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HBV相关糖基转移酶Glt25D2的核苷酸单糖结合活性分析 被引量：2
1
作者 董芳 张锦前 +3 位作者 肖凡 朱新宇 成军 魏红山 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第2期93-96,共4页
目的体外克隆表达人类糖基转移酶Glt25D2,利用Biacore分析系统对其活化单糖及钙离子结合活性进行分析。方法构建Glt25D2原核表达载体pET32a-Glt25D2,转化大肠埃希菌BL21,克隆表达糖基转移酶Glt25D2。离心集菌,制备蛋白样品,进行SDS-PAG... 目的体外克隆表达人类糖基转移酶Glt25D2,利用Biacore分析系统对其活化单糖及钙离子结合活性进行分析。方法构建Glt25D2原核表达载体pET32a-Glt25D2,转化大肠埃希菌BL21,克隆表达糖基转移酶Glt25D2。离心集菌,制备蛋白样品,进行SDS-PAGE电泳分析;融合蛋白线性梯度洗脱,Ni-NTA柱纯化,后做Western blot鉴定。用纯化后的Glt25D2融合蛋白包被CM5芯片,分别用不同浓度的活性单糖及钙离子灌注芯片,利用Biacore生物分子相互作用分析仪分析Glt25D2的活化单糖及钙离子结合活性。结果体外成功表达人类糖基转移酶Glt25D2融合蛋白。Biacore分析显示,该糖基转移酶与400、200、100、50μg/ml唾液酸的结合活性分别为108、71、50和20 RU,与200、100、50、0μg/ml钙离子的结合活性分别为37、20、10和0 RU。结论人类糖基转移酶Glt25D2重组蛋白具有较强的钙离子及唾液酸结合活性。 展开更多
关键词 糖基转移酶 原核表达 Glt25d2 生物分子相互作用分析
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GLT25D1血清水平与慢性乙型肝炎肝纤维化进程相关性分析 被引量：2
2
作者 张仁雯 郝晓花 +6 位作者 刘燃 张晓静 任慧 李红敏 王智强 成军 魏红山 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2013年第4期360-366,共7页
目的探讨GLT25D1血清水平与慢性乙型肝炎肝纤维化进程的相关性。方法通过抗原表位预测软件BepiPred 1.0Server将GLT25D1基因片段分为GLT25D1-1和GLT25D1-2两部分,PCR扩增获得目的片段,构建其原核表达质粒;对制备的多克隆抗体进行效价及... 目的探讨GLT25D1血清水平与慢性乙型肝炎肝纤维化进程的相关性。方法通过抗原表位预测软件BepiPred 1.0Server将GLT25D1基因片段分为GLT25D1-1和GLT25D1-2两部分,PCR扩增获得目的片段,构建其原核表达质粒;对制备的多克隆抗体进行效价及特异性分析。通过以GLT25D1为抗原的ELISA双抗体夹心的方法,检测其在HBV感染不同阶段的患者的血清水平。结果成功表达重组蛋白,Western blot鉴定正确;成功制备兔抗人(GLT25D1-1、GLT25D1-2)的多克隆抗体,效价较高,特异性良好。通过ELISA方法检测HBV感染患者血清,慢性乙肝(病理结果不超过S3期)、肝硬化(S3-4期及S4期)以及肝癌患者中GLT25D1的OD值较正常组均有显著性差异(P<0.01)。结论通过血清学检测结果,我们发现GTL25D1存在于HBV感染的肝病的各进程中,进而我们推测血清GLT25D1可能会作为检测肝纤维化进程的一个新的血清学指标。 展开更多
关键词 糖基转移酶 GLT25d1 多克隆抗体 ELISA 肝纤维化 慢性乙型肝炎
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老年脆性髋部骨折患者并发肺炎与血清维生素25D水平的关系 被引量：6
3
作者 张雪莲 陆灿雄 王明熹 《中国医药科学》 2019年第13期206-208,237,共4页
目的分析老年脆性髋部骨折患者并发肺炎与血清维生素25D水平之间的关系。方法回顾性分析2017年4月~2018年4月我院收治的老年脆性骨折200例,根据是否并发肺炎将其分为两组,Ⅰ组为并发肺炎患者,共100例,Ⅱ组为未并发肺炎患者,共计100例,... 目的分析老年脆性髋部骨折患者并发肺炎与血清维生素25D水平之间的关系。方法回顾性分析2017年4月~2018年4月我院收治的老年脆性骨折200例,根据是否并发肺炎将其分为两组,Ⅰ组为并发肺炎患者,共100例,Ⅱ组为未并发肺炎患者,共计100例,均对其血清维生素25D水平进行检测,对比两组患者检测结果。结果(1)两组患者性别、体重、身高、体质指数、卧床时间、手术时间、术中出血量、有无并发症比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者维生素25D水平、年龄、吸烟史比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Ⅰ组患者血清维生素25D水平缺乏发生率62.0%高于Ⅱ组患者血清维生素25D水平缺乏发生率40.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)经Logistic回归分析法对肺炎影响因素进行分析得出,血清维生素25D水平、年龄、吸烟是引发肺炎的重要因素。结论老年脆性髋部骨折患者并发肺炎与年龄、血清维生素25D水平及吸烟有着密切的关系,血清维生素25D对脆性髋部骨折患者并发肺炎有着预测的作用,针对维生素25D缺乏的患者应尽早进行干预,不仅可以降低或避免肺炎的几率,更促进了预后。 展开更多
关键词 老年 脆性髋部骨折 肺炎 血清维生素25d
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羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d的原核表达、鉴定及纯化 被引量：1
4
作者 张蕾 张芳琳 +5 位作者 张亮 王海涛 胡刚 吴兴安 徐志凯 白文涛 《科学技术与工程》 2010年第25期6146-6149,6154,共5页
研究羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d基因的克隆,原核表达,以及纯化,根据羊布鲁菌M5株外膜蛋白Omp25d蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为650bp的目的基因片断,克隆入融合表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-Omp25d。在大肠杆菌中将该蛋... 研究羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d基因的克隆,原核表达,以及纯化,根据羊布鲁菌M5株外膜蛋白Omp25d蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为650bp的目的基因片断,克隆入融合表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-Omp25d。在大肠杆菌中将该蛋白表达并用亲和层析法纯化。用Western-blot分析方法鉴定GST-Omp25d蛋白。结果成功地构建了pGEX-4T-1-Omp25d原核表达载体并在大肠杆菌中表达了Omp25d基因,纯化后所获得的融合蛋白与兔抗布鲁菌血清发生特异性反应。表明研究成功构建了pGEX-4T-1-Omp25d元和表达载体,并且在大肠杆菌中进行表达,纯化的融合蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 羊布鲁菌 Omp25d蛋白 克隆 表达 纯化
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糖基因GLT25D1和GLT25D2缺失对APAP诱导的急性药物性肝损伤的影响
5
作者 张福阳 何玲玲 +4 位作者 杨君茹 高美欣 王世伟 肖凡 魏红山 《医学分子生物学杂志》 CAS 2021年第2期96-103,共8页
目的 研究糖基因Glt25D1和Glt25D2在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的急性药物性肝损伤中的可能作用及机制.方法 抽取6~8周雄性糖基因Glt25D1和Glt25D2敲除小鼠(Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-))及野生型小鼠(Wild type,WT),构建... 目的 研究糖基因Glt25D1和Glt25D2在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的急性药物性肝损伤中的可能作用及机制.方法 抽取6~8周雄性糖基因Glt25D1和Glt25D2敲除小鼠(Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-))及野生型小鼠(Wild type,WT),构建药物性肝损伤模型.实验组腹腔内注射500 mg/kg APAP,对照组给予相同剂量生理盐水.造模6 h后处死小鼠.检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,观察肝组织病理.分离提纯小鼠肝原代细胞,分别加APAP和衣霉素(Tunicamycin,Tm)刺激6 h后收取细胞,提取细胞蛋白和RNA.q-PCR、Western印迹检测小鼠肝脏组织及原代肝细胞Glt25D1和Glt25D2、内质网应激相关蛋白、凋亡相关蛋白、炎性因子的表达变化趋势.结果 Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-)造模组小鼠ALT和AST水平均显著高于WT造模组.小鼠肝脏HE染色可见,Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-)造模组小鼠肝损伤程度比WT造模组更严重.Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-) APAP造模组GRP78、chop以及cleaved caspase-12、cleaved caspase-3等内质网应激相关蛋白的表达量高于WT造模组,同时伴有线粒体细胞色素C的释放.结论 Glt25D1和Glt25D2基因敲低加重小鼠APAP诱导的急性肝损伤,促进内质网应激,促进肝细胞凋亡. 展开更多
关键词 内质网应激 急性肝损伤 对乙酰氨基酚 糖基化修饰 Glt25d1 Glt25d2
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Glt25d1基因敲低对刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎小鼠巨噬细胞和中性粒细胞的影响 被引量：4
6
作者 高美欣 何玲玲 +6 位作者 叶小慧 杨君茹 李佳 张曼卡 张健 肖凡 魏红山 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2020年第1期36-43,共8页
目的研究Glt25d1基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎中的作用及其对巨噬细胞和中性粒细胞的影响。方法随机抽取6~8周无特定病原体雌性Glt25d1+/-小鼠及与其同窝出生的野生型(wild type,WT)小鼠,体质量(20±... 目的研究Glt25d1基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎中的作用及其对巨噬细胞和中性粒细胞的影响。方法随机抽取6~8周无特定病原体雌性Glt25d1+/-小鼠及与其同窝出生的野生型(wild type,WT)小鼠,体质量(20±2)g,分为WT对照组、Glt25d1+/-对照组、WT造模组和Glt25d1+/-造模组,每组8只。造模组通过内眦静脉注射Con A,剂量为10 mg/kg,对照组给予相同剂量生理盐水注射。造模12 h后处死小鼠。检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST)水平,观察肝组织病理。采用流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏和肝脏中巨噬细胞和中性粒细胞的比例。采用定量逆转录PCR(quantitative reverse transcriptase-mediated PCR,qRT-PCR)检测肝脏中单核-巨噬细胞趋化蛋白-1(monocyte/macrophage chemotaxis proteinⅠ,MCP-Ⅰ)、巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory proteinⅠα,MIP-Ⅰα)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatoryproteinⅡ,MIP-Ⅱ)及淋巴细胞抗原6G(lymphocyteantigen6complexlocusG,Ly6G)等mRNA的相对表达量。结果 WT对照组和Glt25d1+/-对照组小鼠ALT [(52.00±18.19)U/L vs (45.00±6.85)U/L]和AST [(168.17±21.33)U/L vs(276.17±83.37)U/L]水平差异无统计学意义(t值分别为0.360、1.255,P值分别为0.7263、0.2589)。Con A造模12 h后,WT造模组小鼠ALT和AST水平分别为(3089.67±663.92)U/L、(3099.50±519.15)U/L,Glt25d1+/-造模组小鼠ALT和AST水平分别(11565.17±1381.38)U/L、(10875.17±1558.68)U/L,均显著高于未造模组(P均<0.05),Glt25d1+/-造模组小鼠ALT和AST水平均显著高于WT造模组(t值分别为5.530、4.733,P值分别为0.0003、0.0032)。肝组织HE染色示:WT对照组和Glt25d1+/-对照组小鼠肝组织未见明显损伤,Con A诱导12 h后,与WT Con A造模组小鼠相比,Glt25d1+/-造模组小鼠肝脏坏死面积更广、汇管区炎性细胞浸润更显著。Glt25d1+/-对照组小鼠脾脏中巨噬细胞比例显著高于WT对照组[(5.04±0.32)%vs(3.48±0.31)%],差异有统计学意义(t=2.954,P=0.0131),外周血[(0.26±0.09)%vs(0.63±0.16)%]和肝脏[(1.58±0.11)%vs(2.83±0.43)%]中差异无统计学意义(t值分别为1.456、1.626,P值分别为0.1733、0.1351)。Con A诱导12h后,与WT造模组相比,Glt25d1+/-造模组小鼠外周血中巨噬细胞比例显著降低[(0.12±0.21)%vs (0.43±0.10)%,t=2.955,P=0.0144],肝脏中巨噬细胞比例显著升高[(8.34±0.30)%vs (1.03±0.53)%,t=6.992,P=0.0002],脾脏中巨噬细胞比例无显著差异[(3.98±0.39)%vs (3.82±0.21)%,t=0.372,P=0.7173]。与WT对照组小鼠相比,Glt25d1+/-对照组小鼠脾脏中中性粒细胞比例显著升高[(5.20±0.76)%vs (2.46±0.35)%,t=3.836,P=0.0028],外周血[(0.67±0.26)%vs (1.96±0.77)%]和肝脏[(3.68±1.33)%vs (3.76±1.12)%]中中性粒细胞比例无显著差异(t值分别为1.078、0.039,P值分别为0.3040、0.9698)。Con A诱导12 h后,与WT造模组小鼠相比,Glt25d1+/-造模组小鼠外周血中性粒细胞比例显著降低[(1.37±0.22)%vs (14.40±2.72)%,t=4.782,P=0.0088],肝脏中巨噬细胞比例显著升高[(8.08±1.93)%vs (1.64±0.71)%,t=3.788,P=0.0043],脾脏中差异无统计学意义[(5.81±0.84)%vs (5.96±0.42)%,t=0.176,P=0.8621]。WT对照组小鼠MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G mRNA相对表达量分别为0.66±0.31、1.08±0.23、1.04±0.17、1.05±0.19,Glt25d1+/-对照组小鼠上述指标分别为0.60±0.13、1.56±0.11、0.77±0.07、0.92±0.16,差异均无统计学意义(P均> 0.05)。WT造模组小鼠MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G mRNA相对表达量分别为1.29±0.41、1.11±0.18、1.16±0.19、0.90±0.20,Glt25d1+/-造模组小鼠上述指标分别为2.51±0.26、4.72±0.45、2.62±0.36、2.36±0.59,Glt25d1+/-造模组均显著高于WT造模组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 Glt25d1基因敲低可加重小鼠Con A诱导的自身免疫性肝炎,降低外周血巨噬细胞和中性粒细胞比例,升高肝脏中巨噬细胞和中性粒细胞比例,并诱导肝脏细胞因子如MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G转录水平升高。 展开更多
关键词 Glt25d1 自身免疫性肝炎 巨噬细胞 中性粒细胞
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胶原糖基化Glcα1和2Galβ1修饰基因(GLT25D1)敲低小鼠模型的制备与基因型鉴定
7
作者 叶小慧 李玉凤 +6 位作者 张一帆 何玲玲 张曼卡 马慧敏 肖凡 黄玉波 魏红山 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2018年第2期25-29,共5页
目的建立介导胶原糖基化Glcα1、2Galβ1修饰基因(GLT25D1)敲低小鼠模型,为研究其在肝脏疾病中的作用奠定基础。方法基于Cre-loxp重组酶系统,采用胚胎干细胞线性打靶技术,获得同源重组的干细胞,繁殖嵌合体,获得杂合子GLT25D1^(+/-)小鼠... 目的建立介导胶原糖基化Glcα1、2Galβ1修饰基因(GLT25D1)敲低小鼠模型,为研究其在肝脏疾病中的作用奠定基础。方法基于Cre-loxp重组酶系统,采用胚胎干细胞线性打靶技术,获得同源重组的干细胞,繁殖嵌合体,获得杂合子GLT25D1^(+/-)小鼠。随后将GLT25D1^(+/-)小鼠自交。通过PCR凝胶电泳技术对子代小鼠的基因型进行鉴定。采用Western blot技术检测GLT25D1在WT型小鼠(wild type,WT)和杂合子GLT25D1^(+/-)小鼠各组织的表达。比较WT和GLT25D1^(+/-)小鼠的生育情况、子代小鼠基因型比例及出生20天的体重差异。结果 GLT25D1^(+/-)小鼠配笼繁殖的264只子代小鼠中,杂合子GLT25D1^(+/-)小鼠152只,WT小鼠112只,无GLT25D1-/-小鼠。GLT25D1^(+/-)小鼠数量和WT小鼠数量的比值低于孟德尔遗传定律的2∶1(χ~2=9.818,P=0.002)。Western blot示GLT25D1蛋白在WT小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑和淋巴结等重要组织中均有表达,其中在肝、脾和肺中高表达,肾和淋巴结中度表达,心和脑弱表达,GLT25D1^(+/-)小鼠各组织表达水平均低于WT型小鼠。WT和GLT25D1^(+/-)小鼠在外观和行为上无显著差异,GLT25D1^(+/-)小鼠出生后20天体重显著低于WT型小鼠(t=2.520,P=0.0177)。GLT25D1^(+/-)小鼠交配后平均每窝出生的鼠仔数目为4只,低于WT小鼠平均鼠仔数7只(t=-8.482,P<0.001)。结论 GLT25D1基因敲低后会导致GLT25D1-/-胚胎致死,且影响部分GLT25D1^(+/-)小鼠正常出生,GLT25D1^(+/-)小鼠出生后20天体重减轻,繁殖能力下降。 展开更多
关键词 GLT25d1 糖基化 胶原 纤维化 小鼠
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Glt25d1基因通过调节NKT细胞及Treg细胞比例加重Con A诱导的免疫性肝损伤
8
作者 韦何锐 高美欣 +1 位作者 肖凡 魏红山 《中国肝脏病杂志（电子版）》 CAS 2023年第4期33-38,共6页
目的 探讨胶原β(1-O)半乳糖基转移酶[collagen β(1-O) galactosyltransferase 1,COLGALT1/GLT25D1]基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝损伤中的作用及可能机制。方法 6~8周雌性野生型(wild type,WT)小鼠和Glt2... 目的 探讨胶原β(1-O)半乳糖基转移酶[collagen β(1-O) galactosyltransferase 1,COLGALT1/GLT25D1]基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝损伤中的作用及可能机制。方法 6~8周雌性野生型(wild type,WT)小鼠和Glt25d1基因敲低杂合子(Glt25d1^(+/-))小鼠分别分为2组(对照组和Con A造模组),每组中WT小鼠和Glt25d1^(+/-)小鼠均各有6只。Con A以10 mg/kg体质量的剂量经内眦静脉丛给药。于造模后12 h处死小鼠。留取血浆,检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)水平,留取肝组织,用于肝组织病理学评估和肝脏GLT25D1蛋白表达量测定。制备肝脏、脾脏及外周血单细胞悬液,运用流式细胞术比较两种小鼠的调节性T(regulatory T,Treg)细胞、自然杀伤T(natural killer T,NKT)细胞比例,并比较NKT细胞表面凋亡相关因子配体(factor related apoptosis ligand,FasL)表达差异。结果 对照组和Con A造模组中Glt25d1^(+/-)小鼠肝组织GLT25D1表达量均显著低于WT小鼠(对照组:0.342±0.168 vs1.144±0.169,t=5.841,P=0.004;Con A造模组:0.264±0.087 vs 0.964±0.058,t=11.640,P=0.0003)。经Con A诱导12 h后,Glt25d1^(+/-)小鼠ALT水平显著高于WT小鼠[(10155.2±4489.5)U/L vs (3078.5±111.0)U/L;t=-3.522,P=0.024]。肝组织HE染色显示Glt25d1^(+/-)小鼠肝板结构损坏更为严重,肝脏坏死区域更加广泛,汇管区炎性细胞浸润更加显著。流式细胞术检测显示,Con A造模组中Glt25d1^(+/-)小鼠脾脏中Treg细胞频数较WT小鼠显著减少[(7.849±1.116)%vs (9.892±1.762)%;t=2.978,P=0.008],肝脏NKT细胞频数[(9.244±6.898)%vs (3.376±4.794)%;t=-2.253,P=0.037]和NKT细胞FasL表达量[(29.62±4.960)%vs (16.43±3.964)%;t=-5.027,P=0.001]显著高于WT小鼠。结论 Glt25d1基因敲低加重Con A诱导的免疫性肝损伤,其机制可能与其降低Treg细胞频数、增加NKT细胞频数及增强NKT细胞功能有关。 展开更多
关键词 Glt25d1基因 自身免疫性肝炎 调节性T细胞 自然杀伤T细胞
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25D粗旦粘胶纤维纺丝工艺
9
作者 张锡红 《人造纤维》 1990年第2期7-9,共3页
关键词 纺丝 粘胶纤维 纤维 粗旦 25d
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CA25D型振动压路机无法行走故障的排除
10
作者 刘锋 《工程机械与维修》 2004年第5期163-163,共1页
一台CA25D型压路机在工地上作业时,突然出现不能行走的故障。该机行走系统为全液压、双驱动系统。经检查,该机启动后的补油压力为0.8MPa,系统压力为9.0MPa,均远远低于正常值;从测压点流出的少量液压油呈乳白色黏稠状,表明油液已严重变... 一台CA25D型压路机在工地上作业时,突然出现不能行走的故障。该机行走系统为全液压、双驱动系统。经检查,该机启动后的补油压力为0.8MPa,系统压力为9.0MPa,均远远低于正常值;从测压点流出的少量液压油呈乳白色黏稠状,表明油液已严重变质。由此,判定主液压泵和驱动马达已损伤。拆检后发现,主液压泵的侧板和配流盘确已严重磨损,致使高压侧和低压侧的油道串通,主泵已内泄严重。 展开更多
关键词 CA25d型 振动压路机 故障排除 故障分析 行走系统
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O-糖基转移酶、Glt25D2与乙型肝炎包膜蛋白大蛋白的分泌有关
11
作者 肖凡 董芳 +4 位作者 乔雍 常路丝 张仁雯 成军 魏红山 《中华实验和临床感染病杂志（电子版）》 CAS 2013年第5期1-4,共4页
目的在前期研究结果提示Glt25D2与HBV包膜蛋白大蛋白(LHBs)在体外相互作用基础上证明Glt25D2是否与HBV LHBs分泌相关。方法采用激光共聚焦方法分析Glt25D2与LHBs在HepG2细胞内的定位。免疫共沉淀方法进一步证实Glt25D2与LHBs的相互作用... 目的在前期研究结果提示Glt25D2与HBV包膜蛋白大蛋白(LHBs)在体外相互作用基础上证明Glt25D2是否与HBV LHBs分泌相关。方法采用激光共聚焦方法分析Glt25D2与LHBs在HepG2细胞内的定位。免疫共沉淀方法进一步证实Glt25D2与LHBs的相互作用。采用实时荧光定量PCR和Western blot方法分析mRNA和蛋白表达水平。应用ELISA方法检测细胞上清LHBs水平。实时荧光定量PCR方法检测上清HBV病毒载量。ELISA方法检测上清HBV LHBs水平。Western blot方法检测细胞中LHBs蛋白含量。Cobas Amplicor HBV Monitor Test方法检测细胞上清液HBV DNA载量。结果 Glt25D2与LHBs在体外相互作用,上调的Glt25D2高表达促进HBV DNA复制和LHBs表达,Glt25D2低表达抑制HBV DNA复制和LHBs表达。结论 Glt25D2与乙型肝炎包膜蛋白大蛋白的分泌有关。 展开更多
关键词 GLT25d2 包膜大蛋白 乙型肝炎病毒 糖基化修饰
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拉萨市不同孕期妇女血清25羟基维生素D水平的比较
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作者 尼玛顿珠 扎西央宗 +5 位作者 边珍 益西措姆 支张卓玛 詹明君 巴桑央吉 秦绪珍 《基础医学与临床》 2026年第1期120-123,共4页
目的了解西藏拉萨市不同孕期妇女血清25羟基维生素D[25-(OH)D]浓度水平,观察不同孕期妇女维生素D(VD)营养状态。方法选取在2021年7月至2023年4月在西藏自治区人民医院产科门诊就诊的健康孕妇367例为研究对象,取同期209例未妊娠的育龄期... 目的了解西藏拉萨市不同孕期妇女血清25羟基维生素D[25-(OH)D]浓度水平,观察不同孕期妇女维生素D(VD)营养状态。方法选取在2021年7月至2023年4月在西藏自治区人民医院产科门诊就诊的健康孕妇367例为研究对象,取同期209例未妊娠的育龄期体检妇女为正常对照组,采用雅培i2000化学发光仪检测血清25-(OH)D水平,用SPSS统计学软件进行统计分析。结果367例孕期妇女血清25-(OH)D总体水平为11.5(8.5,17.3)ng/mL。VD充足、不足、缺乏分别占16.6%、30.0%、53.4%;209例健康对照组妇女血清25-(OH)D总体水平为9.9(7.7,13.6)ng/mL。VD充足、不足、缺乏分别占6.7%、27.8%、65.5%。9~13^(+6)周、15~20^(+6)周孕期妇女血清25-(OH)D水平比较差异无统计学意义。结论拉萨市孕期和未妊娠育龄妇女普遍存在VD不足或缺乏现象,应在备孕及怀孕期间补充VD。 展开更多
关键词 孕妇 25羟基维生素D 维生素D
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孕早中期25-羟维生素D水平与婴儿上呼吸道感染关联的队列研究
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作者 陈曦 宋五星 +6 位作者 卢爱华 朱娅 汪小娟 吴为文 张耀东 邓伟 张玲 《中国食物与营养》 2026年第1期164-171,共8页
目的:了解黄冈市妇女孕早中期血液25-羟维生素D[25(OH)D]水平,探讨孕期25(OH)D水平与婴儿上呼吸道感染(upper respiratory tract infection,URTI)发生风险的关联。方法:研究对象来自黄冈出生队列,于孕早中期(<24 w)通过问卷调查了解... 目的:了解黄冈市妇女孕早中期血液25-羟维生素D[25(OH)D]水平,探讨孕期25(OH)D水平与婴儿上呼吸道感染(upper respiratory tract infection,URTI)发生风险的关联。方法:研究对象来自黄冈出生队列,于孕早中期(<24 w)通过问卷调查了解孕妇的一般情况,同时收集血样,采用干式荧光免疫层析法检测全血25(OH)D水平;产后6月龄通过儿科医生面对面访谈了解婴儿URTI患病信息。采用广义估计方程分析孕早中期25(OH)D水平与婴儿URTI的关联,计算调整多种混杂因素后的相对危险度(relative risk,RR)及95%置信区间(confidence interval,CI),用限制性立方样条模拟其剂量-反应关系。结果:本研究纳入333对母婴,其中84名(25.2%)婴儿出生后6个月内发生URTI。孕早中期维生素D缺乏137人(41.1%),不足128人(38.4%),充足68人(20.4%)。孕早中期25(OH)D水平的中位数(四分位数间距)为21.49(16.67,28.61)ng/mL。血样检测季节为夏秋季的孕妇,其25(OH)D中位数水平显著高于冬春季(24.17ng/mL vs.19.07ng/mL,P<0.001)。调整潜在的混杂因素后,在血样检测季节为冬春季的孕妇中,与25(OH)D缺乏组相比,25(OH)D充足组的孕妇子代发生URTI的RR值(95%CI)为0.72(0.64,0.82),趋势性检验具有统计学意义(P=0.008);母亲孕早中期25(OH)D每升高2 ng/mL可使URTI风险降低14%;25(OH)D水平与URTI发生风险呈线性负相关,关联接近显著性(P=0.060)。在夏秋季检测的孕妇中未观察到25(OH)D水平与URTI发生风险的关联。结论:黄冈市妇女孕早中期维生素D的缺乏或不足率高(79.6%)。在血样检测季节为冬春季的孕妇中,孕早中期25(OH)D水平较低,且与婴儿6月龄URTI发生风险呈接近显著性负相关。 展开更多
关键词 孕期 婴儿 25-羟维生素D 上呼吸道感染 队列研究
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骨量减少患者中医证型与骨代谢标志物及骨密度的相关性
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作者 刘莹露 何其函 +2 位作者 万茜 吴薇 房其军 《中国临床研究》 2026年第1期127-131,共5页
目的探讨骨代谢及骨密度相关指标与骨量减少患者中医证型的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2024年12月南京鼓楼医院中医科收治的骨量减少患者107例为研究对象。收集患者骨代谢及骨密度相关指标。对患者进行中医辨证分型,分为肾虚证组... 目的探讨骨代谢及骨密度相关指标与骨量减少患者中医证型的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2024年12月南京鼓楼医院中医科收治的骨量减少患者107例为研究对象。收集患者骨代谢及骨密度相关指标。对患者进行中医辨证分型,分为肾虚证组(n=45)及非肾虚证组(n=62)。比较两组患者骨代谢及骨密度异常程度以及可能的影响因素。采用多因素logistic回归分析骨量减少肾虚证的影响因素;采用Pearson或Spearman分析年龄、身体质量指数(BMI)与骨代谢或骨密度指标的相关性。结果Logistic回归分析显示,血清25-羟维生素D水平低、腰椎2骨密度T值及腰椎3骨密度T值低是骨量减少患者发生肾虚证的危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,年龄与股骨颈骨密度T值呈负向直线相关(r=-0.206,P=0.033);Spearman相关性分析显示,BMI与下肢全部骨密度T值、血清Ⅰ型胶原羧基末端肽β特殊序列(β-CTX)与血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PⅠNP)、25-羟维生素D与腰椎1骨密度T值分别呈正向直线相关(r=0.308,P=0.001;r=0.703,P<0.001;r=0.209,P=0.030);β-CTX与血清25-羟维生素D呈负向直线相关(r=-0.212,P=0.029)。结论血清25-羟维生素D、腰椎2骨密度T值及腰椎3骨密度T值与骨量减少肾虚证发生存在一定相关性。年龄、骨代谢指标与骨密度之间存在一定相关性。 展开更多
关键词 骨量减少 血清25-羟维生素D 辨证分型 肾虚证
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2型糖尿病血清25羟维生素D、血脂代谢指标对骨质疏松发生的预测
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作者 宋佳佳 韩晓芳 +1 位作者 胡婷 朱小欢 《公共卫生与预防医学》 2026年第1期154-157,共4页
目的探究2型糖尿病血清25羟维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、血脂代谢指标水平对骨质疏松发生的预测作用。方法将2022年1月至2024年1月合肥市第二人民医院收治的98例2型糖尿病患者依据其合并骨质疏松情况分为骨质疏松组(n=38)与非骨质疏松组(... 目的探究2型糖尿病血清25羟维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、血脂代谢指标水平对骨质疏松发生的预测作用。方法将2022年1月至2024年1月合肥市第二人民医院收治的98例2型糖尿病患者依据其合并骨质疏松情况分为骨质疏松组(n=38)与非骨质疏松组(n=60),测定研究对象的血清25(OH)D_(3)、血脂代谢指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)]水平,以logistic回归分析血清25(OH)D_(3)、血脂代谢指标水平与骨质疏松的关联性;以受试者特征工作曲线(ROC)分析血清25(OH)D_(3)、血脂代谢指标水平对骨质疏松的预测价值。结果骨质疏松组的血清25(OH)D_(3)、HDL水平低于非骨质疏松组,TG、LDL水平高于非骨质疏松组(P<0.05);两组间TC、VLDL水平比较差异不明显(P>0.05)。logistic回归分析显示,血清25(OH)D _(3)、HDL、TG、LDL水平与骨质疏松的发生密切相关(P<0.05);ROC曲线显示,血清25(OH)D_(3)、HDL、TG、LDL联合预测骨质疏松的曲线下面积(AUC)为0.943,灵敏度为92.11%,特异度为85.00%,联合预测效能优于各指标单独预测(P<0.05)。结论2型糖尿病血清25(OH)D_(3)、HDL、TG、LDL水平与骨质疏松密切相关,早期联合监测各指标可为临床预测2型糖尿病患者骨质疏松的发生提供参考价值。 展开更多
关键词 2型糖尿病 骨质疏松 25羟维生素D 血脂代谢指标 预测价值
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基于泰安市中心医院非健康人群血清维生素D水平的初步调查研究
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作者 刘婷 阚伟浩 +1 位作者 李芳 朱广婷 《临床医学进展》 2026年第1期491-496,共6页
目的:分析泰安市非健康人群血清维生素D水平,为科学预防维生素D的缺乏提供参考。方法:回顾性分析2023年3月至2024年2月就诊于泰安中心医院风湿免疫科门诊及住院患者的病历资料共22,480例。依据性别分为男性组(6913例)与女性组(15,567例)... 目的:分析泰安市非健康人群血清维生素D水平,为科学预防维生素D的缺乏提供参考。方法:回顾性分析2023年3月至2024年2月就诊于泰安中心医院风湿免疫科门诊及住院患者的病历资料共22,480例。依据性别分为男性组(6913例)与女性组(15,567例);依据年龄分为婴幼儿组(466例,0~3岁)、学龄组(2831例,4~12岁)、青春期组(819例,13~18岁)、青年组(6264例,19~35岁)、中年组(8540例,36~65岁)、老年组(3560例,>65岁);按照测定时间分为春季组(7118例,3~5月)、夏季组(6087例,6~8月)、秋季组(4940例,9~11月)、冬季组(4508例,12~次年2月)。所有受检者均检测未行干预的血清25-羟基维生素D[25-(OH)D]水平。分析受检者维生素D水平,并比较不同性别、年龄、季节分组受检者维生素D水平。结果:所有受检者总体维生素D水平总体较低,维生素D在六个年龄组中0~3岁婴幼儿群体的维生素D平均值最高(M = 39.80, SD = 13.46),远高于其他年龄段,相比之下19~35岁中年组维生素D水平最低(M = 17.46, SD = 8.50);从性别角度来看,维生素D水平在男性与女性之间亦存在显著差异(t = 34.824, P < 0.01),男性的维生素D均值为24.92 ng/mL (SD = 11.55),显著高于女性(M = 19.73, SD = 9.70);从季节维度分析维生素D水平的变化,同样发现了显著差异(F = 445.664, P < 0.01),夏季和秋季的维生素D水平相对较高(夏季:M = 23.66,SD = 10.70;秋季:M = 23.58,SD = 10.50),而冬季最低(M = 17.17, SD = 9.02),春季居中(M = 20.41, SD = 10.50)。结论:泰安市非健康人群维生素D水平存在不足、缺乏情况,并存在性别、年龄、季节等因素的差异。临床应针对上述不同因素制订相应的预防措施。 展开更多
关键词 维生素D 25-羟基维生素D
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25-羟基维生素D与脑梗死早期神经功能恶化的相关性
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作者 刘珊珊 谢井伟 +3 位作者 杜娟 李思佳 逯瑞 崔明 《中国实用神经疾病杂志》 2026年第1期64-67,共4页
目的探讨25-羟基维生素D[25(OH)D]对老年急性脑梗死早期神经功能恶化(END)可能的影响。方法回顾性选取2022-10—2024-02郑州大学第五附属医院神经内科收治的老年急性脑梗死患者,探讨老年急性脑梗死患者END的独立影响因素,分析血清25(OH)... 目的探讨25-羟基维生素D[25(OH)D]对老年急性脑梗死早期神经功能恶化(END)可能的影响。方法回顾性选取2022-10—2024-02郑州大学第五附属医院神经内科收治的老年急性脑梗死患者,探讨老年急性脑梗死患者END的独立影响因素,分析血清25(OH)D与脑梗死进展评分的相关性。结果219例老年急性脑梗死患者中,59例(26.9%)发生END,160例(73.1%)未发生END。多变量Logistic回归分析显示,空腹血糖和血清25(OH)D是END的独立危险因素,血清25(OH)D与NIHSS评分呈负相关(P<0.01)。结论低维生素D水平可能是脑血管病的一种危险因素,对老年急性脑梗死人群早期进行血清25(OH)D水平检测有助于识别预后不良的卒中患者。 展开更多
关键词 急性脑梗死 神经功能恶化 危险因素 25-羟基维生素D 血清 老年
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重组人生长激素联合赖氨酸磷酸氢钙颗粒治疗特发性矮小症疗效观察
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作者 刘娟 刘娜 尹丽 《新乡医学院学报》 2026年第1期37-40,45,共5页
目的探讨重组人生长激素(rhGH)联合赖氨酸磷酸氢钙颗粒治疗特发性矮小症(ISS)的疗效及对患儿骨代谢与生长相关指标的影响。方法选择2020年3月至2024年3月南阳市第二人民医院收治的100例ISS患儿为研究对象。采用随机数字表法将患儿分为... 目的探讨重组人生长激素(rhGH)联合赖氨酸磷酸氢钙颗粒治疗特发性矮小症(ISS)的疗效及对患儿骨代谢与生长相关指标的影响。方法选择2020年3月至2024年3月南阳市第二人民医院收治的100例ISS患儿为研究对象。采用随机数字表法将患儿分为对照组和观察组,每组50例。对照组患儿给予rhGH 0.10~0.15 IU·kg^(-1),每日1次,睡前皮下注射;观察组患儿在此基础上加用赖氨酸磷酸氢钙颗粒,每次5 g,每日2次。2组患儿均连续治疗6个月。治疗前及治疗后3、6个月时测2组患儿的身高、生长速率(GV)及骨龄(BA)。治疗前及治疗后6个月,采集2组患儿空腹静脉血并分离血清,采用酶联免疫吸附法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平,电化学发光法检测25-羟基维生素D[25-(OH)D]水平,精氨酸激发试验检测碱性磷酸酶(ALP)水平。记录2组患儿治疗过程中不良反应发生情况,并计算不良反应发生率。结果治疗前2组患儿的身高、GV、BA比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后3、6个月时,2组患儿的身高、GV、BA显著高于治疗前,且观察组患儿显著高于对照组(P<0.05)。治疗前2组患儿的血清IGF-1、25-(OH)D、ALP水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后6个月,2组患儿的血清IGF-1、25-(OH)D、ALP水平显著高于治疗前,且观察组患儿显著高于对照组(P<0.05)。治疗后6个月时观察组患儿的FT3水平显著高于治疗前,其余各指标2组患者治疗后与治疗前比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗前及治疗后,2组患儿的FT3、FT4、TSH水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组和观察组患儿不良反应发生率分别为8%(4/50)、6%(3/50),2组患儿不良反应发生率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.628,P=0.804)。结论rhGH联合赖氨酸磷酸氢钙颗粒治疗ISS疗效显著,能够有效推进生长发育进程,提升ALP、IGF-1及25-(OH)D水平,并且未观察到甲状腺功能减退或亚临床甲状腺功能减退的症状和严重的不良反应。 展开更多
关键词 特发性矮小症 重组人生长激素 赖氨酸磷酸氢钙颗粒 胰岛素样生长因子-1 25羟基维生素D 甲状腺功能
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血清MMP-9、hs-CRP、25-(OH)D3在妊娠期B族链球菌感染患者中的表达及对妊娠结局的分析
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作者 熊蕙 邓春明 安琳 《中国妇产科临床杂志》 北大核心 2026年第1期71-72,共2页
目的 探讨血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、25-羟维生素D3[25-(OH)D3]在妊娠期B族链球菌(GBS)感染患者中的表达及对妊娠结局的影响。方法 选取2022年6月至2024年6月甘肃省天水市妇幼保健院100例妊娠期GBS感染孕妇... 目的 探讨血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、25-羟维生素D3[25-(OH)D3]在妊娠期B族链球菌(GBS)感染患者中的表达及对妊娠结局的影响。方法 选取2022年6月至2024年6月甘肃省天水市妇幼保健院100例妊娠期GBS感染孕妇(研究组)及80例健康孕妇(对照组),检测两组血清MMP-9、hs-CRP、25-(OH)D3水平及不良妊娠结局、新生儿感染率,分析研究组不同妊娠结局者的上述指标差异。通过Pearson分析法探究血清指标与不良妊娠结局的相关性。结果 研究组MMP-9、hs-CRP水平高于对照组,25-(OH)D3更低(P<0.05),宫内窘迫、胎膜早破等不良妊娠结局发生率显著升高(P<0.05);研究组新生儿血培养阳性4例,临床诊断败血症2例、肺炎3例;对照组均无阳性发现,差异有统计学意义(χ^(2)=7.579,P=0.005)。不良妊娠结局组MMP-9、hs-CRP高,25-(OH)D3低于正常妊娠结局组(P<0.05);经Pearson相关分析结果显示,血清MMP-9、hs-CRP水平与妊娠期GBS感染患者不良妊娠结局均呈正相关,25-(OH)D3与妊娠期GBS感染患者不良妊娠结局呈负相关(P<0.05)。结论 妊娠期GBS感染患者血清MMP-9、hs-CRP升高及25-(OH)D3降低,可导致不良妊娠结局的风险增加。 展开更多
关键词 妊娠期 B族链球菌 基质金属蛋白酶-9 超敏C-反应蛋白 25-羟维生素D3 妊娠结局
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GLT25D2基因在对乙酰氨基酚诱导肝毒性损伤中对自噬的调控作用 被引量：2
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作者 郭乐乐 刘贞利 +1 位作者 张晶 任锋 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期882-887,共6页
目的探讨GLT25D2基因在对乙酰氨基酚（APAP）诱导的肝毒性损伤中是否对自噬有调控作用。方法选择GLT25D2/野生型C57B/J小鼠和GLT25D2/基因敲除C57B/J小鼠为研究对象。①体内实验：将20只野生型小鼠和20只GLT25D2/小鼠分别按随机数字表... 目的探讨GLT25D2基因在对乙酰氨基酚（APAP）诱导的肝毒性损伤中是否对自噬有调控作用。方法选择GLT25D2/野生型C57B/J小鼠和GLT25D2/基因敲除C57B/J小鼠为研究对象。①体内实验：将20只野生型小鼠和20只GLT25D2/小鼠分别按随机数字表法分为磷酸盐缓冲液（PBS）对照组和APAP干预组，每组10只。腹腔注射25 /的APAP溶液500 m/g建立小鼠肝毒性损伤模型；PBS对照组腹腔注射等量PBS。制模成功后立即处死小鼠取肝组织，采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肝组织自噬相关蛋白ATG5、ATG7、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、P62的表达；电镜下观察肝组织超微结构改变，评估自噬水平。②体外实验：另取野生型小鼠和GLT25D2/小鼠各1只，采用两步胶原灌注法提取原代肝细胞并分为两部分：一部分以5 mmo/ APAP溶液干预0、8、12 h后收集细胞，采用Western Blot试验检测肝细胞自噬相关蛋白ATG5、ATG7、LC3、P62的表达；另一部分用绿色荧光蛋白-LC3质粒（GFP-LC3）转染24 h，分别给予PBS（PBS对照组）和5 mmo/ APAP（APAP干预组）温育12 h，荧光显微镜下观察GFP-LC3阳性表达以反映自噬体的形成情况。结果①体内实验结果显示：与相应PBS对照组相比，经APAP干预后，野生型及GLT25D2/小鼠肝组织中自噬正性相关蛋白ATG5、ATG7、LC3 -Ⅱ表达下调，而负性相关蛋白P62表达上调，说明APAP处理后自噬整体水平降低。与野生型小鼠相比，GLT25D2/小鼠肝组织自噬正性相关蛋白ATG7、ATG5表达上调（ATG/-actin：1.21±0.29比0.84±0.19，ATG/-actin：1.29±0.14比1.54±0.40，均P〉0.05），LC3 -Ⅱ表达略下调（LC3 -/-actin：0.52±0.06比0.58±0.06，P〉0.05），而负性相关蛋白P62表达下调（P6/-actin：1.13±0.94比1.54±0.40，P〉0.05），说明基因敲除后小鼠自噬表达水平高于野生型小鼠。电镜下观察超微结构显示，与相应PBS对照组相比，经APAP干预后，野生型小鼠肝组织自噬体数量无明显变化，但GLT25D2/小鼠自噬体数量增多。②体外实验结果显示：随APAP干预时间延长，野生型及GLT25D2/小鼠原代肝细胞自噬正性相关蛋白ATG5、ATG7表达逐渐上调，LC3略有波动，而负性相关蛋白P62表达逐渐下调，12 h分别达峰值或谷值，说明APAP刺激细胞自噬表达增强，并呈一定时间依赖性；与野生型小鼠相比，GLT25D2/小鼠12 h原代肝细胞自噬正性相关蛋白ATG5、ATG7、LC3 -Ⅱ及负性相关蛋白P62表达上调（ATG/-actin：0.93±0.09比0.74±0.06，ATG/-actin：0.80±0.09比0.65±0.10，LC3 -/-actin：1.35±0.30比1.15±0.20，P6/-actin：0.36±0.02比0.31±0.03，均P〉0.05），说明基因敲除后自噬水平增强。荧光显微镜下观察显示，经APAP干预后，野生型及GLT25D2/小鼠原代肝细胞GFP-LC3阳性细胞均较PBS对照组明显增加；GLT25D2/小鼠GFP-LC3阳性细胞比例明显高于野生型小鼠（0.64±0.08比0.36±0.05，P〈0.05）。 结论GLT25D2是自噬负性调控因子，敲除GLT25D2基因能够增强APAP诱导肝毒性损伤小鼠的自噬水平。 展开更多
关键词 自噬 对乙酰氨基酚 GLT25d2基因 肝毒性损伤
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