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小鼠抗西方马脑炎病毒E2蛋白胞外区(E2ecto)单克隆抗体的制备
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作者 武福星 董阳超 +6 位作者 张剑 薛潘 袁若栋 陈洋 元航 李宝莉 雷迎峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期62-68,共7页
目的制备针对西方马脑炎病毒(WEEV)E2包膜糖蛋白胞外区(E2ecto)的小鼠特异性单克隆抗体(mAb)。方法构建表达WEEV E2ecto的原核表达质粒pET-28a-WEEV E2ecto,转化BL21(DE3)感受态细胞后,IPTG诱导表达,主要为包涵体形式。包涵体纯化后,通... 目的制备针对西方马脑炎病毒(WEEV)E2包膜糖蛋白胞外区(E2ecto)的小鼠特异性单克隆抗体(mAb)。方法构建表达WEEV E2ecto的原核表达质粒pET-28a-WEEV E2ecto,转化BL21(DE3)感受态细胞后,IPTG诱导表达,主要为包涵体形式。包涵体纯化后,通过变性、复性、超滤等制备得到E2ecto蛋白;以QuickAntibody-Mouse5W为佐剂,将E2ecto蛋白肌肉免疫BALB/c小鼠,间隔21 d加强1次。免疫后35 d,取效价超过1×104的小鼠腹腔接种1次E2ecto蛋白,3 d后取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合。通过有限稀释法筛选稳定分泌特异性mAb的杂交瘤细胞,接种小鼠腹腔后制备腹水;利用ELISA检测抗体亚型及腹水中抗体效价的水平;将真核表达质粒pCAGGS-WEEV-CE3E2E1转染BHK-21细胞,通过免疫荧光法(IFA)鉴定上述mAb的生物学活性;利用东方马脑炎病毒(EEEV)、委内瑞拉马脑炎病毒(VEEV)的E2ecto蛋白进行ELISA鉴定上述抗体的特异性。结果成功表达及复性获得了纯化的WEEV E2ecto蛋白;制备了3G6G10、3D7G2、3B9E8、3D5B7四株mAb,其亚型分别为IgG2c(κ)、IgM(κ)、IgM(κ)、IgG1(κ);3G6G10、3B9E8、3D7G2腹水抗体效价均为105,3D5B7达到107;该4株抗体与VEEV和EEEV等其他脑炎甲病毒无交叉反应。结论成功制备了4株特异性结合WEEVE2ecto的小鼠mAb。 展开更多
关键词 西方马脑炎病毒(WEEV) E2包膜糖蛋白胞外区(E2ecto) 原核表达 单克隆抗体(mAb)
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极化(e,2e)碰撞电离的研究进展 被引量:2
2
作者 尚仁成 庞文宁 马骏 《物理学进展》 CSCD 北大核心 1998年第4期369-382,共14页
传统(e,2e)谱学已成为研究原子和分子电子结构和电离机制的强有力工具之一,本文首先简要回顾了迄今国内外传统(e,2e)谱学研究的历史和现状。然后,再重点介绍近几年开展极化(e,2e)碰撞电离研究的进展。
关键词 (e 2e)谱学 自旋 原子结构 碰撞 分子结构
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细胞色素P450 2E1的研究进展 被引量:2
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作者 武淑琴 王成双 +1 位作者 王新 李鹏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期165-170,共6页
细胞色素P450 2E1(CYP2E1)是机体对药物和低分子化合物代谢的主要酶之一,且CYP2E1的活性增强或高表达与临床多种疾病密切相关。文章综述了国内外CYP2E1的蛋白结构、功能、定位机制及基因多态性等方面的研究进展。从而为进一步探索机体内... 细胞色素P450 2E1(CYP2E1)是机体对药物和低分子化合物代谢的主要酶之一,且CYP2E1的活性增强或高表达与临床多种疾病密切相关。文章综述了国内外CYP2E1的蛋白结构、功能、定位机制及基因多态性等方面的研究进展。从而为进一步探索机体内CYP2E1的生物学效应及其与临床疾病的相关性奠定基础。 展开更多
关键词 细胞色素P450 2e1(CYP2e1) 蛋白结构 功能 基因多态性 肝脏毒性
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中国对外贸易的影响因素分析——基于E2C/E2P/I2C/NI2P/NI2E核算数据的实证研究 被引量:3
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作者 杨俊玲 林季红 《国际经贸探索》 CSSCI 北大核心 2016年第1期18-36,共19页
文章根据Richard Baldwin(2014)提出的对以全球生产网络为主导的国际贸易的最新核算方式,并对其进行改进和拓展,将中国的对外贸易划分为NI2P、NI2E、I2C和E2P、E2C,采用WIOD提供的数据对我国对外贸易进行重新核算;进一步利用扩展的引力... 文章根据Richard Baldwin(2014)提出的对以全球生产网络为主导的国际贸易的最新核算方式,并对其进行改进和拓展,将中国的对外贸易划分为NI2P、NI2E、I2C和E2P、E2C,采用WIOD提供的数据对我国对外贸易进行重新核算;进一步利用扩展的引力模型,分别对中国各细分贸易的影响因素进行详细地实证分析,从而有针对性地提出促进我国对外贸易健康发展的政策建议。 展开更多
关键词 对外贸易 影响因素 E2C/E2P/I2C/NI2P/NI2e 引力模型
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(e,2e)反应研究的意义及进展
5
作者 吴兴举 《皖西学院学报》 2005年第5期12-15,共4页
本文从动力学和结构学两方面简单介绍了(e,2e)反应研究的意义及进展,并对(e,2e)谱仪的发展作了简单的介绍。
关键词 (E 2e)反应 原子分子结构 (e 2e)谱仪
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Formation of (2E)-4-Hydroxy-2-nonenal and (2E)-4-Hydroxy-2-hexenal by Plant Enzymes: A Review Suggests a Role in the Physiology of Plants
6
作者 Harold W. Gardner 《Advances in Enzyme Research》 CAS 2016年第2期56-61,共6页
It is demonstrated that (3Z)-nonenal (NON) and (3Z)-hexenal (HEX) are oxidized in a cascade by lipoxygenase (LOX) and hydroperoxide peroxygenase (HP peroxygenase) into (2E)-4-hydroxy-2- nonenal (HNE) and (2E)-4-hydrox... It is demonstrated that (3Z)-nonenal (NON) and (3Z)-hexenal (HEX) are oxidized in a cascade by lipoxygenase (LOX) and hydroperoxide peroxygenase (HP peroxygenase) into (2E)-4-hydroxy-2- nonenal (HNE) and (2E)-4-hydroxy-2-hexenal (HHE), respectively. In turn, HNE inactivates LOX terminating the cascade. The hydroxy-alkenals produced serve to inhibit plant pathogens, which initiated the cascade. In addition to LOX, other unknown oxygenases may be involved in the cascade. 展开更多
关键词 (3Z)-Nonenal (3Z)-Hexenal (2e)-4-Hydroxy-2-nonenal (2e)-4-Hydroxy-2-hexenal (2e)-4-Hydroperoxy-2-hexenal LIPOXYGENASE Hydroperoxide Peroxygenase Hydroperoxide Lyase (2e)-4-Hydroperoxy-2-Nonenal 3 4-Epoxynonanal (2e)-4-Oxo-2-nonenal Glycine max Vica faba Plant Pathogen
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(2E,4E)-N-(2-氨基乙基-5-(苯并[d][1,3][二氧杂环戊烯]-5基)戊-2,4-二烯酰胺的合成及其降血脂作用
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作者 吐尔孙拜克·叶尔达 纳森巴特 赵静 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1811-1818,共8页
以金属钠为催化剂,加热回流合成(2E,4E)-N-(2-氨基乙基-5-(苯并[d][1. 3][二氧杂环戊烯]-5基)戊-2,4-二烯酰胺(C14H16N2O3,胡椒酸乙二胺,EPA),利用XRD、IR、1H、13C NMR对产物结构进行了表征和确认。以EPA的产率为指标,研究其最佳合成... 以金属钠为催化剂,加热回流合成(2E,4E)-N-(2-氨基乙基-5-(苯并[d][1. 3][二氧杂环戊烯]-5基)戊-2,4-二烯酰胺(C14H16N2O3,胡椒酸乙二胺,EPA),利用XRD、IR、1H、13C NMR对产物结构进行了表征和确认。以EPA的产率为指标,研究其最佳合成工艺参数。实验结果表明:当催化剂用量为1. 0 g(通氮气保护),加热回流温度65~70oC,反应时间45~48 h,为较好的合成工艺条件,EPA的合成收率达62. 93%以上,论文研究结果可为工业化生产提供设计依据。同时,EPA能显著降低高脂血症大鼠的血清TC、TG和LDL-C水平,且呈剂量依赖性; 2. 5 mg/kg剂量时显著升高HDL-C水平;并能显著升高高脂血症大鼠血清SOD和GSH-PX活力降低MDA含量。由此可知,降血脂作用与传统降血脂药物辛伐他汀相比,以降LDL-C作用更为明显。EPA具有一定的辅助降血脂功能及抗氧化作用。 展开更多
关键词 (2e 4E)-N-(2-氨基乙基-5-(苯并[d][1 3][二氧杂环戊烯]-5基)戊-2 4-二烯酰胺 合成 高脂血症大鼠模型 降血脂
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银杏叶提取物抑制人胶质瘤细胞系U87增殖和迁移
8
作者 马悦 黄从刚 +2 位作者 王远 徐文青 罗志华 《基础医学与临床》 2025年第9期1144-1150,共7页
目的探究银杏叶提取物(GBE)对人胶质瘤细胞系增殖和迁移的影响。方法体外培养胶质瘤细胞系U87,分别采用0、10、50、100μg/mL的银杏叶提取物干预培养。通过5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EDU)实验检测各组细胞增殖活性;划痕实验检测各组细胞迁... 目的探究银杏叶提取物(GBE)对人胶质瘤细胞系增殖和迁移的影响。方法体外培养胶质瘤细胞系U87,分别采用0、10、50、100μg/mL的银杏叶提取物干预培养。通过5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(EDU)实验检测各组细胞增殖活性;划痕实验检测各组细胞迁移活性;Transwell小室法检测各组细胞侵袭活性;Western blot检测各组上皮细胞-间质转化(EMT)相关蛋白质、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路蛋白和E2F转录因子1(E2F1)蛋白表达水平。加入PI3K/AKT通路激活剂740 Y-P进行回复实验。结果10、50、100μg/mL的银杏叶提取物均显著抑制了U87细胞增殖(P<0.05)、迁移和侵袭活性(P<0.05),细胞内vimentin、N-cadherin、p-PI3K、p-AKT、E2F1蛋白水平均显著降低(P<0.05),而E-cadherin、ZO-1蛋白水平均显著升高(P<0.05)。加入740 Y-P后,银杏叶提取物对U87细胞增殖和转移的抑制作用减弱(P<0.05),细胞内vimentin、N-cadherin、p-PI3K、p-AKT、E2F1蛋白水平均有所升高(P<0.05),而E-cadherin、ZO-1蛋白水平均有所降低(P<0.05)。结论银杏叶提取物可以抑制U87细胞增殖、转移和EMT,这可能与PI3K/AKT/E2F1通路相关。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 胶质瘤 PI3K/AKT通路 E2F转录因子1(E2F1)
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膀胱癌细胞高表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)通过上调CD24抑制NK细胞的杀伤 被引量:1
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作者 姚田军 周幸春 +2 位作者 杨帆 刘静 张波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期333-341,共9页
目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流... 目的 探讨膀胱癌细胞过表达E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a)后是否影响自然杀伤(NK)细胞的活化及杀伤并探讨其具体机制。方法 利用慢病毒载体构建E2F3a稳定过表达的人及小鼠膀胱癌细胞株并将其与NK细胞共孵育,乳酸脱氢酶释放实验及流式细胞术检测NK细胞活化及杀伤能力的变化。转录组测序分析膀胱癌细胞E2F3a过表达组与对照组之间的基因表达差异,免疫组织化学染色法检测膀胱癌组织中E2F3a与差异基因在蛋白水平上表达的相关性。进一步利用染色质免疫沉淀(ChIP)、实时定量PCR、 Western blot法及小干扰RNA(siRNA)等方法探索膀胱癌细胞过表达E2F3a后对NK细胞活化及杀伤影响的具体机制。结果 在膀胱癌细胞中过表达E2F3a能显著抑制NK细胞的活化及杀伤。膀胱癌细胞过表达E2F3a可显著上调CD24基因的表达,膀胱癌组织中E2F3a和CD24蛋白的表达呈显著正相关。CHIP结果显示,E2F3a能够结合CD24的启动子区并促进CD24基因的转录。干涉E2F3a过表达膀胱癌细胞中的CD24表达后,发现膀胱癌细胞E2F3a过表达所介导的NK细胞活化及杀伤抑制被显著缓解。结论 在膀胱癌细胞中E2F3a可结合CD24的启动子区促进CD24基因的转录及CD24蛋白的表达。膀胱癌细胞E2F3a通过上调CD24表达来抑制NK细胞的活化及杀伤。 展开更多
关键词 膀胱癌 E2因子转录因子家族成员3a(E2F3a) 自然杀伤(NK)细胞 CD24 免疫抑制
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日光温室黄瓜发育过程中主要芳香物质和脂肪酸含量的变化 被引量:6
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作者 徐坤范 王明林 艾希珍 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期390-396,共7页
以新泰密刺为试验材料,比较分析了日光温室条件下,不同月份黄瓜商品成熟果实及其发育过程中的主要芳香物质及亚麻酸、亚油酸含量差异.结果显示:(1)黄瓜果实中挥发性物质主要有2E,6Z-壬二烯醛、2E-壬烯醛、2E-己烯醛、2,6-壬二烯醇、正... 以新泰密刺为试验材料,比较分析了日光温室条件下,不同月份黄瓜商品成熟果实及其发育过程中的主要芳香物质及亚麻酸、亚油酸含量差异.结果显示:(1)黄瓜果实中挥发性物质主要有2E,6Z-壬二烯醛、2E-壬烯醛、2E-己烯醛、2,6-壬二烯醇、正己醛、戊醛、2-戊烯醛和3,6-壬二烯醇.其中2E,6Z-壬二烯醛相对含量以5月份最高,1月份其次,11月份最低;具有黄瓜香气的2,6-壬二烯醇和3,6-壬二烯醇,以及与黄瓜风味品质密切相关的2E,6Z-壬二烯醛/2E-壬烯醛比值以1月份最高,5月份其次,11月份最低.(2)1月份黄瓜果实的亚麻酸和亚油酸含量显著大于5月份,说明低温弱光有利于不饱和脂肪酸的形成和积累.(3)随着果实发育天数的增加,黄瓜2E,6Z-壬二烯醛、2,6-壬二烯醇和3,6-壬二烯醇相对含量,2E,6Z-壬二烯醛/2E-壬烯醛比值均较大幅度升高,商品成熟期达到高峰,若延迟采收,上述指标多趋于下降;2E-壬烯醛、2E-己烯醛、正己醛、戊醛等的相对含量多随果实发育而降低,商品成熟期2E-壬烯醛、2E-己烯醛和正己醛降到最低,之后快速升高.研究表明,果实发育过程中亚麻酸和亚油酸含量及二者的比例与2E,6Z-壬二烯醛和2E-壬烯醛相对含量及其比值的变化规律基本相似,说明黄瓜风味品质与其亚麻酸和亚油酸含量有一定相关性. 展开更多
关键词 2e 6Z-壬二烯醛 2e-壬烯醛 亚麻酸 亚油酸 黄瓜
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贸易伙伴与我国全要素生产率变动——基于I2C、NI2P、NI2E和E2C、E2P细分贸易数据的实证分析 被引量:3
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作者 林季红 杨俊玲 《国际贸易问题》 CSSCI 北大核心 2015年第11期83-95,共13页
本文在借鉴国外学者最新贸易划分方式的基础上,运用动态面板模型,实证分析了贸易伙伴国与我国全要素生产率变动之间的关系。研究发现:在所有类型的贸易中,并非所有类型的贸易增长都能带来技术溢出效应和学习效应。其中E2P贸易和NI2P贸... 本文在借鉴国外学者最新贸易划分方式的基础上,运用动态面板模型,实证分析了贸易伙伴国与我国全要素生产率变动之间的关系。研究发现:在所有类型的贸易中,并非所有类型的贸易增长都能带来技术溢出效应和学习效应。其中E2P贸易和NI2P贸易未起到带动我国全要素生产率增长的效应,这与我国粗放型的经济增长方式和外贸发展方式密切相关;发达贸易伙伴并未完全起到技术进步的带动作用,其细分贸易中的E2P贸易和NI2P贸易存在显著的负向效应;不发达贸易伙伴国的NI2E贸易对我国全要素生产率的提高具有一定的促进作用。 展开更多
关键词 贸易伙伴 贸易 全要素生产率 I2C/NI2P/NI2e/E2C/E2P
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通用H5N1亚型禽流感病毒样颗粒疫苗的制备 被引量:1
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作者 刘静 任志广 +6 位作者 王铁成 李元果 孙伟洋 冯娜 秦川 高玉伟 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第7期755-760,共6页
目的高致病性H5N1亚型流感病毒可感染人,并不断衍生出多个新的基因谱系,存在着大规模流行的可能性。我国现有的商品化疫苗无法对不同谱系的H5N1流感病毒感染提供有效的保护。病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗具有良好的免疫... 目的高致病性H5N1亚型流感病毒可感染人,并不断衍生出多个新的基因谱系,存在着大规模流行的可能性。我国现有的商品化疫苗无法对不同谱系的H5N1流感病毒感染提供有效的保护。病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)疫苗具有良好的免疫原性和安全性,成为近年研究的热点。本研究旨在建立H5亚型禽流感病毒通用型病毒样颗粒疫苗的制备方法。 方法将优化的H5N1A/meerkat/Shanghai/SH-1/2012(clade 2.3.2.1)亚型流感病毒的HLHA(HA stem)/5M2e(5个M2e)/HL5M2e(5M2e替代HA的头部嵌入HLHA)、NP基因和M1基因分别插入pFast-BacDual载体,得到相应的重组供体。然后将重组供体转化至含Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,获得含有目的基因的重组杆粒。 结果酶切和PCR鉴定表明成功构建了含目的基因的重组杆粒Bacmid-(HLHA/5M2e/HL5M2e、NP、M1)。将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,IFA试验和Western blot试验皆证实,优化的HLHA(HA stem)/5M2e/HL5M2e、NP基因和M1基因编码的蛋白均获得表达。透射电子显微镜观察VLPs转染Sf9细胞上清的浓缩液中,有球形结构和100nm左右典型VLPs存在。 结论在Sf9昆虫杆状病毒表达系统中成功表达H5N1A/meerkat/Shanghai/SH-1/2012(clade 2.3.2.1)亚型禽流感病毒的HLHA(HA stem)/5M2e/HL5M2e、NP和M1蛋白,并组装成3种VLPs,为进一步研究流感病毒的VLPs疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 流感病毒 基因优化 HLHA(HA stem)/5M2e/HL5M2e NP M1 病毒样颗粒
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浸润性膀胱癌组织中E2F3表达与CD8^+ T细胞浸润数量的相关性分析 被引量:4
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作者 王程远 许志斌 +3 位作者 李伟 焦勇 王江平 张波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,共8页
目的探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8^+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8^+T细胞... 目的探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8^+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8^+T细胞浸润特征,Western blot法检测82例膀胱癌组织及相应正常膀胱组织中E2F3、CD8蛋白水平,直线相关分析方法分析E2F3表达与CD8^+T细胞浸润的相关性。结果膀胱癌组织中E2F3高表达,膀胱癌组织中E2F3表达随肿瘤分期、分级增加逐步增高,而相应肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目逐步减少,E2F3高表达组肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目显著低于E2F3低表达组。E2F3阳性率及CD8^+T细胞的浸润数量减少与肿瘤病理分期、分级、肿瘤大小、伴有淋巴结转移或远处转移等肿瘤临床侵袭性指标密切相关。相关性分析显示肿瘤E2F3表达水平与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数目呈负相关。生存分析表明E2F3高表达患者术后5年预后更差。结论膀胱癌组织中E2F3水平与肿瘤侵袭性关系密切,与肿瘤内CD8^+T细胞浸润数量呈负相关。 展开更多
关键词 浸润性膀胱癌 E2F转录因子3(E2F3) CD8+T淋巴细胞 肿瘤逃逸
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两级物流网络车辆路径问题研究综述 被引量:5
14
作者 李红启 陈鋆 赵佳敏 《供应链管理》 2020年第9期88-100,共13页
城市物流和多式联运等往往表现为多级物流网络模式。在多级物流网络上综合运用多种类型的、载运能力不同的车辆,可节约物流成本。在两级物流网络车辆调度运用过程中,货物需要在不同层级的车辆之间进行中转,两个不同层级的车辆路径方案... 城市物流和多式联运等往往表现为多级物流网络模式。在多级物流网络上综合运用多种类型的、载运能力不同的车辆,可节约物流成本。在两级物流网络车辆调度运用过程中,货物需要在不同层级的车辆之间进行中转,两个不同层级的车辆路径方案之间需互动协同。由于其实践参考价值和建模求解的复杂性,两级物流网络车辆路径问题(2E-RP问题)相关研究成果在近年来不断涌现。文章梳理总结包括2E-VRP问题、2E-LRP问题、TTRP问题和VRPCD问题等在内的2E-RP问题的研究进展;基于2E-RP问题所对应的行业实践背景,为拓展2E-RP问题数学建模思路,提出促使两个层级车辆路径互动的新的驱动因素,即时效和运力匹配;指出后续研究2E-RP问题时可在建模方面的关注点。 展开更多
关键词 两级物流网络 车辆路径问题 2e-VRP问题 2e-LRP问题 TTRP问题 VRPCD问题
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人工蜂王的研制及对东方蜜蜂的生物活性 被引量:3
15
作者 朱洪友 林军 +3 位作者 李全 刘复初 匡海鸥 匡邦郁 《化学研究与应用》 CAS CSCD 1999年第5期498-500,共3页
本文模拟天然蜂王信息素的组成,将合成的9-氧代-2E-癸烯酸(蜂王物质,QueenSubstance)、R/S-9-羟基-2E-癸烯酸(臭味抑制剂,Stink-odourinhibitor)及其它一些微量成分按一定的... 本文模拟天然蜂王信息素的组成,将合成的9-氧代-2E-癸烯酸(蜂王物质,QueenSubstance)、R/S-9-羟基-2E-癸烯酸(臭味抑制剂,Stink-odourinhibitor)及其它一些微量成分按一定的比例混合,并附于醋酸纤维上制成人工蜂王,运用人工蜂王对东方蜜蜂进行了活性测试,结果表明在群味、聚集、消除失王情绪、抑制工蜂产卵、抑制建造急造王台等方面表现出了显著的生物活性,同时也研究了人工蜂王对产蜜量的影响。 展开更多
关键词 人工蜂王 东方蜜蜂 蜂王物质 蜂王信息素
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MND1通过与KLF6结合形成MND1-KLF6-E2F1正反馈环加速细胞周期进程促进肺腺癌进展 被引量:1
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作者 张全利 施润 +10 位作者 柏永康 孟丽娟 胡静雯 朱鸿宇 刘桐言 德晓朦 王思炜 王洁 许林 周国仁 尹荣 《癌症》 CAS 2022年第12期586-604,共19页
背景与目的在全球范围内,肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)在肺癌患者中所占比例不断升高,肺腺癌在癌症相关死亡中所占比例很高。本研究旨在筛选出新的癌基因,为肺腺癌治疗提供潜在靶点,探究肺腺癌发生发展的机制。方法我们通过分析基... 背景与目的在全球范围内,肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)在肺癌患者中所占比例不断升高,肺腺癌在癌症相关死亡中所占比例很高。本研究旨在筛选出新的癌基因,为肺腺癌治疗提供潜在靶点,探究肺腺癌发生发展的机制。方法我们通过分析基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)和癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)的数据,并进行转录组筛选和生存分析,获得了一个潜在的肺腺癌风险生物标志物——减数分裂核分裂1(meiotic nuclear divisions 1,MND1)。我们通过细胞活力检测和皮下异种移植瘤模型验证MND1在肺腺癌细胞增殖和肿瘤生长中的致癌作用。通过质谱、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)和染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)等实验探讨其潜在分子机制。结果通过组织芯片染色和第三方数据分析评估,MND1高表达是肺腺癌患者总生存期的独立风险因素。体内和体外试验结果表明,MND1通过加速细胞周期进程促进肺腺癌细胞增殖。Co-IP、ChIP和双荧光素酶报告基因实验结果显示,MND1竞争性地与肿瘤抑制基因KLF6(kruppel-like factor 6,KLF6)结合,从而保护E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)免受KLF6诱导的转录抑制。荧光素酶报告基因和ChIP分析发现,E2F1通过反馈方式与MND1启动子结合,进而激活MND1转录。结论在肺腺癌中,MND1、KLF6和E2F1形成正反馈环调控细胞周期,导致肺腺癌顺铂耐药。MND1对肿瘤恶性进展至关重要,可能是肺腺癌潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 细胞周期 顺铂耐药 E2F转录因子1(E2F transcription factor 1 E2F1) 肿瘤抑制基因KLF6(kruppel-like factor 6 KLF6) 肺腺癌 减数分裂核分裂1(meiotic nuclear divisions 1 MND1) 正反馈环
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miR-144-3p靶向E2F8抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭并阻滞细胞周期 被引量:3
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作者 宋世伟 李景武 刘晓辉 《生命科学研究》 CAS 2023年第6期479-487,共9页
为了探究miR-144-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的作用机制,本研究基于多个数据库对miR-144-3p和其下游靶基因在肺腺癌组织中的表达水平进行了预测;通过生物信息学方法和文献调研,确定了E2F转录因子8(E2F transcription facto... 为了探究miR-144-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)中的作用机制,本研究基于多个数据库对miR-144-3p和其下游靶基因在肺腺癌组织中的表达水平进行了预测;通过生物信息学方法和文献调研,确定了E2F转录因子8(E2F transcription factor 8,E2F8)为miR-144-3p的下游靶基因,并通过双荧光素酶实验对miR-144-3p和E2F8的靶向结合关系进行了验证;然后,通过实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)、免疫印迹分析(Western-blot)、细胞毒性检测(Cell Counting Kit-8 assay,CCK-8 assay)、克隆形成、侵袭能力测定和流式细胞术等实验,对miR-144-3p和E2F8在肺腺癌中的调控机制进行了探究。结果显示,miR-144-3p在肺腺癌组织和细胞中呈显著低表达,而E2F8则显著高表达,两者存在靶向关系;过表达miR-144-3p或敲低E2F8能抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭并阻滞细胞周期于G1期。上述结果表明,miR-144-3p通过负调控E2F8抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭能力,并阻滞细胞周期于G1期,从而抑制肺腺癌细胞的恶性进展。这为肺癌新检测、治疗手段的开发提供了参考依据。 展开更多
关键词 miR-144-3p E2F转录因子8(E2F8) 肺腺癌(LUAD) 增殖 侵袭
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剪接因子异质核糖核蛋白A2B1在癌细胞和衰老细胞中的相反表达趋势及其对癌细胞衰老的调控 被引量:1
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作者 曹君红 陈蒙 +7 位作者 贾琦 赵昭昭 文海梅 姚钧 余鹏 马海静 倪挺 魏刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期66-75,共10页
剪接因子异质核糖核蛋白A2/B1(HNRNPA2B1)与人类及小鼠的寿命相关,并在多个癌症的病程进展中发挥重要的作用。然而,HNRNPA2B1能否在细胞衰老这一与个体衰老和抑制癌症密切相关的生物学过程中发挥作用尚不清楚。本研究发现,HNRNPA2B1在... 剪接因子异质核糖核蛋白A2/B1(HNRNPA2B1)与人类及小鼠的寿命相关,并在多个癌症的病程进展中发挥重要的作用。然而,HNRNPA2B1能否在细胞衰老这一与个体衰老和抑制癌症密切相关的生物学过程中发挥作用尚不清楚。本研究发现,HNRNPA2B1在多个癌症体系中呈显著上调表达趋势,而在多个细胞衰老体系中则呈显著下调表达趋势,暗示HNRNPA2B1对细胞衰老和癌症具有潜在调控作用。研究结果显示,在多种癌细胞中稳定敲低HNRNPA2B1均可诱导系列细胞衰老相关表型。分子水平的研究表明,HNRNPA2B1的低表达可导致超过1 000个基因发生显著的可变剪接变化,其中包含与细胞衰老有因果关系的基因。进一步研究发现,转录因子E2F1可调节HNRNPA2B1的表达变化。综上,E2F1-HNRNPA2B1是在癌症发展和细胞衰老中均发挥重要作用的一个通路,通过对该通路的调控,可望从诱导癌细胞衰老的角度为相关癌症的研究及治疗提供新的视角。 展开更多
关键词 异质核糖核蛋白A2/B1(HNRNPA2B1) 癌症 细胞衰老 E2F转录因子1(E2F1)
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miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路抑制膀胱癌T24和EJ细胞的增殖 被引量:13
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作者 李小辉 韩兴涛 +2 位作者 杨金辉 孙建涛 魏澎涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1360-1364,共5页
目的研究微小RNA-503-5p(miR-503-5p)对膀胱癌T24细胞和EJ细胞生长的影响和机制。方法 T24细胞和EJ细胞转染miR-503-5p模拟物或阴性对照微小RNA(miR-NC)并验证转染效率,生物信息学软件预测miR-503-5p的靶基因。通过荧光实时定量PCR检测m... 目的研究微小RNA-503-5p(miR-503-5p)对膀胱癌T24细胞和EJ细胞生长的影响和机制。方法 T24细胞和EJ细胞转染miR-503-5p模拟物或阴性对照微小RNA(miR-NC)并验证转染效率,生物信息学软件预测miR-503-5p的靶基因。通过荧光实时定量PCR检测miR-503-5p靶基因E2F转录因子3(E2F3)及下游基因mRNA的表达水平,Western blot法检测视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)/E2F信号通路蛋白E2F3、细胞周期蛋白E(cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、Rb和磷酸化的Rb(p-Rb)蛋白水平,流式细胞术检测膀胱癌细胞周期的变化,MTT法和平板克隆形成实验检测膀胱癌细胞的增殖能力。结果转染miR-503-5p模拟物后,膀胱癌细胞中miR-503-5p的水平显著增加。过表达miR-503-5p可明显降低膀胱癌细胞中E2F3mRNA及Rb/E2F信号通路基因的表达水平,将膀胱癌细胞周期阻滞于G0/G1期,膀胱癌细胞的增殖能力明显降低。结论过表达miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路的转导,抑制膀胱癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 微小RNA-503-5p(miR-503-5p) E2F转录因子3(E2F3) 膀胱癌 增殖
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丙型肝炎病毒河北株E2蛋白胞外核心区的真核表达及应用
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作者 叶传涛 边培育 +5 位作者 翁代慧 张会 杨敬 张颖 雷迎峰 贾战生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期746-749,共4页
目的真核细胞表达丙型肝炎病毒(HCV)河北株E2蛋白胞外核心区(E2c)并利用E2c蛋白检测HCV患者血清中特异性抗E2蛋白抗体水平。方法以HCV1b型(河北株)基因序列为基础,设计HCV1b E2c基因序列并通过基因拼接的方法合成;将含有组织型纤溶酶原... 目的真核细胞表达丙型肝炎病毒(HCV)河北株E2蛋白胞外核心区(E2c)并利用E2c蛋白检测HCV患者血清中特异性抗E2蛋白抗体水平。方法以HCV1b型(河北株)基因序列为基础,设计HCV1b E2c基因序列并通过基因拼接的方法合成;将含有组织型纤溶酶原激活物(t PA)信号肽的E2c扩增产物克隆入p CI-neo真核表达载体,获得p CI-tpa-1b E2c载体;将p CI-tpa-1b E2c真核表达载体转染HEK293T细胞,收集细胞上清后进行浓缩及纯化,Western blot法鉴定蛋白特异性;以获得E2c蛋白为抗原,建立基于雪花莲凝集素(GNA)的改良ELISA检测HCV患者血清特异性抗E2c抗体水平。结果成功利用真核表达系统表达获得E2c蛋白,建立了GNA改良ELISA检测HCV患者血清中抗E2蛋白抗体的方法。结论成功在HEK293T细胞表达HCV-1b E2c蛋白并进行了临床应用。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒(HCV) E2蛋白胞外核心区(E2c)蛋白 真核表达 基于雪花莲凝集素的改良ELISA
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