诺如病毒是严重危害人类健康的重要食源性病原。作者应用3’RACE(rapid amplification of cDNA 3’ends)技术对一株诺如病毒分离株的基因组3’末端进行扩增,并对其核苷酸序列进行比较分析,从而可为该病的分子生物学检测提供阳性物质,并...诺如病毒是严重危害人类健康的重要食源性病原。作者应用3’RACE(rapid amplification of cDNA 3’ends)技术对一株诺如病毒分离株的基因组3’末端进行扩增,并对其核苷酸序列进行比较分析,从而可为该病的分子生物学检测提供阳性物质,并从分子水平上推测该病的来源。经过提取病毒总RNA、以3’RACE锚定引物进行反转录、用特异引物进行3’RACE,琼脂糖凝胶电泳检测结果表明成功扩增了诺如病毒基因组约3282 bp的基因片段,测序及序列BLAST分析证实该分离株属GⅡ-4型,与日本分离株同源。3’RACE扩增序列为诺如病毒的实验室检测及深入研究奠定了基础。展开更多
本研究利用3'-RACE技术从百脉根中克隆了一个钙调素基因(Lj Ca M4),并利用荧光定量PCR技术对该基因在根、茎、叶、花和豆荚中的相对表达量进行了分析。结果显示,扩增得到642 bp的片段,开放阅读框为453 bp,3'非翻译区(3'-UTR...本研究利用3'-RACE技术从百脉根中克隆了一个钙调素基因(Lj Ca M4),并利用荧光定量PCR技术对该基因在根、茎、叶、花和豆荚中的相对表达量进行了分析。结果显示,扩增得到642 bp的片段,开放阅读框为453 bp,3'非翻译区(3'-UTR)长189 bp,编码150个氨基酸,分子量约为17.13 k D,理论等电点为4.03。多序列比对显示Lj Ca M4与其它植物中的Ca Ms有较高的保守性,与蒺藜苜蓿的同源性高达91%。Lj Ca M4m RNA在百脉根各组织中均有分布,其中在根中表达量最高,依次为根>茎>叶>豆荚>花。本研究成功克隆并鉴定了百脉根Lj Ca M4基因,初步检测了该基因在百脉根各组织器官中的表达差异,为进一步探明该基因可能的生物学功能提供了一定的理论依据。展开更多
文摘本研究利用3'-RACE技术从百脉根中克隆了一个钙调素基因(Lj Ca M4),并利用荧光定量PCR技术对该基因在根、茎、叶、花和豆荚中的相对表达量进行了分析。结果显示,扩增得到642 bp的片段,开放阅读框为453 bp,3'非翻译区(3'-UTR)长189 bp,编码150个氨基酸,分子量约为17.13 k D,理论等电点为4.03。多序列比对显示Lj Ca M4与其它植物中的Ca Ms有较高的保守性,与蒺藜苜蓿的同源性高达91%。Lj Ca M4m RNA在百脉根各组织中均有分布,其中在根中表达量最高,依次为根>茎>叶>豆荚>花。本研究成功克隆并鉴定了百脉根Lj Ca M4基因,初步检测了该基因在百脉根各组织器官中的表达差异,为进一步探明该基因可能的生物学功能提供了一定的理论依据。
