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E2F2在肾透明细胞癌中的高表达及其与预后和肿瘤免疫微环境的相关性
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作者 瞿根义 龙朝辉 +4 位作者 黄文琳 阳光 汤乘 徐勇 银利 《现代泌尿外科杂志》 2026年第2期172-181,共10页
目的探讨转录因子E2F2在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达特征、对预后的影响及在肿瘤免疫微环境中的潜在作用,并通过临床样本和功能实验验证。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取ccRCC患者RNA测序数据及临床资料,基因表达综合数据库(GEO... 目的探讨转录因子E2F2在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达特征、对预后的影响及在肿瘤免疫微环境中的潜在作用,并通过临床样本和功能实验验证。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取ccRCC患者RNA测序数据及临床资料,基因表达综合数据库(GEO)下载GSE53757和GSE66272作为外部验证集,比较ccRCC组织与正常组织中E2F2的表达差异。分析E2F2表达水平与临床及病理特征的关系。采用Kaplan-Meier(KM)生存分析以及log-rank检验评估E2F2对总体生存期(OS)、无进展生存期(PFS)和疾病特异性生存期(DSS)的影响。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估E2F2对患者1、3、5年生存状态的预后预测效能。采用基因富集分析(GSEA)E2F2相关信号通路。采用ESTIMATE与CIBERSORT算法评估E2F2表达水平与肿瘤免疫细胞浸润及免疫微环境的关系。收集中南大学湘雅医学院附属株洲医院20例经术后病理确诊的ccRCC患者的肿瘤组织及其配对癌旁正常组织,免疫组织化学检测E2F2蛋白表达水平。采用人ccRCC细胞系786-O进行细胞功能实验,使用shRNA干扰E2F2表达(构建shE2F2#1和shE2F2#2稳定转染株),通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白质印迹法分别验证干扰效率。采用MTT、克隆形成和Transwell迁移实验验证E2F2对ccRCC细胞生物学行为的影响。结果E2F2在ccRCC组织中显著高表达(外部验证集结果与之相同),E2F2高表达与组织学分级、临床分期、TNM分期显著相关(P<0.05)。KM生存分析显示,E2F2高表达组较低表达组患者的OS(P=0.019)、PFS(P=0.036)和DSS(P<0.001)均更短。E2F2预测ccRCC患者1、3、5年生存情况的ROC曲线下面积分别为0.844、0.851、0.815。GSEA结果显示,E2F2低表达组富集于多种代谢相关通路,高表达组则与免疫功能通路相关。免疫分析显示,E2F2高表达水平与肿瘤免疫评分升高、免疫细胞比例升高、肿瘤突变负荷升高及更强的免疫治疗响应能力相关。免疫组化结果显示,ccRCC组织中E2F2免疫评分显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。细胞实验显示,E2F2沉默可显著抑制ccRCC细胞的增殖、克隆形成及迁移能力。结论E2F2在ccRCC中高表达,可能通过调控免疫微环境参与肿瘤发生与进展,其表达水平与患者预后密切相关,有望成为ccRCC潜在的预后生物标志物及免疫治疗靶点。 展开更多
关键词 E2f2 肾透明细胞癌 预后 免疫浸润 基因富集分析(GSEA) 免疫治疗
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Monaco系统中2F2A与1F2A计划对乳腺癌术后照射剂量与计划质量的影响
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作者 赵维秋 牛锐 《医学理论与实践》 2025年第17期2946-2948,共3页
目的:分析Monaco计划系统中的两野双弧(2F2A)计划与单野双弧(1F2A)计划布野方式对乳腺癌术后危及器官受照剂量体积、计划质量与执行效率的影响。方法:回顾性分析我院2024年1—10月收治的50例乳腺癌患者临床资料,对其实施Monaco计划系统... 目的:分析Monaco计划系统中的两野双弧(2F2A)计划与单野双弧(1F2A)计划布野方式对乳腺癌术后危及器官受照剂量体积、计划质量与执行效率的影响。方法:回顾性分析我院2024年1—10月收治的50例乳腺癌患者临床资料,对其实施Monaco计划系统,根据患者情况设计1F2A、2F2A 2种计划,1F2A(28例)、2F2A(22例),分析危及器官受照剂量体积[肺部V_(5)、V_(10)、V_(20)、V30、均匀剂量(D_(mean))及心脏V_(5)、V_(10)、V_(20)、V30、V_(40)、D_(mean)]、计划质量[D_(mean)、中位剂量(D50)、2%剂量(D2)、98%剂量(D98)、剂量均匀性指数(HI)、剂量梯度指数(GI)、最大剂量(D_(max))、符合指数(CI)、计划靶区(PTV)]、执行效率[计划控制点数(CP)、机器跳数(MU)和出束时间(T)]。结果:2F2A组肺部V_(5)、V_(10)、V30、D_(mean)均低于1F2A组(P<0.05),两组肺部V_(20)对比,差异无统计学意义(P>0.05);2F2A组心脏V_(5)、V_(10)、V_(20)、V30、D_(mean)均低于1F2A组(P<0.05),两组心脏V_(40)对比,差异无统计学意义(P>0.05);2F2A组D_(mean)、D50、D2、D98、HI、GI、PTV均高于1F2A组(P<0.05),两组D_(max)、CI对比,差异无统计学意义(P>0.05);2F2A组MU、T、CP均高于1F2A组(P<0.05)。结论:2F2A计划在保护肺部和心脏方面相较于1F2A计划具有更好的效果,且在剂量分布和计划质量上也更优,值得临床运用。 展开更多
关键词 Monaco计划系统 2f2A计划 1F2A计划 布野方式 乳腺癌 脏器受照剂量体积 计划质量
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NR2F2过表达对人卵巢癌SKOV3细胞生物学行为的影响
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作者 张硕 夏云秀 +6 位作者 陈微微 董洪亮 崔冰洁 刘翠兰 刘志强 王飞 杜静 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期58-67,共10页
目的:探讨核受体亚家族2F组成员2(NR2F2)对人卵巢癌SKOV3细胞生物学行为的影响,并阐明其分子机制,为卵巢癌的临床治疗提供新的思路。方法:采用基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库分析卵巢组织中NR2F2基因表达水平,并分析其与卵巢癌患者... 目的:探讨核受体亚家族2F组成员2(NR2F2)对人卵巢癌SKOV3细胞生物学行为的影响,并阐明其分子机制,为卵巢癌的临床治疗提供新的思路。方法:采用基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库分析卵巢组织中NR2F2基因表达水平,并分析其与卵巢癌患者临床预后的相关性。将人卵巢癌SKOV3细胞分为对照组和NR2F2过表达组(NR2F2 OE组),待细胞密度达到70%时,分别转染mCherry对照病毒和NR2F2 OE过表达病毒,48 h后通过嘌呤霉素(puro)筛选稳定转染的SKOV3细胞系。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测2组细胞转染效率,RT-qPCR法检测2组细胞中NR2F2和性别决定区Y-box 2(SOX2)mRNA表达水平,Western blotting法检测2组细胞中NR2F2、SOX2、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)和程序性细胞死亡配体1(PD-L1)蛋白表达水平。CCK-8法检测2组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测2组细胞迁移率,Transwell小室实验检测2组穿膜细胞数,成球实验检测2组细胞成球数,外周血单核细胞(PBMCs)杀伤肿瘤细胞活性实验检测2组存活肿瘤细胞的相对密度,CCK-8法检测紫杉醇(PTX)和卡铂(CBP)对2组细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。结果:与正常卵巢组织比较,卵巢肿瘤组织中NR2F2 mRNA表达水平降低(P<0.05),并随卵巢肿瘤临床病理分级提高而降低;NR2F2 mRNA表达水平较高的患者临床预后较好。成功构建过表达NR2F2的SKOV3细胞,与对照组比较,NR2F2 OE组细胞中NR2F2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.001);CCK-8实验,与对照组比较,不同时间点(1、2、3和4 d)NR2F2 OE组细胞增殖活性均降低(P<0.05或P<0.01);细胞划痕实验,与对照组比较,NR2F2 OE组细胞迁移率降低(P<0.001);Transwell小室实验,与对照组比较,NR2F2 OE组穿膜细胞数减少(P<0.01);与对照组比较,NR2F2 OE组细胞成球数减少(P<0.05),SKOV3细胞中SOX2 mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.001)表达水平均降低;与对照组比较,NR2F2 OE组存活肿瘤细胞的相对密度降低,但差异无统计学意义(P>0.05),PD-L1蛋白表达水平降低(P<0.05);与对照组比较,NR2F2 OE组细胞增殖活性减弱(P<0.05),对PTX和CBP的药物敏感性增强,PTX的IC_(50)明显减小,CBP的IC_(50)因其药物浓度过高未能计算;ABCG2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:NR2F2过表达可抑制人卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,降低SOX2、PD-L1和ABCG2蛋白表达水平,抑制人卵巢癌SKOV3细胞的干性和免疫逃逸能力,增强人卵巢癌SKOV3细胞对PTX和CBP的敏感性。 展开更多
关键词 核受体亚家族2F组成员2 卵巢肿瘤 肿瘤干性 免疫逃逸 耐药
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血清CTRP1、E2F2、CRP水平与急性胰腺炎患者病情及预后的相关性
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作者 时朝辉 刘洋 +2 位作者 吴斌 张钰 赵明 《交通医学》 2025年第4期388-390,394,共4页
目的:探究血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白l(complement C1q/tumor necrosis factor-related protein 1,CTRP1)、E2F转录因子2(E2F transcription factor 2,E2F2)、C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)水平与急性胰腺炎患者病情程度及... 目的:探究血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白l(complement C1q/tumor necrosis factor-related protein 1,CTRP1)、E2F转录因子2(E2F transcription factor 2,E2F2)、C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)水平与急性胰腺炎患者病情程度及预后的相关性。方法:急性胰腺炎患者95例,根据病情分为轻度组61例和重度组34例,以同期健康体检者95例为对照组。比较上述3组及不同预后患者血清CTRP1、E2F2、CRP水平、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluation,APACHEⅡ)评分,分析血清CTRP1、E2F2、CRP水平与患者病情程度、预后及APACHEⅡ评分的相关性,血清CTRP1、E2F2、CRP水平对重度急性胰腺炎的诊断价值。结果:重度组血清CTRP1、E2F2、CRP水平及APACHEⅡ评分高于轻度组、对照组,轻度组高于对照组(均P<0.05)。预后不良患者血清CTRP1、E2F2、CRP水平高于预后良好患者(均P<0.001)。血清CTRP1、E2F2、CRP水平与急性胰腺炎患者病情程度、预后及APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.001)。血清CTRP1、E2F2、CRP水平联合检测诊断重度急性胰腺炎算曲线下面积(area under curve,AUC)为0.843,敏感度为79.41%,特异度为80.33%,优于CTRP1、E2F2、CRP单项检测。结论:血清CTRP1、E2F2、CRP水平与急性胰腺炎患者病情程度及预后关系密切,联合检测对病情评估及预后预测具有一定价值。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白l E2F转录因子2 C反应蛋白 病情 预后
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miR-365通过靶向E2F2抑制胃癌细胞增生和肿瘤形成 被引量:12
5
作者 郭水龙 朱圣韬 +3 位作者 程芮 邵琳琳 孙秀梅 张澍田 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第1期1-5,共5页
目的研究胃癌相关miR-365调控胃癌细胞增生和肿瘤发生的功能,并通过验证下游靶分子E2F2研究miR-365的作用机制。方法采用Northern blotting法检测miR-365在小鼠各组织器官中的表达谱;real-time PCR检测miR-365在人胃癌组织中的表达变化... 目的研究胃癌相关miR-365调控胃癌细胞增生和肿瘤发生的功能,并通过验证下游靶分子E2F2研究miR-365的作用机制。方法采用Northern blotting法检测miR-365在小鼠各组织器官中的表达谱;real-time PCR检测miR-365在人胃癌组织中的表达变化;细胞实验和裸鼠成瘤实验研究miR-365过表达对胃癌细胞增生的抑制作用;生物信息学分析miR-365下游靶分子E2F2;构建E2F2 3’UTR野生型和突变型荧光素酶报告载体,并利用双荧光素酶活性分析检测miR-365对E2F2基因表达的调控和结合位点;Western blotting法检测miR-365对E2F2蛋白表达的调控作用。结果 miR-365在包括胃在内的多种消化道组织中表达;miR-365在人胃癌组织中表达显著下调;miR-365过表达显著抑制多种胃癌细胞的增生和裸鼠皮下的成瘤能力;E2F2是miR-365的靶分子,miR-365通过E2F2 3’UTR上的结合位点抑制E2F2的蛋白表达。结论 miR-365在人胃癌组织和小鼠胃癌模型中表达下调,并通过下游靶分子E2F2抑制胃癌细胞增生和肿瘤形成。 展开更多
关键词 E2f2 miR-365 胃癌 MICRORNA
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3种介导猪NR2F2基因转染PK15细胞方法的比较研究 被引量:5
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作者 张万锋 黑伟 +8 位作者 何志强 刘敏 孟珊 高鹏飞 蔡春波 杨阳 郭晓红 曹果清 李步高 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第5期1352-1359,共8页
试验旨在研究3种转染方法对猪肾上皮细胞(PK15)的转染效率,为以PK15细胞为模型研究外源基因的功能提供参考。本研究以PK15细胞为研究对象,用脂质体、电穿孔、慢病毒3种转染方法转染后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,采用实时荧... 试验旨在研究3种转染方法对猪肾上皮细胞(PK15)的转染效率,为以PK15细胞为模型研究外源基因的功能提供参考。本研究以PK15细胞为研究对象,用脂质体、电穿孔、慢病毒3种转染方法转染后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,采用实时荧光定量PCR检测EGFP和NR2F2基因的表达情况,采用CCK-8检测细胞存活率,进而比较3种方法的转染效果。结果显示,转染PK15细胞后,电穿孔和慢病毒方法转染效率极显著高于脂质体(P<0.01),但电穿孔方法和慢病毒方法之间差异不显著(P>0.05);EGFP和NR2F2基因的实时荧光定量PCR结果显示慢病毒方法效果最好,脂质体方法较差,与细胞转染效率基本一致;CCK-8结果显示,电穿孔转染后细胞存活率最低,极显著低于对照组(P<0.01),脂质体方法显著低于对照组(P<0.05),慢病毒方法与对照组间差异不显著(P>0.05)。综合考虑转染效率及细胞活性,本研究认为慢病毒转染方法最适合转染PK15细胞,为今后高效转染PK15细胞提供了理想的方法。 展开更多
关键词 PK15细胞 NR2f2基因 脂质体转染 电穿孔转染 慢病毒转染
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Al2F2分子结构与稳定性的ab initio计算研究 被引量:2
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作者 于海涛 黄旭日 +4 位作者 池玉娟 傅宏刚 丁益宏 李泽生 孙家钟 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期1059-1065,共7页
用ab initio方法在UMP2/6-311G(d)水平下计算了Al2F2分子可能的异构体构型和AlF二聚化成Al2F2分子的反应能.UMP2/6-311G(d)和UQCISD(T)/6-311+G(3df)∥UMP2/6-311G(d)水平下的能量值均说明具有D2h对称性、1Ag电子态的异构体是A12F2分子... 用ab initio方法在UMP2/6-311G(d)水平下计算了Al2F2分子可能的异构体构型和AlF二聚化成Al2F2分子的反应能.UMP2/6-311G(d)和UQCISD(T)/6-311+G(3df)∥UMP2/6-311G(d)水平下的能量值均说明具有D2h对称性、1Ag电子态的异构体是A12F2分子的最稳定构型,其Al-F键长为0.19074nm,键角Al-F-Al和F-Al-F分别为104.62°和75.38°,以及两个强振动,441.27cm-1和401.93cm-1,均与实验结果相符合.电子结构分析表明,具有D2h对称性的异构体的活性中心在2个Al原子上,在形成衍生物时是主要的反应加成位置.在UMP2/6-311G(d)和UQCISD(T)/6-311+G(3df)∥UMP2/6-311G(d)水平下得到了AIF二聚化能量分别为-75.01kJ/mol和-66.07kJ/mol,与文献估计值基本一致,说明AlF二聚化反应在能量上是有利的. 展开更多
关键词 Al2f2分子 二聚作用 异构化反应 电子结构 ab INITIO 稳定性 氟化铝 构型
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MicroRNA-218下调肝细胞癌中的E2F2基因表达抑制细胞增殖的研究 被引量:7
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作者 王涛 马思聪 +6 位作者 戚星星 汤晓寅 崔丹 王智 池嘉昌 李萍 翟博 《肝脏》 2016年第3期179-182,共4页
目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印... 目的探讨MicroRNA-218(miRNA-218)下调肝细胞癌中的E2F2基因表达,从而抑制细胞增殖的机制。方法从细胞库中取得人类肝癌细胞株HepG2、Huh7、MHCC-97H、BEL-7402和正常肝细胞株L02。随后进行细胞培养和转移、反转录多聚酶链反应、免疫印迹分析、细胞增殖和集落形成试验、细胞周期分析和相应的统计学处理。结果 miR-218表达水平在癌细胞中下调。MTT生长曲线表明,当miR-218过度表达时(Huh7中的miR-218 P=0.001;在MHCC-97中的miR-218 P=0.013)细胞增殖能力明显降低。双荧光素酶实验证实,转染了miRNA-218模拟物的细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.01),荧光酶报告基因含有E2F2野生型的第3′非翻译区。这些结果表明E2F2是miR-218的直接作用对象。与阴性对照组相比,转染了miR-218模拟物的Huh7和MHCC-97细胞株中的E2F2的相对mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论 miR-218通过直接作用于E2F2基因的第3′非翻译区调节E2F2的表达,从而抑制HCC细胞增殖。 展开更多
关键词 MicroRNA-218 肝细胞癌 E2f2基因 细胞增殖
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2F2R宏微机械臂动力学建模与弹性振动尺度效应分析 被引量:2
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作者 高胜 李美杰 +2 位作者 杨明岩 张飘石 任福深 《机械工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第21期65-78,共14页
柔性宏刚性微机械臂是一类典型的刚柔混合机械臂系统。采用有限元法,以2F2R宏微机械臂为研究对象,通过分析,详细推导和建立具有普遍意义的动力学模型。基于给定关节空间运动轨迹,对2F2R宏微机械臂的结构参量、截面参量、材质、集中质量... 柔性宏刚性微机械臂是一类典型的刚柔混合机械臂系统。采用有限元法,以2F2R宏微机械臂为研究对象,通过分析,详细推导和建立具有普遍意义的动力学模型。基于给定关节空间运动轨迹,对2F2R宏微机械臂的结构参量、截面参量、材质、集中质量分布等与系统弹性振动尺度效应之间关系与变化规律进行分析。在此基础上,针对操作空间运动轨迹,采用宏微空间分解方法,进一步分析上述设计参量与系统弹性振动尺度效应之间关系。通过上述两方面研究工作,获得许多有参考价值的研究成果,这对于该类宏微机械臂的设计与控制都将具有重要意义。 展开更多
关键词 2f2R宏微机械臂 动力学模型 弹性振动 尺度效应
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E2F2和Ki67在腮腺黏液表皮样癌的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 丁卫华 程晗菲 +2 位作者 李尧祥 孟令旭 尹林 《江苏医药》 CAS 2015年第24期3030-3032,共3页
目的探讨人腮腺黏液表皮样癌(MEG)中E2F2和Ki67的表达及意义。方法采用RT-PCR和Western blot方法检测20例腮腺MEG手术新鲜标本(A组)和20例正常腮腺组织(B组)中E2F2和Ki67 mRNA和蛋白的表达。结果 A组E2F2和Ki67的mRNA表达均高于B组[(14.... 目的探讨人腮腺黏液表皮样癌(MEG)中E2F2和Ki67的表达及意义。方法采用RT-PCR和Western blot方法检测20例腮腺MEG手术新鲜标本(A组)和20例正常腮腺组织(B组)中E2F2和Ki67 mRNA和蛋白的表达。结果 A组E2F2和Ki67的mRNA表达均高于B组[(14.16±1.18)×10^(-2) vs.(1.09±0.24)×10^(-2) 和(12.04±0.65)×10^(-4) vs.(0.58±0.29)×10^(-4)](P<0.05)。A组E2F2和Ki67的蛋白表达高于B组(P<0.05)。结论 E2F2和Ki67在腮腺MEG中高表达,对MEG临床诊治具有一定的意义。 展开更多
关键词 腮腺 黏液表皮样癌 E2f2 KI67
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核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义 被引量:1
11
作者 伊喜苓 林蓓 +5 位作者 朱连成 王欢 从建萍 郝莹莹 梁秀云 张淑兰 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第10期2026-2030,共5页
目的:探讨核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测33例卵巢浆液性囊腺癌、11例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、13例卵巢浆液性囊腺瘤以及12例正常卵巢组织中E2F2蛋白的表达。结果:E2F2蛋白在卵... 目的:探讨核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测33例卵巢浆液性囊腺癌、11例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、13例卵巢浆液性囊腺瘤以及12例正常卵巢组织中E2F2蛋白的表达。结果:E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌、交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺瘤以及正常卵巢组织中的阳性表达率分别为72.73%(24/33)、54.55%(6/11)、15.38(2/13)%和8.3%(1/11),E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中的阳性表达率明显高于在浆液性囊腺瘤、正常卵巢组织中的阳性表达率(P均<0.05),卵巢浆液性囊腺癌组的阳性表达率值虽然高于交界性浆液性囊腺瘤组,但是两组之间差异无统计学意义(P>0.05),浆液性囊腺瘤的阳性表达率接近正常卵巢组的2倍,但是两组之间的阳性表达率差异也无统计学意义(P>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的阳性表达率随手术病理分期的增加而增加(P<0.05),但与病理分级以及有无淋巴结转移无关(P均>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的表达水平随手术病理分期的增加、病理分级降低而增加(P均<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中核转录因子E2F2呈现明显的高表达,且其表达水平与手术分期、病理分级相关,提示E2F2在卵巢癌的发生发展中起到促进作用。 展开更多
关键词 卵巢浆液性肿瘤 E2f2 细胞周期
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E2F2过表达使内耳感觉细胞重新进入细胞周期 被引量:1
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作者 郭维维 王琳 +1 位作者 余力生 杨仕明 《中华耳科学杂志》 CSCD 2011年第3期244-248,共5页
目的将调控细胞周期和增殖的E2F2基因导入成年哺乳动物耳蜗中,使其过表达,从而使耳蜗内的终末静止细胞重新进入细胞周期,向可分裂细胞转变,达到实现增加毛细胞数量的目的。方法将人来源的E2F2基因构建到腺病毒载体上,通过圆窗导入耳蜗;... 目的将调控细胞周期和增殖的E2F2基因导入成年哺乳动物耳蜗中,使其过表达,从而使耳蜗内的终末静止细胞重新进入细胞周期,向可分裂细胞转变,达到实现增加毛细胞数量的目的。方法将人来源的E2F2基因构建到腺病毒载体上,通过圆窗导入耳蜗;全耳蜗铺片、耳蜗切片观察E2F2过表达后耳蜗细胞的形态特点,用BrdU标记及ki67免疫组化方法检测其增殖情况。结果腺病毒携带的E2F2基因通过圆窗导入耳蜗后,能够在耳蜗毛细胞和支持细胞上表达。特别是在螺旋神经节细胞表达更强。转染E2F2基因后,耳蜗内的细胞BrdU标记呈阳性结果,且有ki67表达。结论过表达E2F2有可能使处于终末期的耳蜗细胞重新进入细胞周期,此方法为毛细胞再生研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 E2f2 细胞周期再进入 耳蜗 毛细胞
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人E2F2基因重组腺病毒的构建及在293细胞中的表达 被引量:1
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作者 王琳 杨仕明 +1 位作者 郭维维 余力生 《中华耳科学杂志》 CSCD 2010年第4期461-465,共5页
目的构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因(pEGFP)的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2,并将其... 目的构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因(pEGFP)的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2,并将其与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒。对重组腺病毒进行扩增、纯化及滴度测定,用聚合酶链反应和测序方法验证穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2穿梭质粒的构建;通过荧光显微镜和Westernblot(蛋白质印迹)方法,分别检测质粒pDC315-GFP-E2F2和重组腺病毒表达E2F2蛋白情况。结果经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2与设计一致;经荧光显微镜检测,分别由穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2、重组腺病毒转染的HEK293细胞均可观察到GFP表达;经Western Blot检测出在72kDa~95kDa处有条特征带,其大小和E2F2-GFP融合蛋白(~76kDa)相吻合;滴度测定为1×1011PFU/ml(PFU,plaque forming unit,空斑形成单位)。结论成功构建了人E2F2基因重组腺病毒载体,并能在HEK293细胞中表达。 展开更多
关键词 E2f2基因 重组腺病毒载体 基因治疗
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NR2F2过表达对三阴性乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响及机制研究 被引量:1
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作者 张艳丽 常文慧 +3 位作者 赵梓妍 王文明 李菁 丁怡 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期683-688,共6页
目的阐明NR2F2对三阴性乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法采用慢病毒感染构建稳定高表达NR2F2的小鼠乳腺癌4T1细胞株。划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real... 目的阐明NR2F2对三阴性乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其可能的机制。方法采用慢病毒感染构建稳定高表达NR2F2的小鼠乳腺癌4T1细胞株。划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中NR2F2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的mRNA和蛋白的表达情况。结果三阴性乳腺癌4T1细胞过表达NR2F2后,细胞的迁移和侵袭能力增强,间质表型标志物N-cadherin、Vimentin表达升高,上皮表型标志物E-cadherin表达降低。结论NR2F2通过诱导三阴性乳腺癌细胞上皮间质转化,促进了细胞的迁移和侵袭。针对NR2F2的靶向干预可望为治疗三阴性乳腺癌提供新的策略。 展开更多
关键词 乳腺癌 转录因子NR2f2 迁移 侵袭 上皮间质转化
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咪达唑仑通过调控LncRNA NR2F2-AS1对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响 被引量:1
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作者 周宇 曹钦钰 刘蕾 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1257-1260,共4页
目的 探讨咪达唑仑对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,随机分组:咪达唑仑0、20、40、60μmol/L组、si-NC组、si-核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-AS)1组、咪达唑仑+pcDNA组、咪... 目的 探讨咪达唑仑对肾癌786-O细胞增殖、迁移及凋亡的影响及其可能作用机制。方法 体外培养人肾癌细胞786-O,随机分组:咪达唑仑0、20、40、60μmol/L组、si-NC组、si-核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2F2-AS)1组、咪达唑仑+pcDNA组、咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组;CCK-8法、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡及迁移;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA NR2F2-AS1表达量;Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关蛋白(Bax)表达量。结果 与咪达唑仑0μmol/L组比较,咪达唑仑20、40、60μmol/L组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显升高,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显降低,长链非编码(Lnc)RNA NR2F2-AS1表达量明显降低,且呈剂量依赖性(P<0.05);转染si-NR2F2-AS1可明显抑制细胞增殖及迁移,并可明显提高细胞凋亡率(P<0.05);与咪达唑仑+pcDNA组比较,咪达唑仑+pcDNA-NR2F2-AS1组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Bax蛋白水平明显降低,迁移细胞数和Bcl-2蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论 咪达唑仑可通过抑制LncRNA NR2F2-AS1表达而减弱肾癌细胞增殖及迁移能力,并可诱导肾癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 肾癌 咪达唑仑 LncRNA核受体亚家族2组F成员反义RNA(NR2f2-AS)1 细胞增殖 凋亡 迁移
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linc00346和E2F2在肝癌中的表达及其与预后的关系 被引量:1
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作者 朱玉 刘浩瀚 +2 位作者 丁蕾 梁雅丽 文育锋 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期228-232,共5页
目的研究linc00346和E2F2在肝癌中表达特征以及对肝癌患者预后的影响。方法从癌症基因组图集(the cancer genome atlas,TCGA)下载肝癌表达谱数据,肝癌与癌旁组织中linc00346和E2F2表达差异分析采用配对t检验,肝癌组织linc00346和E2F2共... 目的研究linc00346和E2F2在肝癌中表达特征以及对肝癌患者预后的影响。方法从癌症基因组图集(the cancer genome atlas,TCGA)下载肝癌表达谱数据,肝癌与癌旁组织中linc00346和E2F2表达差异分析采用配对t检验,肝癌组织linc00346和E2F2共表达分析采用Pearson相关,linc00346和E2F2对患者预后分析采用Log-Rank检验以及Cox回归。结果肝癌组织中linc00346和E2F2表达水平分别是癌旁组织的2.24倍和3.72倍,差异均有统计学意义(均有P<0.05)。linc00346和E2F2存在共表达关系,相关系数r为0.20(P<0.001)。单因素Cox回归发现linc00346和E2F2高表达组患者死亡风险分别是低表达患者的1.77倍(95%CI:1.23~2.55)和2.19倍(95%CI:1.51~3.17)。多重Cox回归结果显示E2F2表达能够影响肝癌患者的预后。结论 linc00346和E2F2在肝癌组织中高表达,肝癌患者linc00346和E2F2高表达其预后效果差,这为探索抗肿瘤治疗提供一个新的潜在靶点,具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 linc00346 E2f2 肝癌 预后
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LncRNA NR2F2-AS1靶向抑制miR-129-5p调控胶质瘤细胞增殖和凋亡的机制研究 被引量:3
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作者 张大鹏 杨艳辉 《中国医药生物技术》 2020年第3期277-283,共7页
目的研究lncRNA NR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法qRT-PCR检测lncRNANR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤组织和细胞中表达水平,MTT法和流式细胞术检测U251细胞增殖和凋亡,Westernblot检测... 目的研究lncRNA NR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法qRT-PCR检测lncRNANR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤组织和细胞中表达水平,MTT法和流式细胞术检测U251细胞增殖和凋亡,Westernblot检测细胞中CyclinD1、p21、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平,双荧光素酶报告系统验证NR2F2-AS1和miR-129-5p的调控关系。结果与正常脑组织相比,在胶质瘤组织中lncRNA NR2F2-AS1的含量显著升高(P<0.05),miR-129-5p的含量则显著下降(P<0.05);干扰NR2F2-AS1表达和过表达miR-129-5p均可抑制胶质瘤U251细胞增殖并促进细胞凋亡,使细胞中CyclinD1和Bcl-2含量降低(P<0.05),p21和Bax含量升高(P<0.05);lncRNA NR2F2-AS1靶向负调控miR-129-5p的表达;抑制miR-129-5p表达逆转了干扰NR2F2-AS1表达对U251细胞增殖、凋亡的作用。结论干扰lnc RNANR2F2-AS1通过靶向促进miR-129-5p表达抑制胶质瘤U251细胞增殖,诱导细胞凋亡。LncRNA NR2F2-AS1可能是胶质瘤的分子靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 U251细胞 NR2f2-AS1 miR-129-5p 增殖 凋亡
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NR2F2基因调控猪PK15细胞增殖和凋亡的研究
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作者 张万锋 赵天枝 +7 位作者 李娇 尤紫薇 杨阳 蔡春波 高鹏飞 曹果清 郭晓红 李步高 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3242-3251,共10页
旨在探究NR2F2基因对猪PK15细胞增殖和凋亡的影响。本研究在猪PK15细胞中过表达NR2F2基因,通过qRT-PCR、Western blot、CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕试验等方法检测了过表达NR2F2基因对细胞增殖的影响;采用CO-IP技术验证NR2F2与Smad4... 旨在探究NR2F2基因对猪PK15细胞增殖和凋亡的影响。本研究在猪PK15细胞中过表达NR2F2基因,通过qRT-PCR、Western blot、CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕试验等方法检测了过表达NR2F2基因对细胞增殖的影响;采用CO-IP技术验证NR2F2与Smad4蛋白结合能力;用qRT-PCR方法检测了NR2F2基因对Smad 4基因表达以及下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D 1表达的影响;挽救试验过表达NR2F2基因且干扰Smad 4基因检测下游基因及增殖基因Ki67、PCNA的表达。结果发现,过表达NR2F2基因极显著上调了Ki 67基因的表达(P<0.01),显著上调了PCNA的表达(P<0.05),促进了细胞周期的进程,抑制了细胞凋亡,促进了细胞的增殖。CO-IP结果证明了NR2F2与Smad4蛋白物理性结合,且发现过表达NR2F2基因后,Smad 4基因表达显著上升(P<0.01),Smad 4基因调控的下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D 1表达显著升高(P<0.01);干扰NR2F2基因后,Smad 4基因表达显著下降(P<0.01),Smad 4基因调控的下游基因表达显著降低(P<0.01)。挽救试验发现,过表达NR2F2基因后,干扰Smad 4基因的表达,能显著降低Cyclin D1、Cyclin B、CDK 1以及Ki67、PCNA的表达(P<0.01,P<0.05)。本研究结果表明,过表达NR2F2基因后促进了细胞的增殖,抑制凋亡,且NR2F2蛋白能与Smad4蛋白结合并影响Smad 4基因的表达,进而影响下游基因的表达。 展开更多
关键词 NR2f2基因 Smad 4基因 细胞增殖 PK15细胞
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小鼠PRL-3表达载体的构建及对乳腺癌D2F2细胞小鼠移植瘤的治疗作用
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作者 曹燕飞 吕娟 +1 位作者 黄昊 寿成超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期266-271,共6页
目的:探讨靶向小鼠肝细胞再生磷酸酶-3(mouse phosphatase of regenerating liver-3,mPRL-3)的DNA疫苗对小鼠乳腺癌D2F2细胞体内生长的抑制作用。方法:构建靶向mPRL-3的真核表达载体pVAX1-mPRL-3,并转染至鹌鹑肌成纤维细胞QM7内,Western... 目的:探讨靶向小鼠肝细胞再生磷酸酶-3(mouse phosphatase of regenerating liver-3,mPRL-3)的DNA疫苗对小鼠乳腺癌D2F2细胞体内生长的抑制作用。方法:构建靶向mPRL-3的真核表达载体pVAX1-mPRL-3,并转染至鹌鹑肌成纤维细胞QM7内,Western blotting检测mPRL-3蛋白在QM7细胞中的表达;通过重组慢病毒Lv-mPRL-3或对照载体Lv-Ctrl感染小鼠乳癌D2F2细胞,分别建立高表达mPRL-3的mPRL-3-D2F2细胞或对照NC-D2F2细胞,Western blotting检测小鼠乳腺癌D2F2细胞中mPRL-3蛋白的表达。BALB/c小鼠左侧乳腺脂肪垫下分别接种mPRL-3-D2F2和NC-D2F2细胞后,通过基因枪接种pVAX1-mPRL-3疫苗(mPRL-3-D2F2/pVAX1-mPRL-3),同时设立疫苗对照组(mPRL-3-D2F2/pVAX1-Ctrl)和细胞对照组(NC-D2F2/pVAX1-mPRL-3),检测小鼠的肿瘤体积及生存期。结果:pVAX1-mPRL-3质粒经酶切鉴定及测序验证均正确,并能在QM7细胞中表达。Western blotting检测结果显示,慢病毒感染的mPRL-3-D2F2细胞中mPRL-3蛋白过表达,而NC-D2F2细胞中不表达mPRL-3蛋白。荷瘤小鼠经pVAX1-mPRL-3 DNA疫苗免疫,其肿瘤体积明显低于对照组[(835.3±509.8)vs(1 543.0±578.4)mm3,P<0.01],且pVAX1-mPRL-3疫苗能显著延长荷瘤小鼠的生存期(中位生存期55.5 vs 38 d,P<0.05)。结论:基因枪接种的靶向mPRL-3的DNA疫苗能抑制高表达mPRL-3的小鼠乳腺癌D2F2细胞移植瘤的生长,并延长荷瘤小鼠生存期,提示其对mPRL-3阳性肿瘤有潜在的治疗作用。 展开更多
关键词 小鼠肝细胞再生磷酸酶-3 小鼠 乳腺癌 D2f2细胞 DNA疫苗 基因枪
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E2F2在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 王小平 谢秋莉 薛晨 《河南医学研究》 CAS 2020年第1期16-18,共3页
目的观察E2F2在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达水平,并分析其与HCC患者的性别、年龄、血清AFP浓度、病理学分级、TNM分期及预后的关系。方法下载并处理癌症基因组图谱(TCGA)中有关HCC的基因组学数据和所研究个体的临床资料,利用SPSS统计... 目的观察E2F2在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达水平,并分析其与HCC患者的性别、年龄、血清AFP浓度、病理学分级、TNM分期及预后的关系。方法下载并处理癌症基因组图谱(TCGA)中有关HCC的基因组学数据和所研究个体的临床资料,利用SPSS统计软件分析E2F2在HCC组织和癌旁组织中的表达水平,探讨E2F2表达水平与HCC患者性别、年龄、血清AFP水平、病理学分级、TNM分期等临床资料的关系以及对HCC患者预后情况的影响。结果E2F2在HCC组织中的表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);血清AFP浓度高的患者E2F2表达水平高于血清AFP水平低的患者,差异有统计学意义(P<0.05);病理学分级中Ⅲ~Ⅳ级HCC患者E2F2表达水平高于Ⅰ~Ⅱ级HCC患者,差异有统计学意义(P<0.05)。E2F2高表达组患者整体生存率低于E2F2低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论E2F2参与肝细胞肝癌的进展过程,是早期诊断肝细胞肝癌的肿瘤分子标志物及预后判断因子。 展开更多
关键词 E2f2 肝细胞肝癌 癌症基因组图谱
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