178913和GSE222982)进行差异表达分析,以筛选共有差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),随后进行通路富集分析。候选基因的表达模式及预后价值进一步在癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)队列中进行评估。免疫组化验证分化簇36蛋白(cluster of differentiation 36,CD36)在配对原发灶及转移灶中的表达。通过质粒转染或慢病毒感染技术,在A2780细胞中沉默CD36,并在OVCAR-3细胞中过表达该基因。划痕和Transwell实验评估细胞迁移与侵袭能力。共表达分析、蛋白互作网络及转录因子预测结果共同表明信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)信号与CD36表达可能存在关联。为证实这一关联,采用STAT3抑制剂Stattic与CD36重新表达技术,在体外实验及卵巢癌腹膜转移小鼠模型中确定是否能部分挽救转移相关表型。结果卵巢癌原位灶与匹配大网膜转移灶的共有DEGs主要富集于脂质代谢相关PPAR信号通路,关键分子CD36的表达升高(P<0.05)。CD36高表达为预后不良的独立危险因素(HR=2.066,95%CI:1.414~3.035,P<0.001)。敲低CD36可抑制A2780细胞侵袭与迁移(均P<0.01),过表达CD36可促进OVCAR-3细胞侵袭与迁移(均P<0.05)。STAT3可能是CD36的上游调控因子。A2780细胞经Stattic处理后,CD36表达下调且细胞迁移和侵袭能力降低(均P<0.01),而同时过表达CD36后可逆转部分表型(均P<0.01)。体内实验显示抑制STAT3可减少小鼠腹腔转移结节和腹腔积液(均P<0.05)。结论CD36是潜在的促进卵巢癌转移的重要因子,STAT3可能参与调控CD36表达并影响转移相关表型,STAT3/CD36相关通路可能成为潜在干预靶点。
