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芥菜BjuAMYB28a的克隆与表达特征分析
1
作者 王佳晨 许丽爱 朱祝军 《分子植物育种》 北大核心 2026年第1期32-39,共8页
MYB蛋白是植物中最大的转录因子家族之一,其广泛参与植物的生长发育、胁迫应答与次生代谢调控等生物学过程。为了进一步分析芥菜中MYB基因的结构和功能,本研究从芥菜(Brassica juncea)基因组中鉴定了6个MYB28转录因子,它们均具有保守的R... MYB蛋白是植物中最大的转录因子家族之一,其广泛参与植物的生长发育、胁迫应答与次生代谢调控等生物学过程。为了进一步分析芥菜中MYB基因的结构和功能,本研究从芥菜(Brassica juncea)基因组中鉴定了6个MYB28转录因子,它们均具有保守的R2和R3结构域,属于典型的R2R3-MYB类转录因子。前期的转录组数据显示,BjuAMYB28a(BjuA042263)在芥菜叶片中显著高表达,且真菌侵染、机械损伤和外源水杨酸处理均可诱导BjuAMY B28a的表达。分离得到BjuAMYB28a上游1789 bp启动子序列,发现其具有乙烯、赤霉素、水杨酸、干旱和低温胁迫响应等相关元件。同时,从栽培品种‘水东芥’中分离BjuAMY B28a,其CDS长度为1065 bp,编码354个氨基酸;亚细胞定位结果显示BjuAMYB28a定位于细胞核和细胞膜;构建了过量表达载体,并导入农杆菌GV3101,为进一步明确BjuAMYB28a的生物学功能提供了基础。 展开更多
关键词 芥菜 BjuAMY B28a 表达分析 载体构建
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KYN28A-12高压开关柜电动升降车系统可靠性优化研究
2
作者 杨润 张宸硕 牛仁先 《大众科学》 2026年第2期16-18,共3页
针对KYN28A-12型高压开关柜电动升降车在长期运行中出现的结构损伤、电控故障与运维不足问题,开展系统性故障模式分析与性能优化研究。从机械结构、电气控制与运维管理3个方面构建可靠性提升策略,提出刚性增强、智能保护、双重限位与标... 针对KYN28A-12型高压开关柜电动升降车在长期运行中出现的结构损伤、电控故障与运维不足问题,开展系统性故障模式分析与性能优化研究。从机械结构、电气控制与运维管理3个方面构建可靠性提升策略,提出刚性增强、智能保护、双重限位与标准化培训等综合技术体系,并结合工程案例验证关键性能指标改进效果。研究为开关柜辅助设备的可靠性设计与精益运维提供技术参考。 展开更多
关键词 KYN28a-12 电动升降车 机械故障 电气控制
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多浪羊LIN28A基因启动子区克隆、序列分析及蛋白表达研究
3
作者 李伟 黄巧艳 +4 位作者 王鑫昆 谷若怀 孙慧萍 朱乐萧 邢凤 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期2992-3003,共12页
【目的】探究多浪羊LIN28A基因的启动子区序列特征及蛋白表达规律,为进一步研究其在初情期的转录调控机理奠定基础。【方法】根据NCBI中绵羊LIN28A基因序列(登录号:NC_056055.1)设计引物进行PCR扩增、克隆测序及序列比对,获取多浪羊LIN... 【目的】探究多浪羊LIN28A基因的启动子区序列特征及蛋白表达规律,为进一步研究其在初情期的转录调控机理奠定基础。【方法】根据NCBI中绵羊LIN28A基因序列(登录号:NC_056055.1)设计引物进行PCR扩增、克隆测序及序列比对,获取多浪羊LIN28A基因启动子区序列,并利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。采集幼年期、初情期前、初情期及初情期后多浪羊的下丘脑、垂体和卵巢组织,利用Western blotting检测LIN28A蛋白在下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴中的表达情况。【结果】多浪羊LIN28A基因启动子区序列长2089 bp,GC含量为56.28%。LIN28A基因启动子序列包含MEIS1、STAT3、COMP1等65个转录因子结合位点,3个TATA-box,1个CpG岛,以及9个潜在转录起始位点。LIN28A蛋白在多浪羊3个组织中均有表达,以卵巢中表达水平最高,下丘脑次之,垂体中表达量最低。在初情期前多浪羊下丘脑中LIN28A蛋白表达量显著高于幼年期(P<0.05),在幼年期和初情期前多浪羊垂体中LIN28A蛋白表达量显著高于初情期及初情期后(P<0.05),卵巢中LIN28A蛋白表达量在初情期启动前后呈现稳定趋势(P>0.05);在同一时期,LIN28A蛋白在多浪羊下丘脑、垂体和卵巢组织中的表达量均无显著差异(P>0.05)。【结论】多浪羊LIN28A基因启动子区有多个与初情期相关的转录因子结合位点,为后续转录因子验证和启动子活性检测提供了试验材料。LIN28A蛋白在多浪羊HPO轴表达差异显著,为进一步研究LIN28A基因功能及调控机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 多浪羊 LIN28a基因 启动子 初情期 下丘脑-垂体-卵巢轴
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LncRNA SNHG11通过上调LIN28A表达促进胰腺癌细胞干性
4
作者 于正悦 王慧之 +3 位作者 丁运韬 周雨静 龚爱华 徐岷 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期93-101,共9页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因11(small nucleolar RNA host gene 11,SNHG11)对胰腺癌细胞增殖和干性的影响及其可能的机制。方法:通过TCGA和GTEx数据库分析SNHG11在泛癌和对应癌旁组织、... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因11(small nucleolar RNA host gene 11,SNHG11)对胰腺癌细胞增殖和干性的影响及其可能的机制。方法:通过TCGA和GTEx数据库分析SNHG11在泛癌和对应癌旁组织、胰腺癌和胰腺组织中的表达;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG11在胰腺癌PANC1、PaTu8988、MIApaca-2细胞中的表达;在胰腺癌PANC1和PaTu8988细胞中分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-SNHG11质粒,在胰腺癌PANC1和MIApaca-2细胞中分别转染sh-EGFP、sh-SNHG11质粒,qRT-PCR检测质粒转染效率,CCK-8法检测细胞增殖率,克隆形成实验检测细胞克隆数及大小,qRT-PCR及蛋白免疫印迹法分别检测干性指标NANOG同源框蛋白(NANOG homeobox protein,NANOG)、Y染色体性别决定区相关HMG盒基因2(sex determining region of Y-chromosome related HMG-box2,SOX2)、八聚体结合转录因子4(octamer binding transcription factor 4,OCT4)、细胞癌基因myc(cellular oncogene myc,c-myc)和LIN28同源物A(LIN28 homolog A,LIN28A)mRNA和蛋白相对表达水平,干细胞成球实验检测干细胞成球数量及直径变化;RNA免疫沉淀实验检测SNHG11和LIN28A结合情况。共转染pcDNA3.1-SNHG11+sh-LIN28A或sh-SNHG11+3×Flag-LIN28A,qRT-PCR检测干性指标NANOG、SOX2、OCT4、c-myc mRNA相对表达水平,干细胞成球实验检测干细胞成球数量和直径变化。结果:LncRNA SNHG11在多种恶性肿瘤中高表达,包括胰腺癌。SNHG11在胰腺癌细胞中相对表达量从低到高依次为胰腺癌PaTu8988、PANC1、MIApaca-2细胞(P均<0.05)。上调SNHG11表达,胰腺癌细胞增殖和干性能力明显增强,下调则与之相反(P均<0.05)。SNHG11可以与LIN28A结合。过表达SNHG11致胰腺癌细胞干性能力明显增强,干扰LIN28A致胰腺癌细胞干性能力明显降低,在过表达SNHG11的胰腺癌细胞中下调LIN28A表达,胰腺癌细胞的干性促进能力明显被抑制(P均<0.05);与之相反,干扰SNHG11致胰腺癌细胞干性能力明显降低,过表达LIN28A致胰腺癌细胞干性能力明显增强,在低表达SNHG11的胰腺癌细胞中上调LIN28A表达,可明显逆转胰腺癌细胞的干性抑制作用(P均<0.05)。结论:LncRNA SNHG11可能通过上调LIN28A表达,促进胰腺癌细胞的增殖能力并增强其干性能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA(lncRNA) 核仁小分子RNA宿主基因11(SNHG11) LIN28a 干性 胰腺癌
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NUP98::CCDC28A融合基因阳性成人早期前体T细胞急性淋巴细胞白血病1例
5
作者 刘邵梅 陈平 +3 位作者 刘要伟 董丽丽 窦立萍 黄赛 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第14期755-756,共2页
患者女性,22岁,主诉双侧颜面浮肿伴颌下淋巴结肿大、发热6个月余。2021年12月患者就诊于解放军总医院第一医学中心。CT检查示:纵隔内、双侧腋窝及双侧腹股沟多发肿大淋巴结,前纵隔软组织密度影,盆腔少量积液;超声检查示:双侧颈部及锁骨... 患者女性,22岁,主诉双侧颜面浮肿伴颌下淋巴结肿大、发热6个月余。2021年12月患者就诊于解放军总医院第一医学中心。CT检查示:纵隔内、双侧腋窝及双侧腹股沟多发肿大淋巴结,前纵隔软组织密度影,盆腔少量积液;超声检查示:双侧颈部及锁骨上窝、双侧腋下及双侧腹股沟可见多发低回声结节;淋巴结穿刺病理示:结合形态学表现及免疫组化,符合T淋巴母细胞淋巴瘤;骨髓细胞形态学意见:多考虑淋巴瘤/白血病骨髓象,白血病细胞形态,见图1;骨髓免疫分型结果示:表型异常的幼稚T细胞占28.16%,表达CD7、CD38、CD33,少量细胞表达CD5、HLA-DR. 展开更多
关键词 早期前体T 细胞急性淋巴细胞白血病 融合基因 NUP98::CCDC28a
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毛丝鼠IRF4基因重组表达载体pET-28a(+)的构建及鉴定
6
作者 丁文乔 熊娇娇 《工业微生物》 2025年第5期204-206,共3页
干扰素调节因子4(IRF4)作为免疫调节的重要转录因子,与多种肿瘤的发生发展密切相关。文章旨在克隆毛丝鼠IRF4基因,并构建其原核表达载体pET-28a(+),为深入研究IRF4蛋白的生物学功能提供基础工具。首先,通过PCR技术扩增毛丝鼠IRF4基因片... 干扰素调节因子4(IRF4)作为免疫调节的重要转录因子,与多种肿瘤的发生发展密切相关。文章旨在克隆毛丝鼠IRF4基因,并构建其原核表达载体pET-28a(+),为深入研究IRF4蛋白的生物学功能提供基础工具。首先,通过PCR技术扩增毛丝鼠IRF4基因片段,并利用同源重组方法将其插入经限制性内切酶线性化的pET-28a(+)载体。其次,将产物转化至大肠杆菌TOP10细胞,通过菌落PCR和基因测序鉴定阳性克隆,并将其转化至BL21(DE3)表达细胞,验证重组质粒的稳定性。结果显示,构建的IRF4-pET-28a(+)重组质粒经电泳鉴定片段大小约为1 600 bp,与理论预测一致;插入的IRF4基因序列无误,且能在BL21(DE3)细胞中稳定存在。研究结果为进一步开展IRF4蛋白表达纯化及探索其在肿瘤发生中的作用机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 干扰素调节因子4 pET-28a(+) PCR扩增 同源重组 BL21(DE3)
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紧凑化布局下KYN28A高压开关柜的结构设计改进
7
作者 陈卢明 张纪元 赖美林 《消费电子》 2025年第5期221-223,共3页
紧凑化布局下的KYN28A高压开关柜,提出了一系列结构设计改进方案,旨在提升其性能、安全性和经济性。改进措施包括模块化设计优化、材料与制造工艺升级、空间利用率提升、安全性能强化以及智能化与远程监控。通过这些改进措施不仅提高了... 紧凑化布局下的KYN28A高压开关柜,提出了一系列结构设计改进方案,旨在提升其性能、安全性和经济性。改进措施包括模块化设计优化、材料与制造工艺升级、空间利用率提升、安全性能强化以及智能化与远程监控。通过这些改进措施不仅提高了设备的整体性能,还增强了其在复杂环境中的可靠性和可维护性。基于此,本篇文章对紧凑化布局下KYN28A高压开关柜的结构设计改进进行研究,以供参考。 展开更多
关键词 紧凑化布局 KYN28a 高压开关柜 结构设计 改进方法
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LIN28A、E-cadherin和vimentin在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量：10
8
作者 李幼梅 张思仪 +2 位作者 赵连梅 单保恩 张超 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2017年第4期304-308,312,共6页
目的:研究RNA结合蛋白LIN28A、上皮间质转化相关因子E-cadherin和vimentin在浸润性乳腺癌中的表达及三者的相关性,探讨其对乳腺癌进展的影响。方法:收集40例浸润性乳腺癌组织标本及其对应的癌旁组织,实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫组织化... 目的:研究RNA结合蛋白LIN28A、上皮间质转化相关因子E-cadherin和vimentin在浸润性乳腺癌中的表达及三者的相关性,探讨其对乳腺癌进展的影响。方法:收集40例浸润性乳腺癌组织标本及其对应的癌旁组织,实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫组织化学法分别检测LIN28A、E-cadherin和vimentin的mRNA和蛋白的表达,分析其与临床病理指标之间的关系,TUNNEL法检测LIN28A阳性癌组织中的细胞凋亡情况,统计分析LIN28A和EMT相关蛋白之间的相关性及其与乳腺癌患者生存率之间的关系。结果:qPCR结果显示,LIN28A mRNA在乳腺癌组织中的相对表达水平高于癌旁组织,其与E-cadherin mRNA的表达水平呈负相关,与vimentin mRNA呈正相关(r依次=-0.340和0.380,P均<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,在乳腺癌组织中,LIN28A、Ecadherin和vimentin蛋白表达率分别为60%、55%和65%。LIN28A蛋白的表达与E-cadherin蛋白呈负相关(r依次=-0.533和0.364,P均<0.05),与vimentin蛋白呈正相关。LIN28A蛋白表达与肿瘤大小、病理分级和淋巴结转移有关。TUNEL检测结果显示,LIN28A蛋白表达阳性的乳腺癌组织中凋亡细胞率低于与癌旁组织(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,乳腺癌组织LIN28A蛋白表达阳性患者的生存率低于LIN28A蛋白表达阴性者(P<0.05)。结论:RNA结合蛋白LIN28A可能通过EMT促进乳腺癌的进展和转移,并且LIN28A高表达可能影响乳腺癌患者的预后。 展开更多
关键词 浸润性乳腺癌 LIN28a E-钙黏蛋白 波形蛋白 上皮间质转化 凋亡
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优质香稻不育系川香28A的选育及利用 被引量：10
9
作者 任光俊 陆贤军 +1 位作者 张翅 李青茂 《四川农业大学学报》 CSCD 1998年第4期414-418,共5页
以湘香二Ａ中雄性可育株为父本材料，与Ｄ９０Ａ杂交、回交，通过排除微效恢复基因和微效温敏不育基因，转育成具有Ｄ型不育胞质的优质香稻不育系川香２８Ａ。该不育系的垩白粒率较珍汕９７Ａ低１８倍，垩白面积小７５倍；稻米香味浓... 以湘香二Ａ中雄性可育株为父本材料，与Ｄ９０Ａ杂交、回交，通过排除微效恢复基因和微效温敏不育基因，转育成具有Ｄ型不育胞质的优质香稻不育系川香２８Ａ。该不育系的垩白粒率较珍汕９７Ａ低１８倍，垩白面积小７５倍；稻米香味浓；配制的杂交种亦表现外观和食味品质好。目前，川香２８Ａ已配制出一批优质高产组合。香优１号于１９９７年通过四川省优质杂交稻区域试验；川香２８Ｂ作为优质种质用于保持系米质改良的育种计划之中。 展开更多
关键词 香味 优质 雄性不育系 杂交水稻 川香28a 选育
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构建稳定转化的BmN细胞表达人白介素-28A及表达产物的体外抗肿瘤活性 被引量：2
10
作者 陆叶 郑小坚 +3 位作者 薛仁宇 曹广力 沈卫德 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期452-457,共6页
为建立能表达人白介素-28A(hIL-28A)基因的稳定转化家蚕卵巢细胞(BmN)系,构建了重组表达载体pIZT/V5-His-hIL-28A并转染BmN细胞,采用终浓度为300～400μg/mL的博莱霉素(zeocin)筛选2个月后,获得了稳定转化BmN细胞系。SDS-PAGE和Western ... 为建立能表达人白介素-28A(hIL-28A)基因的稳定转化家蚕卵巢细胞(BmN)系,构建了重组表达载体pIZT/V5-His-hIL-28A并转染BmN细胞,采用终浓度为300～400μg/mL的博莱霉素(zeocin)筛选2个月后,获得了稳定转化BmN细胞系。SDS-PAGE和Western blotting检测显示在稳定转化BmN细胞中表达的重组hIL-28A蛋白分子质量约为26kD;用ELISA试剂盒测定hIL-28A的表达水平约为2.035×10-5ng/个细胞。用噻唑蓝法(MTT法)检测hIL-28A的体外抗肿瘤活性,结果显示其对肺癌细胞A549、急性早幼粒细胞白血病细胞HL60、肝癌细胞BEL-7402和乳腺癌细胞M231的半数抑制浓度(IC50)分别为3.21、2.84、6.29和9.32ng/mL。研究结果表明hIL-28A可在稳定转化BmN细胞中表达,表达产物具有体外抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 人白介素-28a 转化BmN细胞 基因表达 抗肿瘤活性
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KYN28A-12型中置式开关柜标准化设计研究 被引量：8
11
作者 冯英 吕军 +4 位作者 王承玉 李鹏 兰剑 莫金龙 盛慧 《中国电力》 CSCD 北大核心 2017年第11期65-71,共7页
为满足不同厂家设备在一定范围和一定时期的通用互换使用,提升开关柜设备的运维便利性,选择目前市场上应用较多且运行相对成熟可靠的KYN28A-12型中置式开关柜开展标准化设计研究,介绍了标准化设计的目的、设计思路、输入条件和主要设计... 为满足不同厂家设备在一定范围和一定时期的通用互换使用,提升开关柜设备的运维便利性,选择目前市场上应用较多且运行相对成熟可靠的KYN28A-12型中置式开关柜开展标准化设计研究,介绍了标准化设计的目的、设计思路、输入条件和主要设计内容。重点分析了KYN28A-12型中置式开关柜的典型方案确定,对一次接口及土建接口、二次接口以及关键元件的标准化设计原则及结果进行了详细说明,在满足配网设备需求的基础上兼顾变电站中配电设备的要求,提出了统一的标准化设计方案,为后续标准化建设工作提供重要支撑。 展开更多
关键词 配网设备 标准化设计 KYN28a-12 典型方案 一次接口 二次接口
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pET28a-TAT-LacZ重组子的构建 被引量：3
12
作者 严世荣 龚坚 +1 位作者 严洁 邱云城 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期141-144,共4页
为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT-β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌,利用组氨酸亲... 为了构建高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,观察表达的融合蛋白TAT-β-Gal能否穿过生物膜,使用人工合成编码TAT蛋白转导区的DNA片段,插入载体pET28a组氨酸编码区后再连接lacZ基因,组成pET28a-TAT-LacZ重组表达子,转化大肠杆菌,利用组氨酸亲和层析柱纯化TAT-β-Gal融合蛋白,将融合蛋白加入培养的平滑肌细胞。得到高度纯化的、有活性的TAT-β-Gal融合蛋白,TAT-β-Gal在短时间内进入体外培养平滑肌细胞,成功地构建了高表达pET28a-TAT-LacZ重组子,并在体外培养的细胞中证实TAT-β-Gal融合蛋白穿透生物膜的能力,为肽类、生物大分子药物进入组织细胞内发挥治疗作用提供了理论基础。 展开更多
关键词 pET28a质粒 TAT蛋白转导区 TAT-β-Gal融合蛋白 平滑肌细胞
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含产气荚膜梭菌肠毒素基因重组质粒pET-28a-CPE的构建和表达 被引量：1
13
作者 毕罡 靳风烁 +4 位作者 吴刚 李彦锋 李黔生 张克勤 孙中义 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第21期2430-2432,2436,共4页
目的构建含全长产气荚膜梭菌肠毒素(CPE)基因的重组表达质粒pET-28a-CPE并进行原核表达。方法培养并提取表达肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615的基因组DNA,PCR扩增出全长CPE基因片段并连接入pET-28a载体质粒中,构建重组原核表达质粒pE... 目的构建含全长产气荚膜梭菌肠毒素(CPE)基因的重组表达质粒pET-28a-CPE并进行原核表达。方法培养并提取表达肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615的基因组DNA,PCR扩增出全长CPE基因片段并连接入pET-28a载体质粒中,构建重组原核表达质粒pET-28a-CPE,进行酶切及测序鉴定,并转化入感受态大肠杆菌(E.coli)BL21中,用IPTG诱导CPE表达。结果复苏、培养成功产肠毒素的产气荚膜梭菌标准菌株64615,成功构建了表达质粒pET-28a-CPE,经酶切及测序鉴定结果与设计的完全相符,成功用E.coli BL21进行了原核表达,目的蛋白CPE占总表达蛋白45.37%。结论本实验成功构建并表达了含CPE的重组质粒pET-28a-CPE,为进一步观察CPE对前列腺肿瘤等的生物学作用奠定了基础。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌肠毒素 表达 PET 28a 前列腺癌
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性早熟雌性Sprague-Dawle大鼠下丘脑Lin28a和Lin28b表达异常 被引量：2
14
作者 杨芳琳 于宝生 +3 位作者 单晔 王安茹 高兰英 彭娅 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第12期2210-2213,2218,共5页
目的:研究正常雌性Sprague-Dawle(SD)大鼠不同性发育阶段及雌激素诱导性早熟后下丘脑Lin28a和Lin28b的表达及意义。方法:1)于雌性SD大鼠出生后15日(postnatal day 15,PND15)、PND23、PND35荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRN... 目的:研究正常雌性Sprague-Dawle(SD)大鼠不同性发育阶段及雌激素诱导性早熟后下丘脑Lin28a和Lin28b的表达及意义。方法:1)于雌性SD大鼠出生后15日(postnatal day 15,PND15)、PND23、PND35荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA的表达,同时以ELISA法检测血清黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平变化;2)苯甲酸雌二醇(estradiol benzoate,EB)诱导的性早熟大鼠随机分为EB-1组和EB-2组,分别于阴道开口(vaginal opening,VO)时及PND56两个时间点处死,相应的发育阶段的大鼠用无菌芝麻油(sesame oil,OIL)作为对照分为OIL-1和OIL-2组;荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA的表达,ELISA法检测LH和E2水平变化,并观察性早熟对大鼠阴道开口、体重、顶臀径、胫骨长等生长发育指标的影响。结果:1)PND15、PND23和PND35组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达、血清LH和E2水平无统计学差异(P>0.05);2)EB-1组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达高于OIL-1组(P<0.05),血清LH和E2水平与OIL-1组相比无统计学差异(P>0.05);EB-2组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达高于OIL-2组(P<0.05),血清LH和E2水平低于OIL-2组(P<0.05);3)与OIL-2组比较,EB-2组VO时间明显提前(P<0.01),体重、顶臀长、胫骨长差异无统计学差异(P>0.05)。结论:外源性雌激素引起的性早熟可能导致下丘脑Lin28a和Lin28b表达异常。 展开更多
关键词 性早熟 Lin28a Lin28b 下丘脑
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冷却方式对Fe-28Al-5Cr-0.06B合金组织和性能的影响 被引量：5
15
作者 谢斌 李亚敏 +1 位作者 郝远 安蓓 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2009年第1期63-65,共3页
研究了水玻璃砂型和不锈钢金属型对Fe-28Al-5Cr-0.06B合金组织、力学性能和冲击断裂行为的影响。结果表明:采用不锈钢金属型冷却,可以细化合金的铸态组织;在其他工艺相同的条件下,合金的抗拉强度提高了29MPa,硬度有所增加,伸长率稍有下... 研究了水玻璃砂型和不锈钢金属型对Fe-28Al-5Cr-0.06B合金组织、力学性能和冲击断裂行为的影响。结果表明:采用不锈钢金属型冷却,可以细化合金的铸态组织;在其他工艺相同的条件下,合金的抗拉强度提高了29MPa,硬度有所增加,伸长率稍有下降;合金的冲击断口由沿晶断裂向沿晶+穿晶混合型断裂转变。 展开更多
关键词 Fe-28al-5Cr-0.06B合金 力学性能 冲击断口
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RNA结合蛋白Lin28A差异表达可调控牙周膜干细胞的成骨分化 被引量：2
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作者 何琴 卜艳 +3 位作者 林光磊 罗晶 雍敏 黄永清 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第33期5283-5291,共9页
背景:Lin28A能影响细胞活动的多个方面,包括胚胎干细胞的自我更新、体细胞的重编程、个体的生长发育、组织代谢及致癌作用等,而它对牙周膜干细胞成骨分化的影响国内外均没有深入研究,其影响机制更未见报道。目的:探索Lin28A对牙周膜干... 背景:Lin28A能影响细胞活动的多个方面,包括胚胎干细胞的自我更新、体细胞的重编程、个体的生长发育、组织代谢及致癌作用等,而它对牙周膜干细胞成骨分化的影响国内外均没有深入研究,其影响机制更未见报道。目的:探索Lin28A对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法:经典酶消化法分离、培养人牙周膜干细胞,qRT-PCR检测Lin28A在该类细胞中的分布情况及其在成骨诱导不同时间的差异性表达;构建Lin28A过表达及干扰表达的慢病毒载体转染至牙周膜干细胞,荧光显微镜观察转染效果;qRT-PCR验证慢病毒转染后Lin28A的表达差异,并进一步从正反两个方面检测成骨诱导培养过程中成骨基因碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2和骨桥蛋白的表达量以及碱性磷酸酶染色和茜素红染色,Western blot检测Runt相关转录因子2的蛋白表达水平;应用生物信息学技术预测和双荧光素酶结合实验验证与Lin28A有关的let-7家族成员之间的相关关系,并通过成骨诱导培养差异表达Lin28A的牙周膜干细胞,测定细胞成骨分化过程中表达变化最明显的miRNA。结果与结论:(1)Lin28A富集在牙周膜干细胞的细胞核中,且在成骨诱导不同时间后呈表达上升的趋势;(2)与空白对照组比较,在过表达Lin28A的牙周膜干细胞模型中,碱性磷酸酶染色和茜素红染色相较空白对照组明显深染,成骨基因碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2及骨桥蛋白的表达量分别增加3.3倍、5.1倍及2.2倍(P<0.01);干扰Lin28A表达的细胞模型中,碱性磷酸酶染色和茜素红染色相较对照组染色减少,成骨基因碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2及骨桥蛋白的表达量分别下降19%,61%及10%(P<0.01);(3)成骨相关转录因子Runt相关转录因子2的蛋白表达水平与mRNA的差异趋势一致,过表达组呈上升趋势,干扰组呈下降趋势;(4)生物信息学预测出与Lin28A相关的let-7家族成员有8个,分别为let-7a、let-7b、let-7c、let-7d、let-7e、let-7f、let-7g和let-7i,经正常培养和成骨诱导培养筛选发现let-7a和let-7c随Lin28A的表达差异而发生明显的变化,以let-7a的表达趋势最显著;双荧光素酶结合实验也证实let-7a与Lin28A的3’-UTR直接结合,参与影响牙周膜干细胞的成骨分化过程;(5)结果提示:Lin28A参与调控牙周膜干细胞成骨分化,呈正性相关,即过表达Lin28A使牙周膜干细胞成骨能力增强,干扰Lin28A表达后牙周膜干细胞成骨能力减弱;牙周膜干细胞成骨分化受到Lin28A的调控影响。 展开更多
关键词 牙周膜干细胞 成骨分化 Lin28a 慢病毒载体 转染 基因干扰 let-7a
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多浪羊Lin28A基因克隆及其在初情期启动过程中的表达研究 被引量：3
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作者 邢凤 高庆华 +2 位作者 祁鑫 李庆瑾 李闯 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期78-85,共8页
旨在克隆绵羊Lin28A基因cDNA序列,探讨其在初情期启动过程中的表达规律和调控特性。本研究分别在初情期前(第1次发情前1周)、初情期、初情期后(第1次发情后1周)屠宰多浪羊各5只。采集下丘脑、垂体、卵巢组织,对其Lin28A基因cDNA进行克隆... 旨在克隆绵羊Lin28A基因cDNA序列,探讨其在初情期启动过程中的表达规律和调控特性。本研究分别在初情期前(第1次发情前1周)、初情期、初情期后(第1次发情后1周)屠宰多浪羊各5只。采集下丘脑、垂体、卵巢组织,对其Lin28A基因cDNA进行克隆,利用DNAman 6.0软件对多浪羊Lin28A氨基酸与其他物种的Lin28A氨基酸序列进行同源性比较。采用Real-time PCR技术分析下丘脑、垂体、卵巢中Lin28A基因、let-7a、let-7b在初情期启动过程中表达的变化规律。结果表明,多浪羊Lin28AcDNA序列为3 581bp,包括2 963bp的3′UTR和618bp CDS;多浪羊Lin28A氨基酸与人、家鼠、牛和绵羊的同源性分别是87.56%、88.52%、92.68%和89.95%,与鸡、斑马鱼的同源性分别是76.10%、61.84%。在初情期前至初情期的过程中,下丘脑、卵巢中Lin28A表达显著降低(P<0.05),let-7a、let-7b的表达没有显著变化(P>0.05)。本研究结果对于揭示Lin28A基因在绵羊初情期启动中的作用及机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 多浪羊 初情期 Lin28a let-7a let-7b
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Lin28A促进结肠癌细胞对5-FU化疗敏感性的实验研究 被引量：1
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作者 张崇友 张桂梅 +2 位作者 汪丹丹 赵丽 杨微 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第27期5246-5249,5286,共5页
目的:探讨Lin28A对结肠癌5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响及其分子机制。方法:免疫组化方法检测人结肠癌和正常粘膜组织中Lin28A蛋白表达情况;荧光素酶法检测HCT116细胞活性;实时荧光定量PCR方法检测HCT116细胞中Let-7表达水平。结果:... 目的:探讨Lin28A对结肠癌5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响及其分子机制。方法:免疫组化方法检测人结肠癌和正常粘膜组织中Lin28A蛋白表达情况;荧光素酶法检测HCT116细胞活性;实时荧光定量PCR方法检测HCT116细胞中Let-7表达水平。结果:73.3%人结肠癌患者Lin28A蛋白表达上调;过表达Lin28A组与对照组相比,5-FU处理后细胞活性显著降低(P_(60μg)<0.01,P_(80μg)<0.01),Let-7表达显著降低;过表达Let-7组与对照组相比,5-FU治疗后细胞活性显著降低(P_(40μg)<0.05,P_(60μg)<0.01,P_(80μg)<0.01)。结论:Lin28A可增强肿瘤细胞化疗敏感性,而且这一效应不依赖Let-7。 展开更多
关键词 结肠癌 Lin28a 化疗敏感性 LET-7
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LIN28A和LAMP1在膀胱癌细胞系中的表达及意义 被引量：3
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作者 张艳敏 秦洁 +3 位作者 漆正宇 龙霞 崔光辉 郭新 《临床泌尿外科杂志》 2014年第1期73-78,共6页
目的:探讨LIN28A和LAMP1在膀胱癌细胞系中表达情况,以及两者之间的关系,推测其可能临床意义及对肿瘤进展的影响。方法:采用RT-PCR检测膀胱癌细胞系LIN28A、LIN28B和LAMP1表达,免疫荧光检测LIN28A和LAMP1二者蛋白表达定位;LIN28A敲减后通... 目的:探讨LIN28A和LAMP1在膀胱癌细胞系中表达情况,以及两者之间的关系,推测其可能临床意义及对肿瘤进展的影响。方法:采用RT-PCR检测膀胱癌细胞系LIN28A、LIN28B和LAMP1表达,免疫荧光检测LIN28A和LAMP1二者蛋白表达定位;LIN28A敲减后通过qRT-PCR检测LAMP1的mRNA表达变化。结果:5个癌细胞系T24、UM-UC3、J82、5637和SW780和正常移行上皮细胞系SV-HUC-1均表达LIN28A,其中J82也表达LIN28B;5个癌细胞系均表达LAMP1,SV-HUC-1不表达LAMP1;LIN28A和LAMP1蛋白均定位在胞浆;LIN28A敲减后对LAMP1的mRNA表达变化无明显影响,相应蛋白变化需要进一步验证。结论:4个膀胱癌细胞系T24、5637、UM-UC3和SW780可以用于LIN28A与肿瘤相关的机制研究,而J82可用于LIN28B的机制研究。LIN28A对肿瘤细胞和干细胞的调控方面可能具有相似性,敲减后对其靶点mRNA表达量无明显影响,LAMP1蛋白可能对肿瘤细胞侵袭转移具有抑制作用。 展开更多
关键词 LIN28a LAMP1 膀胱癌
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猪蛔虫感染相关基因28A02的表达谱及其全长cDNA的克隆和分析
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作者 黄翠琴 廖生钱 +3 位作者 王寿昆 黄其春 郑新添 朱兴全 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期988-990,共3页
为鉴定猪蛔虫与感染相关的差异表达基因,本实验由猪蛔虫感染期幼虫差异消减cDNA文库中挑选EST序列(28A02)为研究对象,首先,经半定量RT-PCR方法分析该基因在各期虫体的表达情况。结果显示:该基因在猪蛔虫感染期幼虫和肺三期幼虫中均有表... 为鉴定猪蛔虫与感染相关的差异表达基因,本实验由猪蛔虫感染期幼虫差异消减cDNA文库中挑选EST序列(28A02)为研究对象,首先,经半定量RT-PCR方法分析该基因在各期虫体的表达情况。结果显示:该基因在猪蛔虫感染期幼虫和肺三期幼虫中均有表达,并且在感染期幼虫表达丰度最高,在其它各期虫体包括雌虫、雄虫、虫卵和第四期幼虫均未检测出该基因的表达。其次,以已知的EST序列为模板,采用RACE技术获得了864 bp的全长cDNA序列,包含一个完整的长约450 bp的开发阅读框。另外,经生物信息学分析显示,该基因编码的氨基酸序列与众多物种的ATP合酶有43%～47%的相似性,推测该基因可能参与编码猪蛔虫的线粒体ATP合酶,这为进一步研究其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 猪蛔虫 感染期幼虫 28a02基因 半定量RT-PCR 全长CDNA 生物信息学分析
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